全 文 :植物精油普遍存在于植物的各个部位,民间广泛使用水蒸汽蒸馏法从植物体中提制精油,用于调配
食品、化妆品香精,合成其它原料及维生素等。[1]同时植物精油能保护植物免受细菌及其它病菌的侵害,
利用精油的这项特性,人们在生活中越来越多地应用精油以改善家居环境、预防疾病和保健身体。[2]伊
朗蒿(Artemisia persica Boiss),为菊科蒿属的半灌木状草本,产自西藏,生长于海拔3000~4000m地区。[3]
目前国内外关于植物精油在抑菌抗菌方面的理论和应用研究较多,[4]但是对于伊朗蒿这种西藏常见的草
本植物的研究报道极少。本文主要探讨伊朗蒿(Artemisia persica Boiss)的提取工艺及抑菌效果,为日后伊
朗蒿精油的生产及应用提供理论依据。
1材料与方法
1.1 伊朗蒿
伊朗蒿采于西藏拉萨市达孜县甘丹寺周边地区。将采集到的伊朗蒿清洗、晾干后于60℃烘干,全草
摘要:目的:研究浸泡预处理提取伊朗蒿精油的最佳条件及精油的抑菌效果。方法:采用浸泡预处
理,并试用不同的条件对精油进行提取,同时采用滤纸片扩散法来检测精油对于毕赤酵母生长的抑制作
用。结果:浸泡预处理提取伊朗蒿精油的最佳工艺是料液比为1:15;浸泡预处理24h后回流5h,得到的精
油量为12.0ml/kg。结论:伊朗蒿精油对于毕赤酵母的生长具有明显的抑制作用。
关键词:伊朗蒿;精油;浸泡预处理;抑菌活性
中图分类号:S567.239 文献标识码:A 文章编号:1005-5738(2013)02-007-05
收稿日期:2013-09-25
基金项目:2012年度西藏自治区大学生创新性实验训练计划项目“伊朗蒿精油的提取研究”阶段性成果,项目号:2012CX009
第一作者简介:张勇群,女,汉族,湖南益阳人,西藏大学理学院副教授,博士,主要研究方向为植物多样性与分子生态。
通讯作者简介:拉琼,男,藏族,西藏日喀则人,西藏大学理学院副教授,博士研究生,主要研究方向为植物多样性与分子生
态。
西藏大学学报(自然科学版)
JOURNAL OF TIBET UNIVERSITY
Vol.28 No.2
Oct. 2013
第28卷 第2期
2013年10月
浸泡预处理提取伊朗蒿精油
及其对毕赤酵母的抑制作用研究
张勇群 石梦菲 黄云霞 拉巴卓玛 拉琼
(西藏大学理学院 西藏拉萨 850000)
-- 7
DOI:10.16249/j.cnki.54-1034/c.2013.02.001
粉碎过60目筛选备用。
1.2 供试真菌及培养基配方
供试真菌为毕赤酵母。培养基为YPD固体培养基,配方为:葡萄糖20g/L,胰蛋白胨20g/L,酵母提取
物10g/L,琼脂20g/L。
1.3 不同处理方法对伊朗蒿精油提取的影响
取伊朗蒿干粉50g,加蒸馏水,置于容量为1000ml的蒸馏烧瓶中,采用浸泡预处理方式,并在具备回
流装置的蒸馏器中进行伊朗蒿精油的提取。分别探讨不同浸泡时间、不同料液比以及不同回流时间对伊
朗蒿精油提取的影响。
1.3.1 不做预处理与浸泡预处理对精油含量的影响
称取伊朗蒿干粉50g,加蒸馏水750ml,以1:15的料液比平行进行未处理和浸泡预处理1h,并在相同
的回流时间(5h)内进行精油提取实验,研究浸泡预处理对伊朗蒿精油含量的影响。
1.3.2 不同浸泡时间对提取效果的影响
称取伊朗蒿干粉50g,并加入750ml蒸馏水,在蒸馏前分别对材料进行30min、1h、5h及24h的浸泡处
理,再进行回流时间均为5h的蒸馏提取。研究不同浸泡时间对伊朗蒿精油提取效果的影响,确定最佳浸
泡时间。
1.3.3 料液比对提取效果的影响
取伊朗蒿干粉50g,加入750ml蒸馏水,置于1000mL蒸馏烧瓶中浸泡预处理1h,回流5h,分别以料液
比为1:5、1:10、1:15及1:20进行提取,研究料液比对伊朗蒿精油提取效果的影响,确定最佳料液比。
1.3.4 不同回流时间对精油提取的影响
取50g伊朗蒿干粉,加入750ml蒸馏水,置于1000mL蒸馏烧瓶中浸泡预处理1h,分别以30min、1h、2h、
3h及5h做梯度,研究不同回流时间对伊朗蒿精油提取效果的影响。
1.4 伊朗蒿精油的抑菌试验
1.4.1 供试菌液的制备
将平板保存的毕赤酵母活化,30℃培养22h,直至出现单一菌斑,将其挑出,并置于盛有32mlYPD液体
培养基的锥形瓶中,恒温摇床培养(24h,30℃,200rpm)。后置于4℃保存以备用。
1.4.2 不同浓度精油的配制
伊朗蒿精油与无水乙醇分别以1:1、1:9、1:99、1:999及1:9999的体积比混匀,使得伊朗蒿精油的浓
度依次为50%、10%、1%、0.1%和0.01%。同时以蒸馏水和无水乙醇作为对照。
1.4.3 抑菌试验
取200μl制备好的菌液,均匀涂布到YPD培养平板上,将灭菌的滤纸片(直径7mm)轻放于已涂布的培
养基上,再将不同浓度的精油分别滴加在滤纸片上。每个平板上放6张滤纸片,每张滤纸片滴加3μl 样
品,使其刚好将滤纸片渗透。室温正置30min后,倒置于30℃培养20~28h。观察各浓度精油的抑菌圈大
小。
2结果与分析
2.1 伊朗蒿精油的提取
2.1.1 不做预处理与浸泡预处理对精油提取效果的影响
由图1可知,浸泡预处理所得的伊朗蒿精油量明显大于未做预处理的精油提取量。因此,采用浸泡
预处理可以提高伊朗蒿的精油提取量。
张勇群,石梦菲,黄云霞,等:浸泡预处理提取伊朗蒿精油及其对毕赤酵母的抑制作用研究
-- 8
2.1.2 不同浸泡时间对提取效果的影响
图2 不同浸泡处理时间对伊朗蒿精油含量的影响
由图2可知,提取得到的伊朗蒿精油量随着浸泡处理时间的增加而增大。在浸泡24h后提取的精油
量达到了12ml/kg。
2.1.3 料液比对精油提取效果的影响
图3 不同料液比对伊朗蒿精油含量的影响
由图3可知,当料液比小于1:15时,伊朗蒿精油提取量随着料液比的增大而增加;当料液比大于1:
15时,精油提取量随着料液比的增加而缓慢下降。料液比是精油提取过程中一个比较重要的影响因素。
0
1
2
3
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5
6
7
8
9
10
30min 1h 2h 3h 5h
伊
朗
蒿
精
油
量
(m
l/
kg
)
不做预处理
浸泡处理
图1 不做预处理与浸泡预处理对伊朗蒿精油含量的影响
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30min 1h 5h 24h
伊
朗
蒿
精
油
量
(m
l/
kg
)
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1:05 1:10 1:15 1:20
伊
朗
蒿
精
油
量
(
ml
/k
g)
精油量(ml/kg)
张勇群,石梦菲,黄云霞,等:浸泡预处理提取伊朗蒿精油及其对毕赤酵母的抑制作用研究
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当料液比过小时,精油不能被充分提取;料液比过大,则精油在堆积溶剂中,降低了提取量,同时能耗也随
之增大,造成能源的浪费,增加了成本的投入。因此,从节约能源和提取量两方面考虑,料液比1:15为最
佳选择。
2.1.4 不同回流时间对伊朗蒿精油提取的影响
图4 不同回流时间对伊朗蒿精油含量的影响
从图4可以看出,随着回流时间的增加,提取得到的伊朗蒿精油量也随之增加,尤其在30min~3h时
间段,精油提取量增加幅度更为显著。当回流时间超过3h时,精油量的增加趋于平缓,在5h时达到9ml/kg。
2.2 伊朗蒿精油对毕赤酵母的抑制作用
图5 不同浓度伊朗蒿精油对毕赤酵母的抑制效果
由图5可知,伊朗蒿精油对于毕赤酵母生长的抑制作用非常明显,并且抑菌效果随着精油浓度的递
0
1
2
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30min 1h 2h 3h 5h
伊
朗
蒿
精
油
量
(m
l/
kg
)
张勇群,石梦菲,黄云霞,等:浸泡预处理提取伊朗蒿精油及其对毕赤酵母的抑制作用研究
精油浓度
100%
50%
10%
1%
0.1%
0.01%
抑菌圈直径(mm)
8.95
8.35
8.13
8.08
7.38
7.27
表1 不同浓度伊朗蒿精油对毕赤酵母的抑菌活性
-- 10
增而更加明显。从表1可以更清晰地看出,抑菌圈的大小随着精油浓度的增加而增大,在精油浓度达到
100%时,抑菌圈最大,直径为8.95mm。无水乙醇与蒸馏水作为对照组,对毕赤酵母均没有抑制作用。
3讨论
通过试验得出了浸泡预处理提取伊朗蒿精油的最佳工艺,即料液比为1:15,浸泡24h后进行5h的水
蒸气蒸馏提取,得到的精油量为12.0ml/kg。同时证明了伊朗蒿精油对于毕赤酵母具有明显的抑制作
用,纯精油抑菌效果最强,抑菌圈最大,直径为8.95mm,而低至0.01%浓度的精油对毕赤酵母仍然具有抑
制作用。
参考文献
[1]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京:人民卫生出版社,1978:104.
[2]刘洪波,史冬辉,张瑜.植物精油的研究与应用[J].绿色科技.2011(9).
[3]吴征镒.西藏植物志[M].北京:科学出版社,1985:753-754.
[4]江志利,张兴,等.植物精油研究及其在植物保护中的利用.陕西农业科学[J].2002(1).
张勇群,石梦菲,黄云霞,等:浸泡预处理提取伊朗蒿精油及其对毕赤酵母的抑制作用研究
Infiltration Extraction of Essential Oil
from Artemisia persica Boiss
and antifungal activity on Pichia pastoris
Zhang Yong-qun Shi Meng-fei Huang Yun-xia Laba Zhuoma La Qiong
(School of Science, Tibet University, Lhasa 850000, Tibet)
Abstract: Object:The present research attempted to find the optimal conditions for the extraction of essential oil
from Artemisia persica Boiss with the infiltration pretreatment and its antifungal effects. Method:Essential oil
from Artemisia persica Boiss was extracted under different conditions and the inhibiting effect of essential oil on
Pichia pastoris was detect as well. Result:The results showed that the best condition is to keep the ratio of 1:15
between solid and liquid with immersing treatment for 24h and refluxing for 5h and the yield of essential oil
reaches up to 12.0ml/kg. Conclusion:The essential oil extracted from Artemisia persica Boiss have been inhibiting
the growth of Pichia pastoris.
Keywords: Artemisia persica Boiss; Essential oil; Infiltration pretreatment; Anfungal activity
[责任编辑:索郎桑姆]
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