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2010
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ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.8No.1
Jan.2010
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2010.01.008
OPQI
:2009-05-03
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:1672-3678(2010)01-0040-05
ScreeningandoptimizingcultureconditionsofBacilusstrainfor
producingγpolyglutamicacid
FENGZhibin,CHENGShiwei,MIAOJing,ZHANGYuxiang,
WANGQinqin,YANGZaidong,ZHUYingpu
(ColegeofLifeScience,LudongUniversity,Yantai264025,China)
Abstract:γPolyglutamicacidproducingstrainyt102wasisolatedfromsoilsandtaxonomicalyidentified
asBacilussubtilis.Ahighproductivestrainofγpolyglutamicacidwasobtainedfromyt102withmuta
genesisbyUVandNTG,anditwasgeneticalystablein10generations.Fermentationmediumcomposi
tionforthemutantstrainwasoptimizedbyasinglefactorandpreliminaryorthogonalexperiments.The
averageyieldofγpolyglutamicacidreached285g/Lontheoptimizedmedium.
Keywords:Bacilussubtilis;optimization;γpolyglutamicacid;screening
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10,pH70。
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G
15g/L,
W
12g/L,NH4Cl5g/L,MnSO4
50mg/L,FeCl320mg/L,pH72。
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Table2 Mutagenesisresultsbyultravioletradiation
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γ PGA
0?
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yt102 57 0
U-1 124 117
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Table3 MutagenesisresultsbyNTG
Nm
γ PGA
0?
/(g·L-1) ³Eå¿r/%
U 1 123 0
NTG 1 131 65
NTG 2 129 48
NTG 3 145 178
NTG 4 161 309
NTG 5 152 236
NTG 6 124 48
NTG 7 117 -48
NTG 8 139 13
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Fig.1 GeneticstabilityofmutantNTG4
2.4
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Table4 EfectsofcarbonsourceonγPGAsynthesis
C
P
OD600
ρ(γ PGA)/
(g·L-1)
p
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Fp
1112 193
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0987 165
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0997 145
Kp
0932 134
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1213 24
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Table5 EfectsofnitrogensourceonγPGAsynthesis
N
P
OD600
ρ(γ PGA)/
(g·L-1)
-.G
1071 204
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1121 135
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1057 168
1134 149
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A
-.G
B
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C
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D
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(γ PGA)
1 1(10) 1(30) 1(5) 1(10) 203
2 1(10) 2(50) 2(7) 2(30) 232
3 1(10) 3(70) 3(9) 3(50) 217
4 2(30) 1(30) 2(7) 3(50) 272
5 2(30) 2(50) 3(9) 1(10) 237
6 2(30) 3(70) 1(5) 2(30) 250
7 3(50) 1(30) 3(9) 2(30) 224
8 3(50) 2(50) 1(5) 3(50) 242
9 3(50) 3(70) 2(7) 1(10) 201
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Table7 Variancesoforthogonaltest
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d
A(
-.G
) B(
p
) C(NH4Cl) D(Wå)
]²
K1 21733 23300 23167 21367
K2 25300 23700 23500 23533
K3 22233 22267 22600 24367
+²
R 3567 1433 0900 3000
Èùª
22376 3282 1242 14389 4129
ÛÌ
2 2 2 2 8
F
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2168 0318 0120 1394
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30g/L,NH4Cl7g/L,Wå50g/LÚ,oW
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285g/L。
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