全 文 ：2010年 6月第 33卷第 2期 成都中医药大学学报
Jun.2010, Vol.33, No.2 JournalofChengduUniversityofTCM
中药研究
民间药 “牡蒿 ” 的安全性评价及药效学研究
黄婷慧 卢先明 陈素兰 陈琴
(成都中医药大学 中药材标准化教育部重点实验室 , 四川 成都 610075)
摘 要:目的:探讨民间药牡蒿对凝血时间的影响及抗炎作用 , 并对其安全性进行评价。方法:通过
小鼠最大耐受量测定法对牡蒿进行安全性评价;采用小鼠眼眶后静脉丛取血法和二甲苯致小鼠耳肿胀法分
别对牡蒿对凝血时间影响以及抗炎作用进行评价 。结果:牡蒿小鼠最大耐受量为 63.6 g/kg, 为牡蒿成人
每日最大用量的 254倍 。牡蒿水煎液可使小鼠凝血时间在第一次取血时均显著延长 , 在第二次取血时低剂
量组显著缩短 , 高剂量组明显缩短;高 、 中剂量组的小鼠耳肿胀得到显著抑制 。结论:民间药牡蒿的急性
毒性小 , 安全性高 , 并具有较好活血止血及抗炎的作用 。
关键词:民间药;牡蒿;安全性;凝血时间;抗炎
中图分类号:R285.5;R965.3 文献标识码:A 文章编号:1004-0668 (2010)02-0077-03
基金项目:国家科技支撑计划课题 (编号:2007BAL10B07)
作者简介:黄婷慧 , 女 , 1984年生;在读硕士研究生;研究方向:中药的品种质量与资源开发研究工作。
PharmacodynamicsResearchandsafetyevaluationoftheFolkHerb
—ArtemisiajaponicaThumb
HUANGTing-hui, LUXian-ming, CHENSu-lan, etal
(ChengduUniversityofTCM, KeyLaboratoryofStandardizationofChineseMedicinesofMinistryofEducation, Chengdu610075, China)
[ Abstract] Objective:Toinvestigatetheinflunceoncoagulationtimeandanti-inflammatoryefectofArtemisiajaponicaT.,
andthesafetyevaluationwasgiven.Methods:Thesafetyevaluationwasevaluatedbymaximumtoleranceofmice, andcoagulation
timebybloodtakenfromtheorbitalveins, anti-inflammatoryefectbytheearswelinginducedbydimethylbenzene.Results:The
maximumtolerancedosetomiceis63.6g/kg, whichwasequalto254 timesofaductsoraldoseperday.Thecoagulationtimeofthe
bloodwassigniticantlyprolongedbysupplementedextractfluidforthefirsttime, andsigniticantlydecressedoflowdosage, highdos-
ageforthesecondtime.Theearswelinginducedbydimethylbenzeneofmiddledosageandhighdosagewereinhibited
significantly.Conclusions:TherewasnoanyacutetoxicreactionofArtemisiajaponicaT.andthesecurityisverywel.Itcanpromot
bloodcirculationandarrestbleedingefectively.
[ Keywords] :FolkHerb;ArtemisiajaponicaT.;safety;coagulationtime;anti-inflammatory
牡蒿为菊科蒿属植物牡蒿 Artemisiajaponica
Thunb.的全草 , 其味苦 、 微甘 , 性凉 。具有清热 ,
凉血 , 解毒的功效 。始载于 《名医别录 》 下品 ,
谓:“牡蒿生田野 , 五月 、 八月采。” 据本草记载 ,
牡蒿用于治疗夏季感冒 , 肺结核潮热 , 咯血 , 小儿
疳热 , 衄血 , 便血 , 崩漏 , 带下 , 黄疸型肝炎 , 丹
毒 , 毒蛇咬伤等。在民间使用较为广泛 。据川北民
间介绍 , 陈某在山中不慎摔倒 , 造成腿部大面积摔
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DOI :10.13593/j.cnki.51-1501/r.2010.02.023
成都中医药大学学报 2010年第 33卷
伤 , 于是就地采鲜牡蒿 , 嚼烂敷于患处 , 之后未再
做其他治疗 , 直至伤好而未引起感染 。同时也有记
载牡蒿为药食两用植物 [ 1] , 含有多种活性物质 ,
具有免疫 、 抗病毒 、 抗肿瘤 、 降血糖 、降血脂保肝
以及延缓衰老等多种生理功能[ 2-5] 。随着人们对健
康生活的日益重视 , 开发以牡蒿为主的系列保健产
品是具有广阔的市场前景 , 同时也对中药资源的有
效利用具有重要意义 。到目前为止 , 对牡蒿的研究
国内外都较少 , 因此对牡蒿进行深入研究和开发具
有重大意义 。我们设计了急性毒性 、 对凝血时间的
影响和抗炎等药理实验 , 对牡蒿的安全性及部分药
效进行评价和研究 , 为牡蒿的进一步开发利用及推
广使用提供了科学依据。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 动物
昆明种小鼠 (普通级), 体重 (20±2)g, 由
成都中医药大学实验动物中心提供 , 动物合格证
号:川实动管第七号 。
1.1.2 试药和仪器
云南白药 (云南白药集团股份有限公司 , 批
号:20080111)。地塞米松 (浙江仙琚制药股份有
限公司 , 产品批号:080715)。 YP601N型电子天
平 (上海精密科学仪器有限公司)。可调式移液器
(热电 (上海)仪器有限公司)。玻璃毛细管 (四
川成都华西医科大学仪器厂)。
1.1.3 供试样品
牡蒿自采于成都中医药大学犀浦校区苗圃 , 经
成都中医药大学卢先明教授鉴定为菊科植物牡蒿
ArtemisiajaponicaThunb.的干燥全草。将牡蒿全草
进行粉碎 , 粉末过 2号筛。称取粉末 , 依次分别用
8倍 、 6倍 、 6倍蒸馏水提取 3次 , 时间分别为 30
min、 15min、 15min, 滤过 , 合并滤液 , 浓缩 , 稀
释成所需浓度 , 避光冷藏备用 。急性毒性实验所用
药液为牡蒿粉末依上述方法提取 , 滤过 , 合并滤
液 , 然后将滤液浓缩至最大浓度 , 避光冷藏备用。
1.2 方法
1.2.1 牡蒿安全性评价实验
采用徐叔云等[ 6]记载的最大耐受量测定方法 ,
选取昆明种小鼠 20只 , 体重 (20 ±2)g, 雌雄各
半 , 每组 10只。禁食 12 h, 以牡蒿水提液最大浓
度药液 , 最大给药体积 0.8mL/20 g(体重)给予
小鼠灌胃 1次。观察 7 d内小鼠的中毒反应或有无
死亡 , 并记录小鼠给药 7天后体重增长情况。根据
公式 [每只小鼠的给药量 /小鼠平均体重 (20g)]
× [成人平均体重 (60 kg) /成人每日最大用
量 ] , 计算小鼠的最大给药量倍数 。
1.2.2 小鼠眼眶后静脉取血法观察牡蒿对小鼠凝
血时间的影响 [ 7]
选取昆明种小鼠 50只 , 体重 (20 ±2)g, 雌
雄各半 , 按体重随机分为 5组 , 每组 10只 , 分别
为:①空白组 (给予灌胃蒸馏水 0.2 mL/10 g),
②阳性药物组 (灌胃云南白药 0.2 mL/10 g), ③
牡蒿水煎液高剂量组 , ④牡蒿水煎液中剂量组 , ⑤
牡蒿水煎液低剂量组 。各剂量组均灌胃给药 , 0.2
mL/10 g体重 , 每日 2次 , 连续用药 4 d。于末次
给药 1 h后 , 一次性 20 μL采血管插入小鼠眼眶后
静脉丛取血 , 取满 20μL血。每隔 15sec折断毛细
血管一小段 , 检查有无血凝丝出现 , 记录从采血至
出现血丝的时间 , 即为凝血时间。于第一次采血 1
h后进行第二次采血 , 方法同上 , 记录第二次凝血
时间 。用 SPSS13.0专业版统计软件对各组从采血
至出现血丝的时间进行单因素方差分析 。
1.2.2 小鼠耳肿胀法观察牡蒿的抗炎作用
取昆明种小鼠 60只 , 体重 (20 ±2)g, 全
雄 , 按体重随机分为 5组 , 每组 10只 , 分别为:
①空白组 (给予灌胃蒸馏水 0.2 mL/10 g), ②阳
性药物组 (灌胃地塞米松 0.2 mL/10 g), ③牡蒿
水煎液高剂量组 , ④牡蒿水煎液中剂量组 , ⑤牡蒿
水煎液低剂量组。各剂量组均灌胃给药 , 0.2 mL/
10g体重 , 每日 2次 , 连续用药 4 d。于末次给药
0.5 h后 , 用可调式移液器吸取 25 μL二甲苯涂于
小鼠右耳致小鼠耳肿胀。 40 min后处死小鼠 , 剪
下耳片 , 用直径 8mm的打孔器分别在左右耳同一
部位打下耳片 , 称重 , 求左右耳片重量之差作为肿
胀度;以各组肿胀度均值与空白组肿胀度均值的差
值占空白组肿胀度均值的百分比作为抑制率 。用
SPSS13.0专业版统计软件对各组肿胀度进行单因
素方差分析。
2 结果
2.1 安全性评价
7d内有两只小鼠死亡 , 经解剖后发现小鼠胃
部突起 , 胃中全是药液 , 各脏器无中毒发黑现象 ,
可以判定小鼠是胀死的 。其余的小鼠刚开始有轻微
便溏现象 , 1 ～ 2d后便溏现象消失 , 经过 7 d的喂
养体重均有不同程度的增加。牡蒿一日最大给药量
为成人每日用量的 254倍 (参照牡蒿临床每日最
大用量 15 g), 急性毒性小 , 安全性较好。
2.2 对小鼠凝血时间的影响
结果见表 1。第一次采血与空白对照组比较 ,
·78·
第 2期 黄婷慧 等 民间药 “牡蒿” 的安全性评价及药效学研究
牡蒿水煎液各剂量组均对小鼠凝血时间有显著的延
长作用 (P<0.01)。第二次采血与空白组比较 ,
低剂量组对其有显著的缩短作用 (P<0.01), 高
剂量组有明显的缩短作用 (P<0.05)。
表 1 牡蒿对小鼠凝血时间的影响 ( x±s)
组别 剂量(g/kg)
动物
数 (n)
凝血时间 (s)
第一次采血 第二次采血
空白组 0.2mL/10g 10 129.77±51.81 279.29±98.57
阳性组 1 10 549.31±135.27＊＊ 184.84±52.48＊
高剂组 5 10 516.80±131.77＊＊ 188.90±80.08＊
中剂组 3.4 10 599.34±149.89＊＊ 213.18±152.37
低剂组 0.84 10 561.01±187.67＊＊ 145.82±92.49＊＊
注:与空白对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
2.3 对小鼠耳肿胀的影响
结果见表 2。与空白对照组比较 , 牡蒿水煎液
高剂量组对小鼠耳肿胀有显著的抑制作用 (P<
0.01), 中剂量组对其有明显的抑制作用 (P<
0.05)。同时可观察到低剂量组对其有一定抑制作
用 , 但不具有统计学意义 。
表 2 牡蒿对小鼠耳肿胀的影响
组别 剂量(g/kg)
动物数
(n)
肿胀度
(g)
抑制率
(%)
空白组 0.2mL/kg 12 0.0111±0.0046 -
阳性组 0.01 12 0.0046±0.0026＊＊ 58.45
高剂量组 5 12 0.0087±0.0026＊＊ 45.55
中剂量组 3.4 12 0.0080±0.0038＊ 27.45
低剂量组 0.84 12 0.0060±0.0037 21.27
注:与空白对照组比较 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01
3 结论与讨论
3.1 急性毒性试验对于评价药物安全性 , 为临床
用药提供参考 , 为开展药效学的研究提供科学依据
具有重要意义 。牡蒿无法测出 LD50 , 急性毒性很
小 , 可用最大耐受量测定法 , 观察动物对其耐受
量 , 测定其能达到人用量的多少倍 , 从而对药物的
安全性作出评价 。本次试验中 , 小鼠一次灌胃给药
牡蒿水煎液最大浓度的最大耐受量为 63.6 g/kg,
相当于牡蒿成人每日用量的 254倍 , 说明牡蒿的急
性毒性小 , 用药安全 。
3.2 第一次取血 , 牡蒿水煎液的高剂量组 、中剂
量组以及低剂量组对通过小鼠眼眶后静脉丛取血法
所取的小鼠的血液的凝血时间有显著的延长作用 。
这应该与牡蒿含有桂皮酸和黄酮类成分有关 [ 8-9] 。
第二次取血 , 低剂量组使凝血时间显著缩短 , 高剂
量组也对其有明显的缩短作用 。第二次取血时间距
离第一次取血近 1 h。本实验采用云南白药作为阳
性药物。其功效有止血化瘀 、 活血止痛等 , 兼具止
血与活血两种功效 。根据文献记载 , 牡蒿有凉血止
血的功效 , 故设计本实验旨在考察牡蒿的止血作
用。但在实验中 , 第一次采血与第二次采血牡蒿表
现出截然不同的效果 , 与阳性药物具止血与活血作
用一致。经分析认为第一次取血可看做是对小鼠进
行了外伤的造模 , 故第二次取血药物的止血作用得
以体现。因此我们认为牡蒿也兼具止血与活血两种
功效 。
3.3 牡蒿水煎液高剂量组对二甲苯引起的小鼠耳
肿胀有显著的抑制作用 , 中剂量组对其有明显的抑
制作用。同时可观察到低剂量组对其有抑制的趋
势 , 但不具统计学意义 。实验结果表明牡蒿确实具
有抗炎的作用 , 这应该与牡蒿含有黄酮类成分和阿
魏酸有关 [ 9-10] , 浓度越大抗炎效果越好 。
以上研究表明 , 牡蒿药用不具有急性毒性 , 安
全性高。其水煎液在小鼠不受外伤的情况能显著延
长小鼠凝血时间 , 在对小鼠进行外伤造模后能缩短
小鼠凝血时间 , 并且能够明显抑制二甲苯引起的小
鼠耳肿胀 , 具有一定的活血 、 止血和抗炎作用。
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(收稿日期: 2009-12-07)
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