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2012
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ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.10No.5
Sep.2012
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2012.05.011
NOPH
:2011-03-01
JQR!
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(30970029)
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ExpressionofhumanserumalbumininKluyveromyceslactis
FULili1,GUANBo1,LEIJianyong2,DUANZuoying1,CHENYun2,JINJian2,LIHuazhong1
(1.KeylaboratoryofIndustrialBiotechnologyoftheMinistryofEducation,SchoolofBiotechnology,JiangnanUniversity,
Wuxi214122,China;2.SchoolofMedicine,JiangnanUniversity,Wuxi214122,China)
Abstract:Thesecretoryexpressionofhumanserumalbumin(HSA)inKluyveromyceslactisGG799was
investigated.TheHSAgenewasamplifiedbyPCRusingpPIC9kHSAastemplateandprimerswithXho
ⅠandNotⅠrestrictionsites,respectively,andthenclonedintotheexpressionvectorpKLAC1byXhoⅠ
andNot.RecombinantplasmidpKLAC1HSAwaslinearizedbySalⅡandtransformedintoKluyveromyces
lactisstrainGG799byelectroporation.RecombinantswerescreenedbyYCBplatescontaining5mmol/L
acetamide.ThegenomicDNAoftransformantswasisolatedtoidentifythepositiveonesbyPCR.The
transformantswerefermentedinshakeflaskandtheexpressionproductswereconfirmedbySDSPAGE
andWesternblot.TheefectofYNBinculturemediumonexpressionofHSAinKluyveromyceslactis
werealsoinvestigated.TheresultsindicatedthatHSAwasexpressedbytheKluyveromyceslactisGG799
expressionsystemandtheaverageyieldwas81μg/mL.
Keywords:humanserumalbumin;Kluyveromyceslactis;secretedexpression
(HSA)
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