全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2012，27(3)∶314 ～ 315
基金项目:中山市华南现代中药城(健康医药产业基地)专项发展基金(编号:2007J007)
作者简介:何洋(1980—) ，女，实验师，从事中药质量标准与药动学研究。Email:heyang626@ 163． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:jian139@ tom． com
金钮扣的薄层色谱鉴别及其绿原酸的测定
何 洋1，刘建雄2，周洪波1，李 萍1，李慧珊1，房志坚1*
(1．广东药学院中山校区，广东 中山 528458;2．广东益和堂制药有限公司，广东 中山 528471)
摘要:目的 薄层鉴别金钮扣药材并测定其中绿原酸的含量。方法 采用 TLC法定性鉴别，HPLC法测定绿原酸的含量。结
果 薄层色谱鉴别中，在与对照品色谱相应的位置上，供试品显相同的黄绿色荧光斑点。绿原酸 1 ～ 60 μg·mL －1与峰面积呈
良好的线性关系(r = 0． 9999) ，平均回收率为 99． 6%，RSD = 0． 71%。结论 所用方法准确可靠、灵敏度高、专属性强，可有效
控制金钮扣药材的质量。
关键词:金钮扣;薄层色谱法;高效液相色谱法;绿原酸
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2012)03 － 0314 － 02
Study on quality standard for Solanum torvum
HE Yang1，LIU Jian － xiong2，ZHOU Hong － bo1，LI Ping1，LI Hui － shan1，FANG Zhi － jian1*
(1． Zhongshan Campus of Guangdong Pharmaceutical University，Zhongshan，Guangdong，528458 P． R． China;2． Guangdong Yihetang
Pharmaceutical Co．，Ltd．，Zhongshan，Guangdong，528471 P． R． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish a method for quality control of Solanum torvum． METHODS TLC was used to qualitatively
identify the main ingredients． HPLC was used to quantitatively determine chlorogenic acid content． RESULTS There was the same
spot in colour and position between sample and reference in TLC． The HPLC calibration curve was linear within the range of 1 － 60 μg·
mL －1(r = 0． 9999)for chlorogenic acid． The average recoveries were 99． 6%(RSD = 0． 71%)． CONCLUSION The method is relia-
ble，accurate and specific． It can be used for quality control of Solanum torvum．
Key words:Solanum torvum;TLC;HPLC;Chlorogenic acid
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2012)03 － 0314 － 02
金钮扣为茄科植物水茄 Solanum torvum Swartz
的干燥茎及根，味微苦、辛，性微凉，具有消炎解毒、
消肿散结、散淤止痛之功效［1］，主产于福建、广东、
广西等省。绿原酸是金钮扣的主要活性成分之
一［2］，具有广谱抗菌、抗病毒、抗肿瘤、增强免疫及
解热抗炎、利胆、保肝、降脂等药理作用［3 － 5］，与金钮
扣药材的功能相一致。金钮扣原质量标准仅有显微
鉴别，现以绿原酸为对照和指标成分，采用 TLC 法
定性鉴别金钮扣药材、HPLC 测定药材中绿原酸的
含量，以期有效控制金钮扣药材的质量，完善了金钮
扣的质量标准。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
LC －600E型液相色谱仪(美国 Waters)。绿原
酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号:
110753 － 200413) ;金钮扣药材采自广东阳西、广西、
广东鼎湖，经鉴定均为真品;水为超纯水;乙腈为色
谱纯;其余试剂为分析纯。
1． 2 薄层鉴别
取金钮扣粉末 1 g，加甲醇 20 mL，超声处理 30
min，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇 2 mL使溶解，作为
供试品溶液。另取绿原酸对照品，加甲醇制成 0． 2
mg·mL －1对照品溶液。按《中国药典》2010 年版附
录ⅥB薄层色谱法试验，吸取上述 3 种溶液各 5 μL，
分别点于同一聚酰胺薄层板上，以醋酸为展开剂，展
开，取出，晾干。于 365 nm 下检视，供试品色谱中，
在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄绿色荧
光斑点。
1． 3 绿原酸的测定
1． 3． 1 色谱条件 色谱柱为 Agela Promosil C18柱
(250 mm ×4． 6 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 － 0． 1%
磷酸溶液(10∶90) ，流速 1． 0 mL·min －1，检测波长
327 nm，柱温 35 ℃，进样量 10 μL。分别取对照品
溶液和供试品溶液，在此色谱条件下进样分析，理论
板数按绿原酸峰计不低于 2 × 103，绿原酸的色谱峰
与相邻峰之间分离度大于 1． 5(图 1)。
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2012.03.022
图 1 对照品(A)和样品(B)溶液的 HPLC色谱图
Fig 1 HPLC chromatograms of control solution(A)and sample
solution(B)
1． 3． 2 溶液的制备 取绿原酸对照品适量，精密称
定，置 20 mL量瓶中，加甲醇适量，振摇使溶解，用甲
醇定容，制得 400． 0 μg·mL －1对照品贮备液。取金
钮扣粉末(过 4 号筛)约 0． 5 g，精密称定，置具塞锥
形瓶中，精密加入 20 mL 50%甲醇，密塞，称定重量，
超声处理(500 W，40 kHz)30 min，取出，放冷，再称
定重量，用 50%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，
即得供试品溶液。
1． 3． 3 线性关系考察 分别精密量取对照品贮备
液适量，置 20 mL不同量瓶中，加甲醇定容，即得系
列对照品溶液。按“1． 3． 1”项色谱条件分别进样 10
μL测定，记录色谱图。以对照品浓度为横坐标、相
应对照品峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得绿原酸
的回归方程为:Y = 2． 577 × 104X + 7. 808 × 103 (r =
0． 9999)。结果表明:绿原酸 1 ～ 60 μg·mL －1与峰面
积呈良好的线性关系。
1． 3． 4 重复性试验 取同一样品，按“1． 3． 2”项方
法制备 6 份供试品溶液，在“1． 3． 1”项色谱条件下
进样分析，计算绿原酸的含量为 0． 7200 mg·g －1，
RSD = 1． 9%。表明方法重复性良好。
1． 3． 5 精密度试验 取同一浓度对照品溶液
(20. 00 μg·mL －1) ，在“1． 3． 1”项色谱条件下重复进
样 6 次，计算绿原酸色谱峰峰面积的 RSD = 1. 0%。
表明仪器进样精密度良好。
1． 3． 6 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别于
0、0． 5、1、2、3、4 h 时，在“1． 3． 1”项色谱条件下，进
样分析。计算绿原酸色谱峰峰面积的 RSD = 1． 6%，
表明样品溶液室温避光放置 4 h内稳定。
1． 3． 7 加样回收率试验 取已知含量的供试品粉
末(0． 7258 mg·g －1绿原酸)9 份，每份 0. 25 g，精密
称定，分别加入对照品贮备液 0． 25、0. 50、0． 75 mL，
按“1． 3． 2”项下方法操作，制备供试品溶液，每个浓
度 3 份，进样分析，结果见表 1。
表 1 回收率试验结果(μg，n =3)
Table 1 Results of the recovery experiment(μg，n =3)
Original Detected Added Recovery /% 珔X /% RSD /%
182． 0 281． 2 100． 0 99． 2 99． 6 0． 71
181． 7 280． 9 100． 0 99． 2
181． 5 281． 1 100． 0 99． 6
181． 6 378． 3 200． 0 98． 4
182． 0 382． 6 200． 0 100． 3
182． 1 381． 6 200． 0 99． 8
181． 6 478． 2 300． 0 98． 9
182． 1 483． 7 300． 0 100． 5
181． 6 482． 6 300． 0 100． 3
1． 3． 8 样品的测定 按“1． 3． 2”项方法制备供试
品溶液，按“1． 3． 1”项色谱条件测定，计算金钮扣中
绿原酸的含量。计算 3 批的绿原酸含量分别为
0. 3075、1． 0430、0． 7258 mg·g －1，RSD分别为 1． 9%、
1. 6%、1． 5%。
2 讨论
TLC试验中，曾对比硅胶 H 薄层板、展开剂为
乙酸丁酯 －甲酸 －水和聚酰胺薄层板、展开剂为乙
酸，结果显示:后者分离效果较好，能满足分析要求。
曾采用过甲醇、80%甲醇、50%甲醇和 30%甲醇为
提取溶剂，用 50%甲醇提取率较高并能提取完全，
故采用 50%甲醇为提取溶剂。
参考文献:
［1］ 广东省食品药品监督管理局．广东省中药材标准［M］．广东:
广东科技出版社，2004:136．
［2］ 周洪波，王峰，何洋，等．金钮扣的化学成分研究［J］． 华西药
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［3］ 孙秋艳，刘艳，汪茜，等． 绿原酸对 Lewis 肺癌小鼠及人 A549
肺癌的实验研究［J］．华西药学杂志，2010，25(5) :536 － 538．
［4］ 何显忠，兰荣德．金银花的药理作用与临床应用［J］．时珍国
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［5］ 王天志，李永梅． 金银花的研究进展［J］． 华西药学杂志，
2000，15(4) :292 － 294，298．
收稿日期:2011 － 12 － 24
513第 3 期 何 洋，等。金钮扣的薄层色谱鉴别及其绿原酸的测定