全 文 ：第 23 卷 第 4 期
2011 年 12 月
塔 里 木 大 学 学 报
Journal of Tarim University
Vol． 23 No． 4
Dec． 2011
①
文章编号:1009 － 0568(2011)04 － 0031 － 09
花花柴耐盐相关基因 NHX的克隆与分析
李 彬1，2 康少锋1 张 莉1 邓 芳1 王彦芹1，3*
(1 塔里木大学生命科学学院，新疆 阿拉尔 843300)
(2 四川农业大学水稻研究所，四川 温江 611130)
(3 新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护与利用重点实验室，新疆 阿拉尔 843300)
摘要 植物 NHX属于 Na + /H +逆向转运蛋白 NHE/NHX亚家族的成员，为阳离子逆向转运蛋白家族的一个亚类，具有调节细
胞内 pH值和 Na +的浓度及维持细胞内离子稳态等多种功能。为进一步开发新疆盐生植物耐盐相关基因资源，本研究以盐生
植物花花柴为材料，利用分子克隆技术，从总 RNA中克隆编码 Na + /H +逆向转运蛋白基因。依测序结果判断已从花花柴 cD-
NA中克隆到 1253 bp的 NHX基因片段，并对该序列进行数据库搜索和对序列比对分析。结果显示一致性达到 68． 77%，可以
用于构建植物表达载体进行相应的功能鉴定。
关键词 NHX;总 RNA;分子克隆;分析
中图分类号:Q812 文献标识码:A DOI:10． 3969 / jissn． 1009 － 0568． 2011． 04． 006
Cloning and Analysis of Salt Torlerant Related Gene NHX in Karelinia caspica
Li Bin1，2 Kang Shaofeng1 Zhang Li1 Deng Fang1 Wang Yanqin1，3*
(1 College of Life Science，Tarim University，Alar，Xinjiang 843300)
(2 Rice Research Institute，Sichuan Agricultural University，Wenjiang，Sichuan 611130)
(3 Key Laboratory of Biological Resource Protection and Utilization of Tarim Basin，
Xinjiang Production ＆ Construction Group，Alar，Xinjiang 843300)
Abstract Plant NHX belongs to the Na + /H + antiporter NHE / NHX subfamily members，cationic reverse transport protein family a
subclass，with the regulation of intracellular pH and Na + concentrations and the maintenance of intracellular ion homeostasis and other
functions． For the further development salt tolerance related gene resource of salt plants in Xinjiang，the Na + / H + antiporter gene was
cloned from the total RNA of Karelinia caspica using molecular cloning techniques，and the NHX gene fragment is 1253 bP according by
sequencing． The results show gene consistency is achieved 68． 77% by the sequence database searching and sequence analysis，and it
can be used for the construction of plant expression vector of the corresponding functional identification．
Key words NHX;total RNA;molecular clone;analysis
我国土地面积非常广大，堪称地大物博，但由于
现代化建设和住房用地以及城市扩张、自然灾害、土
地沙漠化等诸多因素的影响可用耕地面积并不多，
大多数土地由于盐碱的危害而并不适于农作物的生
①收稿日期:2011 － 11 － 02
基金项目:塔里木大学重点课程建设项目(TDZGKC09074)
作者简介:李彬(1987 －) ，硕士研究生，主要从事水稻分子标记辅助育种工作。 E － mail:libin15999211540@ sina． com
* 为通讯作者 E － mail:wyqwxf@ 126． com
塔 里 木 大 学 学 报 第 23 卷
长，所以农业发展也受到了相应的限制。地处我国
西部地区的新疆，土壤盐渍化非常严重，但有一些植
物却能很好的生长，依据基因决定性状，这些植物自
身一定拥有丰富的能够调节其在高盐碱环境下生存
的基因资源。充分挖掘这些耐盐碱植物基因资源并
将其进行合理高效的利用，转入在新疆大面积种植
的棉花、旱稻、果树等经济作物中，扩大其种植面积，
不仅可以改善当地人的经济收入问题，也将会为解
决我国粮食生产、土地的利用率和环境保护等一系
列社会问题起到巨大作用。
花花柴(Karelinia caspica) ，菊科，多年生草
本植物。具有泌盐器官，属于泌盐生植物。盐胁迫
下，花花柴植株叶片肉质化，而肉质化是真盐生植物
的一个典型特征，故花花柴特殊的耐盐机理值得研
究。而 Na + /H +逆向转运蛋白则是位于细胞的质膜
或者液泡膜上，PM － ATPase 或 V － ATPase 和 VP-
Pase产生的跨膜 H +梯度，可以将细胞质内的 Na +
进行外排或区隔化到液泡中，具有调节细胞内 pH
值和 Na +浓度以及维持细胞内离子稳态等多种功
能。拟南芥中 AtNHX1 基因是植物中最早克隆的编
码质膜和液泡膜 Na + /H +逆向转运蛋白的基因，随
后又在多种植物中相继克隆得到了它们的同源基
因。GeneBank 数据库中已有 60 多种植物中编码
NHX蛋白的 220 多条 cDNA 序列登录。总结前人
研究成果，本研究将以新疆生长的耐盐植物花花柴
为材料，从中克隆相关的耐盐基因 NHX(控制 Na + /
H +逆向转运蛋白合成)并进行简单分析以便供人们
参考，为后期进行相关转基因研究奠定基础，为提高
农作物的耐盐特性提供候选基因及其转基因材料等
具有重要意义。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 植物材料
菊科植物花花柴(Karelinia caspia (Pall．)
Less． ) ，采于新疆阿拉尔市塔里木河畔。2010 年 6
月采集花花柴野生植株，采集前用 5% NaCl 溶液诱
导 4 d，取其叶片，提取总 RNA。2010 年 10 月采集
了花花柴的种子，阴凉干燥处保存。种子消毒后，
28 ℃条件下发芽，待幼苗长出真叶后用 5%(w /v)
NaCl溶液诱导 4 d，取其叶片提取总 RNA。
1． 1． 2 菌种及载体
E． coli DH10B，pMD18T － Vector 购于 TaKaRa
公司。
1． 1． 3 主要试剂及实验仪器
试剂:TRNzol Reagent，Agarose，M － MLV Re-
verse Transcriptase， Ribonuclease Inhibitor， dNTP
mixture;25mM，Sangon，DEPC，TaqDNAPolymerase，
pMD18T － Vector，CaCl2，DNAMarkerDL2000
仪器:高速冷冻离心机，显微移液器，电泳仪，
凝胶成像仪，生物分光光度计，卧式冷冻冷藏转换
柜，PCR仪，制冰机
1． 2 方法
1． 2． 1 引物设计
Oligo(dT)18 采用 TaKaRa 公司网站发布序列。
Actin primer 采用马清等［1］2009 年发表于《生物技
术》的碱蓬(Suaeda glauca (Bunge)Bunge)Actin
基因片段引物序列。
从 NCBI /Nucleotide数据库中搜索并下载已发
表的编码植物 NHX 基因的 mRNA 序列，然后分离
ORF(open reading frame)序列。应用 DNAMAN 软
件进行多序列比对，并应用 EMBL /ClustalW2 构建
NHX 基因同源进化树。本研究比对了矮牵牛
(Petunia xhybrida，PhNHX1) ，花花柴(Karelinia
caspaca，NHX1，NHX2 ) ，拟 南 芥 (Arabidopsis
thaliana，AtNHX1) ，水稻(Oryza sativa，OsNHX1) ，
盐角草(Salicornia europaea，SeNHX1)的 ORF，
Identity = 94． 53%，保守区域长度为 1653 bp，从
ATG开始到 TAA或 TGA结束。根据保守区域两端
设计了适合于扩增菊科科植物 NHX 基因的特异性
引物。搜索分析了所有已报道的 NHX 基因序列的
酶切位点种类，在设计的引物两端添加限制性内切
酶酶切位点 Hind Ⅲ和 EcoR I。
引物:由上海捷瑞生物工程有限公司合成
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第 4 期 李 彬等:花花柴耐盐相关基因 NHX的克隆与分析
Oligo(dT)18 TTTTTTTTTTTTTTTTTT
Actin primer P1: 5’－ GTGGTCGTACAACAGGTATTGTG － 3’
P2: 5’－ GACCCTCCAATCCAGACACTG － 3’
NHX primer P3: 5’－ CGAGGACGAATATTGGTTCTCTTGAGCTGG － 3’
P4: 5’－ CCCAGCCCCTGCTCCTAAAAGTGTGC － 3’
M13 primer P5: 5’－ CAGGAAACAGCTATGAC － 3’
P6: 5’－ GTAAAACGACGGCCAGT － 3’
1． 2． 2 植物总 RNA的提取
用 Trizol法。
1． 2． 3 1st － cDNA的合成
1． 2． 3． 1 Microtube 管中配制下列模板 RNA /引物
混合液，总体系为 12 μL。
1st － cDNA的合成反应体系:Oligo(dT)18 (50
μM) ，2μL;total RNA，2 μg;ddH2O，up to 12
1． 2． 3． 2 70 ℃保温 10 min 后迅速在冰上急冷 2
min以上。
反转录反应液:RNA /引物变性溶液，12 μL;5
× M － MLV Buffer，4 μL;dNTP Mixture (10 mM
each) ，1 μL;RNase Inhibitor (40 U /μL) ，0． 5 μL;
RTase M － MLV(RNase H －) (200 U /μL) ，1 μL;
RNase Free Water，1． 5 μL．
1． 2． 3． 3 42 ℃保温 75 min。
1． 2． 3． 4 70 ℃保温 15 min后冰上冷却。
1． 2． 4 Actin基因片段的克隆
1． 2． 4． 1 Microtube管中配制下列 PCR 反应液，总
体系为 50 μL。
PCR 反应液:10 × Buffer，5μL;MgCl2 (25
mM) ，4μL;dNTP Mixture (25 mM each) ，0． 5 μL;
P1 (25 μM) ，0． 5 μL，P2 (25 μM) ，0． 5 μL;Taq
DNA Polymerase (5 U /μL) ，0． 5 μL;1st － cDNA，
2． 5 μL;ddH2O，36． 5 μL．
1． 2． 4． 2 按如下程序进行 PCR反应:
94 ℃，4 min，1 cycle;94 ℃，30 s ，52 ℃，30 s，
72 ℃，30 s，30 cycles;72 ℃，10 min，1 cycle;
15℃，∞。
1． 2． 4． 3 1%琼脂糖凝胶电泳检测 PCR产物。
制备 1%琼脂糖凝胶，以 1 × TAE Buffer 为介
质，在 5 V /cm的电场下电泳检测 PCR产物，以 DNA
Marker DL2000 为标准物。
1． 2． 5 PCR扩增 NHX基因及目的片段的回收
1． 2． 5． 1 Microtube 管中配制下列 PCR 反应液，总
体系为 50 μL。
PCR反应液 :10 × Buffer，5 μL;MgCl2 (25
mM) ，4μL;dNTP Mixture (25 mM each) ，0． 5 μL;
P3 (25 μM) ，0． 5 μL，P4 (25 μM) ，0． 5 μL;Taq
DNA Polymerase (5 U /μL) ，0． 5 μL;1st － cDNA，
2． 5 μL;ddH2O，36． 5 μL．
1． 2． 5． 2 按如下程序进行 PCR反应:
94 ℃，4 min，1 cycle;94 ℃，30 s，58 ℃，30 s，
72 ℃，60 s，30 cycles;72 ℃，10 min，1 cycle;15
℃，∞。
1． 2． 5． 3 1% 琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 产物及
回收。
1． 2． 6 NHX基因 PCR产物 TA克隆及鉴定
1． 2． 6． 1 连接反应
Microtube管中配制下列连接反应液，总体系为
10 μL。
连接反应液 :NHX，4． 5 μL;pMD18T － Vector，
0． 3 μL;T4 DNA Ligase，0． 2 μL;10 × T4 DNA Lig-
ase Buffer，1． 0 μL;ddH2O，4． 0 μL。
16 ℃ 连接过夜，4 ℃ 放置，待转化 E． coli
DH10B感受态细胞。
1． 2． 6． 2 氯化钙法制备 E． coli DH10B感受态细胞
33
塔 里 木 大 学 学 报 第 23 卷
1． 2． 6． 3 热激法转化重组 DNA 1． 2． 6． 4 重组质粒构建
图 1 pMD18T － NHX测序质粒图
测序质粒的构建利用的是 pMD18T － Vector
(TaKaRa) ，大小为 2692 bp，目的基因大小为 1253
bp，构建成功的质粒大小在 3945 bp (图 1)。
1． 2． 6． 5 阳性克隆的鉴定
(1)PCR鉴定
(2)酶切鉴定:
1． 2． 7 NHX基因测序
取经过 PCR 鉴定和质粒酶切鉴定均符合要求
的阳性菌落做成穿刺管菌种寄送上海生物工程技术
服务有限公司测序。
2 结果与分析
2． 1 植物总 RNA的提取
1%琼脂糖凝胶电泳检测花花柴总 RNA 结果
如下:
图 2 中，泳道 M为 DNA Marker DL2000，泳道 1
和泳道 2 同为花花柴总 RNA样品。
由电泳图可以看出，总 RNA已提取到。点样孔
有荧光，说明总 RNA样品中存在蛋白质杂质。28 S
与 18 S条带比例基本接近 21，说明 RNA 完整性
较好，可用于反转录实验。
2． 2 1st － cDNA的合成及 Actin基因的克隆
1%琼脂糖凝胶电泳检测 Actin 基因片段 PCR
扩增产物，结果如图 3。
图 2 花花柴总 RNA 图 3 花花柴 Actin基因片段
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第 4 期 李 彬等:花花柴耐盐相关基因 NHX的克隆与分析
图 4 扩增目的条带 图 5 NHX基因片段 TA克隆质粒
图 3 中 M为 DNA Marker DL2000，泳道 1 为花花柴
Actin基因片段。
由图可以看出，花花柴已扩增到预期的 598 bp
的 Actin基因片段，说明反转录合成 1st － cDNA 已
成功。
2． 3 PCR扩增 NHX基因
1%琼脂糖凝胶电泳检测结果显示扩增到预期
的 1253 bp的目的片段。
由图 4 可以看到，已成功克隆到 1253 bp 的目
的条带。
2． 4 NHX基因片段的 TA克隆
2． 4． 1 1%琼脂糖凝胶电泳检测 TA 克隆质粒
如图 5。
图 6 NHX基因片段 TA克隆质粒 PCR鉴定
图 7 酶切鉴定结果
M － DL2000，1 －酶切质粒，2 －重组质粒
53
塔 里 木 大 学 学 报 第 23 卷
图 5 中，泳道 2 为花花柴 NHX 基因片段 TA 克
隆质粒。从图 5 可以看出，TA 克隆质粒已成功提
取到。
2． 4． 2 PCR 鉴定 TA 克隆质粒，如图 6 中，M 为
DNA Marker DL2000 泳道 1，2 为花花柴 NHX 基因
片段 TA克隆质粒 PCR鉴定结果。从图 6 中可以看
出，花花柴 NHX基因片段 TA克隆已成功。
2． 4． 3 酶切鉴定图
图 7 为克隆质粒的酶切鉴定图，泳道 1 －酶切
质粒，泳道 2 －重组质粒。酶切结果显示克隆成功。
2． 5 花花柴 NHX测序结果同源性比对
将 花 花 柴 (Karelinia caspaca， NHX ) ，
(Karelinia caspaca，NHX1) ，矮 牵 牛 (Petunia
xhybrida，PhNHX1 ) ，牵 牛 花 (Ipomoea nil，
InNHX1) ，胡杨(Populus euphratica，NHX1) ，拟南
芥(Arabidopsis thaliana，AtNHX1) ，水稻 (Oryza
sativa，OsNHX1) ，盐角草(Salicornia europaea，
SeNHX1) ，大肠杆菌 (Escherchia coli，NhaA /
NhaB) ，大麦 (Hordeum vulgare，HvNHX1) ，盐爪爪
(Kalidium foliatum) ，酵 母 (Saccharomyces
cerevisiae， Nhap1 ) ，灰 绿 藜 (Chenopo
diumglaucum， CgNHX1 ) ，人 (Homosapiens，
NHE2)的核酸序列利用生物学软件 DANMAN 对测
序结果进行同源性比对分析，发现获得的基因与
GeneBank 上 已 经 提 交 的 花 花 柴 (Karelinia
caspaca，NHX2)同源性高达 81%。与盐角草、盐爪
爪高耐盐植物同源性达到 68%，从基因的同源性比
对分析来看本实验克隆得到的是一个与已提交的
NHX序列不同的新的序列。
2． 6 构建 NHX基因的进化树
将测序结果与 GeneBank 中提交的 Na + /H +逆
向转运蛋白基因用 DNAMAN 构建系统进化树，以
大肠杆菌 NHX基因作为外群，以大麦、水稻为代表
的禾本科植物 NHX 基因与以灰绿藜、盐角草、盐爪
爪为代表的藜科植物和茄科植物牵牛花等相比，在
进化关系上更为原始。花花柴的 NHX 基因与茄科
植物 NHX基因处于同一个进化分支，具有相近的亲
缘关系。本试验研究所得到的花花柴基因与 NCBI
中已提交的花花柴 NHX1、NHX2 也存在细微差异，
导致这种差异的结果可能是由不同地域环境下的个
体差异所造成。
2． 7 翻译获得氨基酸序列
对测序结果利用 DNAMAN 进行翻译获得氨基
酸序列。KcNHX 的蛋白高度保守区均包括一个特
殊的序列 LFFIYLLPPI(图 8 中加粗倾斜下划线部
分) ，此序列已被证明在动植物的 Na + /H +反向运输
体蛋白氨基酸组成中具有高度保守性，为氨氯吡嗪
咪结合位点。
将本实验获得的核酸序列利用 DNAMAN 进行
翻译成氨基酸序列，同花花柴(Karelinia caspaca，
NHX1，DQ303231，NHX2，) ，拟南芥 (Arabidopsis
thaliana，AtNHX1 ) ，牵 牛 花 (Ipomoea nil，
InNHX1) ，胡杨(Populus euphratica，NHX1) ，水稻
(Oryza sativa，OsNHX1) ，盐 角 草 (Salicornia
europaea，SeNHX1) ，大麦 (Hordeum vulgare，HvN-
HX1) ，灰绿藜(Chenopo diumglaucum，CgNHX1)的
氨基酸序列进行同源性比对结果。比对结果显示一
致性达到了 68． 77%，证明本次克隆得到的序列较
好，可以用于构建植物表达载体进行相应的功能
鉴定。
3 讨论
3． 1 植物逆向转运蛋白功能
NHX(Na + /H + antiporter)是液泡膜上的一种
Na + /H +反向运输体，能够将细胞质中大量的 Na +
转运入细胞质，减轻盐胁迫对植物的损害。已有的
研究表明，拟南芥、油菜和番茄中过量表达 At-
NHX1，可在液泡膜中积累大量的运输体，极大地提
高了它们的耐盐性［3］。Na + /H +逆向转运蛋白基因
的表达还具有组织特异性。如 NaCl 胁迫下，拟南芥
的 AtNHX1 基因在叶中的转录水平比对照高出 4
倍，而根中的转录水平则与对照几乎没有差异［2］。
由于植物 RNA 表达具有时空特异性，根据相关文
献，菊科植物在其叶片中 NHX的表达量受盐胁迫变
化最大。所以本研究直接采用经过盐胁迫处理的幼
嫩花花柴叶片作为实验材料。
63
第 4 期 李 彬等:花花柴耐盐相关基因 NHX的克隆与分析
3． 2 PCR扩增耐盐相关基因 NHX
PCR扩增 NHX 基因过程中常遇到如下问题:
一、引物与模板的互补性不好;二、退火温度太低，非
特性条带很多。多次 PCR结果表明，本研究所用的
引物与模板的互补性不是很理想，PCR 结果常常是
没有任何条带。经多次探索发现，增大反应体系致
50 μL，提高退火温度，可以提高 PCR的特异性。
图 8 翻译获得氨基酸
73
塔 里 木 大 学 学 报 第 23 卷
3． 3 NHX基因片段的 TA克隆
3． 3． 1 用于 TA 克隆的大肠杆菌菌株容易退化或
突变，必须定期对其进行分离纯化。一般情况下，每
半年即需对保存的菌种进行一次纯化。通常采用蘸
取甘油菌在平板上进行划线分离，挑取单菌落接种
液体培养基制成菌悬液后制备新的甘油菌菌种。划
线分离可多次重复进行以便筛选活力较高菌株。
3． 3． 2 DNA重组必须在 16 ℃的环境中进行，连接
时间以 10 ～ 12 h为宜，转化前在 4 ℃环境中放置 15
min，以便重组 DNA能够形成稳定的 cccDNA 结构，
才能在宿主菌细胞中稳定存在。
3． 3． 3 本研究采用将重组 DNA转化到生长活性更
高的 DH10B细胞中，利用抗生素筛选克隆，最后，根
据 T载体上M13 引物序列采用 PCR鉴定阳性克隆。
实验结果表明，选用 DH10B作为宿主菌可缩短实验
时间约 12 h，采用 M13 － PCR 能更有效的鉴定阳性
克隆，同时克隆质粒可用于测序等其他实验。
3． 4 序列分析
KcNHX的蛋白高度保守区均包括一个特殊的
序列 LFFIYLLPPI，此序列已被证明在动植物的
Na + /H +反向运输体蛋白氨基酸组成中具有高度保
守性，为氨氯吡嗪咪结合位点(氨基酸序列翻译结
果) ，这表明 KcNHX 确实属于 NHX 基因家族的不
同成员，在植物体内可能行使着不同的生理功能。
此外，KcNHX与已克隆注册的盐生植物 NHX 基因
同源性相差较远。分析原因可能是由于种属的差异
性及其耐盐机制的特异性，灰绿黎(Chenopodium
glaucum)属于非肉质化的泌盐生植物，盐角草
(Salicornia europaea) ，盐 爪 爪 (Kalidium
foliatum)属于真盐生植物，它们均属于黎科。而花
花柴属于肉质化的泌盐生的菊科植物，NHX 基因在
这些植物不同的耐盐机制中也许起着不同作用。
4 结论
4． 1 本研究已成功提取了盐生植物花花柴总
RNA，并合成了 1st － cDNA，成功克隆了花花柴的
Actin 基因片段，并从 1st － cDNA 中成功克隆到
NHX基因，大小为 1253 bp。将其与 GeneBank 中已
经 提 交 的 Karelinia caspaca，NHX1，NHX2;
Arabidopsis thaliana， AtNHX1; Ipomoea nil，
InNHX1;Populus euphratica，NHX1;Oryza sativa，
OsNHX1;Salicornia europaea，SeNHX1;Hordeum
vulgare，HvNHX1;Chenopo diumglaucum，CgNHX1
的氨基酸序列进行同源性比对。结果显示一致性达
到 68． 77%，可以用于构建植物表达载体进行相应
的功能鉴定。
4． 2 目前约有超过 200 个编码 Na + /H +反向运输
载体(Na + /H + hydrogen exchangers NHEs)已经在
GeneBank 和 Pfam 的数据库中注册，该 Na + /H +反
向运输载体广泛存在于自然界各种生物，如原核生
物霍乱弧菌 (Tlibrio cholerae) ，大肠杆菌 (E．
coli) ，酵母，各类植物等，其主要可分为以下两种:
定位于质膜上的一类和定位于胞质内膜系统(如内
质网，线粒体及植物中液泡)的一类。本研究所克
隆的 NHX基因属于后一类型，且已被报道在多种植
物中存在，如拟南芥 NHX 基因家族 AtNHX － 6，水
稻 OsNHX1，盐角草 SeNHX 等，这些植物分别属于
中生植物，甜土植物和盐生植物。
4． 3 盐胁迫对植物的伤害主要来自 2 个方面:一是
较高的盐分降低了土壤水势，从而抑制植物根系的
吸水，引发渗透胁迫;二是过量的盐分进入植物细胞
后，会破坏细胞质的离子平衡，产生离子毒害［3］。
其中，离子胁迫效应是又高盐分直接引起的，为盐胁
迫所特有。因此，如何消除离子胁迫效应就成为了
了解植物耐盐性机理和培育耐盐植物的关键。已有
证据表明，这一过程主要是盐离子的区隔化、盐离子
的外排和减少盐离子的吸收等生理机制实现的［5］。
其中，盐离子的区隔化是盐生植物消除离子胁迫效
应的核心机制，这一机制有位于液泡膜上 H + － AT-
Pase、H + － PPase 和 NHX 蛋白的建立的［4］。大量研
究表明，过量表达 NHX 基因可以提高植物的耐盐
性［6，7］，说明 NHX基因是赋予植物耐盐性的主要因
素，具有广泛的研究价值。本研究得到了花花柴
NHX基因的 cDNA 片段，为进一步分离该基因的全
长序列奠定了基础。对 NHX基因的深入分析，不仅
有利于了解花花柴的耐盐性机理，有助于为耐盐基
因育种工作提供新的耐盐基因资源。
83
第 4 期 李 彬等:花花柴耐盐相关基因 NHX的克隆与分析
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