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紫外分光光度法测定蜘蛛香中总黄酮的含量



全 文 :149
第 1 0卷 第 1 2 期
2008 年 12 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 10 No. 12
Dec . ,2008
紫外分光光度法测定蜘蛛香中总黄酮的含量
李 蓉1,2,李小平1,吴 莹2
(1.江苏畜牧兽医职业技术学院动物药学系,江苏 泰州 225300 ;2.苏州大学化学化工学院,江苏 苏州 220000)
摘 要:目的:建立蜘蛛香中总黄酮含量测定方法。方法:以橙皮苷为标样,对蜘蛛香中黄酮类化合物采用甲
醇超声提取,用紫外分光光度法,在284nm处测定吸光度。结果:总黄酮在5.10~25.50mg·L-1范围内线性关系良好,
其回归方程为:A=0.0325C-0.0023 (r=0.9998) ;平均加样回收率为97.0%(RSD为1.10%)。结论:该实验方法简便、快
速、准确,可控制质量。
关键词:蜘蛛香;总黄酮;紫外分光光度法
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1673-842X (2008) 12- 0149- 02
Quantitative Determination of Total flavones in Valeriana
jatamansi Jones by UV Spectrophotometry
LI Rong1,2,LI Xiao-ping1,WU Ying2
(1.Jiangsu Animal Husbandry and Veterinary College Animal College of
Pharmacy,Taizhou 225300,Jiangsu,China;2.Suzhou University College of
Chemistry and Chemical Engineering,Suzhou 220000,Jiangsu,China)
Abstract:Objective :To determine the total flavones in Valeriana jatamansiones.Methods :Using
detection wavelength at 284nm and hesperidin as the standard sample, the flavones substances in
Valeriana jatamansiones were determined through methyl alcohol ultrasonic extraction and ultraviolet
spectrophotometer. Results:Sample size showed a good linear relationship at the range of 5.10~25.50mg·L-1
and the curve was A=0.0325C-0.0023 (r=0.9998). The average recovery was 97.0% and RSD was 1.10%.
Conclusion :Thismethod is easy ,rapid and accurate, and can be used for quality control of Valeriana
收稿日期:2008-06-20
作者简介:李蓉(1971-),女,江苏泰州人,副教授,硕士研究生,研究方向:药物分析。
记载却有区别,且更广泛。虽然川射干为射干的地
区代用品,使用时仍需针对不同适应症,分开使用。
4 化学成分
现代研究表明鸢尾根茎中主要含异黄酮类
化合物, 且含量较高[5],药理实验等证明其为有效
成分[6]。1991年陈芳群从鸢尾根茎中分得5个黄
酮成分,鉴定了4个化合物,即射干苷、鸢尾苷元
(tectorigenin)、野鸢尾苷元(irigenin)和鼠李秦素
(rhamnazin)。后者为首次从鸢尾中得到[6]。
射干主要含有异黄酮类化合物,如野鸢尾苷
(iridin),野鸢尾黄素(irigenin),鸢尾苷(tectoridin),鸢尾
黄素(tectorigenin),次野鸢尾黄素(irisflo-rentin)。此
外还含有酮类、醌类、酚类、二环三萜类、甾体类化合
物及其他一些微量成分。
川射干和射干都含有异黄酮类化合物,为有效
成分,且以鸢尾苷含量最高。对川射干及射干化学
成分的研究与药理作用的研究有密切关系。通过研
究化学成分,以确定药理活性成分,找出适应的提取
方法提高药效,还可作为鉴定药材真伪优劣的方法。
5 药理作用
现代药理证明川射干具有抗炎、解热、抗过敏作
用,还有明显祛痰作用,抗菌抗病毒作用。射干除具有
抗炎、抗菌抗病毒作用外,还可刺激喉黏膜和促进唾液
分泌的作用,对肿瘤、消化系统、免疫功能有一定影响。
实验表明,川射干和射干对组胺所致皮肤毛细血
管通透性增高和对H刺激所致小鼠腹腔毛细血管通
透性增高均有明显抑制作用;对巴豆油所致大小鼠耳
肿胀均有抑制作用;均能显著促进甲醛所致大鼠脚肿
胀的消退;对棉球肉芽组织增生均有明显抑制作用。
10%射干能抑制8个血凝单位的A京防86-1流
感病毒,10%川射干无抑制作用[7]。川射干和射干
均未见对硝酸士的宁有解毒作用[1]。
以上药理实验所用药材均用乙醇提取,且查阅
大量资料,凡是设计川射干及射干的药理作用,均为
乙醇提取物。笔者认为,中成药是药厂大规模生产,
前期提取可使用乙醇,且制剂过程亦经常使用乙醇。
但是,患者服用汤剂是用水煎。应该根据实际情况
来研究水提后的药理作用,而不是根据化学成分的
性质来研究药理作用。
综上所述,通过比较川射干和射干基源、性能、
功效主治、化学成分、药理作用,表明川射干和射干
同属鸢尾科不同属植物 ;苦寒清热,都有止咳、祛
痰、平喘功效,而射干更为治疗喉痹咽痛要药;从化
学成分和药理作用比较,两药的有效成分都为异黄
酮类化合物,药理作用基本未见显著差异。以上这
些研究都为川射干可以作为射干的地区代用品提供
了依据。川射干被2005年版《中华人民共和国药典》
收载,更说明了其药理作用已得到认可。有效利用
川射干的药用资源,开发疗效确切,剂型稳定的现代
化药品。◆
参考文献
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京:中国中医药出版社,2001 :1.
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出版社,2006 :3.
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[ 7 ] 丁羸,赵永华.药用动植物种养加工技术射干番红花[ M ] .北
京:中国中医药出版社,2001 :1.
DOI:10.13194/j.jlunivtcm.2008.12.151.lir.081
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辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 0 卷
蜘蛛香又名马蹄香、老虎七、印度缬草等,系
败酱科缬草属植物。其根茎及根入药,具有理气
和中,散寒除湿,活血消肿等功效,用于治疗脘腹
胀痛,呕吐泄泻,小儿疳积,风寒湿痹,脚气水肿,
月经不调,跌打损伤,疮疖等症。近年来,该属植
物的药用价值越来越受到重视[1]。研究表明,黄
酮类化合物为其有效成分之一[2],但目前对蜘蛛
香中所含总黄酮含量的测定尚未见报到。为此,
笔者采用紫外分光度法测定了蜘蛛香中总黄酮的
含量,为其质量控制及进一步的开发利用提供依
据。
1 实验材料
TU-1800紫外可见分光光度计(北京普析通用
仪器有限责任公司) ;电子分析天平(北京赛多利斯
仪器系统有限公司);KQ2200DB型数控超声波清洗
器(昆山市超声仪器有限公司);旋转蒸发器(上海
亚荣生化仪器厂);蜘蛛香(购自安徽亳州);橙皮苷
对照品(购自中国药品与生物制品检定所);甲醇、
石油醚(分析纯)。
2 方法与结果
2.1 样品溶液的制备 将蜘蛛香药材粉碎并过筛
(40~180目),用1:10的石油醚回流脱脂两次,每次时
间为2h,抽滤,洗涤,再放入40℃条件下的鼓风烘箱
中干燥1h左右,备用。
称取1.0g已脱脂的蜘蛛香粉末,准确加入25mL
甲醇,密塞,摇匀,称定质量。超声提取30min,取出
放冷,再称定质量,用甲醇补足减失的质量,摇匀,离
心分离,取上清液5mL,用甲醇定容至50mL,即得样
品溶液。
2.2 对照品溶液的制备 准确称取橙皮苷标准品
0.0051g,加甲醇溶解并定容至50mL,即得浓度为
0.102 g·L-1的橙皮苷标准溶液,备用。
2.3 测定波长的选择 分别取1mL对照品溶液和
1mL样品溶液于10mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻
度,在200~500nm进行扫描,发现均在284nm附近有
最大吸收峰,试验中选择测定波长284nm。
图1 样品的紫外吸收图谱 
图2 标准品的紫外吸收图谱
2.4 线性关系考察 分别移取上述标准溶液0.5、
1.0、1.5、2.0、2.5mL于5只10mL容量瓶中,加甲醇
定容,以甲醇作空白,于284nm处测吸光度,结果表
明,橙皮苷在5.10~25.50mg·L-1浓度范围内符合比
尔定律,吸光度与浓度呈现良好的线性关系,得标
准曲线回归方程为:A=0.0325C-0.0023,相关系数
r=0.9998。见图1。
图1 橙皮苷标准曲线
2.5 精密度 精密移取样品溶液1mL,于10mL容
量瓶中,加甲醇稀释至刻度,于284nm处测吸光度,
平行5次,计算RSD为0.5%,表明仪器精密度良
好。
2.6 重复性 对同一批药材样品,按样品制备方法
平行制备5分,依法测定,含量平均值为2.069,RSD
为1.51%,表明重现性良好。
2.7 稳定性 取对照品及样品溶液于室温分别放
置0,2,4,6,8,10,12,24h后,测定吸光度(n=3),计算
对照品及样品溶液的RSD分别为1.29%,1.45%,表
明对照品及供试品溶液在24h内稳定。
2.8 加样回收率 分别精密量取已知总黄酮含量
的提取溶液6份,分别加入一定量的橙皮苷标准品,
按上述操作方法测得吸光度,得出总黄酮含量,计算
出加样回收率。结果见表1。
表1 样品加样回收率实验结果
样品

样品含量
(μg·mL)
对照品量
(μg·mL)
测得量
(μg·mL)
回收
率(%)
平均回
收率(%)
RSD
(%)
1 8.748 10.2 18.68 97.4
97.0 1.10
2 8.748 10.2 18.50 95.6
3 8.748 10.2 18.54 96.0
4 8.748 5.1 13.76 98.3
5 8.748 5.1 13.74 97.9
6 8.748 5.1 13.68 96.7
2.9 含量测定 取样品溶液于284nm处测吸光度,
以标准曲线计算得到总黄酮含量。结果见表2。
表2 含量测定实验结果(%)
样品 总黄酮含量 平均含量 RSD
1 2.069
2.056 0.468
2 2.047
3 2.062
4 2.047
5 2.054
3 讨 论
本实验首次采用紫外分光光度法测定了蜘蛛
香中总黄酮的含量。研究表明结果,精密度、稳定性、
重复性良好,加样回收率合格,该方法快速、简便、结
果准确,仪器要求不高。可作为评价蜘蛛香品质的
方法之一。◆
参考文献
[ 1 ] 石晋丽,刘勇,肖培根.HPLC法测定不同产地蜘蛛香中橙皮苷
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[ 2 ] 陈磊,郑清明,郑汉臣,等.蜘蛛香的研究进展[ J ] .中国野生植
物资源,2002,21 ( 1 ) :8-11.
jatamansi Jones.
Key words :Valeriana jatamansiones ;Total flavones ;Spectrophotom etric method
)(