全 文 ：阿尔泰狗娃花中多糖超声提取及含量测定
杜艳青， 陈建平， 于姝燕， 额尔敦， 胡密霞， 周昊霏， 武世奎， 黄 月， 王美玲*
(内蒙古医科大学 药学院，内蒙古 呼和浩特 010110)
摘 要:目的:采用超声法提取阿尔泰狗娃花中的多糖，并测定其含量。方法:采用紫外－可见分光光度法，
以葡萄糖为对照品，苯酚－浓硫酸显色法测定阿尔泰狗娃花中多糖的含量。结果:总多糖在 2． 535－15． 21μg /mL
范围内呈良好线性关系，回归方程 Y= 0． 0501X－0． 0015(r = 0． 9998，n = 6) ，阿尔泰狗娃花多糖含量为 5． 645%，
ＲSD为 0． 65%。经方法学考察显示，稳定性、精密度、重现性均较好，平均回收率为 96． 86%，ＲSD为 1． 45%。结
论:紫外分光光度法测定阿尔泰狗娃花中的多糖，操作简便、灵敏度高、重现性好，稳定性高，可作为阿尔泰狗娃
花中多糖含量测定方法。
关键词:阿尔泰狗娃花;超声提取;多糖;含量测定
中图分类号:Ｒ917 文献标识码:A 文章编号:2095－512X(2014)04－0306－04
ＲESEAＲCH ON EXTＲACTION PＲOCESS AND
CONTENT DETEＲMINATION OF HETEＲOPAPPUS
ALTAICUS(WILLD．)NOVOPOKＲ． POLYSACCHAＲIDE
BY ULTＲASONIC EXTＲACTION
DU Yan－qing， CHEN Jian－ping， YU Shu－yan， et al．
(College of Pharmacy，Inner Mongolia Medical University，Hohhot 010110 China)
Abstract:Objective:To extract the polysaccharide of Heteropappus altaicus(Willd．)novopokr by
ultrasonic extraction，and determine the polysaccharide content． Methods:Based on the standard
sample glucose，the polysaccharide content of Heteropappus altaicus(Willd．)novopokr polysaccharide
was determined by phenol－sulfuric acid coloration and Ultraviolet and Visible(UV)spectrophotometry．
Ｒesults:The results showed that the absorbance has a linear relationship with the concentration in the
range of 2． 535 ～ 15． 21μg /mL，and the regression equation is Y= 0． 0501X－0． 0015(r = 0． 9998，n =
6)． The polysaccharide consent determined is 5． 645%with 0． 65% of ＲSD． The methodological evalu-
ation demonstrated that this method has good stability，precision and reproducibility． Also，the average
recovery rate is 96． 86% and ＲSD is 0． 65% ． Conclusion:The UV － spectrophotometry can be
employed to determine the polysaccharide content of Heteropappus altaicus(Willd．)novopokr，because
the method is convenient in operation and has high sensitivity，good repeatability and stability．
Key words:Heteropappus altaicus (Willd．)Novopokr;ultrasonic extraction;polysaccharide;
·603· Journal Of Inner Mongolia Medical University Aug． 2014 Vol． 36 No． 4
收稿日期:2014－04－20;修回日期:2014－06－02
基金项目:内蒙古医科大学大学生“英才培育”项目(2013－2014)
作者简介:杜艳青(1980－) ，女，内蒙古医科大学药学院无机化学教研室讲师。
通讯作者:王美玲，教授，E－mail:wangmeiling080@ sina． com内蒙古医科大学药学院无机化学教研室，010110
DOI:10.16343/j.cnki.issn.2095-512x.2014.04.002
content determination
阿尔泰狗娃花 Heteropappus altaicus(Willd．)
Novopokr，又名阿尔泰紫菀，为菊科植物狗娃花属
植物阿尔泰狗娃花的干燥头状花序。全草入中药，
具有清热解毒、排脓之功效，能治时疫热病、高热头
痛、肝胆火旺、胸胁满闷、烦燥易怒、痈疮疖肿、毒蛇
咬伤。药理研究表明，动物实验水煎剂有祛痰作
用，祛痰作用的有效成分为紫菀酮、紫菀皂苷、紫菀
醇以及两种含氮化合物;紫菀在体外对多种致病菌
(包括致病性真菌)均有对抗作用;水煎剂在鸡胚
尿素囊中对流感病毒有明显的抑制作用;所含槲皮
素有利尿作用;表无羁萜醇对艾氏腹水癌有抗癌作
用;紫菀皂苷有很强的溶血作用，粗制剂不宜静脉
注射［1］。
多糖具有抗肿瘤、抗病毒、抗溃疡、抗衰老、降
血脂等多种生理活性［2］。植物细胞壁比较坚固，
妨碍多糖的提取，一般要进行细胞破坏处理。超声
波处理是一种物理破坏过程，利用超声波机械振动
能量，使媒质结构发生空间变化，促使有效成分快
速进入溶剂中，超声波产生的空化效应又进一步破
坏媒质的细胞壁结构，促使媒质细胞内的有效成分
得以释放，直接进入溶剂并充分混合，从而提高提
取效果。本文对阿尔泰狗娃花中多糖进行了超声
提取和含量测定，为该药材的进一步开发利用奠定
了基础［3］。
1 仪器与试药
1． 1 仪器
TU－1901 型双光束紫外分光光度计［北京普
析通用有限责任公司］;KH 5200 DE 型数控超声
波清洗器［昆山禾创超声仪器有限公司］;LX－07A
多功能粉碎机［上海江信科技有限公司］;SHZ－CA
型循环水
式多用真空泵［巩义市英峪仪器厂］;AB135－
S分析天平［Made in Switzerland］;BSA 124 S 型电
子天平［北京赛多利斯科学仪器有限公司］;DF－
101S型恒温水浴锅［巩义市孝义合众仪器供应
站］;DGG－9240B型智能鼓风干燥箱［杭州卓驰仪
器有限公司］。
1． 2 试药
阿尔泰狗娃花［采自内蒙古赤峰市，经内蒙古
医科大学药学院药用植物教研室乔俊缠教授鉴定
为菊科植物狗娃花属植物阿尔泰狗娃花 Hetero－
pappus altaicus(Willd．)Novopokr 的全草］;D－无水
葡萄糖对照品［上海市国药集团化学试剂有限公
司，纯度≥99． 5%，批号:20120415］，无水乙醇、浓
硫酸、苯酚，其他试剂均为国产分析纯。
2 实验方法
2． 1 对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的葡萄糖对照品 0． 5g，
置 100mL容量瓶中用蒸馏水稀释至刻度，精密量
取上述葡萄糖溶液 0． 5mL 置 50mL 容量瓶中用蒸
馏水稀释至刻度摇匀，即得 50μg /mL 葡萄糖对照
品溶液［4 ～ 6］。
2． 2 供试品溶液的制备
精密称取阿尔泰狗娃花全草粉末 1． 0g，加入
25mL 95%乙醇超声 30min，抽滤，用 95%乙醇洗涤
滤渣，滤渣加入 40mL蒸馏水超声提取 40min(提取
温度为 50℃、超声功率为 140W) ，后将提取液离
心，弃去沉淀，将提取液浓缩至 10mL，加入 30mL
95%乙醇静置，离心，沉淀用蒸馏水溶解定容至
100mL。精密吸取上述溶液 2． 0mL 置 50mL 容量
瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得［7 ～ 9］。
2． 3 测定波长的选择
精密量取上述葡萄糖对照品溶液 2． 0mL，供试
品溶液 2． 0mL，分别置于具塞比色管中，加入 5%
苯酚溶液 1mL(称取苯酚 5g，加蒸馏水溶解并定容
于 100mL棕色容量瓶中，避光冷藏备用) ，滴加浓
硫酸至 10mL，放置 10min，摇匀后，于 80℃水浴中
反应 15min。后置于冷水中冷却，进行全波长扫
描，吸收光谱显示对照品和供试品均在 484nm 处
有最大吸收，故选择 484nm 作为测定波长，结果见
图 1。
2． 4 标准曲线的测绘
精 密 量 取 葡 萄 糖 对 照 品 溶
液 0． 0，0． 5，1． 0，1． 5，2． 0，2． 5，3． 0mL 分 别 置 于
10mL具塞试管中，按 2． 3 项下显色方法显色，在
484nm处测定吸光度，以吸光度为横坐标，浓度为
纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y =0． 0501X
－0． 0015(r =0． 9998，n = 6) ，结 果 表 明 浓 度
在 2． 535 ～ 15． 21μg /mL内与吸光度值呈良好线性
关系，结果见图 2。
·703·内蒙古医科大学学报 2014 年 8 月 第 36 卷 第 4 期
图 1 对照品与供试品吸收图谱
Fig． 1 The absorption spectrum of reference and test
图 2 葡萄糖对照品标准曲线
Fig． 2 The standard curve of glucose reference
3 多糖含量测定结果
精密称取阿尔泰狗娃花全草粉末 1． 0g，6 份，
按 2． 2 项下方法制备，取供试品溶液 2． 0mL，分别
置于具塞比色管中，加入 5%苯酚溶液 1． 0mL，滴
加浓硫酸至 10mL，于 80℃水浴中反应 15min 后置
于冷水中冷却，在 484nm 处测定吸光度计算多糖
含量，测得多糖含量为 5． 645%，ＲSD =0． 65%，结
果见表 1。
表 1 多糖含量测定结果
Tab． 1 Ｒesult of the content of polysaccharide
序号 取样量(g) 多糖含量(%) 平均值(%) ＲSD(%)
1 0． 9997 5． 634
2 0． 9998 5． 675
3 0． 9997 5． 591 5． 645 0． 65
4 0． 9998 5． 660
5 0． 9999 5． 689
6 1． 0000 5． 619
4 方法学考察
4． 1 稳定性实验
精密量取同一供试液溶液，按照 3 项下显色方
法显色，在 484nm 处分别测定吸光度(每隔 10min
测定一次，共测定 2h) ，ＲSD 为 0． 14%，结果表明
供试品溶液在 2h内稳定性良好。
4． 2 精密度试验
精密量取同一供试品溶液 6 份，每份 2． 0mL，
按 3 项下显色方法显色，在 484nm 处测定吸光度，
计算多糖含量，ＲSD 为 0． 47%，结果表明精密度
良好。
4． 3 重复性试验
精密称取阿尔泰狗娃花全草粉末 1． 0g，6 份，
按照 2． 2 项下的方法制备，按照 3 项下显色方法显
色，在 484nm 处测定吸光度，计算多糖含量，ＲSD
为 0． 65%，结果表明该方法重复性良好［10 ～ 12］。
4． 4 加样回收率实验
精密称取阿尔泰狗娃花全草粉末 0． 5g，6 份，
分别加入 80%、100%、120%的葡萄糖对照品各 2
份，按 2． 2 项下方法制备，用 3 项下显色方法显色，
在 484nm处测定吸光度，计算加样回收率，平均回
收率为 96． 86%，ＲSD 为 1． 45%，结果表明本实验
的加样回收率良好。结果见表 2。
表 2 加样回收率实验结果
Tab． 2 The result of recovery test
取样量(g) 样品中多糖(mg) 对照品(mg) 测得含量 /mg 回收率% 平均% ＲSD%
0． 4999 28． 22 22． 59 50． 27 97． 61
0． 4998 28． 21 22． 57 49． 71 95． 26
0． 4999 28． 22 28． 21 55． 05 95． 11 98． 86 1． 45
0． 5000 28． 23 28． 22 55． 90 98． 05
0． 4998 28． 21 33． 85 60． 96 96． 75
0． 4999 28． 22 33． 86 61． 52 98． 35
(下转第 313 页)
·803· Journal Of Inner Mongolia Medical University Aug． 2014 Vol． 36 No． 4
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檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
(上接第 308 页)
5 讨论
超声波提取法是近年来药典收载应用较多的一种样
品处理方法，超声波的空化作用对细胞壁与细胞膜的破
坏，有助于有效成分的溶出与释放，超声波使提取液不断
震荡，有助于溶质扩散。同时超声波的热效应对原料有一
定的水浴作用，从而十分有效的缩短了提取时间。采用紫
外－可见分光光度法测定阿尔泰狗娃花中的多糖，操作方
法简单，稳定性、精密度、重复性、加样回收率均较好。超声
提取法有助于提高多糖的提出率，缩短提取时间，节省提
取溶剂，为进一步的开发利用奠定了理论基础。
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·313·内蒙古医科大学学报 2014 年 8 月 第 36 卷 第 4 期