全 文 ：中国病理 生理杂志 Ch i e s e nJ o ur nal oP fat h o ph y s i ol o gy 1 9 9峨, 2 0 ( 2
珠子参总皂戒 、 三七总皂戒及绞股兰总皂戒
对心肌缺血再灌损伤的保护作用
昆明医学院病理生理教研室 (昆明 6 5 0 0 3 1) 韩 红 李麟仙 王 琼仙 魏均娴 . 陈业高 .
摘 要 采用 L an ge dn or f 离体心脏灌流方法 , 以停灌 30 分钟 , 再灌注 20 分钟制备大鼠心肌缺 血
再灌损伤模型 。 三七总皂贰 ( P N S 30 m g / L ) 和纹股兰总皂贰 ( G P , 30 m g / L 和 50 m g / L ) 显著降低不
可逆室颤发生率 , 50 m s/’ L 的 G P 显著抑制心肌 L D H 释放 , P N S 和 G P 显著提高缺血再灌心肌 S O D
活性 , G P 明显降低其 M D A 水平 , P N S 明显降低心肌钙含量 。 在结扎家兔冠状动脉左室 支 2 小时 ,
再灌注30 分钟所造成的心肌缺血再灌损伤模型中 , 珠子参总皂 贰 P J S , 25 0 m g / k g) 和 P N S ( 2 0 0 m g/
k g) 轻度改善缺血再灌后的左室功能 , 显著降低再灌后血浆 L D H 和 C P K 水平 , 明显减轻心肌钙聚积 。
以上结果表明: P J S , P N S 和 G P 对心肌缺血再灌损伤具有保护作用 , P J S 和 P N S 的作用机理可能与
拮抗钙有关 , G P 的作用机理可能与抗脂质过氧化有关 。
主题词 人参 ; 皂贰类 , 过氧化脂质类 , 钙
心肌缺血再灌损伤是临床上常见的病理过
程 , 寻找有效防治措施具有重要实践意 义 。 三
七有许多药理作用 。 近两年 , 李杏 , 黄聪等人
报道 P N匀寸心肌缺血再灌损伤具有保护作用 。
PJ S与 P N S 类似 , 同属五加科人参属植物 , 迄
今 , P sJ 对心肌缺血再灌损伤的研究尚未见报
道 。 G P的心血管药理作用 与 P N S 类似 , 熊维
生等人报道 G P 能缩小家兔心肌梗塞范围 , 抑
制心梗后F A 升高 , 降低梗塞心肌M D A 含量 。
为了探讨 P J S对心肌缺血再灌损伤的影响和进
一步肯定 P N S和 G P 的抗心肌缺血再灌损伤 的
作用 , 本文采用由我 院植 化 室从云南产的三
七 , 珠子参和绞股蓝中提 取 的 P N S , P J S 和
G P
, 观察对整体和离 体 心肌缺血再灌损伤的
影响 , 并探讨其作用机制 。
方 法 和 结 果
一 、 P N s 和 G P 对离体灌流大鼠心脏心肌
缺血再灌损伤的影响
选用W i s t a r大鼠 2 5只 , 体重 3 0 3 士 7 59 , 雌
雄兼用 , 戊 巴比妥 纳 麻 醉 ( 30 m g / k g , iP ) 和
静脉注射 肝 素 ( I 0 0 0U / k g ) 后 , 开胸剪下心
脏 , o ℃停跳 , 迅速用 K H液按 L a n s e n d o fr f技
术经主动脉进行 心 脏 灌 流 。 该灌流液持续用
9 5% 0
2一 5% C O : 饱和 , 使氧分压大于 8 0 k P a ,
保温 36 . 5一 37 ℃ , p H 7 . 4。 预灌注 15 分钟后停
灌30 分钟 ( 37 ℃保温 ) , 继之再灌注 20 分钟 。
药物溶解于灌流液中 , 于实验全程给药 。 观测
再灌后室颤发生率流出液中L D H活性 , 心肌组
织M D A含量 、 s oD 活性以 及 C a , + 含量 “ 一”
。
实验随机分四组 : ( 1) 单纯 缺 血再 灌对照组
( I R
, n = 9 ) ; ( 2 ) P N S组 ( 3 0m g / L , n = 6 ) ;
( 3 ) G P I 组 ( 3 0 m g / L , n = 6 ) ; G P Z 组
( SOm g / L
, n = 7 )
。 实 验 数 据 以 又士 S D 表
示 。
1
.
P N s和 G P 对再灌室颤发生率的影响
离体灌流心脏经 30 分钟缺血和 20 分钟再灌
后 , 8 %发生了室颤 。 P N S 和 G P 明显减少不
可逆室颤发生率 ( 表 1 ) 。
2
.
NP s和 G P对再灌心肌 L D H释放的影响
心脏缺血再灌后 , 流出液中L D H水平明显
升高 , 以再灌 5 分时升高最显 著 。 50 m g / L G P
显著抑制再灌引起的心肌 L D H 释放 , 3 Om s/ L
G P和P N S也轻度减少其 L D H 释放 , 但无显著
性差异 ( 表 2 ) 。
赞 昆明医学院植化研究室
·
1 29
·
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洲 . u护 o。 +` 1UùP卜月
3
.
P N S和 GP 对缺血再灌心 肌 MD A含量
和 D S O活性的影响
GP显著降低缺血再灌心肌 MD A含量 , 而
P N S的这一作用不明显 , : P N S和 G P都显著提高
缺血再灌心肌 SO D 活性 ( 图 1 ) 。
切`/fl)沙ù>钾。门05
I R P N S G P I G P Z
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4
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F ig l E f f e e t s o f p N S a n d G p o n m y o
-
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a c t iv it y i n i s o la t e d r a t h e a r t s u b
·
j e e t e d t o is e he m i a a n d r e Pe r f u s益o n ·
P ( 0
.
05 v s 厄R ( M DA ) , P ( 0 . 0 5 v s
IR ( S O D )
圈 1 P N S和G P对离体大限心脏缺血
再滋后心肌M OA和 5 0 0 活性的影晌
4
.
P N S和 G P对再灌心肌 C a , 十含量的影响
P N S显著降低缺血再灌心肌 C a , + 含量 , 而
G P这一作用不明显 ( 图 2 )
二 、 P J S和 P N S 对家兔心肌缺血再灌损伤
的影响
选用新西兰纯种 家 兔 39 只 ,
裹 1 P N S
体重 2 · 14 士
F ig 2 E f f e e t s o f P N S a n d G P o n m y o c a r
·
d ia ! e a l e i u m e o n t 6 n t 百n i s o l a t 6 d r a t
h e a r t a f t e r i s e h e m i a a n d r e P e r f u s i o n
·
器却 ( 0 . 0 1 v s IR
图 2 P N S和G P对离休大叹心脏
缺血再滋后心肌钙含 t 的形`
。 . 36 k g , 雌雄不拘 , 戊巴 比 妥 纳麻醉 ( 3 0一
40 m s/ k g
,
iv )
, 经颈总 动脉行左心室插管和
股动脉插管 , 接多道生理记录仪 ( RM 6 0 0O型 ,
日本 ) , 开胸结扎冠状动脉左室支中部 , 监测
I 导心 电图 , 于 2 小时末解开结扎 , 再灌注 30
分钟 。 药物溶解于 4 m l生理盐水中 , 平均分四
次分别于术前 5 分钟 , 缺血前 10 分钟 , 缺血 1
小时及 2 小时未从耳缘静脉注射 , 对照组给等
量生理盐水 。观测左心室 Lv s P和 土 dP / dt m ax ,
平均动脉压 , 血浆 L D H和 C p K水平以及心肌组
织 C a , 十 含量 “ ’ 。 实 验 分三组 : (1 ) 单纯缺血
再 灌对 照 组 ( I R 组 , n 二 1 5 ) , ( 2 ) P J S 组
( 2 5 0m g / k g
, n = 1 2 ) ; ( 3 ) P N S 组 ( 2 0 0m g /
k g
, n = 1 2 )
。
和 G P 对离体大暇心脏缺血再滋室顺的影晌
T a bl e 1 E f f e e t s o f PN S a n d G P o n v e n t r ie u l a r f ib r i ll a t i o n ( V F ) e a u : e d b y i s e h e m i a / r e Pe r f u s i o n
i n 150 ! a t G d r a t h e a r t
nI e id e n e e o f V F I n e i d e n e e o f I n e i d e n e e o f
G or uP
op s i t i v e n e g a t i v e r e v e r s i b l e V F i r r e v e sr i b l e V F
I R 9 8 1 1 7
P N S
G P I
1 签
1井
G P Z
. P < 0
.
05
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一
1 30
·
表 2 P NS 和G p对离体大暇心脏再滋注所致 L H O释放的影晌
Ta b le 2 f f Ee e t so fS P Na n dG Po n re Pe r fu :io ni n du c e d L D H re lea se f ro m 一 o sla te d Pe r fu se d
a r t hea r t ( U/ 9m i
n, 又 土 S D )
G r o u P n P
r e 一 i s e h e m i a R e P e r f u s io n
( P l ) n l l n 5 m l n 2 0 m ] n
I R 1
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6 7 士 0 。 9 1 1 2 。 0 1 士 3 。 2 8 a A 2 4 。 6 8 士 1 5 。 1 9八 △ 1 9 。 0 9 士 9 。 4 9压 △
P N S 1
。
6 2 士 0 。 8 2 1 2 。 5 9 士 2 。 7 1 1 5 。 6 9 士丁。 2 5 1 7 。 2 1 士 7 。 2 6
G P I 1
。
5 0 士 0 。 7 6 8 。 6 6 士 3 。 4 0 1 3 。 8 7 士 6 。 6 3 1 2 。 7 0 士 6 。 9、
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表 3
T准b! e 3
P N S 和 P J S 对家兔心肌缺血再滋注左室 LV SP 及 士 d P / d t m a x 的影晌
E f f e e t s o f P N S a n d P J S o n LV SP a n d 士 d P / d t m a x i n r a b bi t h e a r t u n d e r t a k e n
is e h e m ia a n d r e Pe r f u s io n
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P J S ( 9 ) 1 3
土 1
1 1
。
5 3
士 1 。 6 7 .
1 1
。
3 8
士 1 。 5 1
1 1
。
7 8
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1 1
。
2 0
士 1 。 7 7 A
1 1
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1 1
。
2 7
士 1 。 8 4
士 1
。
8 5
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1 1
。
2 7
士 2 。 3 5
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土 1 。 8 0
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。
7
土 90 。 7
5 94
。
7
士 70 。 0
5 7 1
。
8
士 7 9 。 0
4 0 8
。
5
士 1 0 9 。 l b `
4 8 6
.
1
士 93 。 4
4 4 7
。
4
士 1 3 1 。 1
4 0 9
。
3
士 1 3 9 . 4 a a
4 5 7
。
3
士 6 2 。 9
4 7 7
。
1
土 1 1 6 。 2
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。
7
士 9 9 。 9八 a
4 8 4
。
4
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4 2 3
。
3
士 9 0 。 6
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。
1
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4 1 7
。
8
士 1 1 0 。 8签
4 2 8
。
3
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2 99
。
3
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。
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。
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6
士 95 。 2
2 5 3
。
3
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2 6 4
。
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。
4
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2 4 8
。
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士 7 2 。 3 A A
2 3 4
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7
士 6 3 。 8
2 9 0
。
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。
7
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2 4 8
。
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。
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2 3 4
。
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2 4 8
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。
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一 i s e h e m i a
1
.
P J S和 P N S对缺血再灌心脏左室功能及 一步降低 。 P J S 和 P N S 明显减轻再灌后 十 d p /
血压的影响 dt m ax 的下降 , 轻度减轻 L v s P 和一 d p / dt m Xa
结扎冠状动脉左室支后 , L V s P , d p / dt am x 的下 降 , 对平均动脉压无明显影响 ( 表 3 ) 。
及平均动 脉压 ( M A P ) 迅速下降 , 再灌后进 2 , PJ s 和 P N s对血浆L D H和C P K水平的影
.1 3 1
·
表 4P NS和 P s J对家免心肌缺血再滋注后
心肌钙含且的影晌
T a b le 4Ef f e et s of P NS an dP JS on
m y or e a dia le a le iu m en otn et in
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F 19 3 E f f e c t o f PN S a n d P J S o n Pla s m a l LDH
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·
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图3 P N S和 P J S对家兔心肌缺血
再瀚血桨 L O H水平的影晌
P N S 6
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F 19 4 E f f e e t o f P N S a n d P J S o n pla s m a l C PK
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P < 0
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0 5 v s IR
图 4 P N S和 P J S对家兔心肌缺血
再滋血桨C P K水平的影晌
响
心肌缺血后 , 血浆 L D H和 C P K水平迅速上
升 , 再灌后进一步升高 , P sJ 和 P N S 显著降低
再灌后血浆 L D H和 C P K水平 ( 图 3 , 图 4 ) 。
3
.
P J S和 P N S对家兔缺血再灌心肌 C a , 十含
量的影响
心肌缺血再灌后 , 心肌钙含量显著增加 ,
PJ s 和 P N S显著降低其钙含量 ( 表 4 ) 。
讨 论
实验结果表明 : 离体灌流大鼠心脏经全心
缺血 30 分钟 、 再灌注 20 分钟或结扎家兔冠状动
脉左室支 2 小时再灌注 30 分钟 , 都发生明显心
肌缺血再灌损伤 。 其损伤机理与氧自由基的作
用和心肌细胞钙超载有关 ` 5 ’ 。
P J S 是珠子参的主要有效成份 “ ’ 。 我室发
现它可减少沙土鼠脑缺血再灌后脂质过氧化的
形成 `” 。 本文探讨它的抗心肌缺血作用 。 结果
表明 : P SJ 可部份改善家兔心肌缺血再灌后的
左室功能 , 显著抑制再灌引起的心 肌 L D H 和
C P K的释放 , 明显减少心肌钙含量 。 说明 P J S
对心肌缺血再灌损伤具有保护作用 。 其机理之
一可能与拮抗钙有关 。
P N S的心血管药理作用虽有不少研究 , 但
抗心肌缺血再灌损伤的报道不多 。 本文离体及
整体实验结果都表明P N S对心肌缺血再灌损伤
具有保护作用 , 结果与文献报 道一致 ` 日 ’ 9 ’ 。 由
于 P N S 显 著 减少缺血再灌心肌的钙聚积 , 因
此 , 其保护作用与拮抗钙有关 , 此外 , P N S还
可保护心肌 S OD 活性 。 结果 中 , P N S 未能显著
抑制离体大鼠心脏缺血再灌所致的L D H释放 ,
这可能与心肌损 伤 太 重 有关 。 李杏等人报道
·
12 3
·
P S N对低灌0 6 分钟 , 再灌 15 分钟所致的 C P K释
放无明显影响 。 当缩短低灌时间为 40 分钟后 ,
P N S的保护作用才显示出来 `“ ’ , 提示 P N S的保
护作用与损伤程度有关 。 本文未观察到 P N s减
少 M D A 生成的作用 , 可能与实验条件等因素
有关 。
绞股蓝属葫芦科植物 , 其主要成份也是皂
贰 , 它和三七都含有与人参皂贰相同的成份 ,
因此 , 可能有类似作用 。 本文观察到 G P 明显
降低离体灌流大鼠心脏缺血再灌不可逆室颤发
生率 , 抑制再灌心肌 L D H释放 , 降低再灌心肌
MD A含量 , 并提高S o D活性 。 说明 G P 具有抗
心肌缺血再灌损伤的作用 。 其机理可能与抗脂
质过氧化作用有关 。 结果与熊维生等人在整体
实验上得到的结果一致 ` ’ “ ’ 。
参 考 文 献
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sA as y fo
r l iP i d P e or x i
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a e i d r e a e t i o n
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A n a l B i o e h e m 1 97 9 , 9 5 :
3 5 1
。
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·
o x i d e a n i o n r a d i e a l s i 一1 t h e a u t o x i d a t io n o f
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n s e n g s a P o n i n s ( P N S )
,
P a n a x aj P o n i e u s s a P on i n s ( P J S ) a n d g y P e n o s i d
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( G P ) o n m y o e a川 i a l i s c h e m i a a n d
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D 印 t . o f P a t h o Ph y s i o l o gy , K u n n” n g M e di e a l C o l e g e , K u n ln in g
Ab s t r a c t M y o ca r d i a l i n ju r y o f i s o l a t ed ep r f u s ed r a t h ea r t w a s i n d u e ed b y 3 0 m i n
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I t a l s o
s u g g es t e d t h a t t h e u n d e r l y i n g P r o t e e t i v e m e e h a n i s m s o f P J S a n d P N S a r e r e l a t e d t o t h e
P r e v e n t i o n o f e a l e i u m o v e r l o a d
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M e S H G i n s e n g ; S a P o n i n s : M y oc a r d i u m : L IP i d ep r o x id e s : C a l e i u m
峨娜 ,. 翻阴甘侧阴峨姗扭姗摘 . 娜州哪潮哪汾朋娜洲 圈做粗瞬价口阴 ,目川砚姗州 . 做朋姗洲 . 肠夙峨然阴耳娜 1哪溯弓峨沼明峨然州 峨书筋门目翎 1碱沼 1目娜 1峨娜 1峨毅从 . 拐洲目洲 ,哪洲哪绷 目娜 1峨刁粥 1公书洲1峨澎别砚娜弓峨娜 1暇 侧么1哪朔哪娜帕困阴 ,
肠 源 性 肝刺 激 物 质 生 物
活 性 的初 步 研 究
军事医学科学院放射医学研究所 〔北京 1 0 0 8 5 0 ) 王立生 刘福陆 郭学敏 吴祖泽
肝细胞的再生和增殖受刺激物质和抑制物质正负
两方面的精细调节。 在个体发育的不同时期 , 这两类
物质在肝生长调控中所占的地位不同 , 新生哺乳动物
肝脏和损伤肝脏的修复期则 以肝刺激物质为主。 肝刺
激物质不但存在于肝脏本身 , 亦存在于肝 外组织 。 小
肠粘膜是含有肝刺激物质的组织之一 , 这一点在动物
实验中已得到证实 。 本文报道了人胎 儿 小肠 中肝刺
激物 质 ( i n t es t i n a l h e p a t i e s t i n zu l a t o r y s u b s t a n e e ,
I H S S ) 的生物活性和理化性质 。
材 料 和 方 法
一 、 I H S s 的制备 : 取 选一 6 , !一月水囊引产的胎
儿 , 剖开腹腔 , 分离出小肠部分 , 剪开肠管 。 用生理
盐水洗净后刮取小肠粘膜 , 用去离子水制 成细胞悬液
冻存于 一 20 ℃裂解 ,裂解后上清部分经 D E A E ( D E -
3 2 ) 纤维素层析柱分离 , 应 用洗脱液为 pH 7 . 8 , O . 05 M
t ie s 一 H C I缓冲液及 O一 1 M N a C I 梯度 洗脱 , 所得活性
组份经透析冻干后为 I H S S 。
二 、 肝刺激活性体外检测 : 肝刺激活 性体外检测
采用人肝癌 S M M C 一 7 7 2 1 细胞系 , 调整培养体系中细
胞浓度为 2 义 i G S / n l l , 按每孔 1 2 0 卜l加入细胞培养板 ,
置于 37 ℃ , 含 5 % C O : 和 饱和湿度 的 培 养箱中培养
1h2
, 再加入待测刺激物和对照物 , 继续培养 2粗后 ,
每孔加入 S C卜C i / m 13 H 一 胸腺喀陡核普 I c卜 l , 掺入 3 h
后 , 用 0 . 2 5%胰蛋白酶消化细胞 , 用多头细胞收集器
将细胞收集于 49 一号滤纸上 , 滤片干燥后 , 装入含 连m l
闪烁液的液闪瓶中 , 在液 体 闪烁 计 数 仪 上 测 cP m
值 。
讨 论
I H S S对肝来源的细胞D N A 合成具有刺激作用而
对非肝来源的细胞作用不明显 ( 表 1 ) , 说 明 I H s s
表 1
T a bl e
. HS S 对不同组织来源细胞的刹激作用
S t im u l a t o r y e f f e e t o f IHS S o n e e l ls d e ri v e d f r o m di f f e r e n t t i s s u e s
c Pm (又士 S D )
C e l l
R PM I
一 1 64 0 C o n t r o l 1 0% I H S S
H u m a n f e t a l l v e r e e l
H u r Qa n h e P at o m a e e l l li n e SM M C
一
7 7 2 1
H u m a n h e Pa t o ma
e e l l I i n e B E L 一 7 4 0 2
H u lr la n m y e fo i d Ie uk e面 a e e l l l i n e K 5 6 2
F i b ot bl 鸽t e e l I i n e 卜任H 一 3T 3
H u m a n m y e fo i d l e uk e面a e e l l l i n e I IL 一 60
3 1 6 士 8 1
1 1 3 7 士 3 0 7
1 8 0 5 士 2 8 6
1 4 2 6 土 1 7 9
1 1 9 1 士 9 2
2 7 2 2 士 2 5 4
7 5 0 士 1 3 3赞
3 0 6 0 士 2 9 2 赞
2 8 8 5 士 4 3 7苦
1 5 7 9 士 4 0 6
1 2 7 3 士 4 0 5
1 8 7 0 士 2 8 6
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1 64 0 e o n t r o l
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, n = 5 ( 下转第 2 1 4页 )