全 文 ：南 通 大 学 学 报 （ 医 学 版 ）
Journal of Nantong University (Medical Sciences) 2011 ∶ 31（4）
门静脉高压致胃底食管下端曲张静脉破裂在临
床上病情非常凶险，死亡率极高。经随访发现此类患
者行胃底贲门血管离断术等断流术后仍有约 34%的
患者发生再次上消化道出血， 究其原因与术后肝硬
化未改善甚至进行性加重有密切的关系。 因此如何
降低术后出血的再发生率， 改善术后肝硬化具有很
大的临床实际意义。肝纤维化(liver fibrosis)是各种因
素引起肝细胞损害和炎症， 导致肝脏纤维结缔组织
异常增生，大量沉积的病理过程，是各种慢性肝病发
展为肝硬化(1iver cirrhosis)的必经阶段 [1]。 肝纤维化
一旦发展到肝硬化阶段则很难阻断或逆转其病理过
程进一步发展。 近年来的研究[2]表明，肝纤维化的病
理是可逆的。现代药理研究[3]表明，田基黄具有抑菌、
抗肝损伤、调节免疫功能、抗病毒、抗氧化等多种药
理功效。 本实验拟采用 CCl4 诱导肝纤维化大鼠模
型，观察田基黄水煎液对肝纤维化的防护作用，为其
临床用药改善门脉高压患者术后肝硬化提供实
验依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SD 大鼠 40 只，体重 160~180 g，雌
雄兼备，由上海实验动物中心提供。所有动物自由摄
食，饮水。
1.2 药品与试剂 (1)四氯化碳(CCl4)：分析纯，上海
凌峰化学试剂有限公司生产。 使用时用食用花生油
配制成 40%的油溶液；(2)田基黄，上海三越中药饮
片有限公司提供，取原药材 100 g，用水煎煮 3 次，合
并煎煮液并过滤，减压蒸馏浓缩至浓度为 2 g/mL。田
基黄水煎液配成浓度分别为高剂量 0.8 g/mL 和低剂
量 0.4 g/mL； (3)羟脯氨酸 (hydroxyproline，HYP)和丙
田基黄水煎液下调羟脯氨酸和丙二醛对大鼠实验性
肝纤维化的保护作用
胡卫东 1*， 吴 寒 1，2， 梅广林 1， 袁岱岳 1， 陈 翔 1
(1南通大学附属医院普外科， 南通 226001； 2复旦大学附属中山医院肝癌研究所)
[摘 要] 目的：为提高肝病患者对手术术中肝脏缺氧的耐受及术后肝功能的恢复，观察田基黄水煎液对四氯化碳
(CCl4)诱导的实验性肝纤维化的保护作用。方法：将 SD 大鼠分成正常对照组、模型组、田基黄水煎液低剂量给药组
(4 g/kg)和高剂量给药组(8 g/kg)，采用 CCl4诱导大鼠肝纤维化模型，造模同时给予田基黄水煎液干预，在实验第 8 周，测
定血清肝功相关酶指标[谷丙转氨酶(ALT)，谷草转氨酶(AST)]及肝纤维化血清标志物透明质酸(HA)，层黏连蛋白(LN)、Ⅳ
型胶原(Ⅳ-C)的含量，测定肝组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)和丙二醛(MDA)含量。 结果：田基黄水煎液不同剂量均能降低肝
纤维化大鼠血清 ALT、AST、HA、LN 和Ⅳ-C 含量，同时能减少肝组织中 HYP 和 MDA 含量(P<0.05)。 结论：田基黄对 CCl4
诱导的实验性肝纤维化具有防护作用。
[关键词] 肝纤维化；田基黄；羟脯氨酸；丙二醛；大鼠
[中图分类号] R575.2 [文献标志码] A [文章编号] 1674-7887（2011）04-0273-03
Protective effect of Hypericum Japonicum decotion on experimental liver fibrosis
HU Weidong1*， WU Han1，2， MEI Guanglin1， YUAN Daiyue1， CHEN Xiang1 (1Department of General Surgery, Nantong
University, Nantong 226001; 2Cancer Research center of Biomedic of Sciences, Fudan University)
[Abstract] Objective: To observe the protective effect of Hypericum Japonicum decotion against experimental liver fibrosis
induced by carbon tetrachloride. Methods: SD rats were divided into 4 groups: normal control group(NG)， model group(MG)，
Hypericum Japonicum decotion low dose group(LG， 4 g/kg) and high dose group(HG， 8 g/kg). Liver fibrosis model rats were
produced by repeatedly subcutaneous injection of carbon tetrachloride for 8 weeks， meanwhile the Hypericum Japonicum de-
cotion were administered to intervene the process， at the end of 8th week， the related enzymes reflecting liver function such
as alanine aminotransferase(ALT)， aspartate aminotransferase(AST) and liver fibrosis marker such as hyaluronic acid(HA)，
laminin(LN)， collagen type Ⅳ(Ⅳ-C) in serum were detected， the content of hydroxyproline(HYP) and malonaldehyde(MDA)
in hepatic tissue homogenates were measured. Results: Both LG and HG decreased the level of ALT， ST， A， N， Ⅳ-C in
serum as well reduced the content of HYP and MDA in liver tissue in liver fibrosis rats (P<0.05 or P<0.01). Conclusion: Hy-
pericum Japonicum has apreventive effect on experimental liver fibrosis induced by carbon tetrachloride.
[Key words] liver fibrosis; Hypericum Japonicum; hyaluronic hydroxyproline; malondialdehyde; rat
* [作者简介] 胡卫东，男，汉族，生于 1967 年 11 月，江苏省南通市人，硕士，副主任医师，研究方向：肝胆肿瘤。
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南 通 大 学 学 报 ( 医 学 版 ) 2011 ∶ 31（4）
二醛(malonaldehyde，MDA)含量测定试剂盒购自R&D
SYSTEMS 公司 ； (4)透明质酸 (hyaluronic acid，HA)、
层黏连蛋白(laminin，LN)、Ⅳ型胶原(collagen type Ⅳ，
Ⅳ-C)放免试剂盒均购自美国 Biolegend公司。
1.3 实验方法
1.3.1 模型制备[4]及分组给药 SD 大鼠 40 只，随机
分为 4 组：即正常对照组、模型组、田基黄水煎液低
剂量(4 g/kg)以及高剂量(8 g/kg)给药组，每组 10只大
鼠，雌雄兼用。 各造模组均采用 CCl4诱导大鼠肝纤
维化模型：用 40%CCl4花生油溶液 3.0 mL/kg 皮下注
射，每周两次，共 8周；动物每周称重 1 次，并根据体
重调整 CCl4的剂量，正常对照组仅以花生油等容量
皮下注射。 田基黄水煎液低剂量 (4 g/kg)以及高剂
量(8 g/kg)给药组，在造模同时，分别给予 0.4 g/mL 和
0.8 g/mL田基黄水煎液灌胃， 给药容积为 1 mL/100 g。
每天 1次，连续 8周。
1.3.2 肝功能的检测及肝纤维化血清标志物检测
造模至第 8 周末，全部动物禁食 16 h 后，眼眶取血。
血液 4 ℃条件下 2 000 r/min离心 15 min，吸取血清
于 4 ℃冷藏，24 h 内用生化自动分析仪测定谷丙转
氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、谷草转氨酶 (as-
partate aminotransferase，AST)。 按放射免疫试剂盒说
明书提供的方法测定各组大鼠的血清中的 HA、LN、
Ⅳ-C水平。
1.3.3 肝组织中 HYP和 MDA含量的检测 取 10%
肝组织匀浆液测定每份肝匀浆中 HYP 和 MDA 与特
定试剂反应后溶液的吸光值， 并根据肝组织匀浆液
中总蛋白的含量， 分别计算肝脏中 HYP 和 MDA 的
含量。
1.3.4 统计学方法 使用 SPSS12.0 统计软件进行
数据处理。 数据以x軃±s 表示，用单因素方差分析和 F
检验处理数据，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 动物一般情况 实验过程中，正常对照组动物
一般情况良好。 模型组动物毛色暗淡，形体消瘦，活
动减少，食量下降，尿色发黄，部分动物出现慢性腹
泻症状。 各给药组动物一般情况比模型组有改善。
实验结束时，解剖各组动物肝脏。 肉眼可见：正
常对照组大鼠肝脏大小正常，色泽暗红，质地光滑柔
软。 模型组大鼠肝脏大多明显肿大，颜色灰白，肝质
地变硬，表面粗糙，可见明显的、均匀分布的小结节。
各给药组动物肝脏体积稍大，颜色稍显灰黄，包膜略
紧张，质地略粗糙，但无小结节形成。
2.2 肝功能的检测 取各组大鼠血清检测肝功能，
结果见表 1。 高剂量与低剂量组差异无统计学意义
(P>0.05)。
2.3 肝纤维化血清标志物的检测 取各组大鼠血
清检测 HA、LN、Ⅳ-C的含量，结果见表 2。各剂量组
间 HA、LN、Ⅳ-C的含量差异无统计学意义(P>0.05)。
2.4 肝组织中 HYP 和 MDA 的检测 各组大鼠肝
组织匀浆中所含 HYP 和 MDA 的量见表 3， 各剂量
组间差异无统计学意义(P>0.05)。
3 讨 论
本实验采用经典的 CCl4 诱发肝纤维化造模的
方法， 适合于门脉性肝硬化及肝炎后肝硬化的实验
研究[4]。我们的实验结果显示，造模第 8周末，模型组
动物的血清 ALT、AST、HA、LN、Ⅳ-C 含量明显高于
正常对照组(P<0.01)，肝组织中 HYP 与 MDA 含量与
正常对照组比较也明显增加(P<0.01)。说明应用 CCl4
反复长期给药后造成肝功能损伤并出现明显肝纤维
化。 田基黄各剂量组能明显降低模型组血清 ALT、
AST的含量，说明田基黄能很好的保护肝细胞，可以
注：与正常对照组比较，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。
表 1 田基黄水煎液对 CCl4诱导肝纤维化模型大鼠肝功能的
影响(x軃±s，n=10)
组别 ALT/(U·L-1) AST/(U·L-1)
正常对照组 56.19±10.50 169.47±36.58
模型组 1 047.37±125.28## 1 381.43±117.36##
低剂量给药组 489.78±96.80** 645.76±105.43**
高剂量给药组 396.83±89.72** 584.48±95.28**
注：与正常对照组比较，##P<0.01；与模型组比较，**P<0.01。
表 2 田基黄水煎液对肝纤维化大鼠 HA、LN、Ⅳ-C 的影响
(x軃±s，n=10)
组别 HA/(ng·mL-1) LN/(ng·mL-1) Ⅳ-C/(ng·mL-1)
正常对照组 166.28±56.30 21.64±4.87 16.97±3.54
模型组 392.62±85.28## 50.85±8.93## 34.51±6.47##
低剂量给药组 224.78±36.70* 29.82±5.48* 21.89±5.20*
高剂量给药组 176.83±45.62** 32.26±7.32* 17.89±4.79**
注：与正常对照组比较，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。
表 3 田基黄水煎液对肝纤维化大鼠肝组织 HYP 和 MDA 的
影响(x軃±s，n=10)
组别 HYP/(μg/mg protein) MDA/(nmol/mg protein)
正常对照组 2.64±0.39 11.08±3.72
模型组 9.61±3.20## 165.38±42.39##
低剂量给药组 3.03±0.52** 46.08±18.27**
高剂量给药组 2.78±1.32* 52.76±19.10**
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（上接第 272页）208(5):673-685.
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[收稿日期] 2011-05-30
减少肝细胞的损伤， 提示田基黄在抑制肝纤维化的
发生方面可能具有一定效果。 另外田基黄各剂量组
能显著降低肝纤维化血清标志物 HA、LN、Ⅳ-C 的
含量，并能降低肝组织中 HYP 的含量，这说明田基
黄能减少胶原合成，促进胶原降解，降低胶原的过度
沉积，从而直接或间接抑制肝纤维化的形成。
大量研究 [6]表明，在 CCl4、乙醇等所引起的肝纤
维化过程中， 自由基引起的脂质过氧化不仅参与了
起始阶段的肝损伤过程；而且脂质过氧化产物 MDA
与肝纤维化的发生发展密切相关[7]。我们的研究也表
明 MDA参与了肝纤维化的过程，田基黄水煎液低剂
量与高剂量组均能降低肝组织 MDA 含量(P<0.01)，
说明该药物具有一定抗氧化作用， 可以通过减少脂
质过氧化， 在肝纤维化形成的早期阶段能减轻肝细
胞的损伤 ， 并且在纤维化的发展阶段通过减少
MDA，减少胶原产生，防止肝纤维化的进一步发展。
我们的实验结果显示田基黄对肝纤维化的发生
发展有较好的防护作用， 提示为临床上改善肝硬化
患者肝脏的代偿能力， 降低术后并发症提供新的思
路。 其有效成分与具体机制还有待进一步研究。
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[收稿日期] 2011-03-31
胡卫东，等. 田基黄水煎液下调羟脯氨酸和丙二醛对大鼠实验性肝纤维化的保护作用 275· ·