全 文 ：水冬瓜油对小鼠骨髓细胞
染色体畸变的影响
四 川省工业卫生研 究所 四 川省林木种子 公 司 哀 涛 陈科文
水冬瓜是 山桐子 ( d Is e呈 a po ly r a e pa max )和毛 叶 山 桐 子 ( I、 po ly ear pa var 、
v est it a D i es l )的俗名 “ ), 在我国分布广泛 。 水冬瓜油是水冬瓜的果实和种子经压榨 或 浸
出而制得的油 。 该油亚油酸含量高 , 精炼可制成营养价值高的食用油和工业用油 , 是重要的
木本油源 。
为确保人们食用和工业应用的安全 , 本文在我所水冬瓜油急性亚急性毒性实 验 的基 础
上 `“ ) , 进行了水冬瓜油有无致突变和致癌效应的研究 。通过喂养 90 一 1 0 天水冬瓜油的 小 鼠
骨髓细胞有丝分裂中期染色体分裂相的分析 , 了解水冬瓜油对小鼠体细胞是否有 致 突 变 作
用。
一 、 材 料 和 方 法
(一 ) 实验材料 :
本实验用油为四川省林木种子公司提供的四川广元地区野生水冬瓜油 , 用时 经 加 热炼
熟 , 处理 。 环磷酞胺为上海第十二制药厂生产注射用环磷酸胺 。
动物选用本所动物房繁殖饲养 , 8 一 15 周龄 , 体重 18 一 20 克的健康雄性小 鼠 。
(二 ) 实验方法 :
1
. 动物分组及受试物剂量
将 32 只小鼠随机分为三组 , 每组 8 只动物 :
第 I 组 , 空白对照组
喂以基础饲料
第亚组 , 水冬瓜油低剂量组
以人实际摄入油量 ( 设为 5 0 m l / 5 0 k g 体重 /每月 ) 的 10 倍 , 即按 3 . 4 m l/ k g 体 重 /每日
饲给小 鼠 。
第 l 组 , 水冬瓜油高剂量组
以人实际摄入油量的 10 0 倍 , 即按 3 4 m l/ k g 体重 /每日饲给小鼠 “` ) 。
试验膳是将水冬瓜油加入基础饲料 (烘烤熟的干粉饲料 ) 中 , 以开水调和而成 。 4 只小
鼠装为一罐 , 以罐为单位 10 天称一次小 鼠体重 , 计算基础饲料量 (按体重 20 % 算 ) 和给油
量 。 空白对照组喂以开水调和的基础饲料 。 各组动物 自由进食 , 自由饮水 。 水冬瓜油约 占低
剂量组饲料 (干粉 ) 的 1 . 7 % , 高剂量组饲料 (干粉 ) 的 17 % 。 共 喂 油 90 一 10 Q天 , 照 叭
一 2 4一
天算
4 9m l
, 低剂量组每只小鼠总共摄入油量约为 1 1耐 , 高剂量组每只小鼠总共 摄入 油 量 约 为
第万组 , 环磷酞胺阳性对照组
本组动物按照环磷酞胺青 L DS ” 用量 , 即 ` ” m o g 体重二次腹腔注射 , 最后一次 给药后 6小时活杀 川 , 活杀前 2 . 5 小时注射秋水仙素 。
2
. 骨髓染色体标本的采集和处理
动物处死前 2 一 3 小时 , 注射就水仙素 Zm g / k g 体重 , 断颈处死小 鼠 , 取股骨 , 用生 理
盐水冲洗骨髓腔 、 离心 、 收集骨髓细胞 、 低渗 , 使细胞膨胀 、 破裂 、 染色体分散 。
3
. 骨髓染色体标本的固定
以无水乙醇 、 冰醋酸配成固定液 , 重复固定二次 , 保持低渗处理后的骨髓细胞的原形 。
制备 o . 6m l细胞悬液 。
4
. 制片和染色
吸取细胞悬液滴在预冷的玻片 _ _卜, 微热烤 干 , 用 P H 7 . 4G论 m s a 染 色 25 一 30 分钟 , 冲
净晾干 。
二 、 结 果 和 讨 论
镜检时每剂量组观察分析 5 只动物的骨髓标本 * , 每张片子分析 10 0 个 (下限为 50 个 )
中期分裂细胞 , 根据 出现畸变染色体的细胞数 , 计算细胞畸变率 向
细胞畸变率 二 - 有染色体畸变的细胞数分析染色体的细胞总数 X 1 0 0
分析结果用细胞畸变率表示 , 在实验组与对照组之间进行比较 , 结果如下 :
小以骨髓细胞染色体指标观察 表 1
组 别 断裂 单 断 片刊双 断 片 …” .味 ’ 微 小 体 单体互换 { 粉 碎 化
I 空白对照组
I 水冬瓜油低剂量组
l 水冬瓜油高剂量组
丁 阳性对照组 9 2 1 1 4 0 1 7
阅片时 , 重点观察分析染色体结构上的畸变 。 在空白对照和二个实验组只看到了断裂 、
断片 , 微小体 。 整环磷酸胺 阳性对照组还观察到了环 、 单体互换 、 粉碎化等畸变类型 。 见照
片 :
根据各组动物出现畸变染色体的细胞数 , 计算细胞畸变率 。 结果见表 2 :
了
梦 阳性对照组阅 4 只动物的骨髓标本
一25一

1
:
I t
=0
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I
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3 3
二 1 4。 68
) P0
,
0 5
P > O
。
0 1
小鼠骨髓细胞染色体细胞畸变率经统计学处理 , 水冬瓜油低 , 高刘量组与空 自对照组比
较 , 差别均无显著意义 ( P > 。 . 0 5 ) 。 而与阳性对照组比较 , 差别均有极显著 意义 (P > 0 . 0 1 ) 。
阳性对照组的 P 值比阴性对照及实验组均高 40 倍以上 。
对 于染色体裂隙的出现 , 未作为畸变染色体数进行统计 , 单独列于表 3 。
小鼠骨髓细胞染色体裂隙出现率 表 3
. . , . . 巨 . . . . . . . 口 . r , . , 曰 . . . . . . . 州 . . 一一 , , , , 一~ . 一 ~ ,一 , 州 . 二 , ~ 的湘 . . .一~ . . . .一一 ,空白对照 组 I 水冬瓜油低 } l 水 冬瓜油高剂量组 } 剂童组 万 阳性对照组观察细胞数
裂 隙 数
裂隙出现率 1 。 连6 士 O。 5 6 0 。 8 0 士 0 。 凌0 1。 艺0 士 0 。 理8
3 7 5
9 5
艺5 。 3 0 士 2 。 2 5
t = 0
。
3 6
t 二 1 1 。 0 6
WIlt = 0
。
9 9
t 二 1 1 。 3止
P > 0
。
0 5
P < 0
.
0 1
I那百且贾.一
、 几个组染色体裂隙出现率经统计学处理 , 实验组与空白对照组差别无显著意义 , 而与阳
性对照组差别有极显著意义 。 环磷酞胺诱发染色体裂隙出现数 比空白对照 高 达 10 倍以上 。
在小鼠正常骨髓细胞染色体标本中就能看到多倍体 (多为四倍体 ) 的出现 。 实验中 , 各
组多倍体出现的数目经统计学处理的结果 , 两个实验组与空 白对照组 、 实验组与阳性对照组
之间均无显著差别 。 说明水冬瓜油无诱发染色体多倍体 出现 的作用 。 4 o ign k/ g 体重环磷酸胺
能引起骨髓细胞染色体结构畸变 , 但也未致使多倍体数 目增高。
小眼骨髓细胞染色体多倍体出现率 表 4
空白对照组 I 水冬瓜油低剂量组 皿 水冬瓜油高剂量组 开 阳性对照组
观察细胞数
)
吐
多 倍 _体 数 { “多借体出现率 l
_
, “ , 4“ 士 0
。
2 9
5 0 0
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t = 0
.
0 5 1
:
I t = 0
。
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.
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P> 0
。
0 5
P > 0
.
05
I万份里百昌
染色体畸变分析法 , 用于检验受试物可能引起的细胞遗传的异常现象。 检测小 鼠骨髓细
胞染色体畸变是使用高等哺乳动物细胞对受试物有无致突变性的一种快速测定方法 。 在正常
情况下 , 生物细胞染色体的数量 、 大小 , 形态都是相对恒定的 , 如果某种受试物使实验动物
的染色体发生数量或形态结构的改变 . 即为染色体畸变 。 本实验中 , 水冬瓜油的实验组及阴
性对照组的染色体细胞畸变率都在正常范围之内 , 与国内 、 外报道的正常值一致。
一 2 7一
三 小 结
水冬瓜油按 3 . ol /k g体重 /日及 43ml /k g体重 /日喂养小 鼠 09一 01 0天 , 未能引起 小鼠
骨髓细胞染色体的畸变 。 说明在本实验喂饲时间 、 剂量条件下 , 水冬瓜油无体细胞致突变作
用 。
阳性对照用 4 o m g / k g 体重剂量的环磷酞胺 , 二次腹腔给药 , 即能获得满意的 致突 变效
果 。
本实验用的骨髓细胞染色体畸变空气干燥洁 , 方法简单易行 , 有一定 的实用价值 。
本实验得到本所程海昌 , 李代英 、 贾万钩等 同志帮助 , 谨此致谢 。 四川医学科学院崔建
国同志参加了部份实验工作 。
主 要 参 考 文 献
1
. 王国礼 张志诚 : 水冬瓜油的脂肪静组成 , 异味成分 、 精炼工 艺和中间试验的研究 油脂科技
1 9 8 1 年增刊 12 4 页
2
. 吴全珍等 : 山桐子油的急性亚急性毒性及其对皮肤粗膜影啊的研究 油脂科技 1 9 8 2 年 6 期
3
. 《食品毒理 》 第 28 页 人民卫生出版社 1 9 7 9 年
4
. 史纪兰 黄权光 : 辐照 白兰地酒对大鼠骨髓嗜多染红 细胞微核的影响 山东医学科学院资料
5
. 《 工业毒理学实验方法 》 第 241 页 上海科学技术出版社 1 9 7 9 年
氧化油的毒性和抗氧化剂
商业部西安油脂科学研 究所 吴艳 霞
油脂和其他食品一样 , 在储藏过程中也会发生质变 , 发出一 种特殊的臭味 、 酷 味 和 苦
味 , 通常把这种现象称为 “ 酸败 ” , 它是一系列极为复杂的化学变化的结果 , 这些气滋味的
成分从化学分析获知 , 它们是挥发性的脂肪酸 , 醛酮 以及非挥发性的醛类 、 酮类 , 过氧化物
和氢过氧化物等 。
关于这些物质的毒性 , 白台 · 鸿 、 金田尚志等人做过试验 , 即把高度氧化的 亚 油 酸 甲
酷 , 也就是氢过氧化物和二次氧化物 (把油脂氧化使过氧化值达到最高程度后再继续氧化 90
小时 , 让过氧化物再分裂成大量氧化物 ) 含量极高的氧化油对实验动物 -— 小 白鼠进行急性和慢性的毒性试验 , 通过病理组织学的检定 、 解剖 、 观察 。 在急性毒性试验中 , 发现小白鼠
的肝脏 、 肺 、 肾脏等组织有病变症状 , 尤其是小肠的症状最为突出 , 这些特性症状是组织坏
死 , 脂肪沉积 、 血管扩张和充血 。 亚油酸甲酚的氢过氧化物和二次氧化物具有相同的毒性症
状 。 在慢性毒性试验中 , 用量为急性试验的 1 / 2 0 一 1 / 1 0 词养小自鼠二个月 , 在喂养期间对死
亡和存活的小 自鼠进行解剖 , 把小肠 、 肝脏 、 肺 、 ’肾脏等组织从小鼠体内分离 出 来 进 行 检
一 2 8一