全 文 ：表 7　桑叶片对小鼠抗疲劳作用的影响 ( x-± s)
组别 剂量 游泳时间 T /min
对照组 　　　　 - 　　　 1. 88± 0. 71
桑叶片 　　 4. 0 g· kg-1 2. 82± 0. 941)
2. 0 g· kg-1 3. 07± 0. 952)
1. 0 g· kg-1 2. 68± 0. 881)
复方丹参 2. 5片 2. 21± 1. 13
　　注:与对照组比较: 1) P < 0. 05, 2) P < 0. 01; n= 10
实验结果表明 ,桑叶片可明显提高小鼠体内碳廓清速率及血
清溶血素 ,提示桑叶片具有增强机体体液免疫和非特异性免疫机
能的作用 ,有利于增强机体对外界环境的抵抗能力。同时 ,对角叉
菜胶致大鼠足肿胀及醋酸引起的小鼠腹腔毛细血管通透性具有
较强的抑制作用 ,并对大鼠后肢急性淋巴水肿具有较好的治疗作
用 ,表明桑叶片具有较强的抗炎消肿作用。实验结果还表明 ,连续
给药 7d,桑叶片可显著延长常压缺氧条件下小鼠的存活时间和
小鼠的游泳时间 ,降低耗氧量 ,说明桑叶片可提高机体对缺氧的
适应能力 ,延缓疲劳的产生 ,增加运动耐力。 在抗疲劳作用方面 ,
桑叶片 2g /kg作用要强于 4g /kg和 1g /kg;而在耐缺氧方面 ,则
是桑叶片 4g /kg最强 ,具有剂量依赖性特点。综上所述 ,桑叶片具
有增加免疫力和抗炎消肿作用 ,提高机体运动耐力 ,增强机体抗
病能力 ,为桑叶片临床应用提供了药理学研究依据。
参考文献:
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收稿日期: 2003-06-03;　修订日期: 2003-09-12
基金项目: 吉林省延边朝鲜族自治州科技发展规划项目 ( No.
2003YBKJ027)
作者简介:张学武 ( 1973-) ,男 (汉族 ) ,吉林大安人 ,现任延边大学医学院
讲师 ,硕士学位 ,主要从事肝脏生物化学研究 .
珍珠梅提取物对肝癌初期大鼠血清
一氧化氮及一氧化氮合成酶的影响
张学武 , 孙　权 , 张良和 , 金　明
(延边大学医学院 ,吉林 延吉　 133000)
摘要: 目的: 探讨珍珠梅乙酸乙酯提取物在大鼠肝脏化学致癌初期对一氧化氮 ( nitric oxide, NO )及一氧化氮合成酶
( nitric oxide synthase, NOS)的影响。方法:按略改良 Solt- Farber氏方法制作大鼠肝脏癌前病变模型 ,用珍珠梅提取物饲
养大鼠 6周后处死 ,取肝脏 ,用比色分析法检测 NO, NOS的含量。结果: 珍珠梅给药组血清 NO含量 (μmo l/ L)明显低于癌
前病变模型组 (P < 0. 05) ;草苁蓉给药组血清 NOS活力 ( U /ml)明显低于癌前病变模型组 (P < 0. 05)。 结论: 珍珠梅提取
物可降低 NO, NOS水平 ,而这可能是其抗致癌作用机理之一。
关键词: 珍珠梅 ;　一氧化氮 ;　一氧化氮合成酶
中图分类号: R285. 5　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2003) 12-0719-02
Effect of Sorbaria sorbifolia Extract on DEN - induced Preneoplastic Hepatic of NO and
NOS in Rats
ZHANG Xue-wu, SUN Quan, ZHANG Liang-he, JIN M ing
(Department of Biochemistry & Molecular Biolog y ,College of Medicine, Yanbian University Yanji , J ilin,
133000, China)
Abstract: Objective: To study the inhibito ry effec t of Sorbaria sorbif olia on DEN- induced preneoplastic hepa tic nitric oxide
and nitric oxide synthase in rats. Methods: Hepa tic pr eneoplastic lesions in rats w ere induced by modified Solt - Farber
protocol and the rats were killed after fed with the ethyl ester ex tract of Sorbaria sorbifolia for six weeks, tumor supplied
g roup of facto r was detected by using the colo rimetric method. Results: The serum NO content (μmol / L) in treat g roup w as
lower than that of the model group. The serum NOS ac tiv ity in treat g roup was low er than tha t of the model g roup.
Conclusion: Th e Sorbaria sorbifolia can r educe th e content of NO and activ ity of NOS, and it may be one of the anti-
ca rcinogenic mechanisms of Sorbaria sorbif olia.
Key words: Sorbaria sorbifolia;　 Nitric ox ide;　 Nit ric oxide synthase
　　珍珠梅 Sorbaria sorbifolia属蔷薇科植物 ,又称“山高粱”“八 木条” ,广泛分布于云南、贵州、四川、湖北、甘肃、宁夏及东北 ,有
活血化瘀 ,消肿止痛 ,治骨折及跌打损伤的作用 [1 ]。以前的实验研
究发现珍珠梅具有保肝 [2 ]、清除自由基 [3]、对小鼠 S180肉瘤有抑制
作用 [4]。本次实验研究珍珠梅醋酸乙酯提取物在化学致癌初期对
一氧化氮 ( NO)、一氧化氮合成酶 ( NOS)的影响。
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LISHIZHEN M EDICINE AND M ATERIA M EDICA RESEARCH 2003 VOL. 14 NO. 12 时珍国医国药 2003年第 14卷第 12期
1　材料与方法
1. 1　材料
1. 1. 1　药物 珍珠梅茎、叶、花 ,采集于吉林省延吉市市郊。 醋酸
乙酯提取物: 醋酸乙酯分 3次浸泡珍珠梅 ,温度为 40℃ , 12 h /次 ,
合并 3次滤液 ,用旋转蒸发器减压浓缩 ,获珍珠梅醋酸乙酯提取
物浸膏 ( 1 g珍珠梅有效成分相当于 33. 3 g生药 )。
1. 1. 2　试剂 NO、 NOS试剂盒购自南京建成生物技术研究所 ,
其他试剂均为国产分析纯。
1. 1. 3　动物 Wistar大鼠 ,雄性 ,体重为 140～ 160 g ,由延边大学
医学院动物科提供。
1. 2　方法
1. 2. 1　造模、给药及检测方法 将 36只 Wistar雄性大鼠分为
A, B, C 3个组 ,按尹宗柱等报道过的略改良的 Solt- Fa rber氏方
法 [5]制作大鼠肝脏癌前病变模型。 A组为正常对照组 ,以生理盐
水 ( 0. 4 ml)代替二乙基亚硝胺腹腔注射 , 3周后肝脏部分切除 ,
给予标准粉末饲料 ; B组为癌前病变模型组 ,大鼠腹腔注射二乙
基亚硝胺 ( 200 mg /kg ) , 2周后开始在饲料中添加乙酰氨基芴
( 0. 08 g /kg ) ,注射二乙基亚硝胺 3周后进行肝脏部分切除术 ; C
组为给药组 ,大鼠腹腔注射二乙基亚硝胺 , 2周后开始在饲料中
添加乙酰氨基芴 ( 0. 08 g /kg )及珍珠梅 ( 200 mg /kg ) ,注射二乙基
亚硝胺 3周后进行肝脏部分切除术 ( PH)。 3个组的大鼠共饲养 8
周。 8周后将大鼠处死 ,取血清 ,用比色分析法检测 NO、 NOS,见
图 1。
group
group
group C
B
A
Sacrif icePH5 DEN ip
+ 0. 008% AAF+ Sorbaria sorbifolia 6. 6 g /kg
+ 0. 008% AAF
Sacrif ice5 DEN ip PH
Sacrif ice5 Saline ip PH
weeks0 2 3 8
图 1　造模流程图
1. 2. 2　统计学处理 应用 SPSS- 10. 0统计软件进行方差分析。
2　结果
2. 1　 NO含量的测定结果 表 1所示在肝脏化学致癌初期大鼠
血清 NO含量显著高于正常组 (P < 0. 01) ;给药组血清 NO含量
显著低于化学致癌模型组 (P < 0. 01) 而与正常对照组相比无统
计学差异。 这说明: DEN、 AAF诱发的大鼠肝脏癌前病变时血清
NO含量升高 ,而珍珠梅提取物可以对癌前病变导致的 NO含量
升高有明显的降低作用。
表 1　珍珠梅对大鼠肝脏化学致癌初期血清 NO、NOS的影响
组别 CNO /U· ml-1 CNOS /μmol· L-1
正常对照组　 　　 129. 7± 38. 4* 　　 32. 3± 2. 54*
癌前病变组　 183. 9± 12. 4 44. 7± 2. 97
珍珠梅给药组 137. 6± 11. 2* 35. 2± 2. 35*
　　与模型组比较* P < 0. 01
2. 2　 NOS活性的测定结果 表中所示在肝脏化学致癌初期大鼠
血清 NOS活性显著高于正常对照组 (P < 0. 01) ;珍珠梅给药组
血清 NOS活性均显著低于化学致癌模型组 (P < 0. 01)而与正常
对照组相比无统计学差异。说明: DEN、 AAF诱发的大鼠肝脏癌
前病变时血清 NOS活性升高 , 而珍珠梅提取物可以对癌前病变
导致的 NOS活性升高有明显的降低作用。
3　讨论
一氧化氮是生物体内一种结构简单的自由基 ,近年来研究发
现 NO对肿瘤的生长具有双重作用 [6～ 8]。本实验中观察到在大鼠
肝脏化学致癌初期 NO含量和 NOS活性均高于正常对照组。 大
鼠肝脏化学致癌初期 NOS活力和 NO含量升高的可能是由于
DEN、 AAF启动细胞中的基因转录 ,使 OS的合成增加 ,从而促
进 NO的产生。
目前 ,国内外有关 NO和 NOS的实验研究中 ,普遍认为 NO
是通过以下机制引起癌变 [9]: ( 1) NO持续高浓度地存在于细胞
中 ,则可损伤 DNA并导致基因突变 ,最终形成癌肿。 ( 2) NO通过
增加血管通透性来增加和维持肿瘤的血供 ,并可刺激肿瘤的血
供 ,减少血管的紧张性而促进肿瘤细胞生长 ,这种作用是通过细
胞自身的环磷酸鸟苷 ( cGM P )引起的 ,而且可使邻近细胞的
cGM P升高 , cGM P作为细胞内信号传递分子可以参与一些蛋白
酶的活化和蛋白质的磷酸化 ,由此产生生物学效应。 ( 3) NO作为
信号分子 ,介导肌动蛋白的解聚 ,抑制单核细胞的变形、游走、浸
润和播散 ,有利于肿瘤的生长。
本实验中所用的珍珠梅醋酸乙酯提取物显著降低肝脏癌前
病变大鼠 NOS活性和 NO含量 ,可能是通过抑制细胞中的基因
转录及减少环境中诱导剂而达到的 ,这提示珍珠梅提取物有助于
肿瘤的防治。
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时珍国医国药 2003年第 14卷第 12期 LISHIZHEN MEDICINE AND MAT ERIA M EDICA RESEARCH 2003 VO L. 14 NO. 12