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现 代 中 医 药
Modern Traditional Chinese Medicine
2015 年 09 月第 35 卷第 5 期
Sep． 2015 Vol． 35 No． 5
珠子参对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少的影响
刘 芳1 张 红2 谢人明2*
(1．陕西中医药大学基础医学院，陕西 西安 712046;2．陕西省中医药研究院，陕西 西安 710003)
摘 要:目的 观察珠子参水提物(PJE)对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症的影响，为珠子参的临床应用提
供理论依据。方法 C57 雄性小鼠分为空白对照组、模型组、瑞白注射液组、八珍益母丸组、珠子参高剂量组、珠
子参中剂量组和珠子参低剂量组。除对照组外其余各组小鼠皮下注射环磷酰胺形成白细胞减少症，八珍益母丸
组和高中低剂量珠子参组按各自给药剂量灌胃，瑞白注射液组皮下注射升瑞白，空白对照组生理盐水灌胃。记
录各组小鼠体重变化，采用全自动血细胞分析仪检测血液白细胞(WBC)、淋巴细胞(LY)、中性粒细胞(NE)、中
间细胞(MID)、血小板(PLT)等水平，生化法检测谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、球蛋白
(GLO)、尿素氮(BUN)、肌酐(Crea)碱性磷酸酶、(ALP)等水平。结果 与空白组相比，环磷酰胺组小鼠体重减
轻;血清 AST /ALT显著升高;ALB /GlO降低;BUN、Crea水平显著升高;ALP水平显著降低(P ＜ 0． 01) ;WBC、LY、
PLT计数显著降低(P ＜ 0． 01)。与模型组相比，PJE 中、高剂量组体重升高，但无显著差异(P ＞ 0． 05) ;中、低剂
量组的 AST /ALT均降低，其中中剂量 PJE组具有显著差异(P ＜ 0． 01) ;各剂量 PJE ALB /GlO比值升高，其中低
剂量作用最为明显;高、中剂量 PJE可显著降低 Crea水平，对 BUN水平无明显影响;低剂量 PJE 可引起 ALP 水
平略微升高，中高剂量无影响;中、高剂量 PJE均可显著升高 WBC、LY计数(P ＜ 0． 01) ，高剂量 PJE还可显著升
高 MID和 NE细胞数(P ＜ 0． 01) ，各剂量 PJE均可升高 PLT水平(P ＜ 0． 01)。结论 珠子参水提物能明显对抗环
磷酰胺的损伤作用，显著升高白细胞减少症小鼠白细胞水平，对环磷酰胺引起的小鼠肝、肾损伤具有保护作用。
关键词:珠子参;小鼠;白细胞症;肝肾损伤
中图分类号:Ｒ 285 文献标识码:A 文章编号:1672 － 0571(2015)05 － 0164 － 05
DOI:10． 13424 / j． cnki． mtcm． 2015． 05． 062
白细胞减少症是在肿瘤化疗中最为常见的临
床症状，大多数患者化疗后出现白细胞减少、贫
血、骨髓功能抑制、免疫功能下降的症状，成为影
响化疗效果的主要因素。因此积极寻找具有升白
作用的药物对临床防治具有重要意义。
珠子参是云南、陕西地区一种民间常用的名
贵中药，主要用于治疗腰腿疼痛，虚弱乏力，气虚、
阴虚，咳血，吐血，衄血，劳伤腰痛，便血，月经不
调，跌打损伤，关节疼痛，外伤出血等症［1 － 2］。以珠
子参为主要原料制成的珠子参片具有良好的升白
作用。本研究拟观察珠子参水提物对环磷酰胺所
致小鼠白细胞减少症的影响，为珠子参的临床应
用提供理论依据。
目前制作白细胞减少症动物模型的方法主要
是采用化学药物诱导。环磷酰胺是目前应用较广
泛的化学药物，其本身是一种临床抗肿瘤药物，其
主要的副作用是造成白细胞和血小板破坏，引起
骨髓功能抑制，主要表现为白细胞减少，免疫功能
低下，因而常用来制作白细胞减少症动物模型［3］。
本实验研究了珠子参粗提物对环磷酰胺所致小鼠
白细胞减少的影响。
1 实验材料
1． 1 仪器与试剂 注射用环磷酰胺购自江苏恒
瑞医药股份有限公司;八珍益母丸购自北京同仁
堂制药有限公司;瑞白注射液购自齐鲁制药有限
公司;纯净水:自制。Sysmex Corporation 全自动血
细胞分析仪，型号:Sysmex － 2000iV;微量高速离心
机，型号:TG16W。
1． 2 药材 珠子参，采自陕西省宝鸡市红河谷地
区，经鉴定为五加科植物珠子参(Panax japonicus
* 通讯作者:谢人明(1946 －)，男，研究员，研究方向:中药药理学。
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C． A． Mey． var． major (Burk．)C． Y． Wu et K．
M． Feng)的干燥根茎。
1． 3 动物 清洁级 C57 雄性小鼠，由西安交通大
学医学院动物中心提供(实验动物合格证号 SCXK
－2005 － 0001) ，体重 18 ± 2 g。
1． 4 样品制备 取珠子参药材 100 g，粉碎成细
粉，用 90 ℃热水提取两次，每次 2 h，滤过，滤液减
压浓缩，冷冻干燥，得到珠子参粗提物(PJE) ，4 ℃
冰箱储存，备用。
2 实验方法
2． 1 分组及给药 小鼠适应性喂养 3 天后，随机
分为 7 组:空白对照组，模型组，瑞白注射液组
(rhG － CSF，10 μg /kg) ，八珍益母丸组(BZYMW，
3 g /kg) ，珠子参高剂量组(PJE，2． 5 g /kg) ，PJE 中
剂量组(PJE，1． 25 g /kg) ，PJE 低剂量组(PJE，
0． 625 g /kg)。珠子参组和八珍益母丸组于造模前
3 天开始灌胃给药，瑞白注射液组于造模前 3 天开
始注射给药，模型组和空白对照组灌胃给与等量
生理盐水，连续 9 天，第 4 天，除对照组外其余各组
小鼠皮下注射环磷酰胺(100 mg /kg) ，第 5、6 天，皮
下注射环磷酰胺(80 mg /kg) ，造模期间各给药组
继续给药，并与造模后继续给药 3 天。实验结束
时，以 10 %的乌拉坦(1． 0 g /kg)腹腔注射麻醉，摘
眼球取血，采用全自动血细胞分析仪检测每只小
鼠血液 WBC、LY、NE、MID、PLT 等水平，生化法检
测 AST、ALT、ALB、GLO、BUN、Crea、ALP等水平。
2． 2 统计学方法 数据以 x ± s 表示，模型组与正
常对照组比较进行 t检验，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01;
模型组与给药组比较进行 Dunnett － t 检验，#P ＜
0． 05，##P ＜ 0． 01。
3 结果
3． 1 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠体重的
影响 从实验第一天开始，每隔 3 天记录各组小鼠
体重变化，统计结果如表 1 所示，给药后第 9 天，与
空白组相比，环磷酰胺组小鼠体重减轻，而 PJE
中、高剂量组的体重高于模型组，但无显著差异。
3． 2 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠肝功能
的影响 PJE对小鼠肝功能的影响如表 2 所示，与
空白组相比，环磷酰胺组的 AST /ALT 显著升高
(P ＜ 0． 01) ，肝功能受到损伤。PJE 中、低剂量组
的 AST /ALT 均较模型组降低，其中中剂量 PJE 组
具有显著差异(P ＜ 0． 01)。
表 1 PJE对白细胞减少症小鼠体重的影响 (g，x ± s)
分组 n
剂量
(mg /kg)
给药前体重
(g)
给药后体重(g)/天
3 d 6 d 9 d
对照组 12 22． 23 ± 1． 74 22． 40 ± 1． 58 21． 90 ± 2． 12 21． 97 ± 1． 96
环磷酰胺组 12 100 22． 42 ± 2． 19 22． 27 ± 2． 02 22． 66 ± 2． 27 20． 71 ± 2． 73
PJE高剂量组 12 2500 22． 64 ± 2． 12 21． 31 ± 1． 82 21． 64 ± 2． 85 21． 19 ± 4． 13
PJE中剂量组 12 1250 21． 96 ± 2． 89 21． 54 ± 3． 27 21． 79 ± 2． 44 21． 10 ± 3． 33
PJE低剂量组 12 625 21． 80 ± 2． 19 21． 24 ± 1． 95 21． 60 ± 2． 29 20． 55 ± 2． 45
瑞白注射液组 12 0． 01 22． 35 ± 2． 47 23． 38 ± 2． 25 22． 70 ± 2． 45 21． 64 ± 2． 37
八珍益母丸组 12 3000 22． 13 ± 1． 65 21． 75 ± 1． 96 21． 98 ± 2． 08 20． 32 ± 2． 24
注:与对照组比较进行 t检验，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;与模型组比较进行 Dunnett － t检验，#P ＜0． 05，##P ＜0． 01。
表 2 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠血液生化指标的影响 (x ± s)
分组 n 剂量(mg /kg) 谷丙转氨酶 ALT(U /L) 谷草转氨酶 AST(U /L) AST /ALT
对照组 12 40． 86 ± 3． 31 97． 29 ± 15． 67 2． 38 ± 0． 29
环磷酰胺组 12 100
33． 00 ±
3． 59＊＊
93． 88 ± 8． 15
2． 88 ±
0． 46＊＊
PJE高剂量组 12 2500 36． 00 ± 3． 49
104． 17 ±
11． 07#
2． 90 ± 0． 29
PJE中剂量组 12 1250 41． 00 ± 7． 98## 101． 43 ± 12． 41 2． 47 ± 0． 22##
PJE低剂量组 12 625 37． 33 ± 3． 15 98． 67 ± 6． 88 2． 65 ± 0． 08
瑞白注射液组 12 0． 01 33． 86 ± 4． 10 103． 29 ± 12． 69 3． 06 ± 0． 22
八珍益母丸组 12 3000 36． 43 ± 6． 74 87． 71 ± 4． 86 2． 46 ± 0． 35##
注:与对照组比较进行 t检验，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;与模型组比较进行 Dunnett － t检验，#P ＜0． 05，##P ＜0． 01。
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3． 3 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠血清蛋
白代谢的影响 PJE 对小鼠血清蛋白代谢的影响
如表 3 所示，与空白组相比，环磷酰胺引起小鼠血
清 ALB /GlO降低，肝功能受到损伤。而与模型组
相比，各剂量 PJE 引起小鼠血清 ALB /GlO 比值升
高，其中低剂量作用最为明显，表明珠子参能促进
小鼠肝功能恢复。
3． 4 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠肾功能
的影响 尿素氮和肌酐是评价肾功能的两项重要
指标，血清尿素氮和肌酐水平异常升高，代表肾功
能可能出现异常，肾功能受到损害。PJE 对模型小
鼠肾功能的影响如表 4 所示，与空白组相比，环磷
酰胺会引起小鼠血清尿素氮升高，肌酐水平显著
升高(P ＜ 0． 01)。高、中剂量 PJE 可显著降低血清
肌酐水平，对血清尿素氮水平无明显影响。同时
还发现，瑞白注射液和八珍益母丸可显著降低血
清尿素氮、肌酐水平(P ＜ 0． 01)。
3． 5 PJE 对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠血清
ALP水平的影响 碱性磷酸酶(ALP)是一种磷酸
单酯酶，来源于肝和骨组织，其活性降低会影响骨
骼发育。重症肾炎、肾衰或者严重缺血会引起血
清 ALP活性降低，PJE 对小鼠血清 ALP 的影响如
表 4 所示，与空白组相比，环磷酰胺会引起小鼠血
清 ALP 水平显著降低(P ＜ 0． 01)。与模型组相
比，低剂量 PJE 可引起小鼠血清 ALP 水平略微升
高，其它两个剂量无对抗作用。
表 3 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠血液生化指标的影响 (x ± s)
分组 n 剂量(mg /kg) 白蛋白 ALB(g /L) 球蛋白 GlO(g /L) ALB /GlO
对照组 12 23． 70 ± 1． 77 27． 86 ± 2． 97 0． 86 ± 0． 14
环磷酰胺组 12 100 21． 96 ± 2． 60 28． 28 ± 3． 71 0． 79 ± 0． 17
PJE高剂量组 12 2500 20． 93 ± 1． 40 26． 85 ± 4． 04 0． 80 ± 0． 14
PJE中剂量组 12 1250 21． 16 ± 1． 14 26． 29 ± 1． 94 0． 81 ± 0． 06
PJE低剂量组 12 625 23． 12 ± 2． 51 26． 50 ± 1． 97 0． 88 ± 0． 14
瑞白注射液组 12 0． 01 22． 34 ± 1． 23 25． 03 ± 2． 18# 0． 90 ± 0． 09
八珍益母丸组 12 3000 22． 13 ± 1． 21 29． 16 ± 3． 16 0． 77 ± 0． 11
注:与对照组比较进行 t检验，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;与模型组比较进行 Dunnett － t检验，#P ＜0． 05，##P ＜0． 01。
表 4 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠血液生化指标的影响 (x ± s)
分组 n 剂量(mg /kg) 尿素氮(mmol /L) 肌酐(μmol /L) 碱性磷酸酶(U /L)
对照组 12 10． 04 ± 1． 90 8． 29 ± 1． 38 104． 86 ± 20． 28
环磷酰胺组 12 100 10． 81 ± 2． 19
12． 50 ±
1． 72＊＊
63． 75 ± 15． 46＊＊
PJE高剂量组 12 2500 10． 34 ± 2． 38 10． 00 ± 1． 79## 58． 67 ± 9． 77
PJE中剂量组 12 1250 10． 57 ± 1． 09 8． 29 ± 1． 70## 59． 29 ± 6． 52
PJE低剂量组 12 625 10． 90 ± 1． 33 11． 50 ± 0． 84 75． 00 ± 17． 67
瑞白注射液组 12 0． 01 8． 95 ± 0． 82# 8． 57 ± 0． 53## 58． 14 ± 7． 44
八珍益母丸组 12 3000 7． 69 ± 1． 22## 8． 29 ± 1． 60## 63． 71 ± 18． 43
注:与对照组比较进行 t检验，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;与模型组比较进行 Dunnett － t检验，#P ＜0． 05，##P ＜0． 01。
3． 6 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠白细胞
计数的影响 白细胞由嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒
细胞、单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞组成，按照
三分类的方法，可以将白细胞分为中间细胞、中性
粒细胞、淋巴细胞，其中中间细胞由嗜碱性粒细
胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞组成。本实验即采
用三分类的方法检测小鼠血中中间细胞、中性粒
细胞、淋巴细胞比例和数量变化，结果见图 1，与空
白组相比，环磷酰胺引起小鼠白细胞、淋巴细胞数
显著降低(P ＜ 0． 01)。而与模型组相比，中、高剂
量 PJE均可显著升高小鼠白细胞、淋巴细胞数(P
＜ 0． 01) ，高剂量 PJE 还可显著升高小鼠血中间细
胞和中性粒细胞数(P ＜ 0． 01) ;另外从表 5 可见，
PJE 引起模型小鼠中间细胞、中性粒细胞、淋巴细
胞比例发生变化，其中淋巴细胞比例下降，中间细
胞和中性粒细胞比例升高，提示 PJE 可能具有骨
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髓刺激作用，影响骨髓造血干细胞的正常分化。
表 5 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠白细胞数及分类的影响 (x ± s)
分组 动物 剂量(mg/kg) 白细胞(×109 /L) 淋巴细胞(%) 中间细胞(%) 中性粒细胞(%)
对照组 12 6． 31 ±0． 95 86． 89 ±3． 27 4． 95 ±1． 15 8． 06 ±2． 16
环磷酰胺组 12 100 3． 77 ±0． 74＊＊ 72． 84 ±10． 99 10． 90 ±4． 14＊＊ 16． 26 ±7． 55＊＊
PJE组 12 2500 6． 35 ±2． 19## 66． 23 ±11． 97 13． 07 ±3． 58 20． 70 ±8． 48
PJE组 12 1250 5． 68 ±1． 25## 69． 65 ±4． 86 13． 05 ±2． 12 17． 30 ±3． 09
PJE组 12 625 4． 58 ±1． 77 65． 95 ±12． 82 13． 07 ±3． 80 20． 98 ±9． 20
瑞白注射液组 12 0． 01 7． 03 ±1． 32## 60． 15 ±6． 95# 15． 13 ±1． 81## 25． 72 ±5． 48##
八珍益母丸组 12 3000 5． 82 ±1． 79## 69． 20 ±11． 12 10． 70 ±3． 15 20． 10 ±7． 98
注:与对照组比较进行 t检验，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;与模型组比较进行 Dunnett － t检验，#P ＜0． 05，##P ＜0． 01。
图 1 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠白细胞数及分类的影响 (x ± s)
3． 7 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠血小板
的影响 PJE 对小鼠血小板(PLT)的影响如表 6
所示，与空白对照组相比，环磷酰胺会引起小鼠血
小板水平显著降低(P ＜ 0． 01)。而与模型组相比，
各剂量 PJE 引起小鼠血小板水平升高，三个剂量
组均有显著差异(P ＜ 0． 01)。八珍益母丸也能对
抗环磷酰胺引起的血小板减少(P ＜ 0． 01)。
表 6 PJE对环磷酰胺所致白细胞减少小鼠血小板的的影响 (x ± s)
分组 n 剂量(mg/kg) 血小板数(×109 /L) 血小板压积(%) 血小板分布宽度 平均血小板体积
对照组 12 939． 41 ±156． 53 0． 62 ±0． 11 23． 71 ±1． 28 9． 36 ±0． 35
环磷酰胺组 12 100 633． 00 ±67． 16＊＊ 0． 48 ±0． 04＊＊ 27． 60 ±5． 41 8． 59 ±0． 85
PJE高剂量组 12 2500 1071． 81 ±314． 43## 0． 61 ±0． 05## 44． 82 ±7． 81## 5． 75 ±0． 86##
PJE中剂量组 12 1250 1099． 18 ±312． 82## 0． 68 ±0． 12## 41． 70 ±8． 28## 6． 40 ±0． 91##
PJE低剂量组 12 625 961． 64 ±109． 90## 0． 71 ±0． 03## 31． 20 ±10． 33 7． 71 ±0． 60##
瑞白注射液组 12 0． 01 669． 25 ±139． 53 0． 53 ±0． 08# 29． 52 ±4． 99 8． 55 ±0． 67
八珍益母丸组 12 3000 1311． 27 ±278． 30## 0． 76 ±0． 13## 42． 14 ±5． 67## 6． 28 ±0． 83##
注:与对照组比较进行 t检验，* P ＜0． 05，＊＊P ＜0． 01;与模型组比较进行 Dunnett － t检验，#P ＜0． 05，##P ＜0． 01。
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4 讨论
环磷酰胺是磷酰胺基与氮芥结合生成的一种
化合物，是临床常用的抗肿瘤药物。环磷酰胺具
有明显的免疫抑制作用，能导致骨髓造血功能抑
制，主要表现为白细胞减少［4］。本研究采用环磷
酰胺造成 C57 小鼠白细胞减少症模型，研究珠子
参粗提物对小鼠白细胞减少的影响。
白细胞数量明显减少是不容忽视的临床常见
问题，肿瘤的放疗和化疗、自身免疫性疾病、脾功
能亢进、造血功能障碍、再生障碍性贫血等都会引
起白细胞尤其是中性粒细胞数减少［5］。特别要注
意的是，当血液白细胞计数显著降低，尤其是中性
粒细胞数低于 1． 0 × 109 /L 时，人体则非常容易发
生感染和反复感染。本研究发现，环磷酰胺注射
引起 C57 小鼠白细胞、淋巴细胞水平显著降低，肝
肾功能严重受损。PJE 能明显对抗环磷酰胺的损
伤作用，显著升高白细胞减少症小鼠白细胞水平，
主要是通过升高淋巴细胞、中性粒细胞和中间细
胞的数量来实现的。本研究还发现，腹腔注射环
磷酰胺导致小鼠血小板水平、血小板压积明显降
低，而三个剂量的 PJE 均能明显对抗环磷酰胺对
血小板的损伤作用，显著升高模型鼠血小板浓度，
但血小板体积变小，分布变宽。
血肌酐是代表肾脏功能正常与否的主要指标
之一。肌酐分子量较小，可通过肾小球滤过，并且
在肾小管内很少吸收，机体每日产生的肌酐，大部
分随尿液排出，通常情况下尿量对其无影响。当
肾功能发生异常时，会引起肌酐在体内蓄积，从而
成为一种对人体有害的毒素类物质。血清中肌酐
水平的浓度变化主要由肾小球的肾小球滤过率
(滤过能力)来决定。当肾小球滤过能力下降时，
则肌酐水平会升高。因此当检测到当血肌酐值升
高时，说明肾功能可能出现异常，肾脏代谢能力下
降，导致体内的一些有害物质不能及时地排出体
外。这些代谢产物反过来会侵害机体的正常肾组
织，形成恶性循环，使肾脏损伤发生扩大激发式的
蔓延过程，并加速进入了肾功能损伤期(器质性损
伤期) ，这时由于肾脏不断遭受肌酐等物质侵害，
其代谢功能进一步降低，就造成了尿素氮、肌酐等
有毒物质在体内的蓄积，从而表现为血内尿素氮、
肌酐水平升高，尿中肌酐水平下降，肾小球滤过率
下降等［6］。本研究发现，腹腔注射环磷酰胺导致
小鼠血清肌酐水平显著升高，说明环磷酰胺引起
小鼠肾功能损害，而高、中剂量的 PJE 均能明显对
抗环磷酰胺对肾功能的损伤作用，这一点从小鼠
体重与肾、肾上腺指数的变化上同样得到验证，环
磷酰胺对小鼠体重无明显影响，但显著降低肾脏
指数，而高、中剂量 PJE 组肾脏指数明显高于模型
组，肾上腺指数也有所增加，证明 PJE 对小鼠肾脏
具有保护作用，能减轻环磷酰胺引起的肾损害。
同时实验还发现瑞白注射液和八珍益母丸也具有
同样的效果。
谷草转氨酶 /谷丙转氨酶(AST /ALT)是评价
肝功能的重要指标，AST /ALT 高于正常水平说明
肝功能出现异常［7］，本研究发现环磷酰胺引起 C57
小鼠血清 AST /ALT 显著升高，而 PJE 对此有对抗
作用，其中中剂量 PJE 组小鼠血清 AST /ALT 与模
型组相比显著降低。另外本研究还发现环磷酰胺
引起 C57 小鼠 ALB /GlO 下降，说明小鼠肝脏合成
蛋白能力下降，肝功能受损，给予 PJE 后，小鼠
ALB /GlO有所升高。这些结果说明 PJE 对小鼠肝
损伤具有保护作用。
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(收稿日期:2015 － 06 － 25 编辑:文颖娟)