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峨眉雪胆微丸对断奶仔猪肠道形态及消化酶活性的影响



全 文 :第33卷 第2期
 2015年6月 
   
四川农业大学学报
Journal of Sichuan Agricultural University
   
Vol.33 No.2
Jun.2015
  收稿日期:2015-03 -16
基金项目:四川省科技厅重大专项———中兽药创新及产业化(2014-2017)。
作者简介:马双昆,硕士研究生。*责任作者:李英伦,教授,博士生导师,主要从事中兽医与中兽药研究,E-mail:liy-
inglun01@163.com。
doi:10.16036/j.issn.1000-2650.2015.02.012
峨眉雪胆微丸对断奶仔猪肠道形态及消化酶活性的影响
马双昆,僧晓兰,刘艳芳,李英伦*
(四川农业大学动物医学院,四川 温江 611130)
摘要:【目的】探究峨眉雪胆微丸对断奶仔猪肠道形态及消化酶活性的影响。【方法】选用28日龄断奶、初始体重平
均为7.86kg的杜×长×大三元杂交仔猪96头,随机分为A、B、C、D组,每组3个重复,每个重复8头,分别在基础
日粮中添加0.08%硫酸粘杆菌素、0.008%穿心莲提取物以及0.025%、0.05%比例添加峨眉雪胆微丸进行21d饲
养试验,以绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度隐窝深度比值、消化酶活性等为考察指标,研究添加峨眉雪胆微丸对断奶
仔猪肠道形态及消化酶活性的影响。【结果】结果表明,与添加抗生素对照组相比,0.025%峨眉雪胆微丸添加组仔
猪各段的绒毛高度,绒毛高度隐窝深度比值显著增加(P<0.05);淀粉酶活性显著增大(P<0.05)。0.05%峨眉雪
胆微丸添加组仔猪十二指肠,空肠部位绒毛高度显著增大(P<0.05),绒毛高度隐窝深度在十二指肠回肠部位显著
增加(P<0.05),淀粉酶活性差异不显著(P>0.05),脂肪酶和胰蛋白酶活性降低。【结论】饲粮中添加适量的峨眉
雪胆微丸可改善断奶仔猪肠道形态,并有提高消化酶活性的作用,其中以0.025%峨眉雪胆微丸添加组的效果较
好。
关键词:峨眉雪胆微丸;断奶仔猪;肠道形态;消化酶活性
中图分类号:S816.7;S853.72  文献标志码:A  文章编号:1000-2650(2015)02-0199-06
Effects of Emei hemsleyaPelets Additives on Intestinal
Morphology and Digestive Enzyme Activity of Weaning Piglets
MA Shuang-kun,SENG Xiao-lan,LIU Yan-fang,LI Ying-lun*
(Colege of Veterinary Medicine,Sichuan Agricultural University,Wenjiang 611130,Sichuan,China)
Abstract:【Objective】To study the effects of basic ration with Emeihemsleyapelets additive on
intestinal morphology and digestive enzyme activity of weaning piglets.【Method】Four groups di-
vided from 96weaning Duroc× Landrace× Yorkshire piglets with 7.86kg(mean initial body
weight)were fed 21days by basic ration with different dosage of Emei hemsleyapelets additive.
【Results】The results showed that 250g/1 000kg Emei hemsleyapelets additive could increase
the length of duodenum,ileum,and duodenum vili significantly,and the ratio of length of bloom
to the depth of pits,as wel as amylase activity significantly.500g/1 000kg Emei hemsleyapel-
lets additive could improve intestinal morphology and digestive enzyme activity but the difference
was not significant.【Conclusion】Adding appropriate amount of Emei hemsleyapelets can im-
prove intestinal morphology and digestive enzyme activity of weaning piglets.Adding 250g/1 000
kg Emei hemsleyapelets in basic ration can obtain the best intestinal morphology and digestive
enzyme activity effect of weaning piglets.
Key words:Emei hemsleyapelets;weaning piglet;intestinal morphology;digestive enzyme
    四川农业大学学报 第33卷
  在现代集约化养猪环境中,为使母猪繁殖性能
得到充分发挥,通常采用早期断奶技术。然而,早期
断奶等应激会导致仔猪食欲差、腹泻、消化功能紊
乱、免疫力低、生长停滞、死亡率高等断奶应激综合
征[1-2]。峨眉雪胆(Emei hemsleya)主要含有雪胆双
糖[3],雪胆甲素[4]等活性成分,用于治疗肠炎、菌痢、
冠心病、多种炎症、急性黄疸型肝炎、带状疱疹[5]、眼
镜蛇咬伤溃疡[6]、胃肠道疾病以及呼吸道疾病[7],具
有抗病毒、抗肿瘤等[8]作用。近年来雪胆在医学领
域上已有很多剂型[9],而在兽药的研究开发上鲜有
报道。前期,我们将峨眉雪胆制备成微丸在断奶仔
猪饲料中添加,发现有明显的减少仔猪腹泻提高生
产性能的作用[10];本试验我们拟对饲喂添加峨眉雪
胆微丸饲料后断奶仔猪消化酶活性及肠道形态进行
研究,进一步讨论其防治仔猪腹泻的作用机理。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
体重、胎次相近的健康杜×长×大三元杂交28
日龄断奶仔猪96头,体重(7.86±0.785)kg左右,
公母各半,公猪阉割。饲养于通威股份有限公司邛
崃试验猪场。
1.1.2 试验药物
峨眉雪胆微丸,每1g含生药1g。由四川农业
大学药学实验室制备。
1.1.3 主要试剂和仪器
主要试剂:脂肪酶(LPS)测试盒、胰蛋白酶测试
盒和淀粉酶(AMS)测试盒(购自南京建成生物工程
研究所);0.01mol/L PBS溶液。
主要仪器:UV-2102PC型紫外可见分光光度计
(尤尼柯(上海)仪器有限公司);中佳 KDC-2046低
速冷冻离心机(科大创新股份有限公司中佳分公司)
尼康ECLIPSE 80i倒置显微镜(Nikon,Japan);冰
箱(新乡新飞电器有限公司);旋涡混匀器;37℃水
浴箱;石蜡切片机。
1.1.4 试验饲粮
试验饲粮基础日粮配方及营养水平见文献
[10]。
1.2 实验设计
试验进行窝数、体重、性别三因素随机分组,将
96头试验猪共分为4个处理组,每组3个重复,每
个重复8只。其中A、B组为试验组;C、D组为对照
组。各组间试验仔猪体重经统计检验差异不显著
(P<0.05)。试验期为21d。试验设计见表1。
表1 试验设计
Table 1 Experiment design
实验分组
Grouping
每1 000kg饲料中添加量
Dietary per 1 000kg
A组 峨眉雪胆微丸250g
B组 峨眉雪胆微丸500g
C组 穿心莲提取物800g
D组 硫酸粘杆菌素80g 
1.3 试验方法
1.3.1 饲养管理
试验在四川省春源生态养殖有限责任公司仔猪
保育舍内进行,管理及防疫程序完全按照猪场的规
程进行。保育舍温控制在25~27 ℃,相对湿度
50%~70%。仔猪在断奶后最初5d内限量饲喂,5
d后自由采食(每日饲喂4~5次,每次添加量以料
槽中稍有剩余为宜),自由饮水。
1.3.2 样品采集与处理
肠道形态:于试验期第8、15、22天,每个处理随
机选取2头仔猪进行屠宰,使用颈静脉放血的方法
处死,分离出十二指肠、空肠和回肠。分别截取3
cm左右的十二指肠、空肠和回肠,用PBS冲洗干净
在10%甲醛溶液中固定24h,然后将标本做水洗、
透明、浸蜡和包埋等处理后,在室温下切成5μm的
切片,苏木精-伊红染色[11],封片。每个肠管取3
张切片,每张切片选取5个视野照相,用Imagepro
Plus病理图像分析系统测量每个视野中最长绒毛
处的绒毛高度(vilus height,VH)、隐窝深度(crypt
depth,CD),并计算绒毛高度与隐窝深度的比值。
消化酶活性:用灭菌eppendorf管在无菌条件
下在冰块上收集十二指肠、空肠和回肠2~3g内容
物,置-20℃保存。采用南京建成生化工程研究所
试剂盒测定蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。
1.4 数据处理
数据统计与分析用SPSS 21.0。试验数据进行
单因素方差分析,并用LSD法等进行多重比较,进
行差异显著性分析。统计数据用平均数±标准误差
表示。
2 结果与分析
2.1 断奶仔猪肠道形态
各组仔猪肠道形态的统计结果如表2所示,试
验21d时仔猪十二指肠、空肠及回肠绒毛形态见图
1~3。由表2可知,绒毛高度:与对照C组相比7d
002
第2期 马双昆,等:峨眉雪胆微丸对断奶仔猪肠道形态及消化酶活性的影响    
时,试验A组仔猪肠道各段的绒毛高度显著增加(P
<0.05),试验B组在空肠部位的绒毛高度显著增
加,14d时,试验A组十二指肠,空肠短绒毛高度显
著增加(P<0.05),试验B组十二指肠,空肠部位显
著增大(P<0.05),21d时,试验A组各肠短绒毛高
度显著增加(P<0.05),试验B组在十二指肠绒毛
高度显著增加(P<0.05);与对照D组相比7d时
试验A组仔猪肠道各段的绒毛高度显著增加,试验
B组在十二指肠,空肠处绒毛高度显著增加(P<
0.05),14d时试验A组十二指肠,空肠短绒毛高度
显著增加(P<0.05),试验B组十二指肠,空肠部位
显著增大(P<0.05),21d时试验A组仔猪肠道各
段的绒毛高度显著增加,试验B组十二指肠,空肠
部位绒毛高度显著增大(P<0.05)。
绒毛高度隐窝深度比值与对照C组相比7d时
试验A组仔猪肠道各段的绒毛高度隐窝深度比值
显著增加(P<0.05),试验B组在十二指肠和回肠
显著增大(P<0.05),14d时试验A组绒毛高度隐
窝比值差异不明显(P>0.05),试验B组绒毛高度
隐窝比值差异不明显(P>0.05),21d时试验A组
绒毛高度隐窝比值在十二指肠,回肠部位显著增大
(P<0.05),试验B组绒毛高度比隐窝深度在十二
指肠显著增加(P<0.05);与对照D组相比7d时
试验A组仔猪肠道各段绒毛高度隐窝深度比值显
著增大(P<0.05),试验B组十二指肠,回肠处绒毛
高度隐窝深度比值显著增大(P<0.05),14d时试
表2 峨眉雪胆微丸对断奶仔猪肠道形态的影响
Table 2 Effects of Emei hemsleyapelets additives on intestinal morphology
时间
Time/d
项目
Item/μm
试验组Test
A组 Group A  B组 Group B
对照组Control
C组 Group C  D组 Group D
十二指肠 344.69±56.42a 318.92±58.10b  320.69±61.97b  275.80±45.86c
绒毛高度(VH) 空肠   297.57±68.76a 276.81±31.41b  253.13±96.22c  237.32±41.50c
回肠   296.90±64.22a 259.16±27.64b  264.71±40.75b  251.01±39.02b
十二指肠 180.94±50.16  185.29±35.31  192.13±43.75  167.53±21.14
7 隐窝深度(CD) 空肠   125.41±43.35  130.50±36.02  143.09±22.18  118.65±17.55
回肠   124.62±32.83  127.45±32.83  155.95±44.01  145.39±20.71
绒毛高度/ 十二指肠  1.91±0.30a  1.78±0.52b  1.67±0.37c  1.65±0.20c
隐窝深度 空肠    2.38±0.43a  2.12±1.44ab  1.76±0.36b  2.01±0.53b
(V/C) 回肠    2.37±0.58a  2.04±0.87b  1.70±0.50c  1.73±0.30c
十二指肠 405.11±20.59a 398.67±42.30a 378.45±64.02b  336.02±93.66c
绒毛高度(VH) 空肠   370.03±56.15a 304.44±49.25b  336.29±45.14c  301.17±54.64b
回肠   226.75±46.81a 265.93±25.69b  252.44±86.41b  240.82±39.79ab
十二指肠 242.01±49.93  251.50±30.57  199.42±43.33  214.78±46.23
14 隐窝深度(CD) 空肠   151.98±34.13  165.87±38.04  176.92±28.23  167.53±36.80
回肠   109.58±30.49  159.20±65.07  119.31±26.61  162.24±17.96
绒毛高度/ 十二指肠  1.72±0.30ab  1.61±0.30a  1.94±0.32ab  1.55±0.15a
隐窝深度 空肠    2.54±1.90a  1.90±0.42b  1.95±0.47ab  1.82±0.17b
(V/C) 回肠    2.17±0.58a  1.93±0.62ab  2.16±0.83a  1.50±0.29b
十二指肠 475.03±63.09a 466.90±34.45a 411.63±72.25b  371.09±91.29c
绒毛高度(VH) 空肠   363.22±61.88a 314.76±57.87b  338.14±28.38b  267.20±59.94c
回肠   321.05±61.03a 276.75±64.66b  243.80±30.13b  251.12±65.38b
十二指肠 234.80±47.80  219.09±48.05  254.15±64.85  243.21±30.98
21 隐窝深度(CD) 空肠   144.08±21.07  134.90±17.21  128.75±35.77  132.14±22.13
回肠   117.49±35.27  135.55±16.79  120.95±25.60  155.42±46.93
绒毛高度/ 十二指肠  2.09±0.46a  2.21±0.40a  1.67±0.33b  1.52±0.83b
隐窝深度 空肠    2.57±0.55a  2.38±0.58ab  2.76±0.58ac  2.12±0.72b
(V/C) 回肠    2.97±1.06a  2.00±0.39b  2.11±0.57b  1.66±0.32c
   注:同一行比较,上标字母相同表示差异不显著(P>0.05),小写字母不同者表示差异显著(P<0.05)。下同。
 Note:The data with the same letter in a row indicate no significance(P>0.05),the data with different superscripts
of letters indicate significance at 0.05level(P<0.05).The same folows.
102
    四川农业大学学报 第33卷
  A:0.025%峨眉雪胆微丸组;B:0.05%峨眉雪胆微丸组;C:空白对照组;D:硫酸粘杆菌素对照组(图2、
图3、图4同)。
A:0.025%Emei hemsleyapelets;B:0.05%Emei hemsleyapelets;C:control group;D:co-
listin sulfate group.The same as fig.2,3,4.
图1 试验第21天,各组仔猪十二指肠绒毛形态(HE,100×)
Figure 1 Vilus morphology of duodenum from piglets of different groups at 21th day(HE,100×)
图2 试验第21天,各组仔猪空肠绒毛形态(HE,100×)
Figure 2 Vilus morphology of jejunum from piglets of different groups at 21th day(HE,100×)
202
第2期 马双昆,等:峨眉雪胆微丸对断奶仔猪肠道形态及消化酶活性的影响    
图3 试验第21天,各组仔猪回肠绒毛形态(HE,100×)
Figure 3 Vilus morphology of ileum from piglets of different groups at 21th day(HE,100×)
验A组在空肠回肠处显著增加(P>0.05),试验B
组差异不明显(P>0.05),21d时试验A组仔猪肠
道各段显著增加,试验B组在十二指肠回肠部位显
著增加(P<0.05)。通过肠道组织切片观察,试验
A组及试验B组绒毛较完整。
2.2 断奶仔猪消化酶活性
由表3和图4可见,与对照组相比,饲粮中添加
0.025%峨眉雪胆微丸的试验A组与对照C组相比
第21天仔猪淀粉酶,脂肪酶,胰蛋白酶的活性显著
提高(P<0.05),与对照D组相比第21天仔猪淀粉
酶活性差异显著(P<0.05);饲粮中添加0.05%峨
眉雪胆微丸的试验B组与对照C组相比第21天仔
猪淀粉酶和胰蛋白酶活性显著提高(P<0.05),与
对照D组相比第21天淀粉酶活性差异不显著(P>
0.05),脂肪酶和胰蛋白酶活性显著降低(P<
0.05)。
实验结果表明饲粮中添加峨眉雪胆微丸相比于
添加抗生素试验仔猪的肠道绒毛高度及隐窝深度及
消化酶活性有所改善,且添加0.025%组效果较好。
表3 峨眉雪胆微丸对空肠消化酶活性的影响
Table 3 Effect of Emei Hemsleya Pelets on digestive enzymes activities in piglets
时间
Time/d
项目
Item
试验组Test
A组Group A  B组Group B
对照组Control
C组Group C  D组Group D
淀粉酶/(U·dL-1) 1.661a 2.432ab   3.205 6b  1.896a
7 脂肪酶/(U·g-1) 276.709a 103.621b  149.602b  271.112a
胰蛋白酶/(U·mg-1) 81 984.881a 111 801.417b  85 975.367a 100 273.469b
淀粉酶/(U·dL-1) 2.348  2.520 3  1.635  3.100
14 脂肪酶/(U·g-1) 200.612a 72.884b  159.326a 59.588b
胰蛋白酶/(U·mg-1) 73 103.908a 36 551.954b  92 196.646a 142 647.199c
淀粉酶/(U·dL-1) 3.221a 2.518b  1.942c  2.433b
21 脂肪酶/(U·g-1) 223.203a 64.438b  59.128b  213.842a
胰蛋白酶/(U·mg-1) 159 108.649a 54 570.246b  27 205.127b  146 261.385a
302
    四川农业大学学报 第33卷
图4 各组仔猪空肠消化酶活性
Figure 4 Digestive enzyme activity of jejunum
from piglets of different groups
3 分析讨论
小肠是仔猪吸收养分的主要场所,小肠绒毛具
有吸收功能,小肠隐窝具有分泌消化酶的功能。小
肠绒毛由黏膜上皮和固有层构成,小肠隐窝是由绒
毛基部的上皮陷入固有层内形成管状腺体,肠绒毛
与隐窝深度比值反映了小肠的功能状况[12]。绒毛
上皮细胞是消化吸收的功能细胞,微绒毛可以使细
胞表面积至少增加20倍,且对消化酶的活性和营养
物质吸收非常有利[13]。动物养分消化吸收和正常
生长的生理学基础是小肠黏膜结构的良好状态。小
肠的绒毛高度、隐窝深度、绒毛高度与隐窝深度比值
(V/C)是衡量小肠消化吸收功能的重要指标[14]。
张振斌等[15]报道,不同日龄断奶的应激不同程度地
降低了仔猪胰腺和空肠内容物中胰蛋白酶、淀粉酶
和脂肪酶活性。肠绒毛结构和功能的完善可以促进
消化酶活性的提高。
本试验所用峨眉雪胆微丸其主要成分为中药峨
眉雪胆,有效成分主要是是葫芦素和齐墩果烷两大
类三萜皂苷[16]和雪胆双糖以及21种微量元素[17]。
葫芦素类主要为雪胆甲素(含量高达6.018mg/
g[18])和雪胆乙素。峨眉雪胆微丸能够增加小肠绒
毛长度,降低小肠隐窝深度可能有以下几方面的原
因:①大量研究证实[19-20]寡乳糖、寡果糖、寡半乳糖、
甘露寡糖能够调节畜禽肠道微生物菌群,抑制肠道
有害微生物大肠杆菌,促进有益菌乳酸菌,双歧杆菌
的增长。②文献报道[21]雪胆具有广谱抗菌作用,雪
胆皂苷和雪胆苦味素对溶血性链球菌、金黄色葡萄
球菌、福氏痢疾杆菌、大肠杆菌等都有不同程度的抗
菌作用,较同浓度的氯霉素强。所以推测峨眉雪胆
微丸经崩解后形成的雪胆双糖,雪胆皂苷及苦味素
在肠道内也可能具有抑制有害微生物的繁殖,促进
有益菌的生长发育,调节肠道生态平衡,减少有害微
生物产生的毒素对肠道绒毛的破坏,促进肠绒毛的
发育的作用,最终提高断奶仔猪的生产性能。
4 结论
饲粮中添加峨眉雪胆微丸能够促进小肠黏膜的
发育,提高断奶应激仔猪脂肪酶、蛋白酶、淀粉酶的
活性,增强仔猪的消化能力,缓解断奶应激给仔猪带
来的不良影响,其中以0.025%组的效果较好。
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(本文审稿:吴福忠;责任编辑:秦碧雯;英文编辑:刘益平)
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(本文审稿:彭 西;责任编辑:秦碧雯;英文编辑:刘益平)
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