全 文 ：.
1 1 6 ? 中 国 医药工业杂志
； 中 药与天然药物
藏木香 中土木香内酯和异土木香内酯的制备
张新新 ， 杨 洋 ， 刘 胜家 ， 孙文基
西北大学 陕西省 生物医 药重点实验室 ， 陕西西 安 西北大学生命科学学院 ， 陕西西安
摘要 ： 建 立了 藏木香 中土木 香 内 酯和 异土木香内 酯的制备方法 。 藏木香药材粗粉用石 油 醚浸 泡 ， 经硝酸银 硅胶柱色 谱
吸附 ， 以苯 ： 石油 醚 ： 乙 酸 乙酯 （ ： ： 洗脱 ， 得到土木香内 酯和异土木香内 酯 的粗品 ， 经制备型高效液相色谱分
离纯化 。 采用 态轴向压缩柱 ， 以乙腈 ： 磷酸 （ ： 洗脱 ， 检测 波长 。 结 果土木香 内 酯
和异土木香 内酯纯度达到 和 。
关键词 ： 藏木香 ； 土木番 内 酯 ： 异土木香 内 酯 ； 银染法 ； 制备型高效液相色谱 ： 分离 ； 纯化
中 图 分类号 ： 文献标志码 ： 文章编号 ： 丨
■
丨
藏木香 — 为菊科旋覆花属 消食 、 止痛安胎的功效 ， 主要用 于胸助 、 脘腹胀痛 、
植物 主要分布在我国 四 川 、 青海 、 甘肃及西藏等地 ， 慢性 胃炎 、 胎动不安等病症 。 藏 木香中含有多种
以根入药 ， 是藏医 、 蒙 医常用 药材 ⑴ 。 藏木香性温 ， 化学成分 ， 研究表明 土木香 内 酯 （
味甘 、 辛 、 苦 ⑵ ， 具有行气镇痛 、 调气解郁 、 健脾 和异土木香 内 酯 （ 是其主要活
性成分 ， 具有显著的抗炎 、 保肝 、 抑菌和调节心脏
男 ’ 硕士 ， 从事天然产物的提取秘 机能等作用 。 其含量的高低趙影 响 藏木香的质量
离 。 与疗效 。
；
‘ 高纯度 的对照品 是药材鉴别和 质量评价 的前提
：
通信联系人 ： 孙文基 男 ， 博士生导师 ， 从事天然产物的 条件 。 目 前 尚未见关于 、 对照品制备方法的报道 。
本试验主 要考察 了 二者的 制备方法 。 由于 和 双
键位置的差异 （ 见 图 ， 与 形成配合物的牢固
DOI :10.16522/j.cnki.cjph.2014.02.026
中 国医药工业杂志
程度不同 ， 可采用 络合柱色谱法初步分离两者 ， 对照品的 色谱分离条件
然后通过制备型 法进行快速纯化 ， 从而得到 分析型液相 色谱条件
纯度较高的 丨 、 对照品 。 色 谱 柱 丨 柱 （
； 流动相 乙腈 ： 磷酸 （ ： ； 流速
； 柱温 ° 检测 波长 进样量
制备型液相色谱条件
色 谱 柱 态 轴 向 压 缩 柱
流动相 乙腈 ： 磷
图 和 的结构 酸 （ ： ； 流速 ； 柱温 。 检测
波长 进样量 。
溶液配制
仪器与试药 对照 品 溶液 ： 分 别 精 密 称 取 和 对 照 品
脳 型高效 液相色谱仪 、 爾 型紫外 可见光检测器 和 置 量瓶中 ， 用 甲醇溶解并
和 色 谱 工作站 類 公 司 ： 制 备 定容 ， 配成浓度为 和 的混合溶液 ，
型高效液相色谱仪 ， 型 菜 ’ 型 经 微孔滤膜过滤后备用 。
可变波长紫外检测器 制备型 ’ 丄 作 供试品溶液 ： 称取 “ ” 项下得酬 和 粗
站 （ 美 国 公 司 ； ？ 超 导麵共 品适量 ， 用 甲 醇溶解 ， 配制成浓賴 的
振波谱仪 德 国 公司 ； 质 溶液 ， 用 微孔滤膜过滤即得 。
谱仪 （ 美 国 公司 ） 。 ■ 对照品 的分离纯化
藏木香药材 购 自 西藏药材市 取供试品溶液按 “ ’ ， 项 下色谱条件制备 ，
场 ） ； ！ （ 批号 隱 和 对照品 （ 批号 圆 由 中 所得色谱 图 见 图 。 分别 收集 图 中 】 部 分 （
国食 品药 品检 定研 究院提供 。 和 部分 回收溶剂后得
如 目 桂胶 （ 化学纯 ’ 茂 岛海浪赚 剂厂 和 。 分别精密称取所得 和
薩银 （ 河雜作市化工三厂 ） ； 甲 醇 、 麵 、 乙腈 和 苯为 置 丨 量瓶中 ， 用 甲醇溶解并 定容 ， 分别 配成浓
分析纯 ， 石麵 伽 ⑶ 卯 。 、 乙 酸乙酷 为工业纯 ， 水 度为 丨 和 丨 隱液 。 经 微
力 自 孔滤膜过滤后备用 。 按 “ ” 项下的色谱条件测
方法与结果 定 ， 以外标法计算 ， 测得 纯度 为 ， 纯度
对照品粗品 的制备 为 见 图 氕
取干燥 的藏木香根茎药材适量 ， 用 粉碎机粉碎 ，
过 号筛 ， 得粉末 。 以石油 醚浸泡过夜 ， 过滤 ， 滤 八
液浓缩成稠膏 状 ， 以冻干机冻干 ， 得到淡黄色粉末 。
取该粉末适量 按样品与硅胶 （ 含有 硝酸银 ）
： 的 比 例 装 柱 ， 以 苯 ： 石 油 醚 ： 乙酸 乙 酯
： ： 进 行洗脱 ， 法检 查 ， 硫酸 」
乙醇显色 ， 收集与 目 标化合物具有相同 尽 值的蓝色
斑点部分 ， 浓缩 ， 即得 和 的粗品 。 经过
检测 ， 采用 外标法 ， 测 得 含量为 ， 含量 图 制 备型 图谱
为 。
.
l i s ? 中 国医药工业杂志 ，
丨
， ， ： 混合对照品
；
图 分析型 图
结构测定 表 结晶 和 的 数据
结 晶
白色针状结 晶 （ 乙酸乙酯 石油醚 ） ， 交雌 测 定 ■ 文献值
。
。 ， ，
们
。 。
：
丨
、 ， 、 ，
、 、
， ， ， 。
， 数据见表 。 以上数据
与文献 ’ 报道基本一致 ， 故鉴定 该结晶为 。
结 晶 线性试验
白色针状结晶 （ 乙酸 乙酯 ） ， ° 。 精密 吸取混合对照品溶液 、 、 、 、 和
‘
： 。 各 置 量瓶中 ， 加 甲 醇定 容 ， 摇句 ， 配制
： 。 ， 成系列 浓度对照 品混合溶液 ， 分别 进样 ， 以 峰面积
： 」 为 纵坐标 ， 浓度 为横坐标 ， 绘制标准 曲线 。
：
。 和 在
， 和
， ， ， 精密度 、 稳定性和重复性试验
精密吸取混合对照品溶液 ， 连续进样 次 ， 测
定峰面积 。 、 峰面积的 为 和 。
数据见表 。 以上数据 精密吸取混合对照品溶液 ， 按 “ ” 项下色
与 文献 ’ 报道基本一致 ， 故鉴定 该结 晶为 。 谱条 件于 、 、 、 、 、 和 进样 ， 测定
方法学考察 峰面积 。 、 峰 面积的 兄 为 和 。
中国 医药工业杂志 ，
取 “ ” 项下得到的样品 ， 共 份 ， 各置 的 阻力 小于分析柱 ， 因此流动相中有机相 的 比例要
量瓶中 ， 加 甲 醇溶解并定 容 ， 制备供试品溶液 ， 按 相应减小 ， 减小的 百分 比 以不影响 目 标化合物与其
“ ”项下条件测 定 。 结果 、 含量的 ？见 为 他杂质的分离效果 为宜 。
和 。 制备型液相色谱条件的优化
加样回收率试验 制备型液相 的分离效果主要取决于分辨率 、 载
分 别 精 密 称 取 “ ” 项 下 所 得 纯 度 样量和分离速度 ， 分辨率会随 载样量和分离速度的
与 纯度 ， 各 增 加而降 低 。 为 了 获得高 纯度 的 、 对照 品 ， 避
份 ， 置 量瓶中 ， 分别精 密加 入相应对照 品各 免二次制备 ， 试验比较 了不 同载样量 以及不 同流速
加 甲 醇溶解并定容 ， 按 “ ” 项下条件 对分离效 果的影响 ， 最终确定载样量为 次 ，
测 定峰面积 ， 计算得平均加 样回 收率为 和 流速为 。
？切 为 和 。
精制率 参考文献 ：
取粗 品按 “ ” 项下方法制备供试品溶液 ， 按 侯志飞 ， 张勉之 ， 李 洪 ， 等 高效液相色谱法测定 祁木
项下方法经过一次制 备型液相 色谱 的分离纯 香药材 中异土木香 内 酷和土木香 内 酷 中草药 ’ ，
化 ， 得到 和 ， 精制率为 和 ‘
肖远灿 ， 胡 凤祖 测定 藏木香 中土木香 内 酯和 异
土木香 内 酯含量 中国药学杂志 ， ，
董 琦 ， 马世震 ， 胡凤祖 法测 定不同采收期栽培藏
样品分离条件优化 木香 中隱类成分 中草药 ， ，
在制备 与 粗品 的过程中 ， 分别 考察 了 硝酸 张镘丽 ， 霍长虹 ， 刘 丽 ， 等 土木 香药材 指纹图
银浓度为 、 、 和 对分离效果 谱研究及土木香 内 酯和异 土木香 内 酯测 定 中 草药 ，
的影响 。 结 果显示硝酸银浓度过大 ， 、 与 络 ，
合形成的 配合物与硅胶柱的吸 附 能力 变大 ， 难 以洗 纪松岗 ， 金柔 男 ， 赵 亮 ’ 等 用 法同时测定六味安
脱 。 如 果浓度过小 ， 配合物与赚柱的吸附 能力 变 消 中土木香 、 异土木香‘ 大黄》大 的
、山 。 廿 丄 士 《■ 八 … 人 丑 由 八 令 含量 药学服务与研究 ， ，
张 捧 ， 陈若芸 藏木香的化学成分研究 中 国药学杂
本与效率 ， 本试验选择硝酸银浓度为 。 由 于
硝酸银见光易 分解 ’ 故在制备 对照品 粗品时 ’ 应采 赵永明 ， 张嬡丽 ， 霍长虹 ， 等 土木香化学成分的研究
取避光措施 。 天然产物研究与开发 ， ：
分析色谱条件到制 备色谱条件的放大 刘 国宇 ， 李 静 ， 王新莉 ， 等 土木香 中土木香内 酯 与异土
本试验 中 ， 分析 色谱柱 的 填料 粒径 为 木香 内 酷 的分离鉴定 】 陕西农业科学 ， ， （
制备色谱柱的填料粒径为 制备柱对流动相
土壤星海链霉菌的筛选 、 分 离 、 分类和发酵 养基中对其进行 发酵培养 。 发 酵培养至 时 ， 发酵液的抑菌
等 活性达到最高 。 采用 乙酸乙酯 进行抽提抗菌活性产物 ， 应用 柱
筛选分离 出 株土壤 放线菌 ， 产生 的抗生素有 望用 于对抗 色谱 、 薄层色谱和高效液相色 谱法进行分 离纯化 ， 并进行核磁
利 奈唑胺耐药情况 。 通过微生 物形 态学 、 生理生化试验和 共振和 质谱分析 。 将获得的数据在天然产物数据库 中 进行分析
基因 序列 分析进行菌种分类鉴定 ， 确定 编 号 的 菌 比较 ， 发现该化合物是一种 已知抗生素 。 该化合
株 为 星海链 霉 菌 。 该菌 株产生 的抗 物对 种利 奈唑胺耐药菌株和 结核分枝杆菌 均表现出抑菌活性 。
菌活性物质可 以抑制 种临床耐利奈唑胺菌株 。 采用 种培养 此外 ， 该化合物还具 有温和 的抗肿瘤活性及生物渗透性 。
基培养 ， 并检测 相应抗菌活性产物 。 在添加碳酸钙的 培 吴 娜译