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生物技术通报
B IO TECHNOLOGY　BULL ETIN 2009年第 11期
蔗渣发酵菌剂培养基的筛选及发酵条件的优化
叶婧 刘雪 张丽 于江 朱昌雄
(中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 ,北京 100081)
　　摘 　要 : 　采用单因素和正交试验研究了蔗渣高效发酵菌剂 (芽孢杆菌 B2A、曲霉菌 F2A、链霉菌 A2B )的摇瓶发酵最佳工
艺条件。结果表明 :芽孢杆菌 B2A的最佳培养基配方 :牛肉膏 0. 3%、蛋白胨 1%、葡萄糖 1%、NaCl 0. 5%、可溶性淀粉 0. 5%、
3. 08%浓度的 MnSO4溶液 0. 1;最适发酵条件为 pH7、装液量 100 m l(250 m l三角瓶 )、36℃培养 27 h。曲霉 F2A的最佳培养基
配方 :葡萄糖 3%、豆饼粉 3%、蛋白胨 1. 2%、酵母膏 0. 3%、K2 HPO4 0. 05%、KH2 PO4 0. 05%、CaCl2 0. 08%、MgSO4 0. 04%、
MnSO4 0. 04%、ZnSO4 0. 02% ;最适发酵条件为 pH6、装液量 50 m l、30℃培养 3 d。链霉菌 A2B的最佳培养基配方 :可溶性淀
粉 415%、蔗糖 1%、豆饼粉 3%、NaNO3 0. 2%、ZnSO4 0. 01%、KH2 PO4 0. 001% ;最适发酵条件为 pH7、装液量 50 m l、30℃
培养 3 d。
关键词 : 　蔗渣 发酵菌剂 培养基优化 发酵条件优化
Screen ing of Fermentation M edium and Optim iz ing Fermentation
Conditions of the Bagasse M icroorgan ism Inoculants
Ye J ing L iu Xue Zhang L i Yu J iang Zhu Changxiong
( Institu te of Environm ent and Sustainable Developm ent in Agriculture, Chinese Academ y of Agricultural Sciences, B eijing 100081)
　　Abs trac t: 　The op timal conditions for flask fermentation of the strains B acillus sp. B2A, A spergillus sp. F2A and S treptom yces sp. A2
B) were studied by the single2factor and orthogonal test. The results showed that the op timal medium composition ( % ) forB acillus sp.
B2A was beef extract 0. 3, pep tone 1, glucose 1, NaCl 0. 5, soluble starch 0. 5, 3. 08%MnSO4 0. 1; the op timum conditions were initial
pH of 7, media volume 100m l, shaking at 36℃for 27 hours. The op timal medium composition ( % ) of A spergillus sp. F2A was glucose
3, soybean powder 3, pep tone 1. 2, yeast extract 0. 3, K2 HPO4 0. 05, KH2 PO4 0. 05, CaCl2 0. 08、MgSO4 0. 04,MnSO4 0. 04, ZnSO4 0. 02.
The op timum conditions were initial pH of 6, media volume 50m l, shaking at 30℃for 3 days. The op timal medium composition ( % ) of
S treptom yces sp. A2B: soluble starch 4. 5, soybean cake powder 3, sucrose 1, NaNO3 0. 2, ZnSO4 0. 01, KH2 PO4 0. 001. The op timum
conditions were initial pH of 7, media volume 50 m l, shaking at 30℃for 3 days.
Key wo rds: 　Bagasse Fermentation Medium op tim ization Fermentation condition op tim ization
收稿日期 : 2009207231
基金项目 :水专项华南村镇塘坝地表饮用水安全保障适用技术研究 (2008ZX074252002)
作者简介 :叶婧 (19842) ,女 ,在读硕士 ,研究方向 :微生物工程与环境安全 ; Email: yj1984_2008@yahoo. cn
通讯作者 :朱昌雄 ,研究员 ,博士生导师 ; E2mail: zhucx120@163. com　　甘蔗是我国重要的糖料作物 ,也是我国糖分的主要来源。甘蔗制糖过程中大部分糖分被提取出来 ,而有机非糖分大都被转移到糖厂副产物中 ,形成蔗渣、糖蜜和滤泥 [ 1 ]。其中蔗渣是甘蔗经破碎和提取蔗汁后甘蔗茎的纤维性残渣 [ 2 ] ,产量大 ,约为甘蔗重量的 25%左右。如何有效地开发利用蔗渣一直是糖业界面临的难题 ,也是制约我国糖业发展的瓶颈。 蔗渣是一种含有半纤维素、纤维素、木质素等多种有机成分的物质 ,经固体发酵后可得富含有机质、水溶性腐植酸、氨基酸和大量有益菌群的一种混合物即生物腐植酸 ( biotechnology hum ic acid, BHA )。研究表明 , BHA是一种具有多效性的混合物 ,与矿物腐植酸相比 ,具有分子量较小 ,含有活性基团较多 ,色泽较浅 ,水溶性较好 ,易于被动植物组织吸收 ,生物活性较高及应用效果较好等优点 [ 3 ]。所以 ,将
2009年第 11期 叶婧等 :蔗渣发酵菌剂培养基的筛选及发酵条件的优化
蔗渣经固体发酵生产生物腐植酸是蔗渣资源化和功
能化利用的一个重要渠道。但现有发酵菌剂的蔗渣
转化和产酸能力稳定性差 ,限制了蔗渣的资源化利
用。针对此现象 ,本研究对由 3株产酸能力较强微
生物芽孢杆菌 (B acillus sp. ) B 2A、链霉菌 (S treptom y2
ces sp. ) A2B、曲霉 (A sperg illus sp. ) F2A组成的高效
蔗渣发酵菌剂的液体发酵培养基和发酵工艺条件进
行了初步研究 ,并得到了这 3种微生物的最优发
酵工艺。
1　材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1　菌种 　芽孢杆菌 (B acillus sp. ) B 2A;链霉菌
(S treptom yces sp. ) A2B;曲霉 (A sperg illus sp. ) F2A。
均由中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所
环境修复研究室分离保存鉴定。
1. 1. 2　培养基
(1)斜面培养基 :牛肉膏蛋白胨培养基 ;淀粉培
养基 ;马铃薯葡萄糖培养基。以上斜面培养基分装
后均 121℃湿热灭菌 20 m in后备用。
(2 ) 液体发酵培养基 : 芽孢杆菌 : B21: 淀粉
0115%、葡萄糖 015%、尿素 01 l%、K2HPO4 013%、
KH2PO4 0115%、MgSO4 0105%、酵母膏 0102%、FeCl3
0101%、CaCO3 0101%、豆饼粉 110%、3108%浓度的
MnSO4溶液 011% , pH710～712[ 4 ] ; B22:牛肉膏 013%、
蛋白胨 1%、葡萄糖 1%、NaCl 015%、淀粉 013%、
3108% MnSO4 011%、pH712[ 4 ] ; B23:豆饼粉 6%、蔗糖
215%、(NH4 ) 2 SO4 017%、柠檬酸三钠 013%、K2HPO4
0103%、MgSO4 0105%、FeSO4 01005% [ 5 ] ; B 24:牛肉
膏 013%、蛋白胨 1%、酵母浸膏 015%、NaCl 1%、pH
710～712[ 6 ] ; B 25:胰蛋白胨 1%、酵母膏 015%、NaCl
1%、pH712[ 7 ] ; B26:蛋白胨 1%、牛肉膏 015%、酵母
膏 015%、葡萄糖 015%、NaCl 015% [ 7 ]。
链霉菌 : A21:可溶性淀粉 1%、KH2 PO4 011%、
MgSO4 0105%、NaNO3 012%、KCl 0105%、Fe2 ( SO4 ) 3
01001%、pH712; A22: 可溶性淀粉 410%、葡萄糖
310%、黄豆饼粉 115%、蛋白胨 015%、酵母粉
015%、NaCl 012%、CaCO3 015% , pH716[ 8 ] ; A23:葡
萄糖 115%、豆饼粉 3%、CaCO3 016%、水 1 000 m1,
pH6[ 9 ] ; A24:可溶性淀粉 417%、豆饼粉 212%、酵母
粉 012%、(NH4 ) 2 SO4 0127%、CaCO3 0127%、NaCl
0127%、pH712[ 10 ] ; A25: 可溶性淀粉 415%、蔗糖
015%、豆饼粉 415%、NaNO3 012%、ZnSO4 0101%、
KH2 PO4 01001% 、pH712[ 11 ]。
曲霉 : F21: NaNO3 012%、K2 HPO4 011%、KCl
0105%、MgSO4 0105%、FeSO4 01001%、蔗糖 3%、
pH710～712[ 12 ] ; F22:葡萄糖 3%、豆饼粉 3%、蛋白
胨 013%、酵母膏 013%、K2 HPO4 0105%、KH2 PO4
0105%、CaCl2 0108%、MgSO4 0104%、MnSO4
0104%、ZnSO4 0102% , pH5169[ 12 ] ; F23:蔗糖 3%、蛋
白胨 115%、NaNO3 012%、K2 HPO4 011%、CaCl2
0105%、MgSO4 0105%、FeSO4 01001% , pH518[ 13 ] ;
F24:玉米粉 3%、葡萄糖 3%、KCl 0105%、NaNO3
0105%、MgSO4 01005%、KH2 PO4 012%、pH615[ 14 ]。
以上液体发酵培养基均 121℃湿热灭菌 20 m in,
将培养基冷却到室温后备用。
1. 2　方法
1. 2. 1　液体培养基的筛选 配制上述发酵培养液 ,
分装至 250 m l三角瓶 ,每瓶 50 m l,设 3个平行。用
3 m l无菌水 ,从培养好的斜面上洗下菌体 ,制成菌
悬液加入上述三角瓶。芽孢杆菌 B2A 于 30℃、
200 r/m in的恒温振荡器中培养 24 h,以活菌数为指
标检测确定基础培养基 ,活菌计数采用平板倾注计数
法 [ 5 ]。曲霉菌 F2A、链霉菌 A2B在 28℃、200 r/m in
的恒温振荡器中培养 72 h,以生物量为指标检测 ,生
物量测定方法采用烘干法 [ 15 ]。
1. 2. 2　培养基的优化 以 1. 2. 1中筛选出的培养
基为基础 ,采用正交表 L9 (34 ) , 4因素 3水平安排试
验 ,培养条件同 1. 2. 1。
1. 2. 3　发酵条件的优化 　采用优化发酵培养基通
过单因子试验 ,测定不同温度、时间、初始 pH值和
装液量对生长量的影响。
1. 2. 4　数据分析 利用 SAS软件进行数据分析。
2 结果与分析
2. 1　液体培养基对发酵菌剂的影响
2. 1. 1　液体培养基对芽孢杆菌 B2A生长量的影响
分别用 6种发酵培养基 (B 21～B26)对芽孢杆
菌 B2A进行摇瓶培养测活菌数。计数结果 (表 1)表
明 :芽孢杆菌 B2A在 6种培养基上均能生长 ,但在
961
生物技术通报 B iotechnology　B u lle tin 2009年第 11期
各培养基中生长状况存在差异 ;方差分析结果显示 ,
6种培养基被划分为 3个差异显著的区组 ( P < 0.
01) ,其中 B23、B24、B 25和 B26这 4组间不存在显著
差异 ,而培养基 B 22中 B 2A的活菌数极显著高于其
他几种培养基 ,确立培养基 B 22为芽孢杆菌 B2A的
基础发酵培养基。
表 1 发酵培养基对芽孢杆菌 B2A生长量的影响
培养基 菌数 (105 CFU /m l)
B21 126 ±19. 79 B
B22 205 ±35. 35 A
B23 9. 00 ±2. 828 C
B24 28. 5 ±0. 707 C
B25 56. 8 ±0. 353 C
B26 47. 5 ±10. 60 C
注 :表中同一数据后不同大写字母表示差异显著 , P < 0101
2. 1. 2　液体培养基对曲霉 F2A生长量的影响 分
别用 4种发酵培养基 ( F21～F24)对曲霉 F2A进行发
酵培养。结果表明 :曲霉 F2A在这 4种培养基上均
能生长。方差分析结果显示 (表 2) , 4种培养基被
划分为 2个差异显著的区组 ( P < 0. 01) ,其中 F21、
F23和 F24这 3组间不存在显著差异 ,但在培养基
F22上的生物量极显著高于其他几种培养基 ,确立
培养基 F22为曲霉 F2A的基础发酵培养基。
表 2 发酵培养基对曲霉 F2A生物量的影响
培养基 生物量 ( g /50 m l)
F21 1. 16 ±0. 049 B
F22 5. 27 ±0. 615 A
F23 2. 63 ±0. 056 B
F24 2. 73 ±0. 374 B
　注 :表中同一列数据后不同大写字母表示差异显著 , P < 0. 01
2. 1. 3　液体培养基对链霉菌 A2B生长量的影响
分别用 5种发酵培养基 (A21～A25)对链霉菌 A2B
进行发酵培养。结果表明 :链霉菌 A2B在这 5种培
养基中均有生长。方差分析结果显示 (表 3) , 5组
试验被划分为 2个差异显著的区组 ( P < 0. 01 ) ,
A22、A24和 A25这 3组间不存在显著差异 ,且在培
养基 A25上的生物量高于其他 2种培养基 ,故确立
培养基 A25为链霉菌 A2B的基础发酵培养基。
表 3 发酵培养基对链霉菌 A2B生物量的影响
培养基 生物量 ( g /50 m l)
A21 0. 64 ±0. 007 B
A22 2. 37 ±0. 082 A
A23 0. 85 ±0. 070 B
A24 2. 38 ±0. 132 A
A25 2. 55 ±0. 211 A
　注 :表中同一列数据后不同大写字母表示差异显著 , P < 0. 01
2. 2　培养基优化
2. 2. 1芽孢杆菌 B2A培养基优化 采用 L9 ( 34 )正
交设计方案 ,对芽孢杆菌 B 2A发酵培养 ,测定活菌
数 ,试验设计及结果见表 4。结果表明 : 4种营养成
分对活菌数影响的顺序是 A牛肉膏 >D蛋白胨 >B
葡萄糖 > C淀粉 ,对于芽孢杆菌 B 2A来说有机氮源
对其生长量的影响大于碳源。最佳表现组合为
A2B2 C3 D2 ,即牛肉膏 0. 3% ,葡萄糖 1% ,淀粉 0. 5% ,
蛋白胨 1%。芽孢杆菌的优化培养基为牛肉膏
0. 3%、蛋白胨 1%、葡萄糖 1%、NaCl0. 5%、淀粉
0. 5%、3. 08%浓度的 MnSO4溶液 0. l%、pH7. 2。
表 4　芽孢杆菌 B2A发酵培养基正交试验结果与分析
编号 A牛肉膏( % )
B葡萄糖
( % )
C淀粉
( % )
D蛋白胨
( % )
菌数
( ×108 CFU /m l)
1 0. 15 0. 5 0. 15 0. 5 1. 2
2 0. 15 1 0. 3 1 2. 7
3 0. 15 1. 5 0. 5 2 1. 8
4 0. 3 0. 5 0. 3 2 1. 75
5 0. 3 1 0. 5 0. 5 2. 8
6 0. 3 1. 5 0. 15 1 3. 2
7 0. 5 0. 5 0. 5 1 1. 9
8 0. 5 1 0. 15 2 1. 5
9 0. 5 1. 5 0. 3 0. 5 0. 8
K1 1. 9 1. 617 1. 967 1. 6
K2 2. 583 2. 333 1. 75 2. 6
K3 1. 4 1. 933 2. 167 1. 683
R i 1. 183 0. 716 0. 417 1
2. 2. 2　曲霉 F2A培养基优化 采用 L9 (34 )正交设
计方案 ,对曲霉 F2A发酵培养 ,测定生物量 ,试验设
计及结果见表 5。结果表明 : 4种营养成分对曲霉生
物量影响的顺序是 B豆饼粉 >A葡萄糖 > C蛋白胨
071
2009年第 11期 叶婧等 :蔗渣发酵菌剂培养基的筛选及发酵条件的优化
>D酵母膏 ,最佳表现组合为 A3 B3 C3 D2 ,即葡萄糖
3% ,豆饼粉 3% ,蛋白胨 1. 2% ,酵母膏 0. 3%为最
佳组合。曲霉的优化培养基为葡萄糖 3%、豆饼粉
3%、蛋白胨 1. 2%、酵母膏 0. 3%、pH 5. 69。
表 5 正交试验结果与分析 ( F2A)
编号 葡萄糖( % )
豆饼粉
( % )
蛋白胨
( % )
酵母膏
( % )
生物量
( g /50 m l)
1 1 1 0. 3 0. 1 2. 71
2 1 2 0. 6 0. 3 3. 13
3 1 3 1. 2 0. 9 5. 71
4 2 1 0. 6 0. 9 2. 91
5 2 2 1. 2 0. 1 3. 73
6 2 3 0. 3 0. 3 5. 97
7 3 1 1. 2 0. 3 4. 31
8 3 2 0. 3 0. 9 4. 63
9 3 3 0. 6 0. 1 6. 05
K1 3. 85 3. 31 4. 437 4. 163
K2 4. 203 3. 83 4. 03 4. 47
K3 4. 997 5. 91 4. 583 4. 417
R i 1. 147 2. 6 0. 553 0. 307
2. 2. 3　链霉菌 A2B培养基优化 采用 L9 (34 )正交
设计方案 ,对链霉菌 A2B 发酵培养 ,测定生物量。
试验设计及结果见表 6,表明 : 4种营养成分对链霉
菌生物量影响的顺序是 B蔗糖 >A可溶性淀粉 > C
豆饼粉 > D NaNO3 ,最佳组合为 A3 B2 C1 D2 ,即可溶
性淀粉 4. 5% ,蔗糖 1% ,豆饼粉 3% , NaNO3 0. 2%为
最佳组合。链霉菌的优化培养基为可溶性淀粉 4.
5%、蔗糖 1%、豆饼粉 3%、NaNO3 0. 2%、ZnSO4
0. 01%、KH2 PO4 0. 001%、pH7. 2。
表 6 正交试验结果与分析 ( A2B)
编号 淀粉( % )
蔗糖
( % )
豆饼粉
( % )
NaNO3
( % )
生物量
( g /50 m l)
1 1. 5 0. 5 3 0. 1 2. 02
2 1. 5 1 4. 5 0. 2 2. 42
3 1. 5 1. 5 6 0. 4 1. 85
4 3 0. 5 4. 5 0. 4 2. 17
5 3 1 6 0. 1 2. 58
6 3 1. 5 3 0. 2 2. 72
7 4. 5 0. 5 6 0. 2 2. 46
续表
编号 淀粉( % )
蔗糖
( % )
豆饼粉
( % )
NaNO3
( % )
生物量
( g/50 m l)
8 4. 5 1 3 0. 4 3
9 4. 5 1. 5 4. 5 0. 1 2. 09
K1 2. 097 2. 217 2. 58 2. 23
K2 2. 49 2. 667 2. 227 2. 533
K3 2. 517 2. 22 2. 297 2. 34
R i 0. 42 0. 45 0. 353 0. 303
2. 3　培养条件的优化
2. 3. 1　温度对发酵菌剂生长量的影响 试验选取
26, 28, 30, 32, 36, 40℃ 6个温度恒温摇瓶培养 3种
菌 ,测定其在不同培养温度下的生长量。芽孢杆菌
培养 24 h后测其活菌数 ,曲霉菌、链霉菌培养 72 h
后测生物量 ,结果见图 1。由图 1可知培养温度为
36℃时芽孢杆菌 B 2A 活菌数最多可达 4. 3 ×
108 CFU /m l, 40℃次之。这说明 36℃为其最适温
度 ,过高或过低都不利于该菌生长。而曲霉 F2A、
链霉菌 A 2B生物量都在 30℃最高 ,说明 30℃为其
最适温度。
图 1　温度对 B2A、F2A、A2B生长量的影响
2. 3. 2发酵时间对发酵菌剂生长量的影响 芽孢杆
菌 B2A在 36℃、200 r/m in条件下 ,发酵培养 12～
39 h的活菌数见图 2。B 2A活菌数在发酵第 18 h显
著升高 ,第 27 h达到最高 ,随后开始下降。曲霉 F2
A、链霉菌 A2B在 30℃、200 r/m in条件下 ,发酵 1～
6 d的生物量见图 2。曲霉 F2A、链霉菌 A2B均在发
酵的第 3 d生物量达到最大值 ,而后下降 ,到第 6 d
时 ,发酵液中菌体有自融现象 ,菌丝断裂。由图可知
芽孢杆菌 B 2A的最适发酵时间为 27 h,曲霉 F2A、链
霉菌 A2B的最适发酵时间为 3 d。
171
生物技术通报 B iotechnology　B u lle tin 2009年第 11期
A表示芽孢杆菌 B2A的活菌数 , B和 C分别表示曲霉 F2A和链霉菌 A2B的生物量
图 2　发酵时间对 B2A、F2A、A2B生长量的影响
2. 3. 3　培养基初始 pH值对发酵菌剂生长量的影
响 培养基初始 pH直接影响菌株生长和代谢活
动 ,不同的菌株对初始 pH的要求不同 ,根据细菌、
放线菌、真菌生长对 pH的需求范围不同 ,试验设
定芽孢杆菌 B 2A、链霉菌 A 2B 采用 pH 值分别为
6. 0、6. 5、7. 0、7. 5和 8的培养基 ,曲霉 F2A 采用
pH值分别为 4、5、6、7、8和 9的培养基。芽孢杆菌
B 2A在 36℃、200 r /m in培养 27 h后测定活菌数 ;
链霉菌 A 2B 和曲霉 F2A 在 30℃、200 r /m in培养
3 d后测定生物量 ,结果见图 3。芽孢杆菌 B 2A和
链霉素 A 2B在 pH7. 0时菌体生长量最高 ,为最适
pH值 ,而曲霉 F2A在 pH6. 0时菌体生长量最高 ,
为最适 pH值 ;低于或高于这些最适 pH菌体生长
量都明显减少。
A表示芽孢杆菌 B2A的活菌数 ; B和 C分别表示曲霉 F2A和链霉菌 A2B的生物量
图 3　初始 pH值对芽孢杆菌 B2A生长量的影响
2. 3. 4　装液量对发酵菌剂生长量的影响 装液量
是发酵液溶氧的一个间接指标。采用装液量分别为
50、75、100、125 m l/250 m l三角瓶摇瓶培养 ,芽孢杆
菌在初始 pH为 7、36℃、200 r/m in条件下培养 27 h
后测定活菌数 ;链霉菌 A2B在初始 pH为 7、30℃、
200 r/m in条件下培养 3 d后测定生物量 ;曲霉 F2A
在初始 pH为 6、30℃、200 r/m in条件下培养 3 d后
测定生物量 ,结果见图 4。由图可知 ,装液量对 B 2A
的菌数有较大影响 , 100 m l/250 m l三角瓶为最佳的
装量。而随着装液量的增加曲霉和链霉菌的生物量
都降低 ,曲霉、链霉菌最佳的装量为 50 m l/250 m l
三角瓶。
3　结论与讨论
蔗渣的资源化利用一直受到广泛的关注 ,但是
图 4　装液量对 B2A、F2A、A2B生长量的影响
对蔗渣发酵菌剂的研究较少却限制了其资源化利用
的进程。针对这一问题 ,对蔗渣固体发酵过程中产
酸能力较的微生物进行了分离鉴定 ,得到了芽孢杆
菌 B2A、曲霉 F2A、链霉菌 A2B这三株菌。本研究在
前期研究的基础上 ,对 3株菌的摇瓶发酵条件进行
了优化 ,通过单因子试验和正交试验得出芽孢杆菌
271
2009年第 11期 叶婧等 :蔗渣发酵菌剂培养基的筛选及发酵条件的优化
B2A的优化培养基为牛肉膏 0. 3%、蛋白胨 1%、葡
萄糖 1%、NaCl0. 5%、淀粉 0. 5%、3. 08%浓度的
MnSO4溶液 0. l% ;最适发酵条件为温度 36℃、pH值
7、装量 100 m l/250 m l三角瓶、转速 200 r/m in、发酵
时间 27 h。曲霉 F2A的优化培养基为葡萄糖 3%、
豆饼粉 3%、蛋白胨 1. 2%、酵母膏 0. 3%、K2 HPO4
0. 05%、KH2 PO4 0. 05%、CaCl2 0. 08%、MgSO4
0. 04%、MnSO4 0. 04%、ZnSO4 0. 02% ;最适发酵条
件为温度 30℃、pH6、装量 50 m l/250 m l三角瓶、转
速 200 r/m in、发酵时间 3 d。链霉菌 A2B的优化培
养基为可溶性淀粉 4. 5%、蔗糖 1%、豆饼粉 3%、
NaNO3 0. 2%、ZnSO4 0. 01%、KH2 PO4 0. 001% ;最
适发酵条件为温度 30℃、pH7、装量 50 m l/250 m l三
角瓶、转速 200 r/m in、发酵时间 3 d。
通过该试验结果可知 ,高效蔗渣发酵菌剂生长
要求的营养因素范围较广 ,但对于枯草芽孢杆菌 B 2
A和曲霉菌 F2A来说有机氮源对其生物量的影响大
于碳源 ,而碳源对链霉菌生物量的影响却大于有机
氮源。在选择适宜的发酵条件后 , 3种微生物的产
量都明显增加 ,如枯草芽孢杆菌选择合适的发酵时
间能使活菌数提高 31%。经过培养基和培养条件
优化后枯草芽孢杆菌 B 2A的活菌数是初始活菌数
的 22倍 ;曲霉菌 F2A的生物量提高了 27% ;链霉菌
A2B的生物量提高了 49%。该试验可为今后蔗渣
高效发酵菌剂的产业化生产提供一定的理论依据 ,
有利于进一步发酵蔗渣生产生物腐植酸。
参 考 文 献
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抗病毒天然免疫 (现代生物技术前沿丛书 ) ·书 　讯 ·
舒红兵　主编
97827203202548827　　  68. 00　　　　　2009年 9月出版
内容简介 :天然免疫 ,又称固有免疫 ( innate immunity) ,是宿主抵抗病毒感染的第一道防线 ,也是激活适应性免疫的基础 ,
在宿主清除病毒的免疫反应中具有关键作用。本书对抗病毒天然免疫这一生物医学的热点领域的最新研究成果做了比较深
入的介绍 ,包括病毒的感染与复制 ,宿主限制因子介导的内源性免疫 ,模式识别受体介导的抗病毒天然免疫 ,补体系统、NK和
NKT细胞在抗病毒天然免疫中的作用 ,抗病毒天然免疫与适应性免疫的关系及病毒逃逸免疫反应的机制等。
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