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作 者 ：张艳;路福平;刘逸寒;李玉;张春峰;

期 刊 ：生物技术通报 2012年 0卷 07期 页码：114-118

关键词：长野芽孢杆菌；普鲁兰酶；WB600表达；酶学性质；

摘 要 ：根据NCBI上报道的基因序列设计引物,以长野芽孢杆菌(Bacillus naganoensis)ATCC53909的染色体DNA为模板,PCR扩增普鲁兰酶编码基因pulB。将此基因与表达载体pWB980连接构建重组质粒pWB-pulB,并转化枯草芽孢杆菌WB600。SDS-PAGE结果显示,在100 kD处有特异性条带,经测定重组转化子粗酶液酶活力达10.94 U/mL。酶学性质分析表明,其最适反应温度为60℃,最适反应pH为5.0,且在温度30-60℃及pH4.0-6.0范围内稳定,适合淀粉加工行业的应用。

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