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3种滇产鼠尾草属植物丹参酮Ⅱ/A的薄层扫描定量



全 文 :3种滇产鼠尾草属植物丹参酮ⅡA 的薄层扫描定量
胡建林1 ,  张荣平1 ,  李惠兰1 ,  阎彩珍1 ,  杨国红2 ,  何广新3
(1.昆明医学院药学系 ,云南昆明 650031;2.云南中医学院中药系 ,云南昆明 650011;3.昆明市药品检验
所 ,云南 昆明 650034)
摘要:目的:测定了三种滇产鼠草属植物丹参酮 ⅡA 的含量。方法:用薄层扫描法 , 并与正品丹参作对比。结果:甘西鼠
尾丹参酮ⅡA 含量最高 , 其次为滇丹参 ,褐毛甘西鼠尾中丹参酮ⅡA 与正品丹参相当。结论:实验结果对其质量评价有一
定意义。
关键词:滇丹参(Salvia yunnanensis C.H.Wright);甘西鼠尾(S.przewalskii Maxim);褐毛甘西鼠尾(S .przewalsk ii
Maxim var.mandarinorum Stib);薄层扫描(TLC-SD)
中图分类号:284.1     文献标识码:A      文章编号:1001-1528(2000)10-0723-02
Determination of Tanshinone ⅡA Content in Three kinds of Plants Belonging to
Salvia by TLC-scanning
HU Jian-lin1 ,  ZHANG Rong-ping1 ,  LI Hui-lan1 ,  YAN Cai-zhen1 ,  YANG Guo-hong 1 ,  HE Guang-
xin
2
(1 .Kunming Medica l College , Kunming 650031 , China;2 .Depar tment of Pharmacy , Y unnan Col lege of TCM , Kunming 650011 , Ch ina;
3 .Kunming Insti tute for Drug Control , K unm ing 650034 , Ch ina)
Abstract:Objective:To determine tanshinone ⅡA content in three kinds of plants belonging to salvia.Methods:
TLC-scanning method w as used and the determination result w as compared with that of Radix salviae miltior-
rhizae.Results:Tanshinone ⅡA content of S.przew alskii maxim w as the highest , and nex t is S.yunnanensis C.
H.Wright Tanshinone ⅡA content of S.przew alskii maxim Var.mandarinorum stib is equivalent to radix salvi-
ae miltiorrhizae.Conclusion:The experiment results have a certain implication in quality evaluation of three kinds
of plants belong ing to salvia.
Key words:salvia yunnanensis C.H.Wright;S.przew alskii maxim;S.przew alskii maxim var.mandarino-
rum stib;TLC-scanning
收稿日期:1999-12-30
基金项目:云南省科学技术委员会应用基础研究基金资助项目 98C067M
作者简介:胡建林(1965~ ),男 ,云南昆明市人 ,副教授 ,主要从事天然药物化学的研究 ,电话:0871-5338824.
  药用鼠尾草属植物具有活血化瘀 ,凉血消肿的
功效 。鼠尾草属植物滇丹参 ,甘西鼠尾 ,褐毛甘西鼠
尾在云南资源丰富[ 1] 。据报道 ,此 3种滇产鼠尾草
属植物与正品丹参(Salvia milt io rrhiza Bge)有相同
的有效活性物质 ,且药理活性显著 。本文采用双波
长薄层扫描法测定 3种滇产鼠尾草属植物丹参酮
ⅡA 的含量 ,并与正品丹参为对比 ,得出结论:甘西
鼠尾中丹参酮ⅡA 的含量最高 ,滇丹参 、褐毛甘西鼠
尾中丹参酮ⅡA 的含量也不低于正品丹参。中国药
典规定丹参酮ⅡA 的含量是评定丹参质量的重要指
标 ,此结论对于该 3种滇产鼠尾草属植物的质量评
价可提供参考 ,为扩大丹参的药用资源提供了线索。
1 仪器与药品
丹参酮ⅡA 对照品(昆明市药品检验所);丹参
购自云南省菊花村药材市场 ,经昆明市药品检验所
鉴定 ,滇丹参 、甘西鼠尾购自云南省富民药材公司 ,
褐毛甘西鼠尾由云南省药材公司提供 。
仪器:CAMAG SCAN3型薄层扫描仪 , CAMAG
NANOMATⅢ点样器 ,CAMAG定量毛细管。
高效硅胶板(青岛海洋化工厂分厂),其它试剂
均为分析纯 。
2 薄层扫描定量
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第 22 卷 第 10期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
Oct., 2000
Vol.22 No.10
2.1 薄层层析条件
2.1.1 层析条件:高效硅胶板(10×10cm),用苯 —
乙酸乙酯(19:1)展开 。
2.1.2 样品溶液制备:精密称取生药粉末(40目)
各2.0g ,置于具塞锥形瓶中 ,加入 20ml二氯甲烷 —
甲醇(5:1)冷浸 20h。过滤 ,滤液置于小蒸发皿中 ,
上盖滤纸 ,让其自然挥发。同理 ,分别再加入 10ml
溶剂提取 2次 ,挥干。用提取溶剂洗涤 3次挥发余
留物 ,转入 10ml量瓶中 ,定容 。
2.2  扫描条件 氘灯 , 扫描参数 ,测定波长 λδ=
270nm ,参比波长λR=370nm , 分束器尺寸:5.0 ×
0.30mm ,扫描速度:5mm/ s ,扫描方式:吸收反射。
2.3  标准曲线  精密称取丹参酮 ⅡA 对照品1.0
mg ,置于 5ml容量瓶中 ,加二氯甲烷溶解并稀释至
刻度 , 用 CAMAG 定 量 毛 细 管 于 CAMAG
NANOMAT Ⅲ点样器上 ,吸取 2 , 4 , 6 ,8 ,10 ,12μl ,点
于同一块薄层板上 ,以苯 —乙酸乙酯(19:1)上行展
开 ,挥去溶剂进行扫描 ,以点样量 X(μl)为横坐标 ,
斑点积分面积 Y 为纵坐标 ,绘制标准曲线 ,回归方
程为:Y=3318.98+15095.27X , r=0.9956 。
2.4 稳定性试验 吸取上述丹参酮 ⅡA 标准液
(0.2mg/ml)2μl点样 ,展开 ,在相同条件下 ,于 0 , 2 ,
4 ,8 , 16h分别测定斑点积分值 ,结果表明:斑点在8h
内稳定。
2.5 精密度试验 精密吸取丹参酮 ⅡA 对照品标
准液(0.2mg/ml)2.0μl共 6 份 ,分别点于同一硅胶
G薄层板上 ,展开后扫描 ,斑点面积积分值的 RSD
=3.62%。在不同薄层板上点 3 个对照品点 ,展开
后测定 ,重复 4块板的积分值 ,RSD=3.87%。
2.6 加样回收率 称取 10mg 正品丹参两份 ,一份
加入标准品50μl ,另一份不加标准品 ,后分别加入二
氯甲烷 ———甲醇(5:1)1.0m l按样品液制备方法提
取 ,在薄层板上点样 2μl展开 ,扫描得丹参酮 ⅡA 回
收率为98.83%。
2.7 生药测定 生药样品溶液点于薄层板上 ,以丹
参酮ⅡA 标准溶液为对照 ,按拟定条件展开 ,薄层层
析结果见图 1 。扫描测定 ,根据样品和对照品的积
分值 ,微机处理点样量中丹参酮 ⅡA 的量 。扫描结
果及计算结果见表 1。
3 讨论
3.1 展开剂的选择:曾用文献报道的苯 —己烷—甲
醇(7:2:1)为展开剂[ 2] ,薄层层析结果见图 2 ,扫描
测定 ,因扫描点接近前沿 ,对扫描结果影响大 ,微机
图 1 以苯-乙酸乙酯(19:1)为展开剂的薄层色谱
S1.丹参酮ⅡA 标准液(高浓度对照);S2.
丹参酮ⅡA标准液(低浓度对照)
1.正品丹参样品液;2.滇丹参样品液;3.
甘西鼠尾样品液;4.褐毛甘西鼠尾样品液
表 1 样品测定结果
生药 点样液中丹参酮ⅡA的量(μg)
生药中丹参酮
ⅡA 的含量(%)
正品丹参 2.71 1.355
滇丹参 2.82 1.41
甘西鼠尾 2.99 1.495
褐毛甘西鼠尾 2.71 1.355
处理结果 RSD为 9.8%,已接近 10%,误差大。本
文选用苯—乙酸乙酯(19:1)为展开剂 ,薄层层析结
果对比图 2 ,扫描点位置较恰当 ,且 RSD为 4.0%,
扫描效果较好。
图 2 以苯-己烷-甲醇(7:2:1)为展开剂的薄层色谱
S1.丹参酮ⅡA 标准液(高浓度对照);S2.
丹参酮ⅡA标准液(低浓度对照)
1.正品丹参样品液;2.滇丹参样品液;3.
甘西鼠尾样品液;4.褐毛甘西鼠尾样品液
3.2 测定结果对此 3 种滇产鼠尾草属植物质量评
价的意义 由上表扫描测定结果 ,对比正品丹参可
知:3种滇产鼠尾草属植物中甘西鼠尾丹参酮 ⅡA 含
量最高 ,其次为滇丹参 ,正品丹参 ,褐毛甘西鼠尾中
丹参酮 ⅡA 含量相当 。
参考文献:
[ 1]  徐任生.丹参—生物学及其应用[ M] .北京:科学出版社 , 1990 ,
129.
[ 2]  罗淑荣 ,陈国富 ,童玉懿.丹参原植物中丹参酮ⅡA 及隐丹参酮
的薄层光密度法测定[ J] .药物分析杂志 , 1988 , 8(3):154-159.
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中 成 药
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