全 文 ：草药朱砂莲抗菌成分的分离与鉴定
陕西省 中医研究所药物研究室
根据我省民间用药经验 、 实验研究①及临床初步试用情况②⑦ 来看 , 草药朱砂莲 (P 。行-
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.
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) 确有一定的抗菌作用 。 关于本品的化学成
分文献中尚未见有报导 。 为了认识朱砂莲中抗菌有效成分的性质 , 以便为今后改良剂型 、 控
制质量及制定工艺流程提供科学依据 , 有必要对其化学成分进行提取 、 分离与鉴定 , 本工作
之 目的乃在于此 。
我们结合微生物实验 , 从朱砂莲中分离出两种抗菌有效成分 : 朱砂莲 甲素及朱砂莲 乙素 。
根据两者 的理化性质及各 种 衍 生 物 的 制 备 (见表 l ) , 分别证明朱砂莲甲 素 即 大 黄 素
( e rn o d i n ) 〔 I 〕、 朱砂莲乙素即大黄素甲醚 ( Ph y s c i o n ) 仁I 〕。 查文献中关于大黄素及大黄素甲
醚前人已有报告 见 , 根据我们抗菌实验结果亦表明两者体外抗菌作用显著 , 至于两者的体内
的抗菌作用抗菌作用及临床效果如何 , 尚待今后进行观察和验证 。
实 验 部 分
(一 ) 朱砂莲甲案及乙紊的分离 :
( 1 ) 甲法 * 生 药 粉
}
, 仿回流提取
「一一一一一 一 )
药渣 提取液
{浓缩
, 放置
粗晶
{乙醇重结晶
母液
回收氛仿 , 乙醉重结品
I 一 - 一— 一马甲素 母液
(产 率 O 。 5 % )
析出物
}
苯重结晶
乙素 〔产率 0 . 01 % )
此法提取方便 , 但溶剂消耗量大 , · 产率低 , 不适于大量制备 。
(2 ) 乙法 生药粉
}
乙醇回流提取 , 趁热吸滤 。
药渣 提取液
}浓缩成糖浆娜 用 2 % H : 5 0 4 水解两小时 , 放冷 , 过滤
母液 析出物
…用抓仿回流提取
( — 〕不溶物 氯仿提取液…浓缩 , 放置 ,
厂~ ~ — - 一二 一— 一 乃析出粗晶
}
乙醇重结晶
甲素 (产率 3 % )
此法产量高 , 氯仿用量少 , ’可用于工艺生产 。
(二 ) 朱砂莲 甲素即大黄案〔工〕的鉴定 :
( l ) 理化性质 : 本品为橘黄色针晶 , 熔点 2 54 ~ 25 6 O C , 溶于 5 %碳酸钠溶液呈红色 ,
三氯化铁反应阳性 , 其乙醇溶液遇醋酸镁 晶粒呈红色 。
元素分析 : C , 。 H , 。 0 6
计算值 , % C = 6 6 . 6 6 ; H = 3 . 7 3
实验值 , % c = 6 6 . 5 4 ; H = 3 . 8 5
( 2 ) 乙酞化物〔皿 〕的制备 : 常法制备 , 甲醇重结晶 , 得淡黄色针晶 , 熔点 198 ~ 1” 。
C 。
元素分析 : C : 。 H 7 o 。 ( CH 。 C O ) 。
计算值 , % C = 63 . 63 ; H = 4 . 06
实验值 , % c 二 6 3 . 7 2 , H = 5 . 5 5
( 3 ) 苯甲酞化物〔W 〕的制备: 常法制备 , 用冰醋酸重结晶 , 得黄色结晶 , 熔 点 187 ~
1 8 9
O
C
。
( 4 ) 甲基化物 〔 l 〕的制备 : 用重氮 甲烷进行轻度甲基化 , 用乙醇重结晶得 橙 黄 色 针
晶 , 熔点 2 03 . 5 “ C 。 与大黄素甲醚测混合熔点不下降。
以上理化性质与文献⑥⑥ 记载的大黄素性质相符 , , 经与大黄素标准品测混 合 熔 点 亦
未见下降 , 因此证明朱砂莲甲素即大黄素 〔工〕。
(三 ) 朱砂莲乙素即大黄素甲醉〔 l 〕的鉴定 .
( 1) 理化性质 : 本品为橙黄色针晶 , 熔点 2 04 ~ 206 O C , 不溶于 5 %碳酸钠溶液 , 溶于
5 %氢氧化钠溶液呈红色 , 三氯化铁反应阳性 , 其乙醇溶液遇醋酸镁晶粒呈红色 。
元素分析 : c : 。 H : : 0 -
计算值 , % C = 6 7 , 6 3 , H 二 4 . 2 5
实验值 , % c 二 6 7 . 9 2 ; H = 4 . 2 5
( 2 ) 乙酞化物〔V 〕的制备: 常法制备 , 甲醇重结晶 , 得淡黄色针晶 , 熔点 1 8 ~ 1 8 9 “ 一
C
。
元素分析 : C : 。 H : 。 o 。 ( C H 3 CO ) :
计算值 , % C = e s . 2 1 ; H = 4 , 3 7
实验值 , % C = 65 . 5 1 ; H = 4 . 2 7
( 3 ) 苯甲酞化物〔班 〕的制备 : 常法制备 , 乙醇重结晶 , 得淡黄色丝绢状 结 晶 , 熔 点
2 3 1~ 2 3 3
O
C
。
元素分析 : C : 。 H : 。 0 7
计算值 , % C = 7 3 . 2 0 ; H = 4 . 1 0
实验值 , % c = 7 3 . 0 5 ; H = 4 . 2 5
( 4 ) 乙素脱甲基反应 : 称取乙素 10 毫克 , 加浓硫酸使溶解 , 油浴上在 16 0 “ C加热 1 小
时 , 放冷后加适量水 , 滤出析出物 , 用氯仿溶解之 , 通过硅胶柱层析纯化 , 乙醇重结晶 , 得 声
橘黄色针晶 , 熔点 2 56 ~ 27 5 O C , 与甲素测混合熔点不下降。
以上理化性质与文献⑤⑥ ①记载的大黄素甲醚性质相符 , 经与大黄素甲醚测混合熔点未
见下降 , 因此证明朱砂莲乙素即大黄素 甲醚〔 I 〕。
( 四 ) 朱砂莲甲紊与朱砂莲乙家的抗菌作 用 令
( 1 ) 实验方法 :
①甲素与乙素溶液的制备— 精确称取甲素 50 毫克 , 加 5 %碳酸钠溶液 2 毫升溶解后再以蒸溜水稀释至 50 毫升 , 使每 l 毫升含 l 毫克 。 乙素加 o . I N氢氧化钠 2 毫升使其溶 解 后 加
水稀释至 50 毫升 , 使每 1 毫升含 1 毫克 。 以上两液制备后高压 15 磅 1 小时备用 。
②应用试管法将上述甲素及乙素溶液按双倍顺序稀释 , 最后滴入菌液 , 经 37 O C 24 小 时
后 , 转种平板 , 再经孵育 , 观察有无细菌生长 , 以判定药液抑菌的最高稀释度 。
( 2 ) 实验结果 : 见下表 。
甲素和乙紊不同稀释度对不同菌种的抗菌效果
药 物 的 不 同 稀 释 度
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朱砂莲甲素一乙
嵌 抗菌试验系西安医学院第二附属医院检验科进行 。
福` 尸 、 表 1 : C o H 。 O C 0 0 0 CO C o H 。
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参 考 文 献
1
.陕西省中草药科研组 : 中草药简报 , 1 9 7。 , 第 4 期 .
2
. 同上 : 中草药研究资料 (第一集 ) , 1 9 7 0 .
3
. 陕西省中医研究所 : 中西医结合研究资料汇编 , 19 7 1 , 48 页 .
4
. 陈琼华等 : 药学学报 , 1 9 6 2 , 9 ( 1 2 ) , 7 5 7 ~ 7 6 1 ·
5
. 月田洁等 : 药学杂志 ( 日 ) , 1 9 5 4 , 7 4 ( 4 ) , 3 7 9 .
6
.
T u t i n F
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.
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