全 文 ：果旭阿汤中土木香内酯和异土木香内酯的含量测定
陈晓红1，2，陈睿3，陈元涛2，热增才旦1，段黎昊2
(1．青海大学医学院药学系，西宁 810001;2．青海师范大学化学系，西宁 810008;3．青海省质量技术监督局，西
宁 810008)
［摘 要］ 目的 建立同时测定藏药果旭阿汤中土木香内酯和异土木香内酯含量的方法。方法 通过优化提取
方法，用气相色谱(GC)法同时测定藏药果旭阿汤中藏木香有效成分土木香内酯和异土木香内酯的含量。结果 土木香
内酯和异土木香内酯均在 0． 1 ～ 1． 0 mg·mL－1(n= 5)范围内呈良好线性关系。土木香内酯回收率为 97． 25% (n = 6) ，
RSD=0． 93%;异土木香内酯回收率为 97． 42% (n=6) ，RSD= 0． 90%。结论 该方法可用于藏药果旭阿汤中土木香内
酯和异土木香内酯的含量同时快速、准确测定。
［关键词］ 果旭阿汤;土木香内酯;异土木香内酯;含量测定
［中图分类号］ R29． 08;R927． 2 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1004－0781(2011)09－1210－03
Simultaneous Determination of Alantolactone and Isoalantolactone in Guoxu A Decoction
CHEN Xiao-hong1，2，CHEN-Rui3，CHEN Yuan-tao2，RE Zeng-caidan1，DUAN Li-hao2(1． Department of
Pharmacy，Qinghai University Medical College，Xining 810001，China;2． Department of Chemistry，Qinghai
Normal University，Xining 810008，China;3． Qinghai Bureau of Quality and Technical Supervision，Xining
810008，China)
ABSTRACT Objective To establish a simultaneous determination for alantolactone and isoalantolactone in guoxu a
decoction by gas chromatography． Methods Alantolactone and isoalantolactone of Radix Inulae Heleni in decoction of guoxu a
were determined by gas chromatography，based on the optimized extraction methods． Results The linear range of alantoactone
and isoalantolactone was 0． 1－1． 0 mg·mL-1(n=5)． The mean recovery for alantolactone was 97． 25%(n=6) ，RSD= 0． 93% ．
The mean recovery for isoalantolactone was 97． 42%(n=6) ，RSD=0． 90% ． Conclusion The result indicates that the method
is sensitive and accurate，which can be used to simultaneousy determine alantolactone and isoalantolactone of Radix Inulae Heleni
in decoction of guoxu a．
KEY WORDS Guoxu A decoction;Alantolactone;Isoalantolactone;Content determination
藏药果旭阿汤是藏医药世家通过长期实践总结出
的治疗血隆病的经典处方之一，收载于《中华人民共
和国卫生部药品标准·藏药》第 1 册中［1］，在《四部医
典》［2］和青海的藏药志中也有记载。该处方主治功能
为开胸解郁行气、镇痛，用于治疗血隆病引起的胸闷气
短、胸胁疼痛和肩背胀痛等症。通过查阅文献［3-7］，笔
者未见果旭阿汤中藏木香有效成分土木香内酯和异土
木香内酯含量测定方法的报道，因此通过对藏木香中
有效成分提取方法、提取溶剂以及影响测定结果的其
他参数进行了比较，采用气相色谱法测定藏药果旭阿
汤中藏木香有效成分土木香内酯和异土木香内酯的含
量，为该药质量标准的建立提供了实验依据。
［收稿日期］ 2011－01－28 ［修回日期］ 2011－03－07
［作者简介］ 陈晓红(1968－) ，女，土族，甘肃天水人，高
级实验师，在读硕士，主要从事医用化学和中藏药开发。电话:
0971－3639210，E-mail:chenxiaohong883@ 163． com。
［通讯作者］ 陈元涛，教授，电话:0971－6303374，E-mail:
chenyt@ qhnu． edu． cn。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 气相色谱仪(Agilent 7890 型) ;FID 检测
器;GCD-500G高纯氢气发生器(北京佳维科创科技有
限公司)。超声仪(KQ-250DV型，250 W，40 kHz，昆山
市超声仪器有限公司)。
1． 2 试药 土木香内酯对照品(中国药品生物制品
检定所，批号:110760-200507，供含量测定用) ;异土木
香内酯对照品(中国药品生物制品检定所，批号:
110761-200204，供含量测定用) ;超纯水;乙酸乙酯
(色谱纯) ;藏药果旭阿汤样品所用药材均由青海省藏
医药研究所提供(批号:100801，100802，100803) ，并经
青海省药品检验所鉴定。各缺味阴性对照样品按四味
藏木香汤散的处方及制备工艺进行缺味制备。
2 方法与结果
2． 1 提取条件的选择 同时提取土木香内酯和异土
木香内酯，采用乙酸乙酯超声提取 30 min。
2． 2 色谱条件 色谱柱:SE-30(30 m × 0． 32 mm，
0． 50 μm) ;程 序 升 温 法:初 始 温 度 50 ℃，以
20 ℃·min-1 升 至 170 ℃，保 持 28 min，再 以
·0121· Herald of Medicine Vol. 30 No. 9 September 2011
25 ℃·min-1升至 250 ℃;分流比:10∶1;检测器温度:
260 ℃;载气:氮气;流速:1． 0 mL·min-1。
2． 3 对照品溶液制备 分别精密称取土木香内酯和
异土木香内酯对照品各 20 mg，置 10 mL量瓶中，用乙
酸乙酯稀释至刻度，配成 2． 00 mg·mL-1储备液。各吸
取 2． 00 mg·mL-1土木香内酯对照品储备液和异土木
香内酯对照品储备液 0． 5，1． 0，1． 5，2． 0，2． 5 mL，分别
置于 5 mL量瓶中，用乙酸乙酯稀释至刻度，制得土木
香内酯和异土木香内酯系列对照品溶液。
2． 4 供试品溶液 精密称取果旭阿汤样品(悬钩木、
藏木香、宽筋藤、干姜和马钱子按处方比例混匀，藏木
香在成药中所占的比例约为 20． 2%，过孔径0． 355 mm
药筛)3 份，加入乙酸乙酯 30 mL，称定质量，超声处理
30 min，取出，冷至室温，再称定质量，用乙酸乙酯补足
质量，摇匀，过滤，取滤液作为供试品溶液。
2． 5 空白实验 取不含藏木香成分的果旭阿汤阴性
样品 1 份，按“2． 4”项方法制成阴性样品溶液。分别
吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液各1． 0 μL
注入气相色谱仪，按色谱条件依次测定。结果该阴性
溶液在土木香内酯峰的位置上无干扰。
2． 6 线性关系考察 分别吸取土木香内酯和异土木
香内酯系列对照品溶液 1． 0 μL进样，测定其含量。结
果土 木 香 内 酯 和 异 土 木 香 内 酯 均 在 0． 1 ～
1． 0 mg·mL-1内呈良好线性关系，回归方程分别为 Y=
1． 35×103X+8． 17(r = 0． 999 3) ，Y = 1． 25×103X+32． 3
(r=0． 999 8) ，前者检测限为 2． 7 μg·mL-1(S /N = 3) ，
后者检测限为 2． 6 μg·mL-1。
2． 7 精密度实验 分别取 0． 20 mg·mL-1土木香内酯
和异土木香内酯的对照品溶液，进样，测定其含量。结
果，土木香内酯的 RSD为 1． 25% (n=6) ，异土木香内
酯的 RSD为 1． 16%(n=6)。说明该实验方法准确。
2． 8 重复性实验 取样品粉末按“2． 4”项方法分别
配制供试品溶液 6 份，依次测定土木香内酯和异土木
香内酯的含量。结果土木香内酯和异土木香内酯的平
均含量分别为 2． 65 和 3． 60 mg· g-1，RSD 分别为
1． 44%和 1． 16%。结果表明，该方法重复性良好。
2． 9 稳定性实验 取同一批次供试品，按“2． 4”项方
法分别配制供试品溶液 5 份，依次放置 0，4，8，12，24 h
后，分别测定。结果土木香内酯的 RSD= 1． 02% (n =
5) ，异土木香内酯的 RSD= 1． 32%(n = 5)。说明稳定
性很好。
2． 10 加样回收率实验 分别精密称取已知含量的土
木香内酯和异土木香内酯样品约 1． 0 g，分别准确加入
1． 00 mg·mL-1对照品溶液 2． 00 mL，按“2． 4”项方法
分别制备供试品溶液，依法测定，结果土木香内酯和异
土木香内酯平均回收率分别为 97． 25%，97． 42%;RSD
分别为 0． 93%，0． 90%，见表 1。
表 1 土木香内酯和异土木香内酯的加样回收率测定结果
Tab． 1 Results of recovery of alantolactone and
isoalantolactone mg，n=6
原有量 加入量 测得量 回收率 /%
土木香内酯
2． 65 2． 00 4． 62 98． 50
2． 94 2． 00 4． 88 97． 00
2． 32 2． 00 4． 24 96． 00
3． 05 2． 00 5． 00 97． 50
2． 29 2． 00 4． 25 98． 00
2． 44 2． 00 4． 37 96． 50
异土木香内酯
3． 60 2． 00 5． 52 96． 00
3． 36 2． 00 5． 31 97． 50
2． 94 2． 00 4． 91 98． 50
2． 93 2． 00 4． 87 97． 00
2． 55 2． 00 4． 52 98． 50
3． 47 2． 00 5． 41 97． 00
2． 11 样品含量测定 取 3 批样品，分别按“2． 4”项
方法制备供试品溶液，依次测定土木香内酯和异土木
香内酯含量。结果土木香内酯含量分别为 2． 65，
2． 59，2． 61 mg·g-1，平均 2． 62 mg·g-1，RSD = 1． 21%
(n = 3) ;异土木香内酯含量分别为 3． 34，3． 37，
3． 39 mg·g-1，平均 3． 37 mg·g-1，RSD=0． 76%。
3 讨论
实验中同时提取土木香内酯和异土木香内酯，分
别采用三氯甲烷冷浸提取 14 h 、甲醇超声提取、乙酸
乙酯超声提取和乙醚回流提取的方法对同一批样品进
行了提取和测定，对这几种方法地提取速度和分离效
果进行比较研究，发现提取速度、提取率略有差别:三
氯甲烷冷浸法耗时长，操作较繁琐，不利于快速、及时
分析;甲醇超声提取 40 min 能较完全地提取药材中的
土木香内酯和异土木香内酯，但耗时也较长;乙醚回流
提取样品液虽简单快速，但脂溶性杂质较多，影响色谱
柱的分离效果;用乙酸乙酯超声提取 30 min 法提取率
较高，又省时，故本实验采用此提取方法。
以乙酸乙酯为溶剂，比较超声提取法 30，60，
90 min提取效果，结果发现超声提取 30 min 提取的含
量差别不大，由于其操作时间短，选择超声 30 min 为
提取条件。
在其他色谱条件固定的条件下，笔者对 5 种不同
的升温程序进行了选择，包括初始温度、升温速率进行
·1121·医药导报 2011 年 9 月第 30 卷第 9 期
了选择、比较，并且考虑分离度、分析时间长短及高沸
点杂质的影响，选择了简单易行的提取条件和色谱条
件，基本消除了其他成分的干扰。
本研究结果表明，采用气相色谱法同时测定藏药
果旭阿汤中土木香内酯和异土木香内酯含量，快速、准
确，简便可靠，重复性好。本实验所建立的方法，为更
好地控制藏木香药材及其制剂的质量标准和藏药综合
开发利用提供了科学依据。
［DOI］ 10． 3870 /yydb． 2011． 09． 034
［参考文献］
［1］ 中华人民共和国卫生部药典委员会．中华人民共和国卫
生部药品标准［S］．藏药．第 1 册． 1995:309．
［2］ 玉妥·云丹贡保．四部医典(藏文)［M］．拉萨:西藏人民
出版社，2000:70．
［3］ 曾锐，瞿燕，高宇明．反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测
定藏药六味能消胶囊中土木香内酯和异土木香内酯的含
量［J］．中国药学杂志，2007，42(7) :491－493．
［4］ 董琦，马世震，胡凤祖．高效液相色谱(HPLC)法测定不同
采收期栽培藏木香中内酯类成分［J］．中草药，2010，41
(7) :1186．
［5］ 王秀丽，栾杨，刘拥军，等．气相色谱法测定土木香中土木
香内酯含量［J］．山东中医大学学报，2005，29(4) :322－
323．
［6］ 丘翠嫦，戴斌．新疆木香中土木香内酯与异土木香内酯的
分离鉴定［J］．中药材，1995，18(1) :30－32．
［7］ 杨媛媛，马晓康，顾政一，等．不同产地新疆赤芍中芍药苷
的含量测定［J］．医药导报，2008，27(7) :763－764．
刺五加注射液的安全性考察
李秀梅，范能全，赵欣欣，杨柳，詹宇杰，张芳艳
(重庆市药品检验所，401121)
［摘 要］ 目的 对刺五加注射液作安全性实验考察。方法 采用间接酶联免疫法检测过敏性杂质;采用超滤电
泳法对大分子物质进行考察;另作了渗透压、降压物质、豚鼠过敏实验以及模拟临床配伍条件的不溶性微粒实验考察。
结果 用间接酶联免疫法未检查出过敏性物质;采用超滤电泳实验发现各厂家产品中不同程度地存在大分子物质;其他
实验考察结果未见异常。结论 不同厂家刺五加注射液的生产工艺存在一定差异，且都需要进一步改进。
［关键词］ 刺五加注射液;安全性实验;间接酶联免疫法;超滤电泳;生产工艺
［中图分类号］ R286;R927． 11 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1004－0781(2011)09－1212－03
刺五加注射液收载于《卫生部药品标准》中药成
方制剂第 18 册，系刺五加科植物刺五加经提取有效成
分而成的供静脉滴注的中药注射剂，除具有免疫调节、
抗肿瘤作用外，还可治疗心脑血管疾病、糖尿病、神经
衰弱等症。其质量标准中的生物安全性检验项目有热
原、异常毒性和无菌。通常按其现行质量标准检验上
述指标均符合规定，然而在临床使用中不时发现其存
在以下不良反应:药物热、过敏性休克、全身症状、药
疹、呼吸道反应、胃肠道反应等［1-2］。
引起中药注射液发生不良反应的原因通常是高分
子物污染、抗原性、与输液的配伍作用等［3-4］。为进一
步考察刺五加注射液的安全性，笔者对 3 个厂家生产
的刺五加注射液进行了一系列实验考察，报道如下。
［收稿日期］ 2010－11－11 ［修回日期］ 2011－04－29
［作者简介］ 李秀梅(1970－) ，女，四川高县人，高级工程
师，硕士，主要研究方向:药品质量控制。电话:023－86072737，
E-mail:lixiumei@ cqidc． org． cn。
1 材料与方法
1． 1 药物与试剂 刺五加注射液 76 批(黑龙江乌苏
里江制药有限公司 59 批，黑龙江省珍宝岛制药有限公
司哈尔滨分公司 2 批，黑龙江多多药业有限责任公司
15 批) ;刺五加标准抗原(中国药品生物制品检定所抗
生素室，规格:4 mg·mL-1) ;特异性刺五加抗体(中国
药品生物制品检定所抗生素室) ;牛血清白蛋白干粉
(北京欣经科生物技术有限公司) ;羊抗兔辣根过氧化
物酶抗体(中国药品生物制品检定所) ;凝胶缓冲液
(三羟甲基氨基甲烷 36． 33 g，丙烯酰胺 0． 3 g，加适量
水，调 pH至 8． 45，定容至 100 mL) ;阳极缓冲液(三羟
甲基氨基甲烷 12． 1 g，加适量水溶解，用盐酸液调
pH=8． 9，定容至500 mL) ;阴极缓冲液(三羟甲基氨
基甲烷 6． 05 g，tricine8． 96 g，丙烯酰胺 0． 5 g，定容至
500 mL，pH8． 0) ;0． 1%硝酸银染色液;过硫酸铵、甘
油、硝酸银和 N，N，N＇，N＇-四甲基乙二胺(TEMED) (分
析纯，华美生物工程公司) ;MAKER(ABI 公司生产，国
内分装) ;96 孔酶标板(COSTAR 2592) ;500 μL 超滤
管(Sartorius Vivaspin)。
·2121· Herald of Medicine Vol. 30 No. 9 September 2011