全 文 ：收稿日期：２０１５－１１－２８
基金项目：国家自然科学基金项目（Ｎｏ．８１３４１１４１）；湖北省卫生厅项目（Ｎｏ．２０１１ＪＸ５Ｃ２１）
通信作者：石孟琼（１９７１－），女，实验师，主要从事中药药理研究．Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈｍｑ０２１２＠１２６．ｃｏｍ
ＤＯＩ：１０．１３３９３／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ．１６７２－９４８Ｘ．２０１６．０３．０２３
珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用治疗大鼠肝纤维化作用研究
张继红１　王海燕１　石孟琼２　刘　雄１　周继刚１　谈燕清１　罗　涛１　李浩然１　田培琳１
（１．三峡大学 中医临床医学院 ＆ 宜昌市中医医院，湖北 宜昌　４４３０００；２．三峡大学 医学院，湖北 宜昌　
４４３００２）
摘要：观察珠子参皂苷与骨髓干细胞（ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｓ，ＢＭＳＣｓ）联用对四氯化碳（ＣＣｌ４）致
大鼠肝纤维化损伤的治疗作用．实验大鼠腹腔注射５０％ＣＣｌ４（２和１ｍＬ／ｋｇ／周），连续８周制备大
鼠肝纤维化模型，注射２周后灌胃给予珠子参皂苷（２００ｍｇ／ｋｇ），正常组和模型组灌胃给予等体积
的０．５％羧甲基纤维素钠溶液，每天１次，共８周；在第５周，其中的珠子参皂苷组大鼠尾静脉注射
５×１０６／０．５ｍＬ／只Ｄｉｌ标记ＢＭＳＣｓ，７ｄ后，用荧光显微镜检测ＢＭＳＣｓ向大鼠肝组织募集情况；８
周后取血清，检测谷丙转移酶（ＡＬＴ）、谷草转移酶（ＡＳＴ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、总蛋白（ＴＰ）、白蛋
白（ＡＬＢ）水平；检测肝组织羟脯氨酸（Ｈｙｐ）水平和病理学变化，计算纤维化分级、胶原纤维和网状
纤维面积比．结果表明珠子参皂苷可显著促进ＢＭＳＣｓ定向募集至肝脏受损部位，珠子参皂苷和其
与ＢＭＳＣｓ联用均可明显改善肝功能，降低血液中 ＡＬＰ、ＡＬＴ、ＡＳＴ水平，增加 ＴＰ、ＡＬＢ水平和
Ａ／Ｇ，降低肝纤维化分级、胶原纤维和网状纤维面积比及 Ｈｙｐ水平，改善肝脏组织形态学（Ｐ＜
０．０５或Ｐ＜０．０１），尤以珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用组效果最为显著．本研究为珠子参皂苷与
ＢＭＳＣｓ联合应用治疗肝纤维化损伤提供了实验依据．
关键词：珠子参皂苷；　肝纤维化；　骨髓干细胞
中图分类号：Ｒ２８２．７１　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７２－９４８Ｘ（２０１６）０３－０１０４－０４
Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌ　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍＲｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ　Ｃｏｍｂｉｎｅｄ
ｗｉｔｈ　ＢＭＳＣｓ　ｏｎ　Ｈｅｐａｔｉｃ　Ｆｉｂｒｏｓｉｓ　Ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４ｉｎ　Ｒａｔｓ
Ｚｈａｎｇ　Ｊｉｈｏｎｇ１　Ｗａｎｇ　Ｈａｉｙａｎ１　Ｓｈｉ　Ｍｅｎｇｑｉｏｎｇ２　Ｌｉｕ　Ｘｉｏｎｇ１　
Ｚｈｏｕ　Ｊｉｇａｎｇ１　Ｔａｎ　Ｙａｎｑｉｎｇ１　Ｌｕｏ　Ｔａｏ１　Ｌｉ　Ｈａｏｒａｎ１　Ｔｉａｎ　Ｐｅｉｌｉｎ１
（１．Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｉｎａ　Ｔｈｒｅｅ　Ｇｏｒｇｅｓ　Ｕｎｉｖ．，Ｙｉｃｈａｎｇ　４４３００２，Ｃｈｉｎａ；２．
Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｃｏｌｅｇｅ，Ｃｈｉｎａ　Ｔｈｒｅｅ　Ｇｏｒｇｅｓ　Ｕｎｉｖ．，Ｙｉｃｈａｎｇ　４４３００２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｈｅ　ａｉｍ　ｉｓ　ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍＲｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ
ｗｉｔｈ　ＢＭＳＣｓ　ｏｎ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ＣＣｌ４ｉｎ　ｒａｔｓ．Ｔｈｅ　ｒａｔ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｗａｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｉｎ－
ｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ＣＣｌ４．Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｗｅｅｋｓ，ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｗｅｒｅ　ｏｒａｌｙ　ｇｉｖｅｎ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍ
Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ（２００ｍｇ／ｋｇ），ｔｈｅ　ｒｅｓｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｏｒｍａｌ　ａｎｄ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｇｉｖｅｎ　ｅｑｕａｌ　ｖｏｌｕｍｅ　ｏｆ
０．５％ｓｏｄｉｕｍ　ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ　ｃｅｌｕｌｏｓｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ｏｎｃｅ　ａ　ｄａｙ　ｆｏｒ　８ｗｅｅｋｓ．Ｏｎ　ｔｈｅ　ｆｉｆｔｈ　ｗｅｅｋ，ｔｈｅ　ｏｎｅ　ｇｒｏｕｐ　ｏｆ
ｔｗｏ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｉｎｊｅｃｔｅｄ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｓ（ＢＭＳＣｓ）ｌａｂｅｌｅｄ　Ｄｉｌ　ｂｙ　ｔａｉｌ　ｖｅｉｎ，ａｎｄ　ｔｈｅ
ｆｌｏａｔａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＢＭＳＣｓ　ｉｎ　ｒａｔ　ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅｄ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ　ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｅｉｇｈｔｈ　ｄａｙ．Ｔｒｅａｔ－
ｍｅｎｔ　ｗｉｔｈ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍＲｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ　ｆｏｒ　ｅｉｇｈｔ　ｗｅｅｋｓ　ｌａｔｅｒ，ｓｅｒｕｍ　ｇｌｕｔａｍｉｃ－ｐｙｒｕｖｉｃ　ｔｒａｎｓａｍｉ－
ｎａｓｅ（ＡＬＴ），ｇｌｕｔａｍｉｃ－ｏｘａｌａｃｅｔｉｃ　ｔｒａｎｓａｍｉｎａｓｅ（ＡＳＴ），ａｌｋａｌｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ（ＡＬＰ），ｔｏｔａｌ　ｐｒｏｔｅｉｎ（ＴＰ），ａｌ－
第３８卷　第３期
２０１６年６月
三峡大学学报（自然科学版）
Ｊ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｔｈｒｅｅ　Ｇｏｒｇｅｓ　Ｕｎｉｖ．（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）
Ｖｏｌ．３８Ｎｏ．３
Ｊｕｎ．２０１６
ｂｕｍｉｎ（ＡＬＢ）ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ；Ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ（Ｈｙｐ）ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｎｄ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ｇｒａｄｉｎｇ　ｏｆ　ｌｉｖｅｒ　ｆｉ－
ｂｒｏｓｉｓ，ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｃｏｌａｇｅｎ　ｆｉｂｅｒ　ａｒｅａ　ａｎｄ　ｒｅｔｉｃｕｌａｒ　ｆｉｂｅｒ　ａｒｅａ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ＨＥ　ｓｔａｉｎｉｎｇ；Ｏｕｒ　ｓｔｕｄｙ　ｓｈｏｗｅｄ
ｔｈａｔ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍＲｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｐｒｏｍｏｔｅｄ　ｔｈｅ　ＢＭＳＣｓ　ｄｉｒｅｃｔｅｄ　ｒｅｃｒｕｉｔｍｅｎｔ　ｔｏ　ｔｈｅ
ｄａｍａｇｅｄ　ｐａｒｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ；Ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍＲｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ＢＭＳＣｓ　ｃｏｕｌｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ
ｉｍｐｒｏｖｅ　ｌｉｖｅｒ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ，ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｓｅｒｕｍ　ＡＬＰ，ＡＬＴ，ＡＳＴ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ，ｉｎｃｒｅａｓｅ　ＴＰ，ＡＬＢ　ｃｏｎｔｅｎｔｓ　ａｎｄ　Ａ／Ｇ　ｒａｔｉ－
ｏ，ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　Ｈｙｐ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｇｒａｄｉｎｇ　ｏｆ　ｌｉｖｅｒ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ，ｒａｔｉｏ　ｃｏｌａｇｅｎ　ｆｉｂｅｒ　ａｒｅａ　ａｎｄ　ｒｅｔｉｃｕｌａｒ　ｆｉｂｅｒ
ａｒｅａ，ｉｍｐｒｏｖｅ　ｌｉｖｅｒ　ｔｉｓｓｕｅ　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ（Ｐ＜０．０５ｏｒ　Ｐ＜０．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ），ｅｓｐｅｃｉａｌｙ　ｓａｐｏｎｉｎｓ　ｆｒｏｍＲｈｉｚｏ－
ｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ＢＭＳＣｓ　ｇｒｏｕｐ．Ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ａｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａ－
ｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ＢＭＳＣｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ　Ｍａｊｏｒｉｓ；　ｈｅｐａｔｉｃ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ；　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｓ
　　骨髓干细胞（ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｓ，ＢＭＳＣｓ）
移植在治疗肝纤维化等方面有了很大的进展，以其费
用低廉、取材方便、不存在免疫排斥反应等越来越受
到重视．近年来，其在临床应用越来越广泛．中药在治
疗肝纤维化损伤方面有其独到优势和特点，但关于中
医药对ＢＭＳＣｓ的影响，促进肝细胞再生方面的研究
尚十分匮乏．珠子参为五加科植物Ｒｈｉｚｏｍａ　Ｐａｎａｃｉｓ
ｍａｊｏｒｉｓ的根，为土家族传统的草药．近年来，研究发
现珠子参皂苷对ＣＣｌ４ 引起的大鼠肝纤维化损伤具有
保护作用及可促进ＢＭＳＣｓ分化为肝细胞［１］．本研究
在此基础上，观察珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用诱导
ＢＭＳＣｓ募集和对大鼠肝纤维化的治疗作用，为珠子
参皂苷与ＢＭＳＣｓ联合临床应用治疗肝纤维化提供
依据．
１　材料与方法
１．１　实验药物
珠子参药材购自神农架林区，经三峡大学生物技
术中心王玉兵博士鉴定为五加科人参属植物珠子参
的根状茎，珠子参皂苷皂苷含量为９２．６５％，制备参
照文献［２］．
１．２　实验动物
体质量为１８０～２２０ｇ的雄性Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ
（ＳＤ）资料大鼠购自武汉大学实验动物中心，许可证
号：ＳＣＸＫ（鄂）２００８－０００４．
１．３　主要试剂
ＤＭＥＭ培养基、胎牛血清：美国 Ｇｉｂｃｏ公司；胰
蛋白酶：美国Ｓｉｇｍａ公司；台盼蓝、氮唑溴盐（ＭＴＴ）：
二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）：美国 Ａｍｒｅｓｃｏ公司；Ｄｉｌ－ｄｙｅ：
ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司；ＣＣｌ４：成都市科龙化工试剂厂；橄榄
油：西班牙托雷斯和利贝雷斯公司；谷丙转移酶
（ＡＬＴ）、谷草转移酶（ＡＳＴ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、总
蛋白（ＴＰ）、白蛋白（ＡＬＢ）、羟脯氨酸（Ｈｙｐ）：南京建
成生物科技有限公司；其它试剂为市售分析纯．
１．４　实验仪器
Ｈ－７５００透射电子显微镜：日本日立公司；ＮＩ－
ＫＯＮ　ＴＥ２０００型荧光倒置显微镜：上海衡桥仪器有
限公司；Ｏｌｙｍｐｕｓ　ＫＸ４１型倒置显微镜、３１１１ＣＯ２ 培
养箱：美国 Ｔｈｅｒｍｏ；ＡＤＶＩＡ１２００全自动生化分析
仪，国西门子公司．
１．５　方法
１．５．１　ＢＭＳＣｓ分离与标记
在无菌条件下处死ＳＤ大鼠，取出股骨，用细胞
培养基（含１０．０％胎牛血清）冲洗骨髓腔，收集冲洗
液，离心收集沉淀后，加入预冷的 ＮＨ４Ｃｌ溶液，混匀
后，再次离心，收集沉淀，将其用细胞培养基（含
１０．０％胎牛血清）按２×１０６／ｍＬ密度接种到细胞培
养皿中，置于ＣＯ２ 培养箱中培养，４８ｈ后换液一次细
胞，当细胞单层长到８０％时，进行传代培养，然后用
５×１０６／０．５ｍＬ　Ｄｉｌ标记的ＢＭＳＣｓ后继续培养．
１．５．２　大鼠肝纤维化模型的建立及分组
将ＳＤ大鼠完全随机分为正常组、肝纤维化模型
组、ＢＭＳＣｓ组、珠子参皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组、ＢＭＳＣｓ＋
珠子参皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组５组．除空白组外，其余各
组大鼠分别按２和１ｍＬ／ｋｇ于周二和周五腹腔注射
５０％ＣＣｌ４ 橄榄油溶液，每周２次，空白组注射同体积
橄榄油．２周后，各注射ＣＣｌ４ 溶液组大鼠饮水中加入
苯巴比妥（３５０ｍｇ／Ｌ），同时各组大鼠灌胃给予对应的
药物，正常组和模型组灌胃给予同体积的生理盐水溶
液，每天给药１次，连续８周．在实验的第５周，ＢＭ－
ＳＣｓ组和ＢＭＳＣｓ＋珠子参皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组大鼠按
５×１０６／０．５ｍＬ／只尾静脉注射Ｄｉｌ标记的ＢＭＳＣｓ，其
他组注射同体积的生理盐水，然后各组继续给药．
１．５．３　ＢＭＳＣｓ在肝纤维化大鼠体内分布检测
在尾静脉注射Ｄｉｌ标记的ＢＭＳＣｓ　７ｄ后，随机选
取尾静脉注射 ＢＭＳＣｓ的模型组和珠子参皂苷与
ＢＭＳＣｓ联用组３只大鼠，处死后，迅速去除肝脏，进
５０１第３８卷　第３期　　　　　　　　　张继红，等　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用治疗大鼠肝纤维化作用研究
行冰冻切片后，用荧光显微镜观察ＢＭＳＣｓ在肝纤维
化组织中的分布情况．
１．５．４　大鼠体质量和肝指数的计算
分别称重给药前的体质量、每周的体质量；第８
周末，实验大鼠麻醉后腹腔主动脉取血分离血清，取
肝脏，并称量其质量，计算肝脏指数（ｇ／ｇ×１　０００）．
１．５．５　血液指标检测
分离大鼠血清后，用生化分析仪测定其中的
ＡＳＴ、ＡＬＢ、ＡＬＰ、ＡＬＴ和ＴＰ的含量及白蛋白／球蛋
白（Ａ／Ｇ）．
１．５．６　肝组织中 Ｈｙｐ检测
分别取各实验大鼠进行肝组织进行匀浆，测定
Ｈｙｐ含量．具体方法按照试剂盒的说明书进行．
１．５．７　肝组织形态学分析
肝组织经切片和 ＨＥ染色后，进行肝纤维化分
析．分析时按照改良Ｋｎｏｄｅｌ评分方法进行［３］．
１．６　统计学处理
实验结果用均数 ± 标准差 （ｘ±ｓ）表示，用
ＳＰＳＳ１５．０统计软件包进行结果分析在，以ｏｎｅ－ｗａｙ
ＡＮＯＶＡ进行多组间差异的比较，以Ｐ＜０．０５表示
差异具有统计学意义．
２　结　果
２．１　珠子参皂苷对ＢＭＳＣｓ向大鼠肝组织募集的影响
荧光显微镜观察发现，实验大鼠移植经Ｄｉｌ标记
ＢＭＳＣｓ　７ｄ后，模型组大鼠肝组织中仅有少量Ｄｉｌ标
记的ＢＭＳＣｓ（发红色荧光），而用珠子参皂苷治疗后，
大量Ｄｉｌ染色标记的ＢＭＳＣｓ．实验结果表明，珠子参
皂苷可显著促进ＢＭＳＣｓ定向募集至肝脏受损部位
（图１）．
图１　珠子参皂苷对ＢＭＳＣｓ向大鼠肝组织募集的影响
２．２　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用对大鼠体质量和肝
指数的影响
由表１可知，造模前和大鼠体质量无明显差异，
在用ＣＣｌ４ 造模后，其体重增长速度较正常组明显降
低（Ｐ＜０．０１）；用珠子参皂苷治疗后，体质量有明显
的改善；在肝重和肝脏指数方面，模型组均出现显著
升高；珠子参皂苷及与ＢＭＳＣｓ联用治疗后，均出现
了明显的降低，与模型组比较具有显著性差异（Ｐ＜
０．０５或Ｐ＜０．０１），尤以珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用
组效果最为显著．
表１　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用对肝纤维化模型大鼠体质量和肝指数的影响（ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别 实验前体质量／ｇ 实验后体质量／ｇ 肝脏质量／ｇ 肝脏指数／％
正常组 １９０．８±６．７　 ３７２．５±２３．６　 １２．１±１．２　 ３．０９±０．２４
模型组 １９２．４±５．７　 ３１９．２±２５．４＃＃ １６．４±０．８＃＃ ５．１５±０．３９＃＃
ＢＭＳＣｓ组 １８９．３±４．６　 ３３１．４±２１．７　 １４．８±０．９＊ ４．１３±０．３４＊
珠子参皂苷组 １９２．５±５．５　 ３３４．７±２０．５　 １３．２±１．１＊＊ ３．７８±０．４２＊＊
ＢＭＳＣｓ＋珠子参皂苷组 １９１．７±６．３　 ３４０．３±３１．２　 １２．５±０．７＊＊ ３．５３±０．３７＊＊
　　与正常组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１与模型组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１
２．３　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用对大鼠肝功能的影响
由表２可知，模型组大鼠血液中 ＡＬＴ、ＡＬＰ和
ＡＳＴ含量显著增加，ＡＬＢ、ＴＰ含量和Ａ／Ｇ值显著降
低，与正常组比较具有显著性差异（Ｐ＜０．０１）；珠子
参皂苷及与ＢＭＳＣｓ联用治疗后，ＡＬＴ、ＡＬＰ、ＡＳＴ、
ＡＬＢ、ＴＰ含量及Ａ／Ｇ值均得到改善，与模型组比较
具有显著性差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），其中以珠子
参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用组作用效果最为显著．
表２　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用对大鼠肝功能的影响（ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别 ＡＳＴ（ＩＵ／Ｌ） ＡＬＴ（ＩＵ／Ｌ） ＡＬＰ（ＩＵ／Ｌ） ＴＰ（ｍｇ／Ｌ） ＡＬＢ（ｍｇ／Ｌ） Ａ／Ｇ
正常组 ９．８±２．５　 １０．２±２．３　 ７９．８±４．９　 ７５．２±２．１　 ４２．６±１．３　 １．３４±０．０５
模型组 ５１．１±２．１＃＃ ４６．８±３．７＃＃ １９１．２±３．８＃＃ ４８．６±２．５＃＃ １９．７±１．５＃＃ ０．５６±０．０７＃＃
ＢＭＳＣｓ组 ３６．２±５．８＊ ３３．１±５．４＊＊ １２８．４±５．３＊＊ ５４．３±３．４＊ ２３．４±０．９＊＊ ０．７９±０．０９＊
珠子参皂苷组 ３１．９±６．７＊＊ ２７．３±４．９＊＊ １３５．１±６．９＊＊ ５９．７±２．８＊＊ ２８．７±１．４＊＊ ０．８１±０．０７＊＊
ＢＭＳＣｓ＋珠子参皂苷组 ２９．４±５．８＊＊ ２２．６±５．１＊＊ １２８．７±４．３＊＊ ６７．７±３．１＊＊ ３５．２±１．７＊＊ １．０２±０．０６＊＊
　　与正常组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１与模型组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１
６０１ 三 峡 大 学 学 报（自 然 科 学 版）　　　　　　　　　　　　　　２０１６年６月
２．４　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用对大鼠肝纤维化的
影响
如表３和图２所示，正常组肝索排列规则有序，
肝小叶结构清晰正常；模型组肝细胞弥漫性脂肪变
性，肝索排列杂乱，肝小叶可见炎性浸润，胶原纤维、
网状纤维沉积异常增多；珠子参皂苷及与ＢＭＳＣｓ联
用后，肝细胞炎性浸润和脂肪变性均显著降低，胶原
和网状纤维样变得到有效遏制．经改良Ｋｎｏｄｅｌ评分
分析：模型组肝纤维化、胶原纤维面积、网状纤维面积
比和 Ｈｙｐ水平均明显升高，与正常组比较具有显著
性差异（Ｐ＜０．０１）；珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用后，上
述异常改变均得到显著的逆转（Ｐ＜０．０５或 Ｐ＜
０．０１），其中以珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用组作用效
果最为明显．
表３　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用对大鼠肝纤维化的影响（ｘ±ｓ，ｎ＝８）
组别
肝纤维化分级／级
０　 　Ⅰ　 　Ⅱ　 　Ⅲ　 　Ⅳ
胶原纤维面积比
／％
网状纤维面积比
／％
Ｈｙｐ
／（μｇ·ｇ
－１）
正常组 ８　 ０　 ０　 ０　 ０　 ０．１１±０．０２　 １．１４±０．３１　 ２２５．４±４１．３
模型组 ０　 ０　 １　 ２　 ５　 １３．０１±０．８７＃＃ １４．２１±０．９８＃＃ ８１０．３±７９．２＃＃
ＢＭＳＣｓ组 ０　 ２　 ５　 １　 ０　 １０．１２±０．６５＊＊ １１．４８±０．７５＊ ４１０．６±６９．１＊＊
珠子参皂苷组 ０　 ４　 ４　 ０　 ０　 ９．０３±０．８４＊＊ ８．９７±０．８４＊＊ ３２３．５±５９．８＊＊
ＢＭＳＣｓ＋珠子参皂苷组 ０　 ５　 ３　 ０　 ０　 ６．９９±０．７６＊＊ ７．９３±０．６９＊＊ ３０９．７±５３．４＊＊
　　与正常组比较，＃Ｐ＜０．０５，＃＃Ｐ＜０．０１与模型组比较，＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１
Ａ：正常组；Ｂ：模型组；Ｃ：ＢＭＳＣｓ移植组；Ｄ：珠子参皂苷组；Ｅ：ＢＭＳＣｓ移植＋珠子参皂苷组 ＨＥ染色
图２　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用对大鼠肝纤维化的影响
３　讨　论
干细胞是一类具有多向分化潜能的原始细胞，虽
然具有较强的分化潜能，但是在机体内复杂的微环境
中，很难确保其较长时间向单一方向分化，加之机体
移植后存在成肿瘤（如畸胎瘤）的风险和伦理等诸多
问题，在一定程度上限制了其在临床上的推广应
用［４－５］．近年来，国内外的许多科学家相继研究发现
ＢＭＳＣｓ的分化能力是最为接近胚胎干细胞的成体干
细胞，在一定条件下，它可以分化成为心、肝、脑、肌
肉、软骨、胰岛等多种体细胞［６］．ＢＭＳＣｓ因其来源丰
富，自体移植可避免疫排斥反应，不涉及伦理等诸多
优点而倍受关注，充分开发利用ＢＭＳＣｓ，将为心、肝、
脑等重要器官致命性疾病的治疗开辟一条新的道路．
我国在２０世纪８０年代就开展了中药对ＢＭＳＣｓ
的生物学影响研究，应用中药治疗血液病、抗放化疗
副作用等取得了很好的临床效果［７－８］．由于乙肝患者
在我国仍拥有大量的人群，加之人们不合理的饮食、
饮酒习惯，使得了肝脏疾病在我国高居不下，肝纤维
化、肝硬化、肝癌和肝衰竭已成为当前临床防治的重
点．干细胞移植为治疗终末期肝病提供了新的希望，
而ＢＭＳＣｓ以其独特的优势，得到了许多研究者的青
睐．为此积极开展中药干预ＢＭＳＣｓ动员、扩增、定向
分化、移植等方面的研究具有重要的重要意义和应用
价值．近年来，研究发现珠子参皂苷对ＣＣｌ４ 引起的大
鼠肝纤维化损伤有较好的保护作用，证实与延缓肝细
胞衰老和促进肝细胞增殖密切相关［１］；在体外实验
中，发现珠子参皂苷可诱导ＢＭＳＣｓ分化为肝细胞，
使其具有了合成糖原、摄取低密度脂蛋白及分泌尿素
的能力．在本实验研究中，通过观察珠子参皂苷与
ＢＭＳＣｓ联用对肝纤维化大鼠的治疗作用发现，珠子
参皂苷可促进ＢＭＳＣｓ定向募集至肝脏受损部位，降
低血液中ＡＬＰ、ＡＬＴ、ＡＳＴ水平，增加ＴＰ、ＡＬＢ水平
和Ａ／Ｇ比值，降低肝组织 Ｈｙｐ含量和肝纤维化，改
善肝脏组织形态学．本研究为珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ
联合应用治疗肝纤维化损伤提供了实验依据．
参考文献：
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７０１第３８卷　第３期　　　　　　　　　张继红，等　珠子参皂苷与ＢＭＳＣｓ联用治疗大鼠肝纤维化作用研究
苷可以提高ＥＲα表达，可能对子宫内膜癌具有防治
作用，但需要进一步研究．
ＥＲｓ不仅对正常生理功能调控具有重要作用．同
时，乳腺癌、宫颈癌、前列腺癌、结肠癌等许多肿瘤发
生过程中，ＥＲｓ也扮演了重要角色．所以，进一步探讨
３－羟基根皮苷对不同组织的作用及机制，以及３－羟基
根皮苷及根皮苷的相互作用，对更好地利用土家族药
物湖北海棠具有重要意义．
参考文献：
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［责任编辑　周文凯］
２１１ 三 峡 大 学 学 报（自 然 科 学 版）　　　　　　　　　　　　　　２０１６年６月