全 文 ：第6 卷 第 2期
1 97 9 年
_ 上海 第 一 医 学 院 学 报
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1 9 7 9
防治冠心病中草药的研究
1
. 鼠尾草属植物的筛选
郭济贤 顺庆生 马虹新 李 颖
(上海第一医学院药学系生药学教研组 )
颜寿琪 陈滨凌 虞礼敏 赵明霞
(上海第一医学院药学系药理生化教研组 )
冠心病为严重常见病之一 。 因此 , 寻找和研制防治冠心病的有效药物 , 是药物研究中
的一项重要课题 。 我系自 1 97 年下半年起 , 由生药学教研组与药理生化教研组合作 , 开
展了防治冠心病中草药的研究工作 。 我们考虑从以下两个方面寻找与筛选样品 : ( 1) 临床
用手冠心病心纹痛确有疗效的中草药的同属或近缘属的植物 ; (2) 中医传统认为具有活血
化痪 、 芳香开窍功能的中草药 。 在此基础上 , 并进行必要的实验研究 。
中药丹参为唇形科 (L a b i at ae ) 鼠尾草属 ( S al 丽 a) 植物丹参 ( S哪丽 a 。赫杯口r 犷无落绍
B u n ge )的干燥根部 , 其水溶性部位注射液对冠心病心绞痛与心 肌梗塞 有较显 著 的疗
效 .1[ , , 。 上海第九制药厂与上海第一医学院中草药化学教研组首先 自丹参水溶性部 位 中
分离得原儿茶醛 (rP 饥 co at ce 五u al de h y de ) 〔` b l 。 江苏新医学院医学系药理教研组观察到
提自四季青 (1 二咖、 俪: is m的叶的原儿茶醛有较强的扩张冠状动脉作用 4[J 。 这一结果
提示 , 原儿茶醛可能为丹参作用于冠心病的一种活性成分 。 据此 , 我们收集了鼠尾草属 1 9
种植物与生药样品 (包括丹参及一个未定种 ) , 以其水溶性部位进行药理筛选 , 并借薄层层
析检查原儿茶醛在这些植物中的分布 。 本文报告此项研究的结果 。
实 验 材 料
实验用鼠尾草属植物与生药样品
样品种类和产地等见表 九
表 l 实验用鼠尾草属 (尽a乙丽 a )植物与生药样品
编 号 生 药 名 称 药用 (实验 )部分 植 物 学 名 产 地
一·姗砚小紫丹参
大紫丹参
黑大紫丹参
红根子
云南鼠尾草 S al 而 a 倪们夕乙口儿 6 们之浅召
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橙色鼠尾草 5 . a e犷 e a L 6 v l ·
大叶鼠尾草 8 . 9 、 叼坛了j 她 W ·
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备 注
干品 (下同 )
红根草 召. 到妞伪“讹 H a 七 ce
云南楚雄
云南楚雄
云南楚雄
江西弋阳
根IC曰nO4咎-8a象
太系 1 9 75 级毕业生林连波 、 王怀琦 、 李丽 、叶顺英参加实验工作 。
上 海 第 一 医 学 院 学 报 6卷
(续表 )
编 号 生 药 名 称 药用 (实验 )部分 植 物 学 名
丹参 丹参 &饥翻`。叮从绍 E u o ge
丹参
一串紫
蓝花鼠尾草
朱唇
一串红
红大紫丹参
根
带根全草
带根全草
带根全草
带根全草
根
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-5 1 2{ 白花丹参
紫参
荔枝草
甘肃丹参
南欧丹参
丹参
反背红
土丹参
全草
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根
南丹参 5 .乙侧 l e夕 a“ D u n n
一串紫 名 .无理冲机协之名仍 L .
蓝花鼠尾草 s .a f“ 翎 ae Be nht ·
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白花丹参 5 .饥倪“盯了人咖 Bu ngeva r .饥叮杯盯犷 h乞日 a f .la ba C .Y .W u
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南欧丹参 5 .邵 z, ae .L
拟丹参 召 . : 认幼 a M i go
贵州鼠尾草 5 . e a 俨 a Ze ,俪 L 6v l ·
荞麦地鼠尾草 5 . 凡他帅 e“~ L `vl
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} }本院红旗药厂提供
! 山东临沂 }水溶性部位注射液
} 卜批号 , 7 7 0 70 1 )
1江酉湖 口 }
}上海 } 观 赏植物
{上海 } 观赏植物
{上海 { 观赏植物
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云南楚雄
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学名未定
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}上海 {
{甘肃武威 }
! 陕西西安 }
}安徽六安 }
1贵州岑巩 {
1四川德昌 }
原儿茶醛 ( 3 , 4 二轻基苯甲醛 )标准品
上海试剂总厂出品 (批号 : 74一 03 一 01) 。
实验方法与结果
药 理 筛 选 部 分
一 、 供药理筛选用水溶性部位注射液的制备
称取一定量整理过的实验材料 , 用常水洗净 , 再用蒸馏水冲洗后 , 切碎 , 置三角烧瓶
中 , 加蒸馏水覆盖约 6 厘米 , 小火加热煮沸 , 煎煮 2 小时后 , 倾出煎出液 。 药渣再加蒸馏水
同上煎煮二次 , 每次 1 . 5 小时 , 合并煎出液 , 水浴浓缩至每毫升含生药 2 克左右 。 浓缩液
冷却后 , 加入 95 沁 乙醇 , 边加边搅拌至含醇量为 75 多 , 静置冷藏 40 小时 , 过滤 , 滤液浓缩
至每毫升含生药 5 克左右 。 浓缩液同上加入 95 多 乙醇至含醇量为 8 5外, 静置冷藏 40 小
时 , 过滤 , 滤液浓缩至每毫升含生药 6 克左右。 加入 10 倍量左右重蒸馏水 , 静置冷藏 16
小时 , 过滤 , 滤液浓缩至每毫升含生药 4 克左右 , 冷藏 4 0 小时以上 , 过滤 , 滤液以 1 0多 氢
氧化钠调节 p H 至 6 , 8 左右 , 加热煮沸 0 . 5 小时 , 加入 2外 活性炭 , 稍冷后过滤 , 再用 10 外
氢氧化钠调节 p H 至 6 . 8 , 再过滤 , 以重蒸馏水稀释至每毫升含生药 1 . 5 克 , 灌封 , 消毒后
得水溶性部位注射液 。
二 、 小 白鼠常压耐缺氧试验
取体重 17 ~ 21 克健康小鼠 , 随机分组 , 每组 1 0 只 。 给药组分别腹腔注射样品水溶性
部位注射液 0 . 2 毫升1/ O 克 (相当于 3 0 克生药 /公斤 ) , 对照组分别腹腔注射相同剂量的
生理盐水 , 分别于给药后 0 . 5 、 1 . 5 、 3 小时放入相同体积 (1 25 毫升 )的带有橡皮塞的广口
2期 防 治 冠 心 病 中草 药 的 研 究
瓶中 (瓶内放有钠石灰 0 1克 , 以吸收水份 和二氧化碳 ) , 塞紧塞子 , 记录小 鼠的存活时间 ,
将给药组与对照组的平均存活时间作统计学处理 。
结果 : ( 1) 能显著地提高小鼠常压耐缺氧能力的样品 ( P < 0 . 0 5 ) : 给药 0 . 5 小时后有
于 8 、 1 6 ; 给药 1 . 6 小时后有 -5 7 、 8 、 1 3 、 1 4 、 1 5 ; 给药 3 小时后 于1 8 。 (2 )能非常显著地
提高小鼠常压耐缺氧能力的样品 (P < 0 . 01) : 给药 0 . 5 小时后有 S一1 、 5 、 6 、 1 7 ; 给药 1 . 5
小时后有 S一1 、 4 、 5 、 6 、 1 1 、 1 2 、 1 6 、 1 7 、 1 8、 1 9 ; 给药 3 小时后有 S吐 、 4 、 5 、 6 、 8 、 9 、 1 7 。
三 、 离体豚鼠心脏灌流试验
取体重 28 0 ~ 35 0 克健康豚鼠, 雌雄兼有 , 用力击昏后 , 迅速剖开胸腔 , 暴露心脏 , 剪破
心包膜 , 小心将心脏放入含饱和氧气的冷灌流液中 , 轻轻将心脏内血液全部挤出 , 剪去其
它残余组织 , 然后将心脏套管插入主动脉内 , 扎紧固定 , 安于灌流装置上 , 在恒压 (液面高
度 6 0 厘米 )与恒温 (37 士 0 . 50 0) 下 , 用氧饱和的台氏液灌流心脏 , 记录每 2 分钟的冠状动
脉流量 。 流量稳定后 , 则 以含有样品水溶性部位注射液的台氏液 (浓度 : 0 . 75 、 1 . 5 、 3 毫克
生药 /毫升 )灌流心脏 , 记录每 2 分钟的冠状动脉流量 。 将给药前后的冠状动脉流量作统
计学处理 , 结果见表 2 。
表 2 离体豚鼠心脏灌流试验结果
样 品 } 浓 度
}(毫克生药
… 编 号 …/毫升 ) 动物数
冠 状 动 脉 流 量 (毫升 2/ 分钟 )
{ 给 药 前 ! 给 药 后 增 加 数 增加率 (% ) P 值
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90 士 1 . 3 6一一 ~ ~ ` ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ 一薄 层 层 析 部 分一 、 供薄层 层析用样品液的制备取样品水溶性部位注射液 4 毫升 , 用 6N 盐酸酸化至 p H < 2 , 置分液漏斗中用 乙醚
上 海 第 一 医 学 院 学 报 6卷
1 0毫升提取 3次 。 合并乙醚提取液 , 回收乙醚 , 残留物加 9 5多 乙醇 1 . 石毫升溶解 , 即得
供薄层层析用样品液 。
二 、 硅胶一 C班C 薄层的制备
取薄层层析用硅胶 H 与 0 . 8界 CM O (较甲基纤维素钠 ) 水溶液按常法制备硅胶一 CM C
薄层 。 硅胶用量按 10 ~ 15 毫克 /平方厘米计算 。 薄层于 6 0o C 干燥后 , 1 1 0o C 活化 30 分
钟 , 置干燥器中备用 。
三 、 展开
1
. 展开 剂 (1) 苯 : 醋酸 乙醋 : 甲酸 (8。 : 7 0 : 8) ; (2) 氯 仿 : 丙 酮 : 甲醇 : 醋
酸 ( 70 : 2 0 : 1 5 : 5 ) 。
2
. 展距 1 0 厘米 。
各种实验材料的样品液与原儿茶醛标准品乙醇溶液点样后 . 系在相同条件下展开 。
四 、 显层
先将薄层置紫外线分析灯下观察荧光斑点 , 再喷以三氯化铁一铁氰化钾试剂 , 并将薄
层置 0 . I N 盐酸中浸泡数分钟 , 以流水冲去酸液 。
五 、 结果
两种不同溶剂系统的层析结果表明 , 本文所研究的鼠尾草属植物或生药的水溶性部
位中均显有与原儿茶醛相同 丑 , 值的斑点 (图 1 、 2 ) , 因而初步确定原儿茶醛在所试植物 中
均有分布。
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图 1 鼠尾草属 (山如艺司植物与生药水溶性部位的薄层层析 ( 1)
展开剂: 苯 : 醋酸乙醋 : 甲酸 ( 80 : 7 0 : 8) P: 原儿茶醛 S一 1~ 19 : 样品 , 见表 1
2期 防 治 冠 心 病中草 药 的 研 究
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图 2 鼠尾草属 ( S al 。俪 )植物与生药水溶性部位的薄层层析 (2)
展开剂 : 氯仿 : 丙酮 : 甲醇 : 醋酸 (7。 :2 0 : 15 :5 ) P : 原儿茶醛 冬 1~ 19 : 样品 , 见表 1
讨 论
(1 ) 药理筛选试验结果表明 , 在所试样品中 , 云南鼠尾草 (-5 1) 与拟丹参 (s 一 1 7) 两种
植物根的水溶性部位注射液能非常显著地提高小鼠常压耐缺氧能力 ( P < 0 . 0 1) , 并增加
离体豚 鼠心脏冠状动脉流量 ( P < 0 . 01) 。 二者的作用强度及薄层层析的结果均与临床习
用的丹参 (-5 5) 根的水溶性部位相近 。 而且 , 它们分别在云南省与安徽省有相当量的资源
并作药用 。 据此 , 我们认为 , 可以推荐云南鼠尾草与拟丹参的根作为丹参的代用 品 , 用于
冠心病的治疗 。
( 2 ) 在小 鼠耐缺氧试验中观察到 , 大多数样品均能使小 鼠处于安静状态 , 但不引起睡
眠或麻醉 。 这与丹参有明显镇静 、 安定作用的报道相一致〔5J 。 这种作用可能是提高耐缺
氧能力的重要原因之一 , 对冠心病的治疗是有利的 。
(3 ) 药理筛选试验结果表明 , 多数能提高小鼠常压耐缺氧能力的样品同时能增加离
体豚 鼠心脏冠状动脉流量 , 但也有少数样品仅对其中一项试验有显著作用 。 因此 , 我们认
为 , 对于防治冠心病中草药的筛选 , 药理试验应采用两种以上的多指标 。
( 4 ) 在已知丹参水溶性部位中含有原儿茶醛的基础上 , 我们对 鼠尾草属的 18 种植物
或生药样品进行了薄层层析检查 , 初步确定在所试样品中均含原儿茶醛 。 这一实验结果
对于探索唇形科鼠尾草属植物化学成分的分布规律 , 研究这一类群植物的化学分类学 , 可
能具有一定的参考意义 。 但是 , 由于我们所试植物的种数仅为我国所分布的该属植物总
数的四分之一左右 , 因此 , 有必要进一步研究 。
(5 ) 在所试样品中 , 原儿茶醛的含量高低不一 。 据薄层层析结果估计 , 以云南鼠尾草
( S
一
1)
、 丹参 ( S一5) 及拟丹参 (S 一17) 中的原儿茶醛含量铰高 , 其余均较低 。 而这三种样品
提高小鼠常压耐缺氧的能力及增加离体豚 鼠心脏冠状动脉流量的作用最为显著 。 从而进
上 海 第 一 医 学 院 学 报6 卷
一步提示原儿茶醛可能为丹参作用于冠心病的一种活性成分 。 本院有关教研组正在开展
对原儿茶醛的实验研究 , 结果将另行发表 。
( 6) 薄层层析结果表明 , 除原儿茶醛外 , 在所试样品水溶性部位中尚显示一个具显著
量的共有成分 , 其 R , 值约为 0 . 2 3 〔展开剂 ( 1) 〕与 0 . 3 5 〔展开 剂 ( 2 )〕。 这 一 成 分 值得
探讨 。
(7 ) 河南南阳化学制药厂试制室曾报道丹参注射液的硅板薄层层析 61[ 。 惟其仅在可
见光与紫外光下观察层析结果 。 我们认为 , 这样的结果是不够完全的 。 根据我们的实验 ,
在观察荧光斑点后 , 喷洒三氯化铁一铁氰化钾试剂 , 并在 0 . I N 盐酸中浸泡数分钟 , 显色的
斑点数较可见光下显示的斑点数为多 , 比较符合实际情况 。 又 , 该文指出 , 凡有原儿茶醛
斑点的丹参注射液在波长 281 土 3 纳米 ( n m )处有最大吸收峰 , 反之则无 。 我们 曾对所试
样品水溶性部位注射液进行紫外吸收光谱测定 , 结果发现 , 虽然所试样品均显示原儿茶醛
斑点 , 但并非全部均在此波长处有最大吸收 (如子4 、 7 、 1 0等 ) 。 因此 , 南阳化学制药厂的
提法是值得商榷的 。
参 考 文 献
[ 1 〕
[ 2 〕
[ 3 a〕
[ 3 b〕
〔 4 ]
〔 5 」
〔 6 〕
上海第九制药厂 : 冠心病新药— 丹参及复方丹参注射液的研究 , 医药工业 ( l) : 14 , 1 9 73 。金惠铭 : 丹参制剂的临床运用及其活血化痕原理的研究 , 中华医 学杂志 ( 5 5) : 1 80 , 1 9 7 8 。
上梅第九制药厂 、 上梅第一医学院中草药化学教研组 : 丹参 (召口d如 加 l沉ae 对姗`时动咖e) 有效成分的研究
I
,
LJ 茶酚醛的分离鉴定与药理 (内部资料) , 1 9 75 年 5 月 。
上海第九制药厂 、 上海第一医学院中草药化学教研组 : 丹参 (R a d让 碗 l明口 ` 对心故冲诵艺召口e) 有效成分的研究 工,儿
茶酚醛的分离与鉴定 (摘要 ) , 中国药学会上海分会 1 9 7 年度学术年会资朴 , 1 9 78 年 4 月 。
江苏新医学院医学系药理教研组: 四季青对冠脉流量及心肌氧耗量的初步研究 , 中草药通讯 (幻 : 35 , 1 9 7.5
《全国中草药汇编》编写组 : 《全 国中草药汇编 》上册 , 第 1 版 , 2 16 页 , 人 民卫生出版社 , 1 9 75 年。
河南南阳化学制药厂试制室: 丹参注射液的硅板薄层层析 , 医药工业 (7 ) : 14 , 1 9 7 6 。
本文承云南楚雄卫生学校、 安徽省药检所及上海市龙华留圃等单位提供部分样品 , 特致谢意。
2期 防 治 冠 心 病 中 草药 的 研 究 89
ST U I E DS ON C I HN ESU G R E DS O FR
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1
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口加 J:一灯人N , S n u N Q I N o 一 s H E N G , M ^ E O N o 一 x I N , L l YI N e , Y人 N S H o u 一盯 -
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e r o h r o m a七o g r a Ph y ( T L C ) a n a l y o i s , 伍 e a u t h or o f o u n d t h a七
t h e Por 七o c a七e c h u a ld e hy d e ( P C A ) o c o u加 i n a l l 1 9 o a m p l e s o f S a Z。落a s p e c i e s
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e x a m in a t i o n 场 T L C , 七h e P CA e o n t e n七 o f R S M , R S Y a n d R S S 15 h i g h e r 七h a n t h e
o七h e r s , 七h u s i七 o a n b e c o n s i d e r e d a s a n a o七i v e P r血 ic P l e o f 士h e s e r o o士s 主n t h e 七r e a ltn e n 七
o f e o r o n a yr h
e a r t d i s e a 日e
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