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金钮扣止咳、化痰及平喘作用的研究



全 文 :[3]苗智如,黄夏琴,程晓莉,等 . 注射用脉络宁对大鼠血栓
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金钮扣止咳、化痰及平喘作用的研究
冯承恩1,黄庆芳1,房志坚1* ,梅全喜2
( 1. 广东药学院中山校区,广东 中山 528458; 2. 广州中医药大学附属中山市中医院,广东 中山 528400)
摘要 目的:研究金钮扣水提物及醇提物止咳、化痰及平喘作用。方法: 采用豚鼠枸橼酸引咳法、小鼠气管酚
红法、豚鼠组胺和乙酰胆碱致喘法,观察金纽扣水、醇提物低、中、高剂量( 4. 28、8. 56、17. 12 g /kg) 的止咳、化痰及平
喘作用。结果:水提物高剂量和醇提物中、高剂量均能延长咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数。水和醇提物中、高剂量均
能增加酚红分泌量。在平喘实验中,水、醇提物各剂量组的哮喘潜伏期与空白对照组比较,差异无统计学意义( P >
0. 05) 。结论:金纽扣水、醇提取物具有止咳和化痰疗效,均无平喘作用,但醇提取物止咳和化痰疗效优于水提取
物。
关键词 金钮扣;水茄;止咳;化痰;平喘
中图分类号: R285. 5 文献标识码: A 文章编号: 1001-4454( 2012) 05-0783-03
收稿日期: 2011-09-21
基金项目:中山市华南现代中药城( 健康医药产业基地) 专项发展基金( 2007J2007)
作者简介:冯承恩( 1978-) ,女,硕士,实验师,主要从事药理学研究; Tel: 13711295657,E-mail: cefeng2006@ 126. com。
* 通讯作者:房志坚,E-mail: jian139@ tom. com。
金钮扣,别名一面针、山颠茄、刺茄或者小登
茄〔1〕。来源于茄科植物水茄( Solanum torvum Swar-
tz) 的干燥茎及根,有活血、散瘀、消肿、通经、止咳、
止痛等功效,该药味辛、性微凉,有小毒〔2〕。近年
来,金钮扣的研究主要集中在化学成分上,而对呼吸
系统方面的研究尚未见报道。本研究主要对金钮扣
进行止咳、化痰和平喘作用的药理研究,为临床应用
及合理开发资源利用提供依据。
1 材料与仪器
1. 1 实验动物 昆明小鼠及豚鼠,购自南方医科
大学实验动物中心,许可证号: SCXK ( 粤 ) 2006-
0015。由广州中医药大学中山附属医院动物实验室
饲养,室内温度控制在( 20 ± 2) ℃,湿度为 60%。
1. 2 药物 金钮扣由广东益和堂生产提供,经田
素英副教授鉴别为水茄的干燥茎; 取其茎部用蒸馏
水和 95%乙醇分别回流提取;浓缩得水提取物 90. 0
g( 提取率 6. 13% ) 及醇提取物 151. 5 g ( 提取率
5. 99% ) ,4 ℃下保存备用;氢溴酸右美沙芬片,广州
白云山光华制药股份有限公司,批号: 20100620; 氯
化铵,呼和浩特制药厂,批号: 20100112; 氨茶碱,天
津力生制药有限公司,批号: 061001; 其余所用试剂
均为分析纯。
1. 3 主要仪器 YLS-8A多功能诱咳引喘仪( 山东
省医学科学院设备站) ; UV1102 紫外 /可见分光光
度计( 上海天美科学仪器有限公司) 。
2 方法
2. 1 对豚鼠枸橼酸引咳的影响〔3〕筛选豚鼠 取体
质量 150 ~ 200 g 的豚鼠,置于诱咳引喘仪中,喷雾
17. 5%枸橼酸 1 min,以豚鼠出现响亮的咳嗽声为标
准,记录 5 min 内豚鼠的咳嗽次数,次数多于 10 次
的豚鼠为合格动物用于实验。取合格豚鼠 80 只,雌
雄各半,随机分为 8 组,每组 10 只,即对照组( 生理
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盐水) 、阳性对照组、金纽扣水及醇提物低、中、高
( 4. 28、8. 56、17. 12 g /kg) 剂量组。实验前禁食不禁
水 12 h,各组按 10 mL /kg,灌胃给药,1 次 /d,连续 3
d,其中对照组给予等体积生理盐水,阳性药物氢溴
酸右美沙芬于第 2 天给药,1 次 /d,连续 2 d。末次
给药后 1 h,将豚鼠放入诱咳引喘仪中,并使豚鼠接
受恒压 17. 5%枸橼酸刺激至预定时间引咳,喷雾刺
激时间为 1 min,记录豚鼠的咳嗽潜伏期以及在 5
min内咳嗽次数。
2. 2 对小鼠气管酚红排泌的影响〔3〕 以 5% NaH-
CO3 作为溶剂,测定浓度为 0. 25、0. 50、0. 75、1. 00、
1. 50、2. 00、2. 50、3. 00 μg /mL 酚红的光密度 D( λ)
值,通过酚红浓度和 D( λ) 值计算出回归方程,再根
据回归方程计算出各小鼠的气管酚红的排泄量。取
小鼠 80 只,雌雄各半,体质量 18 ~ 22 g,分组同
“2. 1”项下方法。实验前禁食不禁水 12 h,各组按
20 mL /kg灌胃给药,1 次 /d,共 7 d,其中对照组给予
等体积生理盐水,阳性药物氯化铵于第 6 天给药,1
次 /d,连续 2 d。末次给药后 30 min,灌胃 2. 5%酚
红生理盐水溶液 0. 5 mL /只,注射后 30 min,颈椎脱
臼处死小鼠,钝性分离甲状软骨至气管分支处段气
管,用 5%NaHCO3溶液反复抽洗气管 3 次,每次 0. 5
mL,合并洗出液,装入试管中,以 1 500 r /min 转速
离心 10 min,取上清液,用分光光度计测 546 nm 处
D( λ) 值。根据回归方程计算出酚红的含量,酚红含
量和动物体质量计算出酚红校正量。
2. 3 对豚鼠平喘的影响〔3〕 筛选豚鼠:取体质量
150 ~ 200 g的豚鼠,置于诱咳引喘仪中,用 0. 2%磷
酸组胺和 2. 0%氯化乙酰胆碱等量( 1∶ 1) 混合液,喷
雾 10 s,观察豚鼠的哮喘反应,选出哮喘潜伏期( 从
开始喷雾至出现抽搐、跌倒为止的时间即为豚鼠的
哮喘潜伏期) 不超过 120 s 的豚鼠为合格动物用于
实验。取合格豚鼠 80 只,分组同“2. 1”项下方法。
实验前禁食不禁水 12 h,各组按 10 mL /kg 灌胃给
药,1 次 /d,连续 3 d,其中空白对照组给予等体积生
理盐水,阳性药物氨茶碱于第 2 天灌号给药,每天 1
次,连续 2 d。末次给药后 1 h,将豚鼠放入诱咳引喘
仪中,喷雾 0. 2%磷酸组胺和 2. 0%氯化乙酰胆碱等
量混合液 10 s,观察记录豚鼠的哮喘潜伏期,延长 6
min以上者按 6 min计算。
2. 4 统计学处理 数据结果以 珋x ± s 表示,应用
SPSS 13. 0 统计软件统计分析,计算资料组间采用
ANOVN检验,P < 0. 05 表示有统计学意义。
3 结果
3. 1 金纽扣水及醇提物对枸橼酸所致豚鼠咳嗽的
影响结果 与对照组比较,水提物高剂量组咳嗽潜
伏期由 88. 2 s延长至 138. 6 s,咳嗽次数由 10 次减
少为 5 次( P < 0. 05) ,低、中剂量虽能延长咳嗽潜伏
期,咳嗽次数减少,但差异无统计学意义。醇提物
高、中剂量组的咳嗽潜伏期 126. 5 s 及 158. 1 s,高、
中剂量组咳嗽次数分别为 4 次和 6 次( P < 0. 05 ) ,
低剂量组咳嗽潜伏期及咳嗽次数均无显著性差异
( P > 0. 05) ;醇提物的止咳作用,见表 1。
表 1 金钮扣水及醇提物对枸橼酸所致
豚鼠咳嗽的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂量 /( g /kg)
咳嗽潜伏期 /
s
咳嗽次数 /

对照组 - 88. 2 ± 21. 3 10. 0 ± 2. 3
氢溴酸右眉沙芬 0. 30 166. 9 ± 18. 4** 3. 0 ± 1. 1**
水提低剂量组 4. 28 113. 5 ± 13. 7 7. 0 ± 2. 8
水提中剂量组 8. 56 117. 4 ± 22. 5 8. 0 ± 1. 9
水提高剂量组 17. 12 138. 6 ± 16. 2* 5. 0 ± 1. 7*
醇提低剂量组 4. 28 100. 7 ± 27. 8 11. 0 ± 3. 4
醇提中剂量组 8. 56 126. 5 ± 22. 1* 6. 0 ± 2. 8*
醇提高剂量组 17. 12 158. 1 ± 19. 6** 4. 0 ± 1. 4**
注:与对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01
3. 2 金纽扣水及醇提物对小鼠气管酚红分泌量的
影响 与对照组比较,水及醇提物各剂量组的酚红
分泌量增加,但水及醇提物低剂量组均无显著性差
异。随着药物剂量的增加酚红分泌量也呈现增加的
趋势。见表 2。
表 2 金钮扣水及醇提物对小鼠气管酚红
分泌量的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂量 /( g /kg)
酚红分泌量 /
μg
酚红校正 /
( μg /g)
对照组 - 0. 375 ± 0. 050 0. 016 ± 0. 003
氯化铵组 1. 0 1. 105 ± 0. 053** 0. 042 ± 0. 014**
水提低剂量组 4. 28 0. 443 ± 0. 046 0. 017 ± 0. 008
水提中剂量组 8. 56 0. 627 ± 0. 039* 0. 020 ± 0. 007*
水提高剂量组 17. 12 0. 767 ± 0. 042** 0. 033 ± 0. 003**
醇提低剂量组 4. 28 0. 416 ± 0. 042 0. 018 ± 0. 009
醇提中剂量组 8. 56 0. 791 ± 0. 059** 0. 031 ± 0. 005**
醇提高剂量组 17. 12 0. 871 ± 0. 034** 0. 038 ± 0. 021**
注:与对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01
3. 3 水及醇提取物对豚鼠哮喘潜伏期的影响结果
对照组哮喘潜伏期为 79. 0 s,水及醇提低、中及高
剂量组哮喘潜伏期与对照比较,差异无统计学意义
( P > 0. 05) ,见表 3。
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表 3 金钮扣水及醇提物对豚鼠喷雾致
喘法的影响(珔x ± s,n =10)
组别 剂量 / ( g /kg) 哮喘潜伏期 / s
对照组 - 79. 0 ± 15. 7
氨茶碱组 0. 1 166. 4 ± 12. 2*
水提低剂量组 4. 28 49. 2 ± 15. 4
水提中剂量组 8. 56 65. 0 ± 17. 1
水提高剂量组 17. 12 68. 4 ± 22. 0
醇提低剂量组 4. 28 66. 0 ± 13. 0
醇提中剂量组 8. 56 71. 5 ± 16. 4
醇提高剂量组 17. 12 89. 3 ± 19. 2
注:与对照组比较,* P < 0. 05,**P < 0. 01
4 讨论
金钮扣是民间常用植物药,具有散瘀、通经、消
肿、止痛、止咳之功效,是中华老字号广东益和堂生
产的传统名药“沙溪凉茶”的主要成分之一〔4〕。而
在《全国中草药汇编》中也曾记载金钮扣具有“清
暑、止咳、补虚。治痧症、久咳、劳弱虚损”功效〔5〕。
在本实验中,笔者发现金钮扣水提物高剂量组
延长咳嗽潜伏期、减少咳嗽次数到 5 次,但低、中剂
量组虽能延长咳嗽潜伏期和减少咳嗽次数,但无显
著性差异。另外,醇提物中、高剂量能显著减少豚鼠
咳嗽次数和延长咳嗽潜伏期,低剂量组的结果与对
照组比较无显著性差异。通过测定小鼠酚红的分泌
量得到呼吸道痰液分泌量,可以间接评价药物的化
痰作用和强度。在化痰实验中,小鼠灌服水及醇提
取物后,各剂量组的小鼠气管内酚红分泌量增加实
验结果表明金纽扣水及醇提取物具有一定的止咳及
化痰疗效,但以醇提取物疗效更佳。
最后,通过组间比较,笔者发现金钮扣的茎部水
及醇提取物均无平喘作用。分析其原因可能是具有
平喘作用的成分属易挥发、不耐热成分,采用回流法
未能收集到,或者具有平喘作用的成分不溶或溶解
在水及乙醇中的量相对较少,不足以起到平喘的作
用。笔者初步判断金钮扣茎部水及醇提取物具有良
好的止咳化痰作用,且醇提取物的疗效更佳,故有必
要在药理活性指导下,对金钮扣醇提取物做进一步
提取分离,为临床的进一步广泛应用提供了科学依
据。
参 考 文 献
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131-133.
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