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竹节参与珠子参质量比较研究



全 文 :西北大学学报(自然科学版)
2010年 10月 , 第 40卷第 5期 , Oct., 2010, Vol.40, No.5
JournalofNorthwestUniversity(NaturalScienceEdition)
  收稿日期:2009-10-26
  基金项目:陕西省中医管理局 2009科研基金资助项目(ZY09);陕西省科学技术研究发展计划基金资助项目 (2006K16-
G1(2));陕西省教育厅 2005年科学研究计划基金资助项目(05JK168);《中国药典》 2010版一部标准研究基
金资助项目(YZ-123)
  作者简介:王薇 ,女 , 陕西咸阳人 , 从事中药质量与资源研究。
  通信作者:宋小妹 ,女 , 陕西中医学院教授 , 从事中药药效物质基础及中药炮制研究。
竹节参与珠子参质量比较研究
王 薇 ,郭 琳 ,冯改利 ,崔九成 ,宋小妹
(陕西中医学院 药学院 , 陕西 咸阳 712046)
摘要:目的 研究建立珠子参和竹节参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定方法 ,并比较二者化学成分的
差别。方法 采用薄层色谱法进行珠子参和竹节参鉴别 ,高效液相色谱法测定二者竹节参皂苷Ⅳa
的含量 。结果 二者在主要化学成分含量和种类上存在一定区别 ,珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量
在 2.42% ~ 4.99%之间 , 而竹节参中竹节参皂苷Ⅳa含量 3.09%。结论 珠子参和竹节参化学成
分存在一定差异 。
关 键 词:竹节参;珠子参;薄层色谱;高效液相色谱法
中图分类号:R282.71  文献标识码:A  文章编号:1000-274Ⅹ (2010)05-0833-04
Comparativestudyonchemicalconstituentsbetween
rhizomapanacisJaponiciandrhizomaPanacisMajoris
WANGWei, GUOLin, FENGGai-li, CUIJiu-cheng, SONGXiao-mei
(ShaanxiUniversityofTCM, PharmacySchool, Xianyang712046, China)
Abstract:Aim TocomparethechemicalconstituentsbetweenrhizomaPanacisMajorisandrhizomaPanacisJa-
ponici.Methods ThedeterminationofTLCandHPLCwereadoptedtoanalyzethechemicalcomponentsofchiku-
setsusaponinIVa.Results ThecotentsandkindsofchemicalconstituentshavesomediferencebetweentwoChi-
nesedrugs.Conclusion ThereisdiferenceinchemicalconstituentsbetweenrhizomaPanacisMajorisandrhizoma
PanacisJaponici.
Keywords:rhizomaPanacisjaponici;rhizomaPanacisMajoris;chemicalconstituents;TLC;HPLC
  珠子参和竹节参均为五加科人参属来源的中
药 ,其中竹节参为竹节参 PanaxjaponicusC.A.
Mey.的干燥根茎;珠子参为竹节参的变种 ,系珠子
参 PanaxjaponicusC.A.Mey.var.major(Burk.)C.
Y.WuetK.M.Feng或羽叶三七 PanaxjaponicusC.
A.Mey.var.bipinnatifidus(Seem.)C.Y.WuetK.
M.Feng的干燥根茎 。从二者的功效主治来看 ,珠
子参性味苦 、甘 、微寒 ,功能补肺 、养阴 、活络 、止血 ,
主治气阴两虚 、烦热口渴 、虚劳咳嗽 、跌扑损伤 、关节
疼痛 、咳血 、吐血 、外伤出血;竹节参性味甘 、微苦 、
温 ,功能滋补强壮 、散瘀止痛 、止血祛痰 ,主要用于病
后虚弱 、劳嗽咯血 、咳嗽痰多 、跌打损伤 [ 1]等症的治
疗。临床上 ,珠子参主要以补益作用为主 [ 2] ,而竹
节参以抗炎镇痛治疗风湿为主[ 3-5] 。然而 ,现行 《中
国药典》中珠子参和竹节参质量标准都采用皂苷的
泡沫反应及三氯化锑反应鉴别试验作为定性指标 ,
色谱鉴别均以水解后的苷元齐墩果酸 、人参二醇 、人
参三醇为评价指标 ,缺乏专属性 ,且二者均缺乏含量
测定项。为了说明珠子参和竹节参药材在化学组成
上的差异 ,进一步完善二者药材的质量标准 ,本文采
用薄层色谱法 、高效液相色谱法对珠子参和竹节参
的化学成分进行了比较研究。
1 仪器及试药
1.1 仪 器
岛津 LC-2010AHT高效液相色谱仪;Shimadzu
LCsolution工作站;SB-3200D型超声清洗机 (宁波
新芝生物科技股份有限公司 , 180W, 40kHz);BP-
121S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司);
BP-121S电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公
司);紫外灯(上海精科实业有限公司 , WFH-201B紫
外透射反射仪);双槽层析缸 (规格 200 mm×200
mm)。
1.2 试 药
珠子参药材分别购自四川成都 、云南和贵州 ,竹
节参药材购自四川成都 ,分别经陕西中医学院药学
院王继涛高级实验师鉴定为五加科珠子参 Panax
japonicusC.A.Mey.var.major(Burk.)C.Y.Wu
etK.M.Feng和同科竹节参 PanaxjaponicusC.A.
Mey.的干燥根茎。竹节参皂苷Ⅳa对照品(自制 ,含
量大于 98%),人参皂苷 Ro(自制 ,含量大于 97%)。
乙腈为色谱纯 ,其余均为分析纯 ,水为纯净水。
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别
分别取珠子参与竹节参粉末约 1 g,称重 ,加甲
醇 30mL,超声处理 40 min,水浴挥去甲醇 ,残渣加
水 20mL溶解 ,放冷 ,水饱和正丁醇萃取 5次 ,合并
正丁醇萃取液 ,水浴蒸干 ,加甲醇 5mL溶解 ,制成
0.2g·mL-1溶液作为供试品溶液 。另取竹节参皂
苷Ⅳa对照品和人参皂苷 Ro对照品 ,分别加甲醇制
成 2 mg· mL-1的对照品溶液。照薄层色谱法吸取
珠子参和竹节参供试品溶液及各对照品溶液 1μL,
点于同一硅胶 G薄层板上 ,以正丁醇 -乙酸乙酯 -
甲醇 -甲酸 -水(5∶10∶0.5∶0.3∶3.5)上层液为展
开剂 ,上行展开 ,取出 ,晾干。以 10%硫酸乙醇溶液
喷雾显色后 , 105℃加热至斑点清晰 ,在 300nm紫外
灯下检视。结果见图 1。
薄层色谱结果显示:珠子参与竹节参在化学成
分的种类和含量上存在一定差异。
2.2 含量测定
2.2.1 色谱条件 色谱柱:InertsilODS-sp(4.6 mm
×150 mm, 5 μm);流动相:乙腈 -0.2%磷酸溶液
图 1 珠子参与竹节参薄层色谱图
Fig.1 TLCchromatogramofrhizomaPanacisMajoris
andrhizomaPanacisJaponici
1.竹节参皂苷Ⅳa对照品;2, 6.四川产珠子参样
品;3, 7云南产珠子参样品;4, 8.贵州产珠子参样
品;5, 9竹节参样品;10.人参皂苷 Ro对照品
(35∶65);检测波长:203nm;流速:1.0 mL· min-1;
柱温:30℃。
2.2.2 供试品溶液的制备 分别取珠子参和竹节
参药材粉末 0.1 g,精密称定 ,置锥形瓶中 ,加 60%
乙醇溶液 25mL,超声处理 40 min,取出 ,加 60%乙
醇补足重量 ,滤过 。分别取续滤液作为珠子参和竹
节参供试品溶液。
2.2.3 对照品溶液制备 取竹节参皂苷 Ⅳa对照
品适量 ,精密称定 ,加 60%乙醇配制成 1.007 6 mg
·mL-1的贮备液 ,摇匀 ,待用 。
2.2.4 标准曲线及线性范围考察 分别精密吸取
上述贮备液 0.5mL, 1mL, 2 mL, 3mL, 4mL和 5mL
于 10 mL量瓶中 ,加 60%乙醇至刻度 ,摇匀 ,配制成
0.050 4, 0.100 8, 0.201 5, 0.302 3, 0.403, 0.503 8
mg· mL-1的系列溶液 ,分别进样 20 μL,测定峰面
积 ,以竹节参皂苷Ⅳa对照品进样量(μg)为横坐标 ,
峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,得竹节参皂苷Ⅳa
的回归方程:Y=391 102X-16 725 (r=0.999 9)。
竹节参皂苷Ⅳa在 1.007 6 ~ 10.076 μg范围内具有
良好的线性关系。
2.2.5 精密度试验 取竹节参皂苷Ⅳa对照品溶
液 10 μL,按 “ 2.2.1”项下色谱条件进行测定 ,连续
进样 5次 ,竹节参皂苷Ⅳa峰面积的 RSD为 0.02%
(n=5),结果表明精密度良好 。
2.2.6 重复性试验 取同一珠子参粉末 0.1 g, 5
份 ,精密称定 ,按 “ 2.2.1”项下色谱条件进行测定 ,
计算含量 。结果供试品中竹节参皂苷Ⅳa含量的
RSD为 1.10% (n=5),结果表明 ,本方法重复性良
好。
—834— 西北大学学报(自然科学版)                 第 40卷
2.2.7 稳定性试验  取同一供试品溶液 ,分别于
0, 2, 4, 8 , 12, 18和 24h进行测定。测得竹节参皂苷
Ⅳa含量的 RSD为 1.10% (n=5),结果表明 ,供试
品溶液在 24 h内稳定性良好 。
2.2.8 加样回收率试验 采用加样回收法 ,取已知
含量的样品 6份 ,每份各 0.05 g,精密称定 ,分别加
入一定量竹节参皂苷Ⅳa对照品 ,按 “2.1”项下色谱
条件测定峰面积 ,计算竹节参皂苷Ⅳa含量及加样
回收率。平均回收率为 103.46, RSD为 0.81%。
2.2.9 样品的测定 取珠子参样品 0.1g和竹节参
0.3g(各 2份),精密称定 ,按 “2.2.2”项下方法进行
供试品溶液的制备 , 按 “2.2.1”项下色谱条件进样
分析 ,计算竹节参皂苷Ⅳa的含量 ,结果见表 1,色谱
图见图 2。
表 1 样品含量测定结果
Tab.1 Theresultofsampledetermination (%, n=2)  
样品来源 取样量 竹节参皂苷Ⅳa含量 平均值
珠子参(四川) 0.100 55
0.100 58
2.48
2.36 2.42
竹节参(四川) 0.350 01
0.350 02
3.04
3.13 3.09
珠子参(云南) 0.100 58
0.100 5
3.46
3.35 3.40
珠子参(贵州) 0.100 73
0.100 71
4.95
5.04 4.99
  测定结果显示 ,珠子参与竹节参在主要成分的种类和含量上存在一定区别。
图 2 高效液相色谱图
Fig.2 HPLCchromatogramofrhizomaPanacisMajorisandrhizomaPanacisJaponici
A竹节参皂苷Ⅳa对照品;B四川产竹节参;C四川产珠子参;D云南产珠子参;E贵州产珠子参
3 讨 论
1)《中国植物志》第 54卷中将珠子参与竹节参
合并为假人参的变种 ,来源上混用 ,仅从药材的形态
上予以区分 ,临床用药时易与竹节参混用。自 1977
年版后历版的 《中国药典 》将二者分开。本文通过
对各自化学成分的比较研究 ,为将二者分开使用提
供科学依据 。
2)薄层色谱鉴别时 ,对点样量 、提取溶媒 、提取
时间 、制样方法 、对照品溶液浓度 、样品浓度 、展开条
件等进行了详细考察 ,最终确定本实验的薄层色谱
条件 。
3)含量测定中检测波长的选择是根据竹节参
皂苷Ⅳa对照品及样品的紫外全波长扫描图谱确定
的 ,检测波长 203 nm;通过对流动相的选择 ,采用乙
腈 -0.2%磷酸溶液(35∶65)作为流动相 ,竹节参皂
苷Ⅳa峰与相邻峰能达到基线分离 ,且峰形较好 ,溶
剂空白无干扰 。
4)从竹节参皂苷Ⅳa含量的高低进行二者的鉴
别 ,存在一定难度 ,但从高效液相色谱的谱图来看 ,
珠子参与竹节参在主要化学成分的种类和含量上存
—835—第 5期               王薇等:竹节参与珠子参质量比较研究
在较大差异 。尤其在 7 min~ 12.5 min之间的 5个
峰 ,主要存在以下差异:①在珠子参的 3个样品 D,
C, E中在 11 min处有一个小峰 ,相应的竹节参中没
有 ,而竹节参在 8.5 min处有一小峰 ,珠子参 3个样
品中都没有;②从相应峰面积来看 ,竹节参 9 min处
的峰很大 ,而珠子参的 3个样品中相应的峰很小;③
从各峰之间的峰高(或面积)比例来看 ,二者之间也
存在显著差别。因此 ,应进一步加强对珠子参与竹
节参药材质量评价方法的研究 ,建立多指标综合评
价其质量的方法 ,为临床用药提供科学依据。
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—836— 西北大学学报(自然科学版)                 第 40卷