全 文 ：第 29卷 ,第 3期 光　谱　实　验　室 Vol . 2 9 , No . 3
2 0 1 2年 5月 Chinese Journal of Spectroscopy Laboratory May , 2 0 1 2
不同生长年限川党参多糖、总黄酮含量的
分析比较
① 联系人 ,手机: ( 0) 13647653516; E-mail: h exianyuan@ 163. com
作者简介:李达 ( 1985— ) ,男 ,湖北省赤壁市人 ,在读硕士 ,主要从事中药材 GAP建设以及有效成分提取的研究工作。
收稿日期: 2011-10-19;接受日期: 2011-12-05
李 达　何先元①　冯 婧　马发君a
(重庆医科大学药学院　重庆市渝中区医学院路 1号　 400010)
a(重庆市金马药业有限公司　重庆市　 404600)
摘　要　通过对不同生长年限川党参多糖、总黄酮含量的测定为川党参种植作出指导。 用苯酚 -硫酸
法测定不同生长年限的川党参多糖含量 ,用 UV法测定总黄酮含量 ,并对其结果的差异进行分析比较。 三
年生的川党参多糖含量最高 ,而总黄酮含量呈递增关系 ,四年生川党参总黄酮含量增长率比三年生川党参
有放缓趋势 ,因而在实际川党参种植采收可以选收三年生川党参。 以川党参的多糖含量、总黄酮含量为川
党参药材质量主要参考指标 ,结合种植年限等生产成本考虑 ,采收三年生川党参比较合适。
关键词　川党参 ;生长年限 ;多糖 ;总黄酮
中图分类号: O657. 32　　　文献标识码: B　　　文章编号: 1004-8138( 2012) 03-1724-05
1　引言
据中国药典 2010版收录 ,党参 [Codonopsis pilosula( Franch. ) Nannf. ]、素花党参 (C . pilosula
Nannf. Var. modesta)和川党参 (Codonopsis tangshen ) 3种 [1 ]为中药材党参的 3个基原。党参属于桔
梗科植物 ,为常见大宗中药 ,味甘 ,性平 ,归脾、肺经。 有补中益气、健脾益肺、止渴生津之功效 [2 ]。
川党参作为党参的一个重要品种 ,近年来产量连年提高并热销于华南以及东南亚地区。国内也
产生许多川党参规范化种植区 ,较为出名的产区有重庆市巫溪县、巫山县、奉节县、 南川市、湖北省
竹溪县、陕西省平利县等 [ 2, 3]。由于川党参巨大的药食两用价值和其产生的经济价值 ,对地方经济特
别是农业的增长有着越来越突出的贡献 ,一些川党参种植地区在医药企业的合作下开始建立起川
党参规范化种植基地 [4 ]。
在川党参种植区内采种 ,种植 ,采收都对川党参的产量以及经济利益最大化起着重要作用 ,由
于川党参是多年生草本植物 ,对不同年限的川党参而言 ,它的代谢产物含量是不同的即其生药质量
以及药用价值也是有差异的。因此要获得最大经济利益 ,川党参的生长年限尤为关键 ,因为既要保
证川党参的生药质量、药用价值符合质量标准 ,又要考虑其生长期的长短对药农的生产投入所产生
的经济负担。本文对不同生长年限川党参的多糖 [5 ]和总黄酮含量 [ 6 ]进行分析比较 ,对川党参生长年
限和采收做了初步的分析 ,可以作为川党参种植采收的参考。
2　实验部分
2. 1　仪器、试剂与材料
UNICO UV2000型紫外 -可见分光光度计 [尤尼科 (上海 )仪器有限公司 ]; KQ-500DE型数控
超声清洗器 (昆山市超声仪器有限公司 ) ; RE-2000旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂 ) ; XS205DU
型分析天平 (瑞士 Mett ler Toledo公司 )。
川党参 (采集于重庆市奉节县 ,采集时间: 2010年 9月 )。
芦丁标准品 ( 99. 8% ,批号 0781-200210,中国药品生物制品检定所 ) ;葡萄糖标准品 ( 99. 8% ,
批号 110833-200503,分析纯 ,中国药品生物制品检定所 ) ;亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、石油醚、无
水乙醇 (使用时配制成所需浓度 )、乙醚、丙酮、氯仿 ,苯酚 ,实验所用试剂皆为分析纯 ,皆选购自重庆
川东化工有限公司。实验用水为自制纯净水。
2. 2　实验方法
2. 2. 1　供试品溶液制备
准确称取不同年份的川党参粉 3份 ,每份约 5. 00g ,用石油醚 ( 60— 90℃ )水浴回流脱脂两次
(每次 2h)。残渣挥干溶剂后 ,置于圆底烧瓶中 ,加 60%乙醇 45mL浸泡 12h, 70℃下回流 3h。过滤 ,
另用少量 85%乙醇多次洗涤滤渣 ,并入提取液 ,并转入 100mL容量瓶中 ,用 85%乙醇定容 ,即得测
总黄酮的川党参供试品液一。 将提尽黄酮后的川党参残渣置于 100mL圆底烧瓶中 ,加 80%乙醇
50mL超声提取 20min,以除去单糖及一些苷类。残渣挥干乙醇后 ,加水 50mL在 75℃水浴下回流两
次每次 2h ,合并两次提取液 , 旋转蒸发至 10mL左右 ,然后用水定容于 100mL容量瓶中 ,即为测多
糖的川党参供试品液二。
2. 2. 2　多糖含量的测定
2. 2. 2. 1　校准曲线的绘制
准确称取 105℃干燥至恒重的葡萄糖 20. 0mg,加水溶解后 ,置于 100mL容量瓶中 ,用水稀释
至刻度 ,即得 0. 2mg /mL葡萄糖标准溶液。准确吸取标准溶液 0、 0. 2、 0. 4、 0. 6、 0. 8、 1. 0mL分别置
于 10mL具塞试管中 ,依次加水补足到 1. 0mL,各管再加入 5%的苯酚溶液 1mL,摇匀 ,迅速加入浓
硫酸 5mL,并于冰浴中冷却 ,然后置于 100℃水浴锅中加热 10min,然后置于自来水下冷却 ,用蒸馏
水补至刻度 ,于 490nm处测定吸光度 ,绘制校准曲线 ,以吸光度 A对样品浓度 C作回归分析 ,得到
回归方程 A= 1. 1966C+ 0. 0367, r= 0. 9991。校准曲线见图 1。表明糖含量在 0— 0. 02mg /mL范围
内具有线性特征。
2. 2. 2. 2　多糖含量的测定
准确吸取供试品液二 0. 5mL,按照 2. 2. 2. 1节的方法测定其吸光度 ,计算出不同年份川党参
多糖含量。
2. 2. 2. 3　精密度、稳定性实验
准确吸取供试品液二 1mL,共吸取 6份 ,按 2. 2. 2. 1节的方法测定其吸光度 ,求得 RSD为
3. 32% 。以其中一份作为参考对象 ,在 0. 5、 1、 2、 4、 12、 24h时测定其吸光度 ,求得 RSD为 2. 35% 。
2. 2. 2. 4　加标回收率实验
准确吸取 4份党参样品液 1mL,分别加入 0. 2mg /mL葡萄糖标准液 0、 0. 5、 1、 1. 5,按照
2. 2. 2. 1节方法 ,测得吸光度 A,计算平均回收率为 99. 84% , RSD为 4. 27% 。
2. 2. 3　总黄酮含量的测定
2. 2. 3. 1　校准曲线的绘制
准确称取在 120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品 20mg ,以 60%乙醇为溶剂溶解后定容至
1000mL,制得芦丁标准溶液 ( 0. 02mg /mL)。准确吸取芦丁标准溶液 0、 1. 0、 2. 0、 3. 0、 4. 0、 5. 0mL
分别置于 10mL的容量瓶中 ,加 5%亚硝酸钠溶液 1mL,摇匀 ,放置 6min,加 10%硝酸铝溶液 1mL,
1725第 3期 李 达等:不同生长年限川党参多糖、总黄酮含量的分析比较
摇匀 ,放置 6min,再加入 5%的氢氧化钠 1. 0mL,加 60%乙醇至刻度 ,摇匀 ,静置 15min。 以第一管
为空白对照 ,于波长 510nm扫描 ,测定吸光度。绘制吸光度-浓度曲线 ,求得回归方程为 A= 1. 43C
+ 0. 0292, r= 0. 9995。校准曲线见图 2。说明在 0— 0. 01mg /mL范围内 ,吸光度与相应浓度呈良好
的线性关系。
图 1　多糖校准曲线 图 2　总黄酮校准曲线
2. 2. 3. 2　总黄酮含量的测定
准确吸取供试品液一 1mL,并按照 2. 3. 1节方法测定其吸光度 ,计算出不同年份川党参总黄
酮含量。
2. 2. 3. 3　精密度、稳定性实验
准确吸取供试品液一 1mL,共吸取 6份 ,按 2. 2. 3. 1节的方法测定其吸光度 ,求其 RSD为
2. 07% 。以其中一份作为参考对象 ,在 0. 5、 1、 2、 4、 12、 24h时测定其吸光度 ,求得 RSD为 4. 88% 。
2. 2. 3. 4　加标回收率实验
分别量取藏党参的样品液 1mL,共 4份 ,置于 10mL容量瓶里。准确加入 0. 02mg /mL的芦丁
标准品储备液 0、 0. 4、 0. 8、 1. 0mL,再加入 80%的乙醇溶液补足至 10mL,照 2. 2. 3. 1节方法 ,进行
吸光度测定 ,代入校准曲线回归方程 ,计算出平均回收率为 114. 53% , RSD= 4. 50% 。
3　结果与讨论
3. 1　不同生长年限川党参多糖含量
不同生长年限川党参多糖含量测定值见表 1。
表 1　不同生长年限川党参多糖含量测定值
年份 样品数 多糖含量 (% ) 多糖含量平均值 RSD(% )
1 16. 02
1 2 16. 73 16. 19 2. 90
3 15. 83
1 19. 63
2 2 20. 83 19. 71 5. 40
3 18. 68
1 37. 56
3 2 37. 07 37. 16 0. 99
3 36. 84
1 29. 27
4 2 31. 63 29. 87 5. 10
3 28. 71
　　由表 1可知 ,在川党参的生长过程当中 ,多糖含量增长率并没有随着生长年份的增加而增大 ,
第二年增长率为 21. 74% ,第三年增长率为 88. 53% ,第四年出现负增长 19. 62%。第三年多糖含量
增长率最高。 [增长率的算法: (第 N+ 1年 -第 N年 ) /第 N年× 100% ]根据对增长率的比较 ,前三
1726 光谱实验室 第 29卷
年都处于增长期 ,并且第三年增长率很高 ,达到一个极大值 ,而在第四年 ,却出现了负增长 ,这可能
的原因是随着种植年限的增长 ,多糖在其代谢过程中有一部分作为能量物质消耗掉了 ,并不像种植
初期的时候储存起来 ,当然 ,具体为何种原因有待进一步的探讨研究。所以以川党参多糖作为考察
指标的话 ,选择采收三年生川党参是较为合适的。
3. 2　不同生长年限川党参总黄酮含量
不同生长年限川党参总黄酮含量测定值见表 2。
表 2　不同生长年限川党参总黄酮含量测定值
年份 样品数 总黄酮含量 (% ) 总黄酮含量平均值 RSD(% )
1 0. 049
1 2 0. 054 0. 054 9. 25
3 0. 059
1 0. 092
2 2 0. 097 0. 099 8. 27
3 0. 108
1 0. 153
3 2 0. 146 0. 147 3. 79
3 0. 142
1 0. 185
4 2 0. 177 0. 178 3. 68
3 0. 172
　　根据表 2可知 ,在川党参种植过程中 ,总黄酮含量是根据生长年限的增加而增长的。第二年的
增长率是 83. 33% ,第三年的增长率是 48. 48% ,第四年的增长率是 21. 09% 。第二年的增长率最
高 ,第三年也保持较高的增长速度 ,在这个时期 ,总黄酮含量都是以一个较为快速的速度增长的 ,到
第四年时增长率降低 ,可见增长速度在放缓。如果仅以总黄酮含量作为指标进行考察 ,选收四年生
的川党参总黄酮含量最高 ,但是考虑到第四年总黄酮增长速度在下降 ,加之多一年的生长 ,成本陪
护费用也相应增加 ,综合表 1和表 2,结合多糖含量、总黄酮含量进行考察 ,应该选择采收三年生川
党参 ,既保证了生药质量 ,又节约了种植成本。 因此 ,采收三年生川党参是较为合适的。
3. 3　结果分析
经过调查 ,在渝产川党参种植区 ,由于各方面因素 ,大多数药农采挖移植两年后的川党参作为
药材 ,可能导致部分川党参药材的生药品质并未达到最佳。因此 ,综合药农的生产成本、种植年限和
生药品质 ,可以选择采挖三年生川党参作为药材 ,这样可以保证其药用效果。
4　结论
党参是一味补中益气 ,健脾益肺的大宗药材 ,其含多种药用成分 ,但是目前还没有确定其有效
成分 ,鉴于目前多糖以及黄酮的药理研究 ,以及川党参多糖和黄酮含量较高且稳定 ,加之检测较为
方便 ,故而选取多糖和总黄酮作为研究指标来分析。 多糖是植物最为普遍的代谢产物 ,药理实验证
明其具有增加机体免疫力 ,增加脾脏造血功能等功效。黄酮具有抗炎抗病毒等广谱的生理活性和药
理作用。川党参多糖黄酮的药理研究也从一个侧面印证了党参补中益气、健脾益肺的功效。
多糖的测定有苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法 ,由于蒽酮不便于保存 ,要随用随制 ,在避光低温条
件下 ,苯酚溶液更容易保存 ,故而选用苯酚-硫酸法。 UV法是总黄酮含量测定的较为经典的方法 ,
操作简便。
在渝产川党参种植区 ,由于生长环境以及栽培模式的不同必然会造成川党参一些成分含量的
差异 ,因而在采收期的选择上显得尤为重要 ,因为既要保证采收药材的生药质量 ,又要综合考虑到
1727第 3期 李 达等:不同生长年限川党参多糖、总黄酮含量的分析比较
种植成本和经济效益。所以本研究参考渝产种植区的移植二年后采收的习惯 ,选取了 4个不同生长
年限的样品进行多糖以及总黄酮含量的分析比较。 可以作为川党参采收的参考。
参考文献
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Analysis and Comparison of The Contents of Pol ysaccharide and Total
Flavonoids inCodonopsis tangshen of Different Growth Years
LI Da　 HE Xian-Yuan　 FENG Jing　 MA Fa-Juna
(School of Pharmacy ,Chongqing Med ical University,Chongqing 400010, P. R.China)
a( Jinma Pharmaceut ical Co. , Ltd . ,Chongqing 404600, P. R.China)
Abstract　 The contents of poly saccharide and to tal f lavonoids inCodonopsis tangshen of different
g row th years w ere determined to make guidance for Codonopsis tangshen planting. The content of
polysaccharide w as detected by sulfuric acid-phenol method, and the total f lav onoids content w as
detected by UV spect rometry. The differences among the experimental results of Codonopsis tangshen
of dif ferent g row th years w ere analyzed and compared. The content of polysaccharide in three-year-old
Codonopsis tangshen is the highest, w hile the content of total flavonoids keeps increasing along wi th
g row th years, and the increasing rate of f lav onoids content in four-year-old Codonopsis tangshen i s
low er than that of th ree-year-old, thus in the actual planting w e should choose to harv est three-year-
old Codonopsis tangshen. If use the polysaccharide content and total flavonoids content as the main
reference index of quality of Codonopsis tangshen, considering the plant life and other costs of
production, it’ s suitable to harv est theCodonopsis tangshen of three years old.
Key words　Codonopsis tangshen; Grow th Years; Polysaccha ride; Total Flav onoids
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1728 光谱实验室 第 29卷