全 文 ：第 22卷　第 2期
2006年 4月
福建师范大学学报 (自然科学版 )
Journal of Fujian Normal Univ e rsity ( Na tural Science Edition)
Vo l. 22　 No. 2
Apr. 2006
文章编号: 1000-5277( 2006) 02-0118-03
白子菜总黄酮含量的测定
黄　骐 1, 2 , 林荣华 2 , 郑　钊 1 , 叶冰莹 1 , 陈如凯 3 , 陈由强 1
( 1. 福建师范大学生命科学学院 , 福建 福州　 350007; 2. 福州市农业科学研究所 , 福建 福州　 350018;
3. 农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室 , 福建 福州　 350002)
　　摘要: 白子菜样品经 45%乙醇提取后 , 以芦丁为标准品 , 用聚酰胺吸附 -硝酸铝显色法于 510 nm处测定
总黄酮含量 . 结果表明 , 白子菜植株总黄酮质量分数为 1. 43% , 叶为 1. 16% , 茎为 2. 60% , 根为 4. 28% . 研
究结果可为利用白子菜生产黄酮类药用成分提供科学依据 .
关键词: 白子菜 ; 总黄酮 ; 含量测定
中图分类号: Q945　　　文献标识码: A
　收稿日期: 2005-04-03
　基金项目: 国家部委基金资助项目 ( JA05225 /w k j2) ; 福建省科技厅基金资助项目 ( 2005N037) ; 福建省教育厅基金资助项目
( JB04232)
　作者简介: 黄骐 ( 1963—　 ) , 男 , 福建福州人 , 硕士生 , 助理研究员 .
Determination of Total Flavonoid Content inGynura divaricata (L. ) DC.
HUANG Qi
1, 2
, LIN Rong-hua
1
, ZHENG Zhao
1
, YE Bing-ying
1
, CHEN Ru-kai
3
, CHEN You-qiang
1
( 1. College of L ife Sciences, Fujian Normal University , Fuzhou 350007, China;
2. Fuzhou Institute of Agricultural Sciences, Fuzhou 350018, China;
3. Key Laboratory of Sugarcane Genetics and Breeding , Ministry of Agriculture, Fuzhou 350002, China )
Abstract: Ex tracted by 45% ethano l, purified by polycapro lactam and the rutin w as used as a
standa rd compound, the to tal flavonoid content of Gynura divaricata ( L. ) DC. w as quanti tated by
measurement of absorbance a t 510 nm. The resul ts show that the content of the w hole plant is
1. 43% , the leaves 1. 16% , the stem 2. 60% , the roo t 4. 28% . This study w ill provide scientific basis
on producing medicinal components of f lav onoids f rom Gynura divaricata ( L. ) DC. .
Key words: Gynura divaricata ( L. ) DC. ; f lav onoids; content determination
白子菜 (Gynura divaricata ( L. ) DC. ) , 又名白背土三七、 叉花土三七 , 多年生草本植物 , 菊科三
七草属 . 高 30～ 50 cm , 根茎块状 , 茎紫红色 , 被短毛 , 分布于我国南部和西南部 , 福建各地均有 , 喜
生于潮湿的阴地上 [1 ] . 全草消热解毒 , 活血化淤 , 去风消肿 , 根入药 , 有泻火、 凉血、 生津之功效 , 是
民间治疗乳腺炎、关节炎、气管炎等各种炎症常见中草药 [2 ] . 近现代药理学研究表明 , 以上功效与黄酮
类化合物有关 . 目前对于白子菜的研究还处于基础阶段 [3- 4 ] . 迄今为止 ,关于白子菜主要药用成分黄酮
类化合物含量的研究国内外尚未见报导 . 本文作者将聚酰胺吸附与硝酸铝显色法相结合 , 测定白子菜
不同部位的总黄酮含量 , 以期为利用白子菜生产黄酮类药用成分提供科学依据 .
1　材料与方法
1. 1　材料
1. 1. 1　植物材料
白子菜 , 采自福建省福州市仓山镇 . 样品Ⅰ : 白子菜全植株 ; 样品Ⅱ : 白子菜叶 ; 样品Ⅲ : 白子
菜茎 ; 样品Ⅳ : 白子菜根 .
1. 1. 2　仪器与设备
752型分光光度计 (上海分析仪器总厂 ) , 索氏抽提装置 ,恒温水浴锅 , RE- 52cs旋转蒸发仪 , 砂
芯层析柱 .
1. 1. 3　试剂
芦丁标样 (上海试剂二厂 ) , 聚酰胺粉 ( 80～ 100目 , 以 70%乙醇预处理 ) , 5% NaNO2 , 10% Al
( NO3 ) 3 , 1 mol /L NaOH.
1. 2　方法
1. 2. 1　样品处理
质量足够的白子菜各粉末样品分别以石油醚 ( 30～ 60℃ ) 为溶剂在索氏提取器中抽提 , 以去除叶
绿素并脱蜡、 脱脂 , 之后自然挥去石油醚 , 粉末备用 .
1. 2. 2　总黄酮的提取与纯化
称取样品干燥粉末 10 g, 加入 45%乙醇溶液 100 mL, 70℃水浴回流 1 h, 过滤后 , 滤渣重复浸提
2次 , 合并滤波 , 减压浓缩至原体积的 1 /3, 将浓缩液过滤并定容至 100 mL. 准确吸取提取液 5 mL, 加
200 mg聚酰胺粉搅匀 , 转移到装有 400 mg聚酰胺粉的砂芯层析柱中 , 用乙醇梯度洗脱: 45%乙醇 ( 20
m L) → 60%乙醇 ( 20 mL) → 75%乙醇 ( 20 mL) → 95%乙醇 ( 20 mL) →无水乙醇 ( 20 mL) . 收集
各级洗脱液 , 合并浓缩 , 用 45%乙醇定容至 100 mL, 备测 .
1. 2. 3　最大吸收波长的选择
以 NaNO2、 Al (N O3 ) 3、 NaOH为显色剂 , 分别作各样品提取液以及芦丁标准品的吸收曲线 , 均在
510 nm处有一强吸收 , 因此选择 510 nm为测定波长 .
1. 2. 4　芦丁标准曲线绘制
精确配制 0. 1 mg /mL的芦丁标液 , 分别取 0、 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0 mL于 6个 10 mL容量瓶
中 , 各加 45%乙醇成 5 m L, 加入 5% NaNO2溶液 0. 3 mL摇匀 , 放置 6 min后 , 加 10% A1 (N O3 ) 3 ,
溶液 0. 3 mL, 摇匀 , 放置 6 min后加入 1 mo l /L NaOH溶液 4 mL, 再加蒸馏水稀释至刻度 , 摇匀 , 放
置 15 min后 , 于 510 nm波长处测定 OD值 , 绘制标准曲线 [5 ] .
1. 2. 5　总黄酮含量的测定
分别吸取 1. 0 mL上述各备测液于 10 mL容量瓶中 , 按芦丁标准品测定方法 , 于 510 nm波长下测
定 OD值 , 计算各提取液中总黄酮质量分数 , 即得率 .
样品总黄酮质量分数 (以芦丁计 ) (% ) = m 1V1V3 /10 m2V2V4 ,
式中 , m1为样液含黄酮质量 ( mg ) ; m2为称样质量 (g ) ; V1为抽提定容体积 ( mL) ; V2为聚酰胺处
理时取样液体积 ( mL) ; V3为聚酰胺处理后定容体积 ( mL) ; V4为显色反应取样液体积 ( mL) .
2　结果与分析
2. 1　标准曲线绘制
图 1　芦丁标准曲线
以OD值对每 10 mL试液芦丁标准品质量 ( mg )作图 ,标准
曲线回归方程为 y = 1. 012x - 0. 003 7 ,其线性范围每 10 mL试
液 0～ 0. 5 mg , 相关系数 R= 0. 999 (图 1) .
2. 2　显色稳定性试验
芦丁标准品及各样品提取液的显色反应均较稳定 , 在 60 min
内每隔 15 min测定其吸光度 , 吸光度值均未发生改变 .
2. 3　白子菜各部分总黄酮含量测定
各样品总黄酮质量分数 (按芦丁计 )测定结果见表 1. 植株粉
末总黄酮质量分数平均值为 1. 43% ; 根粉末总黄酮质量分数最
高 , 为 4. 28% ; 茎粉末总黄酮质量分数为 2. 60% ; 叶粉末总黄酮质量分数为 1. 16% . 各样品测定结果
的相对标准差均小于 5% , 精密度达到要求 .
119　第 2期　　　　　　　　　　　　　　黄　骐等: 白子菜总黄酮含量的测定
表 1　白子菜样品总黄酮质量分数测定结果 (按芦丁计 )
样品 总黄酮质量分数 /% 平均值 /% S /% Cv /%
植株粉末
1. 37
1. 49
1. 43
1. 43 0. 060 4. 20
叶粉末
1. 15
1. 12
1. 20
1. 16 0. 040 3. 46
茎粉末
2. 68
2. 53
2. 59
2. 60 0. 075 2. 88
根粉末
4. 21
4. 18
4. 45
4. 28 0. 148 3. 46
2. 4　加标回收实验
称取以上样品数份 , 分别添加适量标样 , 按前述操作进行提取、 层析、 测定 . 以加标测得量减去
原样含量 , 除以加标量 , 计算回收率 , 其结果见表 2. 平均回收率为 101. 25% , 标准差为 4. 48% , 相对
标准差为 4. 43% .
表 2　加标回收实验结果
样品 样品含总黄酮质量 /g 加标量 /g 测得总黄酮质量 /g 回收率 /% 平均回收率 /%
植株粉末 0. 034 0. 035 0. 070 102. 86
0. 034 0. 070 0. 102 97. 14
叶粉末 0. 046 0. 035 0. 084 108. 57
0. 046 0. 070 0. 115 98. 57
茎粉末 0. 027 0. 035 0. 060 94. 29
0. 027 0. 070 0. 100 104. 29
根粉末 0. 018 0. 035 0. 054 102. 86
0. 018 0. 070 0. 089 101. 43
101. 25± 4. 43
3　讨论
在预实验中 , 经石油醚脱脂、 脱色处理可提高叶粉末总黄酮的提取率 , 因为脂类和叶绿体的消除 ,
有利于极性提取剂的渗透和黄酮类化合物的渗出 .利用聚酰胺吸附提纯与常用的硝酸铝显色法相结合 ,
测定白子菜不同部位的总黄酮质量分数 , 结果表明 , 白子菜植株总黄酮质量分数为 1. 43% , 不同部位
总黄酮质量分数相差较大 , 根总黄酮质量分数较高 , 根粉末总黄酮质量分数为 4. 28% ; 茎粉末总黄酮
质量分数为 2. 60% ; 叶粉末总黄酮质量分数为 1. 16% . 白子菜抗逆性强 , 已实现人工栽培 , 栽培容易 ,
生长周期短 , 产量高 , 每 667 m2年可收获叶和嫩茎 5 000～ 8 000 kg. 鉴于白子菜资源丰富 , 黄酮类化
合物含量较高 , 药用价值大 , 可以大力开发利用其黄酮类药用成分 .
参考文献:
[ 1] 福建省科学技术委员会 , 福建植物志编写组 . 福建植物志: 第五卷 [M ]. 福州: 福建科学技术出版社 , 1992: 393
- 394.
[ 2] 江苏新医学院 . 中药大辞典: 上册 [ M ]. 上海: 上海科学技术出版社 , 1985: 749, 756.
[ 3] 杨暹 , 刘厚诚 . 白子菜的特征特性及栽培技术 [ J]. 广东农业科学 , 1998 ( 5): 16- 17.
[ 4] 陈贤兴 . 白背三七草的诱变及抗诱变作用的初步研究 [ J]. 河南科学 , 2002 ( 20): 260- 262.
[ 5 ]元晓梅 , 蒋明蔚 , 胡正芝 . 聚酰胺吸附-硝酸铝显色法测定山楂及山楂制品中的总黄酮含量 [ J]. 食品与发酵工业 ,
1996 ( 4) : 27- 32.
(责任编辑: 余　望 )
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