全 文 ：郝艳霜，魏 军，陈福星． 藏蒲公英多糖纳米乳剂的制备及性质研究［J］． 江苏农业科学，2012，40(6) :236 － 239．
藏蒲公英多糖纳米乳剂的制备及性质研究
郝艳霜1，魏 军2，陈福星1
(1．河北农业大学中兽医学院，河北定州 073000;2．西藏大学旅游与外语学院，西藏拉萨 850000)
摘要:筛选出合适的油、表面活性剂和助表面活性剂，根据纳米乳区并结合肉眼观察，筛选藏蒲公英多糖纳米乳
剂的处方，制备 W/O藏蒲公英多糖纳米乳剂，并测定其形态、粒径分布、pH值、黏度及稳定性，从而为利用纳米技术开
发藏药蒲公英多糖提供理论依据。结果显示，Tween 80 /Span 80 /石蜡油 /乙醇 /多糖水溶液配方的体积比为
3 ∶ 1 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 3，制备的藏蒲公英多糖纳米乳为淡黄色透明液体，透射电镜下呈圆球形，平均粒径为 56． 8 nm，pH 值
6. 18，黏度 3． 80 s，理化性质较稳定。藏蒲公英多糖纳米乳剂制备简单，成本低，稳定性很好，具有较大开发应用价值。
关键词:蒲公英多糖;纳米乳剂;免疫增强剂;制备;理化性质
中图分类号:R944． 1 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)06 － 0236 － 03
收稿日期:2012 － 03 － 21
基金项目:西藏自治区科技厅 2010 年重点科研计划(编号:
N2010D16) ;河北省畜牧兽医局项目(编号:2010 － 1 － 10)。
作者简介:郝艳霜(1978—) ，女，河南安阳人，硕士，讲师，主要从事中
药多糖在动物生产中的应用研究。Tel: (0312)2381241;E － mail:
lspeng2005@ 163． com。
通信作者:魏 军，副教授。E － mail:w． j． charles@ 126． com。
纳米乳剂(nanoemulsion，NE)是指乳滴直径大小处在纳
米尺度的一种特殊乳剂。一般情况下，将 2 种互不相溶液体
在表面活性剂作用下形成的热力学稳定、各向同性、外观透明
或半透明、粒径 1 ～ 100nm 的分散体系称为纳米乳液。纳米
乳液作为极具潜力的新型药物载体，具有物理稳定性好、提高
难溶性药物的溶解度、促进大分子水溶性药物在体内的吸收、
提高药物的生物利用度等优点［1］。蒲公英(Taraxacum mongo-
licum Hand － Mazz．)别称黄花苗、婆婆丁、黄花地丁等，为菊
科蒲公英属多年生草本植物的带根全草，《中华人民共和国
药典》(2005 年)记载其具有清热解毒、消肿散结、利尿通淋等
功效。现代药理研究显示，蒲公英具有广泛的药理活性，如抗
病原微生物感染、提高机体免疫、保肝利胆、抗溃疡等［2 － 6］。
蒲公英多糖(Taraxacum polysaccharides，TP)为蒲公英的多糖
提取物。本研究前期发现，蒲公英多糖能显著提高试验小鼠
及鸡的免疫器官指数，改善免疫器官内部组织结构，促进免疫
器官生长发育，有利于增强机体免疫［7］。为进一步研究剂型
对蒲公英多糖的影响，更好地发挥蒲公英多糖的免疫增强效
果，本试验引入纳米乳剂，旨在筛选出合适的油、表面活性剂
和助表面活性剂，制备 W/O 蒲公英多糖纳米乳剂，并对其理
化性质进行研究，从而为利用纳米技术开发中药多糖提供理
论依据。
1 材料与方法
1． 1 材料与主要试剂
藏蒲公英多糖由河北农业大学中兽医学院自制。蒲公英
采自西藏拉萨地区，水提醇沉法提取多糖，柱沉析法纯化，干
燥后得多糖含量为 16． 8%，硫酸 － 苯酚法测定纯度为
46． 37%。
肉豆蔻酸异丙酯(IPM)、乙醇、丙二醇、丙三醇、正丁醇
(国药集团化学试剂有限公司生产) ;橄榄油(四川天源油橄
榄有限公司生产) ;大豆油(西安嘉里油脂工业有限公司生
产) ;液体石蜡(天津天达化学试剂厂生产) ;氢化蓖麻油聚烃
氧酯 40(Cremophor RH 40，德国 BASF公司生产) ;Tween 60、
Tween 80、Span 60、Span 80(天津致远化学试剂有限公司生
产)。
1． 2 仪器与设备
透射电镜(JEM －1230 型，日本) ;酸度计(PHD200 型，上
海博通经贸有限公司生产) ;纳米粒度仪(Zetasizer Nano ZS
型，英国马尔文仪器有限公司生产) ;恒温磁力搅拌器(78HW
－1 型，杭州仪表电机厂生产) ;高速离心机(TGL － 16B 型，
湖南星科科学仪器有限公司生产) ;电热恒温水浴锅(HHS11
－ 4 型，武汉建新器械厂生产)。
1． 3 数据处理
试验数据用“x ± s”表示，所有数据用 SAS 软件处理，并
检查各组间的差异性。
2 结果与分析
2． 1 纳米乳佐剂处方的筛选
2． 1． 1 水相的选择 选择藏蒲公英多糖作为水相主要成分，
按照 3． 4%比例溶于水，辅以维生素 C(1 mg /mL)等辅助成
分，并加入乳化和稳定剂卵磷脂(1 mg /mL) ，最终形成纳米乳
佐剂的水相。
2． 1． 2 表面活性剂、助表面活性剂和油相的选择 表面活性
剂亲水 －亲油平衡值(hydrophile － lipophile balance，HLB)的
选择是微乳配方设计的一个初步指标。根据乳化理论和文献
记载，查阅 O /W型微乳 HLB值范围、各种表面活性剂的 HLB
值和油相乳化时所需要的 HLB值，结果显示当表面活性剂的
HLB值范围在 8 ～ 18 时，易形成 O /W 型微乳;当表面活性剂
的 HLB值范围在 4 ～ 7 时，易形成 W/O型微乳［8］。首先选定
表面活性剂相，然后根据表面活性剂相的 HLB 值确定油相。
大量文献质料显示，当油相乳化所需要的 HLB 值和表面活性
剂的 HLB值相匹配时，更有利于微乳的形成。
—632— 江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 6 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2012.06.067
本试验选用 Tween 60、Tween 80、Span 60、Span 80 作为表
面活性剂，选用乙醇、丙二醇、丙三醇和正丁醇作为助表面活
性剂，选用液体石蜡、肉豆蔻酸异丙酯、大豆油、橄榄油、Cre-
mophor RH 40 作为油相。根据王新伟的方法［9］初步筛选出
表面活性剂、助表面活性剂及油相，并根据经验通过肉眼观察
判断纳米乳的形成，以透明度、黏性及油相和水相的比例作为
评价标准［10］。结果表明:最终纳米乳组分中油相为液体石
蜡，表面活性剂为 Tween 80 和 Span 80 的混合物，助表面活性
剂为乙醇。用它们进一步进行纳米乳相图的研究，寻找出最
佳的油包水型纳米乳配方。
2． 1． 3 用伪三元相图确定表面活性剂与助表面活性剂的质
量比———Km 值 分别将 Tween 80、Span 80 以 2 ∶ 1、3 ∶ 1、
4 ∶ 1混合作为混合表面活性剂，以石蜡油为油相，在室温下搅
拌滴加水至形成透明的纳米乳剂，肉眼观察体系澄清度和黏
度变化，记录体系变澄清或浑浊时水的临界加入量。混合表
面活性剂、油相、水相分别作为相图的 3 个顶点，用 Origin 7． 0
绘制伪三元相图，结果见图 1。图中阴影部分即为 W/O 纳米
乳区，可见当 Tween 80 ∶ Span 80 = 3 ∶ 1 时，纳米乳区面积最
大，可确定其为混合表面活性剂最佳组成。
将混合表面活性剂与助表面活性剂乙醇分别按 Km =
2 ∶ 1、4 ∶ 1、6 ∶ 1、9 ∶ 1 混合，再分别与石蜡油混匀，室温下绘
制伪三元相图，结果见图 2。由图 2 可知，当 Km = 4 ∶ 1 时形
成的纳米乳区最大，增大或减小 Km 值所形成的微乳区均减
小，且 Km = 4 ∶ 1 时，纳米乳易形成，不会出现凝胶等粘稠态。
因此，确定 Km = 4 ∶ 1。
2． 2 藏蒲公英多糖纳米乳剂的制备
根据纳米乳区、药物含量和稳定性，藏蒲公英多糖纳米乳
剂的组成为:Tween 80、Span 80、液体石蜡、乙醇和水(体积比
为 3 ∶ 1 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 3)。按照处方量量取各成分，在室温下，将
表面活性剂、助表面活性剂和油搅拌均匀，即得油相;将藏蒲
公英多糖、卵磷脂、维生素 C等溶于蒸馏水中，搅拌使其完全
溶解，过滤，即得水相;将油相缓慢滴加到水相中，滴加的同时
不断搅拌，直至形成透明的体系，过滤，即得透明的藏蒲公英
多糖 W/O纳米乳剂。
—732—郝艳霜等:藏蒲公英多糖纳米乳剂的制备及性质研究
2． 3 藏蒲公英多糖纳米乳剂的理化性质
2． 3． 1 外观和 pH 值 藏蒲公英多糖纳米乳剂为淡黄色透
明液体，流动性良好，pH值为 6． 18。
2． 3． 2 黏度 取出口内径为 1． 2 mm 玻璃吸管，吸取 1 mL
样品，室温条件下记录流出 0． 4 mL 样品所需要的时间(s) ，
即为其黏度。本研究纳米乳剂黏度为 3． 80 s。
2． 3． 3 形态观察 纳米乳剂用蒸馏水适当稀释后，滴在覆有
支持膜的铜网上，静置 10 min，滴加 3% 磷钨酸溶液负染
5 min，自然挥干，透射电镜观察发现纳米乳呈圆球形(图 3)。
2． 3． 4 粒径及其分布 用 Zetasizer Nano ZS型纳米粒度仪测
得纳米乳剂的粒径分布:平均粒径为 56． 8 nm，粒径在 31． 1 ～
92． 4 nm的粒子占 95． 7%，大于 92． 4 nm 或小于 31． 1 nm 的
粒子仅占 4． 3%。本研究纳米乳佐剂的粒径分布范围窄，粒
径比较均匀。
2． 3． 5 稳定性考察 纳米乳剂于 10 000 r /min 速度离心
10 min后仍保持透明均一的外观，未出现分层和药物析出等
现象。将纳米乳佐剂分装于西林瓶中，密封包装后，分别于
4、25、37、40、60 ℃及强光(4 500 ± 500)lx条件下放置，于 15、
30 d取样，测定 pH值、乳滴粒径、药物(藏蒲公英多糖)含量
等指标(表 1)。纳米乳剂在 4、25、37、40 ℃和光照条件下放
置 30 d，液体保持澄清透明状态，未见分层、絮凝和破乳，pH
值、乳滴粒径和药物含量未见明显变化;但在 60 ℃条件下纳
米乳剂变浑浊，置室温下又恢复澄清透明状态。表明本研究
纳米乳剂在室温或 4 ℃较为稳定。
表 1 纳米乳剂的稳定性
放置条件
pH值 药物含量 (%) 外观
放置 0 d 放置 15 d 放置 30 d 放置 0 d 放置 15 d 放置 30 d 放置 0 d 放置 15 d 放置 30 d
4 ℃ 6． 18 6． 16 6． 14 3． 4 3． 4 3． 4 淡黄色透明 淡黄色透明 淡黄色透明
25 ℃ 6． 18 6． 15 6． 14 3． 4 3． 4 3． 4 淡黄色透明 淡黄色透明 淡黄色透明
37 ℃ 6． 18 6． 16 6． 13 3． 4 3． 4 3． 4 淡黄色透明 淡黄色透明 淡黄色透明
40 ℃ 6． 18 6． 14 6． 13 3． 4 3． 4 3． 4 淡黄色透明 淡黄色透明 淡黄色透明
60 ℃ 6． 18 6． 03 6． 11 3． 4 3． 4 3． 4 变浑浊 变浑浊 变浑浊
强光 6． 18 6． 16 6． 13 3． 4 3． 4 3． 4 淡黄色透明 淡黄色透明 淡黄色透明
3 讨论
药用纳米乳处方设计的重点是选择适宜的组分和比例，
使体系中的各组分既符合药用要求又可以在较大的范围内形
成纳米乳，且对药物溶解能力较强。油相是纳米乳形成的必
需成分，也是影响最终纳米乳佐剂稳定性的主要因素［11］。本
试验选择常用的药用辅料液体石蜡作为油相。
理论上，纳米乳的形成要求表面活性剂或助表面活性剂
混合物吸附在油 /水界面上，以降低界面张力至很低值，甚至
负值。表面活性剂的 HLB 值对纳米乳的结构和纳米乳区的
大小均有很大影响，当 HLB值较大时，容易形成 O /W型纳米
乳，当 HLB值较小时，容易形成 W/O型纳米乳。Tween 80 属
于聚氧乙烯(20)失水山梨醇脂肪酸酯类非离子型表面活性
剂，含有聚氧乙烯基(EO) ，其 HLB值为 14． 9，由于其 HLB 值
较高，不易形成 W/O型纳米乳，故通常与失水山梨醇脂肪酸
酯类非离子型表面活性剂(如 Span 80，HLB值为 4． 3)复合使
用。从图 1 可知，2 种混合表面活性剂的 HLB 值均符合乳化
石蜡油所需 HLB值的要求，故纳米乳区均以 W/O 型纳米乳
为主。图 1 － b的纳米乳区最大，其次是图 1 － c，图 1 － a的纳
米乳区最小，结果表明 Tween 80 ∶ Span 80 = 3 ∶ 1 是最佳混合
表面活性剂组成。
加入助表面活性剂的作用主要是降低界面张力、增加界
面膜的流动性和调节 HLB值［12］。助表面活性剂一般采用中
等链长的醇、胺及有机酸等，但是其中许多不能应用于药学
上，所以本试验采用乙醇作为助表面活性剂。将混合表面活
性剂与助表面活性剂乙醇分别按 Km = 2 ∶ 1、4 ∶ 1、6 ∶ 1、8 ∶ 1
混合，室温下绘制伪三元相图，结果显示当 Km = 4 ∶ 1 时形成
的纳米乳区最大，增大或减小 Km 值，所形成的纳米乳区均减
小，这可能是因为此时表面活性剂与助表面活性剂的质量比
达到了最佳，助表面活性剂正好完全镶嵌到表面活性剂中，形
成的纳米乳结构中增溶空间最大，载油量最大。Km = 4 ∶ 1
时，纳米乳易形成，不会出现凝胶等粘稠态。目视法可观察到
随 Km 中表面活性剂量的增加，体系黏度也增加，这可能是由
表面活性剂的性质所决定。而加入乙醇可使纳米乳黏度降
低，这与乙醇增加了界面膜的柔性有关。
在保证纳米乳稳定的前提下，借助相图中纳米乳区大小
和表面活性剂用量，筛选出 Tween 80 /Span 80 /石蜡油 /乙醇 /
水(体积比为 3 ∶ 1 ∶ 2 ∶ 1 ∶ 3，Km = 4 ∶ 1)纳米乳作为藏蒲公
英多糖的药用载体。本试验中在高速离心和不同温度作用条
件下，纳米乳无分层、絮凝和药物析出等现象;温度高于 60 ℃
体系会出现浑浊，这可能与表面活性剂的浊点有关。
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(下转第 239 页)
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(上接第 238 页)
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闫海霞，邓俭英，李立志，等． 无机盐对月季玛利亚的采后保鲜效应研究［J］． 江苏农业科学，2012，40(6) :239 － 241．
无机盐对月季玛利亚的采后保鲜效应研究
闫海霞1，邓俭英1，2，李立志1，2，卜朝阳1，邓杰玲2，武 鹏2
(1．广西农业科学院花卉研究所，广西南宁 530007;2．广西现代农业科技示范园，广西南宁 530007)
摘要:为了探讨无机盐对切花月季延缓衰老的效应，以月季玛利亚为材料，在确定有较好延缓衰老效果的保鲜剂
处理浓度和处理时间上，进行了瓶插期间鲜重变化、水分平衡的生理指标测定。结果表明:0． 040% NaCl、0． 006%
CaCl2、0． 006% ZnCl2 的瓶插寿命分别比对照延长了 7、6、6 d。3 种无机盐中，0． 040% NaCl 的保鲜效应最明显，其次
为 0． 006% CaCl2 和 0． 006% ZnCl2。通过对切花花枝鲜重和水分平衡的指标测量及分析可知，切花瓶插寿命的延长
与花枝鲜重和水分平衡密切相关。
关键词:无机盐;月季;瓶插寿命;采后保鲜;水分平衡
中图分类号:S685． 120． 9 + 3 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2012)06 － 0239 － 03
收稿日期:2011 － 11 － 04
基金项目:广西农业科学院基本科研业务费专项(编号:桂农科
2011YM16)。
作者简介:闫海霞(1981—) ，女，广西贵港人，硕士，助理研究员，从事
花卉新品种选育与示范推广工作。E － mail:819307232@ qq． com。
通信作者:武 鹏，硕士，助理研究员，主要从事蔬菜栽培与育种研
究。E － mail:86932830@ qq． com。
月季(Rosa chinensis)是蔷薇科蔷薇属多年生落叶或常绿
灌木［1］，是世界四大鲜切花之一，在国内外花卉市场上占有
非常重要的地位。但月季在瓶插期间花瓣极易失水、失鲜、褪
色、萎焉，严重影响切花的瓶插寿命和观赏价值。因此，对月
季进行采后保鲜研究已经成为当前切花保鲜研究的重大课题
之一。大多数的鲜切花保鲜剂成分主要包括杀菌剂、营养物
质、乙烯抑制剂与生长调节剂四大类物质［2］，目前还没有很
有效的通用型保鲜剂。虽然硫代硫酸银已经广泛用作月季切
花保鲜剂的主要成分，但却存在延缓开花衰老效果不稳定和
环境污染的问题［3 － 5］。无机盐作为保鲜液的成分之一，具有
较明显的抗衰老作用，价格低廉，容易配制，对环境无污染。
近年来，国内外有关无机盐对月季的采后保鲜研究报道越来
越多［6 － 14］。因此，通过试验选择合适的无机盐作为保鲜液的
成分具有重要意义。本试验主要研究无机盐对月季切花玛利
亚的瓶插寿命、鲜重变化、水分平衡变化的影响，以期寻求一
种经济、有效的延长切花月季瓶插寿命的途径，为今后月季贮
藏保鲜研究提供理论依据和技术支持。
1 材料与方法
1． 1 材料
试验在广西农业科学院广西现代农业科技示范园进行。
月季品种选用粉红系列的玛利亚(Rosita Vendela) ，由广西现
代农业科技示范园提供。采摘的鲜切花要求粗壮均一，以花
蕾松动而尚未开放为标准，采后立即插入清水中并运回实验
室。处理前先修剪枝叶，保留 2 片复叶，花枝切口剪成 45°斜
面，花枝长约 30 cm，插入清水 2 h后再进行处理。
1． 2 方法
试验采用 3 种无机盐(NaCl、CaCl2、ZnCl2) ，以自来水为
对照，每种无机盐设 10 个浓度梯度:0． 002、0． 004、0． 006、
0. 008、0． 010、0． 020、0． 040、0． 060、0． 080、0． 100(单位:%)。
将瓶插液分别盛于同规格花瓶中，每瓶插 5 朵花，置于无直射
阳光、无风的室内(室温 20 ～ 30 ℃)。自瓶插之日起，每隔
2 d 进行观察、记录和测量。
1． 2． 1 瓶插寿命 外层花瓣展开与花茎呈直角且露心，弯颈
或萎蔫、蓝变即为瓶插寿命结束。
1． 2． 2 切花的鲜重 用电子天平称取花枝鲜样质量，取平
均值。
1． 2． 3 水分平衡 参照高勇的方法［15］进行:以(杯 +保鲜液
—932—江苏农业科学 2012 年第 40 卷第 6 期