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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2015, 31(5):179-185
收稿日期 ：2014-10-11
基金项目 ：广东高校国际合作创新平台项目（2013gjhz0008），十二五国家科技支撑计划（2012BAD17B02），广东教育厅科技创新重点项目
（2012CXZD0026）
作者简介 ：蔡佳，男，讲师，研究方向 ：水产动物病害防治 ；E-mail ：matrix924@foxmail.com
通讯作者 ：鲁义善，教授，研究方向 ：水产动物免疫学及病害控制 ；E-mail ：fishdis@163.com
红笛鲷（Lutjanus sanguineus）C 型凝集素基因的克隆
与组织表达分析
蔡佳1，2，3  张雪利1，2，3  吴灶和2，3  简纪常1，2，3  鲁义善1，2，3   
冯东岳4  焦茂兴5
（1. 广东海洋大学 水产学院，湛江 524088 ；2. 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，湛江 524088 ；3. 广东省水产经济
动物病害控制重点实验室，湛江 524088 ；4. 农业部全国水产技术推广总站，北京 100125 ；5. 宜春学院，宜春 336000）
摘 要 ： 根据已知的海水鱼类 C 型凝集素基因的核苷酸保守区序列设计一对简并引物，先后通过 RT-PCR 和 RACE PCR 法
从红笛鲷脾脏中首次克隆获得红笛鲷 C 型凝集素（CTL）基因的 cDNA 全长（登录号 ：AGT37609）。该序列长 828 bp，开放阅读框
663 bp，编码 220 个氨基酸。氨基酸序列分析显示，红笛鲷 CTL 基因氨基酸序列与其他物种 CTL 的相似性在 30%-68% 之间。系
统进化分析表明，红笛鲷 C 型凝集素与鳉鱼、条石鲷、斜带石斑鱼 CTL 蛋白亲缘关系最近，聚成一支。通过荧光定量 PCR 分析红
笛鲷基因的组织差异表达，红笛鲷 CTL 基因在肝、脾以及皮肤中表达水平较高，其次是头肾、肾、胃、肠及肌肉，在心脏与脑中
表达量较低。
关键词 ： 红笛鲷 ；C 型凝集素 ；基因克隆 ；组织表达分析
DOI ：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.05.028
Cloning and Tissue Expression Analysis of C-type Lectin Gene from
Humphead Snapper（Lutjanus sanguineus）
Cai Jia1，2，3 Zhang Xueli1，2，3 Wu Zaohe2，3 Jian Jichang1，2，3 Lu Yishan1，2，3 Feng Dongyue4 Jiao Maoxing5
（1. Fisheries College，Guangdong Ocean University，Zhanjiang 524088 ；2. Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and
Epidemiology for Aquatic Economic Animals，Zhanjiang 524088 ；3. Key Laboratory of Control for Diseases of Aquatic Economic Animals of
Guangdong Higher Education Institutes，Zhanjiang 524088 ；4. National Fisheries Technical Extension Center，Beijing 100125 ；5. Yichun
University，Yichun 336000）
Abstract: According to conservative region of known C-type lectin（CTL）gene, a pair of degenerate primers were designed, and full
length cDNA sequence of C-type lectin gene was amplified by RT-PCR and RACE PCR from spleen of humphead snapper, Lutjanus sanguineus
（GenBank accession number: AGT37609）for the first time. The total cDNA sequence of the gene was 828 bp, consisting of a 663 bp open
reading frame（ORF）and encoding 220 amino acids. The deduced amino acid sequence of humphead snapper CTL shared 30%-68% identities
with other species CTLs. Phylogenetic analysis showed that humphead snapper CTL was clustered closely with mummichog, rock bream, and
orange-spotted grouper CTL. Moreover, the mRNA expression levels in different tissues were analyzed by real time quantitative PCR. The result
showed that humphead snapper CTL gene expressed in all tested tissues with highest level in liver, spleen and skin, moderate level in head
kidney, kidney, stomach, intestine and muscle, and lowest level in heart and brain.
Key words: Lutjanus sanguineus ；C-type lectin ；gene cloning ；tissue expression analysis
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2015,Vol.31,No.5180
凝集素是真核生物中一类重要的模式识别受体
（pattern recognition receptors，PRRs）。根据不同的结
构和功能，凝集素大致可分为 calnexin、C 型、L 型、
P 型、I 型、R 型和 S 型凝集素［1］。其中 C 型凝集素
（C-Type lectins，CTLs）的研究较为广泛。此类蛋白
具有相同的结构特征，如具有碳水化合物识别结构
域（carbohydrate recognition domain，CRD），二硫化
物结合位点以及钙离子结合位点［2-5］。在脊椎动物中，
C 型凝集素可分为 17 个亚类，它们大多数都能结
合病原相关分子模式（pathogen-associated molecular
patterns，PAMPs），也能通过病原微生物表面的糖
基（如 N-乙酰氨基葡萄糖、甘露糖等）与病原本身
结合［6］。
目 前， 多 种 鱼 类 如 石 斑 鱼［7］、 虹 鳟［8］、 鲤
鱼［9］、日本牙鲆［10］、大西洋鲑［11］及鳗鲡［12］的 C
型凝集素相继被鉴定，鱼类 CTLs 的组织分布各不相
同［7，8，11，12］，并且在受到病原细菌、真菌以及病毒
刺激后的表达量上调［7］；此外，鱼类 C 型凝集素在
Ca2+ 的存在下还能使细菌与真菌发生凝集［7，12］，表
明鱼类 CTLs 在鱼体抵御病原侵染的免疫反应中可能
发挥着重要的作用。
红笛鲷（Lutjanus sanguineus）是我国南部沿海
地区一种重要的海水养殖鱼类。然而随着养殖规模
的不断扩大，红笛鲷养殖中弧菌病频发，对其养殖
业造成了巨大的损失。但是目前有关红笛鲷免疫防
御机制的研究报道相对较少。本研究对红笛鲷 C 型
凝集素基因（CTL）进行克隆鉴定，并对该基因的
序列特征及组织分布进行分析，旨在为进一步研究
红笛鲷 CTL 在抵御病原感染过程中的作用奠定基础。
1 材料与方法
1.1 材料
试验用红笛鲷（50-60 g/条）购于湛江东风市场。
1.2 方法
1.2.1 cDNA 一链合成 红笛鲷暂养后取皮肤、心脏、
肌肉、脑、头肾、胃、肠、肾、脾和肝，采用 Trizol
（Invitrogen）法分别提取总 RNA。分别用 M-MLV 将
提取得到的各组织的总 RNA 反转成 cDNA 一链用于
后续试验。另取脾的总 RNA，利用 Clontech 公司的
SMARTer RACE 试剂盒，按照试剂盒的方法分别合
成用于 3 RACE 与 5 RACE 扩增的 cDNA 模板。
1.2.2 红笛鲷 CTL 基因 cDNA 全长的扩增
1.2.2.1 红笛鲷 CTL 基因引物的设计 首先根据已
报道的斜带石斑鱼、条石鲷与香港石斑鱼 CTL 核苷
酸 序 列（ 登 录 号 分 别 为 ：FJ805452、GU097438 与
FJ392023）的保守区域设计简并引物 LsCTL-DF 与
LsCTL-DR（表 1），从脾脏 cDNA 一链中扩增红笛鲷
CTL 基因的保守序列，然后根据简并引物扩增得到
的序列设计红笛鲷 CTL cDNA 全长的 RACE 引物。
1.2.2.2 红笛鲷 CTL 基因片段的扩增 利用引物
LsCTL-DF 与 LsCTL-DR，通过降落 PCR 扩增 CTL 基
因的片段。PCR 反应条件为 ：98℃预变性 3 min ；
94℃ 30 s，54℃ 30 s，72℃ 30 s，5 个循环；94℃ 30 s，
50 ℃ 30 s，72 ℃ 30 s，5 个 循 环 ；94 ℃ 30 s，50 ℃
30 s，72℃ 30 s，25 个循环；72℃延伸 10 min，4℃保
存。PCR 反应产物电泳检测后将目的条带切胶回收。
回收产物与 pMD18-T Vector 连接后转化 DH5α 感受
态，挑克隆进行菌落 PCR 鉴定，将鉴定的阳性克隆
送至深圳华大基因公司测序。
1.2.2.3 红笛鲷 CTL 基因 3 与 5 端扩增 利用 Ls-
CTL3-F1、LsCTL5-R1 分别与试剂盒自带的 UPM Mix
引物进行 3 RACE 与 5 RACE PCR 的第一轮扩增。
反应条件为 ：98℃预变性 3 min ；94℃ 30 s，72℃
2 min，5 个循环 ；94℃ 30s，70℃ 30 s，72℃ 2 min，
5 个循环 ；94℃ 30 s，68℃ 30 s，72℃ 2 min，25 个
循环 ；72℃延伸 5 min，4℃保存。取第一轮 PCR 产
物 稀 释 10 倍 作 为 第 二 轮 的 模 板， 用 LsCTL3-F2、
LsCTL5-R2 分 别 与 试 剂 盒 引 物 NUP 进 行 第 二 轮
PCR，反应条件为 ：98℃预变性 3 min ；94℃ 30 s，
68℃ 30 s，72℃ 2 min，30 个 循 环 ；72℃ 延 伸 10
min，4℃保存。余下步骤同 1.2.2.2。
1.2.3 红笛鲷 CTL 基因的序列分析 上述测序结
果采用 DNAMAN5.2 软件进行拼接，获得的 cDNA
序 列 通 过 NCBI 网 站（http ：//www.ncbi.nlm.nih.gov/
blast）进行比对分析 ；通过 Genetyx 7 软件预测开放
阅读框（ORF）以及氨基酸序列 ；应用 Clustal X2.0
及 MEGA5 软件分别进行序列的多重比对与系统进化
树构建。通过 ExPASy 网站的工具 http ：//web.expasy.
org/protparam/ 在线分析红笛鲷 CTL 氨基酸序列的组
成 与 理 化 性 质 ；http ：//web.expasy.org/protscalel 分
2015,31(5) 181蔡佳等：红笛鲷（Lutjanus sanguineus）C型凝集素基因的克隆与组织表达分析
析红笛鲷 CTL 蛋白的亲 / 疏水性。利用 SignalP4.1
Serve（http ：//www.cbs.dtu.dk/services/ SignalIP） 分
析蛋白的信号肽。跨膜结构通过 TMHMM Server v2.0
（http ：//www.cbs.dtu.dk/services/TMHMM/）预测。序
列比对所用登录号，见表 2。
表 2 序列比对所用登录号
物种 登录号
红笛鲷（Lutjanus sanguineus） AGT37609
条石鲷（Oplegnathus fasciatus） GU097438/ACY66647
鳉鱼（Fundulus heteroclitus） AAU50548
斜带石斑鱼（Epinephelus coioides） FJ805452/ACO06100
香港石斑鱼（Epinephelus akaara） FJ392023
斑马鱼（Danio rerio） XM_005172630.2
凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei） AGV68681
中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis） ADK66338
牛（Bos taurus） NP_001180046
人类（Homo sapiens） CAA65480
1.2.4 红笛鲷 CTL 基因的组织表达分析 利用 CTL
引 物 RT-LsCTL-F、RT-LsCTL-R 与 内 参 基 因 β-actin
引物 RT-actin-F、RT-actin-R，通过荧光定量 PCR 分
析红笛鲷 CTL 基因在各个组织中的表达。将各组织
的总 RNA 经 DNase I 消化后合成 cDNA 一链，用无
菌水稀释后作为荧光定量 PCR 的模板。以红笛鲷
β-actin 做为内参基因，利用 Bio-Rad iQ5 实时荧光
定量 PCR 仪对红笛鲷 CTL 基因的表达量进行分析，
每个样本进行 3 个重复。PCR 反应条件为 ：94℃预
变性 5 min ；94℃变性 20 s，55℃退火 20 s，72℃延
伸 20 s，进行 40 个循环 ；72℃延伸 30 s，4℃保存。
PCR 反应结束后以各组织中最低的 mRNA 表达量为
基准，通过 2- △△ Ct 方法计算红笛鲷 CTL 基因在不同
组织中的相对表达量。
2 结果
2.1 红笛鲷CTL基因的克隆
红笛鲷 CTL cDNA 全长 828 bp，其中 5 非翻译
区（5 UTR）37 bp，3 非翻译区（3 UTR）128 bp，
开放阅读框 663 bp，编码 220 个氨基酸。3 UTR 含
有两个加尾信号 AATAAA。该基因氨基酸序列具
有 CTLs 家族特有的 CRD 结构域及关键的功能基序
“EPD”，且含有信号肽序列（前 31 个氨基酸），不
具有跨膜结构，为分泌型蛋白（图 1-图3）。
2.2 红笛鲷CTL序列分析
2.2.1 红笛鲷 CTL 氨基酸序列的理化性质 ProtPa-
ram 在线分析结果显示，红笛鲷 CTL 蛋白的理论分
子量为 24.53 kD，等电点为 5.81。推测的氨基酸序
列中 Glu 的含量最高，比例为 9.5% ；Leu 含量次之，
为 8.2% ；Met 含量最低，仅为 0.9%。带正电荷的氨
基酸有 20 个，带负电荷的氨基酸有 35 个。不稳定
指数为 38.55，归类为一个稳定的蛋白。该蛋白总的
平均亲水值为 -0.469，是亲水性蛋白。ProtScale 分
析表明红笛鲷 CTL 蛋白亲水性氨基酸含量较高，亲
水区域较大（峰值小于零的为亲水性峰，图 4），为
亲水性蛋白，与理化分析的结果一致。
2.2.2 红 笛 鲷 CTL 蛋 白 的 同 源 性 比 对 与 进 化 分
析 利用 Clustal X2.0 软件将红笛鲷 CTL 编码的氨基
酸序列与 NCBI 数据库公布的其他物种 CTL 蛋白进
行序列比较，发现红笛鲷 CTL 与条石鲷、斜带石斑鱼、
鳉鱼 CTL 相似度较高，分别为 68%、61% 和 58%，
与斑马鱼 CTL 仅为 32%，与牛 CTL 的相似度最低，
为 30%。红笛鲷 CTL 与其他的比对的序列具有特征
性的 CRD 结构域，其中含有“EPD”功能基序以及
4 个完全保守的半胱氨酸残基（图 5）。进化分析结
果（图 6）显示，红笛鲷 CTL 蛋白与鳉鱼、条石鲷、
斜带石斑鱼 CTL 蛋白亲缘关系最近，聚为一支，与
哺乳类以及甲壳类 CTL 蛋白的亲缘关系较远。
2.3 红笛鲷CTL基因的组织表达分析
通过荧光定量 PCR 检测红笛鲷各组织 CTL 基因
的表达量，结果（图 7）显示，红笛鲷 CTL 基因在
肝、脾与皮肤中表达水平较高，其次是头肾、肾、胃、
表 1 实验所用引物序列
引物 引物序列（5-3） 用途
LsCTL-DF ACCCTGGGMATCAGAGGCCAC 保守片段扩增
LsCTL-DR TGTCCACCACAGCRCAGTCCTCT
LsCTL3-F1 GCAAAAGTGTGAAGAGAAAGGCGGC 3 RACE-PCR
LsCTL3-F2 GTGGAACAAGAAGGCAGAAGGAT
LsCTL5-R1 CCTTTCTCTGTGTTCCAAAATGAGGT 5 RACE-PCR
荧光定量 PCR
LsCTL5-R2 TCCGATCCAGTAGTATGTGTATGT
RT-LsCTL-F ATCTCGCCATCTTGACCACCAG
RT-LsCTL-R CACCACCACACAGTCCTCTCCC
RT-actin-F GCAGATGTGGATCAGCAAGCAGGA
RT-actin-R CGCCTGAGTGTGTATGAGAAATG
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2015,Vol.31,No.5182
肠及肌肉，在心脏和脑中的表达量较低。
3 讨论
C 型凝集素广泛存在于所有真核生物中，能通
过结合细胞表面特定的碳水化合物促进不同细胞的
凝集及调节细胞的吞噬作用，在非己识别与清除侵
染微生物中发挥着重要的功能［13-15］。本试验通过同
源克隆和 RACE PCR 技术获得了红笛鲷 C 型凝集素
信号肽用下划线表示，碳水化合物识别结构域（CRD）用阴影标记，功能基序用黑框表示，加尾信号以加粗字体表示
图 1 红笛鲷 CTL 基因 cDNA 序列及推导的氨基酸序列
0
0 10 20 30
Position
40 50 60 70
0.2
0.4S
co
re
0.6
0.8
1.0
C-score
S-score
Y-score
图 2 红笛鲷 CTL 蛋白的信号肽预测分析
图 3 红笛鲷 CTL 蛋白的跨膜结构分析
0
50 100 150 200
0.2
transmembrane inside outside
0.4
pr
ob
ab
ili
ty
0.6
0.8
1.0
1.2
-3
50 100 200150
Position
-2
-1
0
Sc
or
e 1
2
3
4
峰值大于零的为疏水性峰，峰值小于零的为亲水性峰
图 4 红笛鲷 CTL 蛋白的亲水性 / 疏水性分析
2015,31(5) 183蔡佳等：红笛鲷（Lutjanus sanguineus）C型凝集素基因的克隆与组织表达分析
基因（CTL），该基因 cDNA 全长 828 bp，开放阅读
框 663 bp，编码 220 个氨基酸，分子量为 24.53 kD，
等电点为 5.81。其编码的氨基酸序列具有 C 型凝集
素家族特征性的 CRD 结构域，并且其 N 端具有信号
肽，表明红笛鲷 CTL 为分泌型蛋白。
C 型凝集素含有特异的糖识别结构域（CRD），
该类结构域一般由 115-130 个氨基酸组成，包括
14 个几乎不变的和 18 个高度保守的残基具有相似
的序列特征，包括保守的疏水残基和 4 个半胱氨酸
残基［16，17］。CDR 结构域包含一类重要的功能基序
“E/QPN/D/K/S/Q/T”［18］， 其 中 EPN 基 序（Glu-Pro-
Asn） 主 要 与 甘 露 糖 结 合， 而 QPD（Gln-Pro-Asp）
则对半乳糖的结合具有重要作用［16，17］。在红笛鲷
CTL 序列中该基序为 EPD（Glu-Pro-Asp），Asp 代替
了 EPN 中第 3 位的 Asn，此特征与石斑鱼 CTL 的相
应序列相同。石斑鱼 CTL 的研究显示其主要参与半
乳糖的结合，与 QPD 的结合特性一致，并且石斑鱼
CTL 能使酿酒酵母（真菌）、创伤弧菌（革兰氏阴性菌）
与金黄色葡萄球菌（革兰氏阳性菌）产生凝集反应［7］。
L. sanguine ：
F. heterocl ：
E. coioides ：
O. fasciatu ：
D. rerio ：
B. taurus ：
L. sanguine ：
F. heterocl ：
E. coioides ：
O. fasciatu ：
D. rerio ：
B. taurus ：
L. sanguine ：
F. heterocl ：
E. coioides ：
O. fasciatu ：
D. rerio ：
B. taurus ：
L. sanguine ：
F. heterocl ：
E. coioides ：
O. fasciatu ：
D. rerio ：
B. taurus ：
100%
58%
61%
68%
32%
30%
⴨լᓖ⻣≤ॆਸ⢙䇶࡛㔃ᶴฏCRD
箭头所示为保守半胱氨酸，功能基序用黑色方框标记
图 5 红笛鲷 CTL 与其他物种 CTL 氨基酸序列比对
L. sanguineus
F. heteroclitus
O. fasciatus
E. coioides
B. taurus
H. sapiens
L. vannamei
E. sinensis74
72
100
40
52
0.1
图 6 红笛鲷 CTL 基因的进化分析㓒ㅋ勧CTLสഐⲴ⴨ሩ㺘䗮䟿 㝁0123456 㛍 ᗳ㜿 㛳 㚼㚹 㝮 ཤ㛮 㛮 Ⳟ㛔 㛐
图 7 红笛鲷 CTL 基因的组织表达分析
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2015,Vol.31,No.5184
而在其他水产动物中，凡纳滨对虾 CTL3 蛋白也含
有相同的“EPD”基序，其重组蛋白能使溶藻弧菌、
副溶血弧菌（革兰氏阴性菌）以及枯草芽孢杆菌（革
兰氏阳性菌）发生凝集，但是对无乳链球菌（革兰
氏阳性菌）却没有相同的作用［19］。上述研究表明 C
型凝集素的凝集特异性可能不仅仅与本身的糖基结
合特性及细菌种类相关。此外，C 型凝集素 CRD 结
构域中还具有一段保守的“WIGL”基序，该序列
可以作为鉴定 C 型凝集素的一个有效标志，其中的
甘氨酸（Gly）由于其位置的高度保守被推测可能与
CRD 的折叠以及稳态相关［6］。本研究下一步将通过
点突变构建突变体真核表达载体，并对红笛鲷 CTL
不同突变体的重组蛋白进行结构与特性分析，为深
入了解该蛋白的功能机制奠定基础。
目前已报道的不同鱼类 CTLs 基因表达谱存在差
异，且具有较明显的组织分布特异性，在免疫相关
组织中均有较高的表达。其中石斑鱼 CTL 在肝与皮
肤中的表达量最高［7］，牙鲆和日本鳗鲡 CTL 分别仅
在肝和皮肤中表达［11，12］；而虹鳟 CTL 则分布在脾
脏与外周血淋巴细胞中［8］。本研究中，红笛鲷 CTL
基因在肝、脾以及皮肤中表达水平较高。硬骨鱼类
的肝与脾等器官在受到免疫接种后，其黑色素巨噬
细胞增多，通过与淋巴细胞和抗体生成细胞的聚集
参与体液免疫和炎症反应，并对内源或者外源的异
物进行贮存、破坏或脱毒［20］。而鱼类皮肤的上皮组
织中分布有大量的黏液细胞，是鱼体与外界环境接
触的第一道屏障，对鱼体抵御病原侵染至关重要［21］。
尽管不少研究已经证实鱼类 CTL 蛋白能使多种细菌、
真菌发生凝集［7，12，22］，并且鱼类 CTL 结合微球还
能显著增强巨噬细胞的吞噬作用［22］，但是鱼类 CTL
相关的作用模式及其在鱼类抵御病原侵染过程中的
功能尚不清楚。因此，今后可以从两方面开展红笛
鲷 CTL 基因的研究 ：一方面，通过原位杂交或者免
疫组化技术鉴定分泌 CTL 的细胞类群，推测其可能
的生物学功能 ；另一方面，分析 CTL 蛋白在调节免
疫细胞功能及抗病原微生物免疫反应中的功能，这
些研究结果将为我们进一步了解 C 型凝集素在鱼类
免疫系统中的作用提供新的方向。
4 结论
本试验克隆获得红笛鲷 CTL 基因 cDNA 全长，
该序列长 828 bp，其中开放阅读框 663 bp，编码
220 个氨基酸。组织表达分析表明，红笛鲷 CTL 基
因在多种组织中均有表达，在肝、脾以及皮肤中表
达水平较高。
参 考 文 献
［1］ Janeway CA, Medzhitov R. Innate immune recognition［J］. Annu
Rev Immunol, 2002, 20 ：197-216.
［2］ Robinson MJ, Sancho D, Slack EC, et al. Myeloid C-type lectins in
innate immunity［J］. Nat Immunol, 2006, 7（12）：1258-1265.
［3］ Ofek I, Crouch E, Keisari Y. The role of C-type lectins in the innate
immunity against pulmonary pathogens［J］. Adv Exp Med Biol,
2000, 479 ：27-36.
［4］ Drickamer K. C-type lectin-like domains［J］. Curr Opin Struct
Biol, 1999, 9（5）：585-590.
［5］ Vasta GR, Quesenberry M, Ahmed H, et al. C-type lectins and
galectins mediate innate and adaptive immune functions ：their roles
in the complement activation pathway［J］. Dev Comp Immunol,
1999, 23（4-5）：401-420.
［6］ Zelensky A, Gready J. The C-type lectin-like domain superfamily
［J］. FEBS J, 2005, 272（24）：6179-6217.
［7］ Wei J, Xu D, Zhou J, et al. Molecular cloning, characterization and
expression analysis of a C-type lectin（Ec-CTL）in orange-spotted
grouper, Epinephelus coioides［J］. Fish Shellfish Immunol, 2010,
28（1）：178-186.
［8］ Zhang H, Robison B, Thorgaard GH, et al. Cloning, mapping and
genomic organization of a fish C-type lectin gene from homozygous
clones of rainbow trout（Oncorhynchus mykiss）［J］. Biochim
Biophys Acta（BBA Gene Struct Expr）, 2000, 1494 ：14-22.
［9］ Fujiki K, Bayne CJ, Shin DH, et al. Molecular cloning of carp
（Cyprinus carpio）C-type lectin and pentraxin by use of suppression
subtractive hybridization［J］. Fish Shellfish Immunol, 2001, 11 ：
275-279.
［10］ Richards RC, Hudson DM, Thibault P, et al. Cloning and
characterization of the Atlantic salmon serum lectin, a long-form
C-type lectin expressed in kidney［J］. Biochim Biophys Acta,
2003, 1621（1）：110-115.
［11］ Kondo H, Yeu Tzeh AG, Hirono I, et al. Identification of a
novel C-type lectin gene in Japanese flounder, Paralichthys
olivaceus［J］. Fish Shellfish Immunol, 2007, 23（5）：1089-
2015,31(5) 185蔡佳等：红笛鲷（Lutjanus sanguineus）C型凝集素基因的克隆与组织表达分析
1094.
［12］Tasumi S, Ohira T, Kawazoe I, et al. Primary structure and
characteristics of a lectin from skin mucus of the Japanese eel
Anguilla japonica［J］. J Biol Chem, 2002, 277 ：27305-27311.
［13］Marques MRF, Barracco MA. Lectins, as non-self-recognition
factors, in crustaceans［J］. Aquaculture, 2000, 191 ：23-44.
［14］ Dodd RB, Drickamer K. Lectin-like proteins in model organisms ：
implications for evolution of carbohydrate-binding activity［J］.
Glycobiology, 2001, 11 ：71R-79R.
［15］ Vasta GR, Ahmed H, Odom EW. Structural and functional
diversity of lectin repertoires in invertebrates, protochordates and
ectothermic vertebrates［J］. Curr Opin Struct Biol, 2004, 14 ：
617-630.
［16］ Drickamer K, Taylor ME. Biology of animal lectins［J］. Annual
Review of Cell Biology, 1993, 9 ：237-264.
［17］ Weis WI, Taylor ME, Drickamer K. The C-type lectin superfamily
in the immune system［J］. Immunol Rev, 1998, 163 ：19-34.
［18］ Wang XW, Wang JX. Diversity and multiple functions of lectins in
shrimp immunity［J］. Dev Comp Immunol, 2013, 39（1-2）：27-
38.
［19］ Li M, Li C, Ma C, et al. Identification of a C-type lectin with antivi-
ral and antibacterial activity from pacific white shrimp Litopenaeus
vannamei［J］. Dev Comp Immunol, 2014, 46（2）：231-240.
［20］Fournier-Betz V, Quentel C, Lamour F, et al. Immunocytochemical
detection of Ig-positive cells in blood, lymphoid organs and the
gut associated lymphoid tissue of the turbot（Scophthalmus
maximus）［J］. Fish Shellfish Immunol, 2000, 10（2）：187-202.
［21］ 黄智慧 , 马爱军 , 汪岷 . 鱼类体表黏液分泌功能与作用研究进
展［J］. 海洋科学 , 2009, 33（1）：90-94.
［22］Tsutsui S, Iwamoto K, Nakamura O, Watanabe T. Yeast-binding
C-type lectin with opsonic activity from conger eel（Conger myria-
ster）skin mucus［J］. Mol Immunol, 2007, 44（5）：691-702.
（责任编辑 马鑫）