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木鳖子制霜前后的体外抑菌作用研究



全 文 :— 33 —现代中药研究与实践2009年第22卷第6期Research and Practice of Chinese Medicines
其原理是活细胞在其生长和增殖过程中,线粒体
中的琥珀酸脱氢酶能够将黄绿色的 MTT 降解成紫
蓝色的化合物甲臜沉积于细胞中,而死亡细胞则
不能代谢 MTT 成甲臜。甲臜溶解后可被分光光度
仪测试,量化指标为 OD 值,其含量与活细胞的
增殖程度成正相关,从而间接反映细胞的增殖状
况。本实验就是利用该原理测定不同的蜂房提取
液对胃癌细胞 BGC823 增殖的抑制作用。
针对文献中蜂房抗肿瘤活性部位主要集中在
挥发油、小分子的黄酮、酚酸和酚酸酯类成分、
大分子的蜂房蛋白的报道,本研究分别采用石油
醚提取蜂房挥发油部位,用 95% 乙醇提取小分子
的黄酮、酚酸和酚酸酯类成分,用水提取其中的
蛋白等大分子物质,考虑到蛋白可能会受乙醇、
或加热因素的影响,先后用乙醇提取后水浸提、
温水浸提、沸水煎煮提取的方法得到 C、D、E 提
取液。结果显示,蜂房各活性部位均显示出一定
的抗肿瘤作用,但作用最强的部位应该在乙醇提
取物中,其高、中剂量的抗肿瘤活性明显优于其
它溶剂提取物;三种不同方法得到的水提取液 C、
D、E 对胃癌细胞 BGC823 的抑制率并无显著差
异,表明其中水溶性活性成分对乙醇、或加热因
素的影响并不大;对于蜂房石油醚提取物中挥发
油,试验发现仅有高剂量有抑制作用,而中、低
剂量反而促进增殖作用,显示其抗肿瘤作用不明
确,此结果与早期的文献推测其中的饱和脂肪酸
和不饱和脂肪酸作为抗肿瘤活性成分的说法并不
吻合。根据蜂房活性部位对胃癌细胞 BGC823 增
殖实验的结果,可以认为进一步筛选蜂房的抗肿
瘤活性成分应从 95% 乙醇提取物中含有的黄酮、
酚酸和酚酸酯类化合物着手分离。
参考文献
[1] 李 彦,贾恩礼,栾 琳. 蜂房药理作用研究进展[J]. 中医药信息,2004,
21(5):21.
[2] 朱晏伟,高 虹,姜维洁 ,等 . 五味活血化瘀中药对 SPC-A-1 细胞凋亡
影响的研究 [J]. 中医药学刊,2004,22(7):1268.
[3] 芦志红,张圣明,李香群,等 . 中药露蜂房醇提取物对人红白血病
K562 细胞的生长抑制及凋亡诱导作用 [J]. 解剖学杂志,2004,27(1):
18.
[4] 辛先贵,张圣明,时 彦,等 . 中药露蜂房蛋白对人红白血病 K562 细胞
增殖的影响 [J]. 解剖学报,2006,37(1):44.
[5] 赵维诚,肖 伟,于德泉,等. 蜂房抗肿瘤成分的提取及分析检测[J]. 实
用肿瘤学杂志,2000, 14(1):14.
[6] 徐叔云,卞如濂,陈 修 主编 . 药理实验方法学(第三版)[M]. 北京:
人民卫生出版社, 2001.1785.
木鳖子制霜前后的体外抑菌作用研究
路俊仙 1,孟 蔚 2,张才波 3,崔 璐 4,林慧彬 1,林建强 5*,林建群 5*
(1. 山东省中医药研究院,山东 济南 250014 ;2. 山东省疾病预防控制中心 , 山东 济南 250014 ;
3. 山东教育学院,山东 济南 250013 ;4. 山东中医药大学,山东 济南 250014 ;
5. 山东大学生命科学院,山东 济南 250100)
摘要:目的 比较木鳖子及其制霜品的体外抑菌作用,为临床用药提供依据。方法 用K-B 纸片扩散
法,考查对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、绿脓杆菌的抑菌作用。结果 木鳖子及其霜对白色
念珠菌作用明显,对大肠杆菌及绿脓杆菌作用不明显。其中,木鳖子皂苷、含油10%的霜及含油20%的霜
抑菌效果较好。结论 木鳖子制霜后抑菌作用增强。
关键词: 木鳖子;木鳖子霜;体外抑菌
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2009)06-0033-03
收稿日期:2009-03-17
基金课题:为国家科技部“十一五”支撑课题(课题编号:2006BAI09B06-05)。
*通讯作者:林建强, Tel: 0531-88365218,E-mail: Jianqianglin@hotmail.com; 林建群, Tel: 0531-88364429,E-mail: Jianqunlin@sdu.edu.cn
Study on the Bacteriostasis in vitro by pre- and post Processed Seed of Momordica
cochinchinesis
LU Jun-xian1, MENG Wei2, CHANG Cai-bo3,CUI Lu4, LIN Hui-bin1, LIN Jian-qiang5, LIN Jian-qun5
(1.Shandong Institute of TCM, Jinan 250014, China; 2.Shandong Center for Disease Control and Prevention,
Jinan 250014, China; 3.Shandong Institute of Education, Jinan 250013, China; 4.Shandong University of TCM,
Jinan 250014, China; 5.College of Life Sciences, Shandong University, Jinan 250100, China)
DOI:10.13728/j.1673-6427.2009.06.016
— 34 — 现代中药研究与实践2009年第22卷第6期Research and Practice of Chinese Medicines
木鳖子为葫芦科植物木鳖 Momordica cochinchinensis
(Lour. ) Spreng. 的干燥成熟种子 , 别名漏苓子、藤桐
子、木鳖。木鳖子性凉 , 味苦 , 微甘,有毒;入肝、脾、
胃经。功能为散结消肿,攻毒疗疮 [1,2]。木鳖子在临床
上一般为外用 , 如取其种仁治疗脓性指头炎 , 与醋研
磨治疗扁平疣、痔疮,纳脐治疗小儿泄泻 , 与碘酊研
磨为糊外用治疗白癜风、治癣及治疗乳腺增生等;内
服制霜入丸散 , 如小金丹治疗肺癌咯血 , 有报道内服
可以抗肝纤维化等 [3]。本研究对不同含油量的木鳖子
霜以及原药材的体外抑菌作用进行了比较,旨在探讨
木鳖子的炮制机理,并为进一步开发应用提供依据。
1 试验材料
1.1 木鳖子及样品制备 木鳖子药材购于济南漱玉药
材公司 , 经山东省中医药研究院林慧彬研究员鉴定
为葫芦科植物木鳖 Momordica cochinchinensis (Lour.
)Spreng. 的干燥成熟种子。采用制霜机将木鳖子分别
制备成含油 10%、20%、30%的木鳖子霜,并采用
索氏提取法制备木鳖子纯霜,用正丁醇法提取木鳖子
总皂苷。
1.2 供试菌种及培菌方法 金黄色葡萄球菌 (ATCC
6538) 第 6 代;大肠杆菌 (8099) 第 6 代;白色念珠菌
(ATCC 10231) 第 4 代;绿脓杆菌(ATCC15442)第
5 代。营养琼脂培养基(白色念珠菌用沙堡琼脂培养
基)平板 37℃温箱培养。以上菌株均由山东省疾病
预防控制中心提供。
2 方法
2.1 实验药液的制备 ① 水溶性提取物的制备:精
密称取过 60 目筛的木鳖子原药材粉末、纯霜、含油
量分别为 10%、20%、30%的木鳖子霜各 0.5 g,分
别置于三角瓶中,加入蒸馏水 10 mL,40℃超声 30
min,过滤,残渣中再加入 5 mL 蒸馏水,40 ℃超声
30 min,过滤,合并滤液。滤液水浴挥干,加入 1.5
mL 的蒸馏水充分溶解后备用。②脂溶性提取物的制
备:取含油 20%的木鳖子霜 1 g,用 15 mL 的氯仿和
乙酸乙酯超声两次,挥干后用 1.5 mL 的二甲基亚砜
溶解后备用。③木鳖子皂苷:取纯度为 3%的木鳖子
总皂苷 0.5 g,溶于 1.5 mL 蒸馏水中备用。
2.2 抑菌实验 将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白
色葡萄球菌、绿脓杆菌分别用无菌棉拭子蘸取浓度为
5×105cfu/mL~5×106cfu/mL 试验菌悬液涂抹三次到合
适的培养基表面 , 滴加待测液 10 μL 到直径 0.5 cm 的
滤纸片上,阴性对照滴加 10 μL 蒸馏水,把滤纸片贴
到培养基上 , 37 ℃培养 24 h 后观察抑菌环直径。
2.3 试验结果评价 精确测量抑菌环的直径,根据
抑菌环的大小对样品的抑菌效果进行评价,3 次重复
试验均有抑菌作用者 , 判定为合格。
3 结果
不同含油量的木鳖子霜、原药材及皂苷对白色
念球菌均有抑制作用,其中皂苷的抑菌效果最为有
效,含油 10%的木鳖子霜抑菌效果次之,结果见表 1、
图 1。
木鳖子药材对金黄色葡萄球菌有一定的抑制效
果,木鳖子药材、不同含油量的木鳖子霜及木鳖子皂
苷对大肠杆菌和绿脓杆菌的抑制作用均不明显。结果
见表 1。
1. 乙酸乙酯提取物 2. 含油量 10% 的霜 3. 含油量 20% 的霜
4. 含油量 30% 的霜 5. 原药材 6. 总皂苷
图 1 木鳖子制霜前后对白色念珠菌的抑制作用
Fig.1 Antibacterial activity of Candida albicans seed by pre- and post
processed
Abstract:Objective To study the antibacterial activity of raw medicinal material in vitro and different
oil content in the seed of Momordica cochinchinesis and provide a theoretical basis for clinical medication.
Methods K-B paper dispersion method was used to test the inhibition effect in different concentration solution
of defatted Momordicae seed powder. Results The raw material of Momordicae seed and its defatted powder had
obvious abilities of inhibiting the growth of Candida albicans, but it also showed that anything antibacterial effect
on Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa. Among constituents, the defatted powder of the oil content
of 10% and 20% and saponins extracted had better antibacterial activity, respectively. Conclusion After being
processed, the antibacterial activity of Momordicae seed was improved remarkably.
Key words: Momordica cochinchinesis; defatted Momordicae seed powder; growth inhibition in vitro
— 35 —现代中药研究与实践2009年第22卷第6期Research and Practice of Chinese Medicines
结果表明,木鳖子霜的乙酸乙酯和氯仿提取物
基本没有抑菌作用,木鳖子油的抑菌作用也不明显。
4 讨论
4.1 本研究主要对木鳖子制霜前后的抑菌作用进行
比较,结果显示木鳖子药材及霜的水提取物对白色念
珠菌生长有显著的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的生
长也具有一定的抑制作用,而对大肠杆菌和绿脓杆菌
抑制作用不明显,表明木鳖子水提物对真菌有较强的
生长抑制作用。
4.2 不同含油量的木鳖子霜的水提取物在抑菌效果
方面有一定差异,而且均比原药材的抑菌效果要强,
提示木鳖子制霜后抑菌作用增强。研究证实单纯的木
鳖子脂肪油抑菌作用不明显,20% 霜的乙酸乙酯和
氯仿提取物也基本没有抑菌作用,说明木鳖子中的抑
菌物质是水溶性的。
4.3 研究发现木鳖子皂苷的对白色念珠菌的抑菌作
用很强,提示木鳖子的抑菌成分与其皂苷有相关性。
本研究结果对进一步阐明木鳖子制霜的机理,揭示抑
菌的物质基础,指导临床合理用药提供了理论依据。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中国药典(一部) [S].北京:化学工业出版社,2005.44.
[2] 王秀琴 , 白宗利 , 贾天柱 . 木鳖子研究进展 [J]. 辽宁中医药大学学
报 ,2007,9(2):56-57.
[3] 牛玉东,牛玉红,王亚雄.中药抗肝纤维化60例疗效观察[J].陕西中
医 ,2003,24(1):31.
表 1 木鳖子药材、皂苷及其制霜品抑菌作用比较
Tab.1 Comparison of antibacterial activity in the raw material, saponins
extracted and defatted powder of Momordicae seed
序号
1
2
3
4
5
6
7
8
样品
含油10%霜水提液
含油20%霜水提液
含油30%霜水提液
原药材水提液
皂苷水液
木鳖子油
含油20%霜乙酸乙酯提取液
含油20%霜氯仿提取液
白色念珠菌
12~13
11~12
10~11
8~9
15~17
-
-
-
大肠杆菌
-
-
-
-
-
-
-
-
金黄色葡
萄球菌
-
-
-
7~8
-
-
-
-
绿脓杆菌
-
-
-
-
-
-
-
-
注:抑菌作用以抑菌环(mm)表示;“-”表示无抑菌作用。
北苍术挥发油不同提取工艺及药效学研究
张兴德,李俊松,吕游春
( 南京中医药大学药学院,江苏 南京 210046)
摘要:目的 考察水蒸气蒸馏法和超临界流体萃取法对提取苍术挥发油得率的影响,并比较两者的
药效。方法 通过优化两者的提取参数,确定最佳提取工艺,并研究两者提取所得挥发油的小鼠肠推进作
用。结果 超临界流体萃取法提取效率高,且所得挥发油药效与水蒸气蒸馏法所得一致。结论 超临界流
体萃取法可用于提取苍术挥发油。
关键词:北苍术; 水蒸气蒸馏法 ; 超临界流体萃取法
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1673-6427(2009)06-0035-03
Study on Pharmacodynamic and Extraction Technology of the Essential oil of
Atractylodes lancea
ZHANG Xing-de, LI Jun-song, LV You-chun
(College of Pharmacy, Nanjing University of Chinese medicine, Nanjing 210046, China)
Abstract:Objective To compare the two different methods for the extraction rate of essential oil from
Atractylodes lancea (Thunb). Methods The essential oil of A. lancea was extracted by supercritical-CO2
fl uid (SF-CO2) and by steam distillation (SD) separately, and was compared effects of the both. Results The
pharmacodynamic was the same for the essential oil of A. lancea by SF-CO2 extraction and by steam distillation.
Conclusion SF-CO2 can be used for extraction of the essential oil of A. lancea.
Key words: Atractylodes lancea (Thunb); steam distillation; supercritical-CO2 fl uid extraction
收稿日期:2009-04-08