全 文 ：植物学报 Chinese Bulletin of Botany 2011, 46 (4): 476–478, www.chinbullbotany.com
doi: 10.3724/SP.J.1259.2011.00476
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收稿日期: 2010-11-19; 接受日期: 2011-04-07
基金项目: 国家重点基础研究发展计划(No.2009CB522300)、植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室开放课题(No.0970-
8211Z1)、国家民委项目(No.09ZY09)、985工程(No.MUC985)、高等学校学科创新引智计划(No.B08044)和中央高校基础研究专项基金
(No.0910KYZY46)
* 通讯作者。E-mail: wangjunli2008@yahoo.com.cn
华北蓝盆花的组织培养与植株再生
许东婷, 王俊丽*, 刘名飞, 毕凯丽, 宋韵霏
中央民族大学生命与环境科学学院, 北京 100081
摘要 以华北蓝盆花(Scabiosa tschiliensis)无菌苗的叶片及叶柄为外植体, 建立了华北蓝盆花的无性繁殖体系。结果表明,
叶片外植体为诱导不定芽的适宜外植体, 其不定芽诱导的适宜培养基为MS+4.0 mg·L–16-BA, 不定芽生根的最适培养基为
MS+2.0 mg·L–1IBA, 幼苗移栽成活率可达70%以上。
关键词 植株再生, 华北蓝盆花, 组织培养
许东婷, 王俊丽, 刘名飞, 毕凯丽, 宋韵霏 (2011). 华北蓝盆花的组织培养与植株再生. 植物学报 46, 476–478.
华北蓝盆花(Scabiosa tschiliensis)又名山萝卜
花, 是川续断科(Dipsacaceae)蓝盆花属(Scabiosa)
植物, 为常用蒙药材(蒙药名为套森-套日麻)(国家中
医药管理局《中华本草》编委会, 2004), 性味甘、涩、
钝、燥、腻、熏、凉等, 有清热平“希拉”之功效, 主
要用于治疗火头痛、发烧、肺热咳嗽、黄疸、肝热症、
肝中毒、肝性消瘦等病症, 并具有抗炎、解热、抗氧
化、镇静和增强心血管及免疫功能等功效, 对肾缺血
再灌注损伤有良好的保护作用(武海燕和李俊, 2007;
王俊丽等, 2009)。华北蓝盆花为野生药用植物, 分布
海拔较高, 入药需求量大, 植物资源日渐匮乏。而利
用组织培养技术对其进行扩增繁殖, 可为今后进一步
扩大华北蓝盆花的种植提供种源, 并为获得其药用成
分奠定实验基础。截至目前, 有关华北蓝盆花的组织
培养和快速繁殖研究尚未见报道。
1 植物材料
实验材料华北蓝盆花(Scabiosa tschiliensis Grun-
ning)的成熟种子采自北京东灵山。种子经自来水冲洗
1小时, 在蒸馏水中浸泡24小时后, 置于超净工作台
上, 先用75%乙醇浸泡30秒, 再将其转入0.1%的升
汞溶液中浸泡7分钟, 经无菌水充分漂洗后接种于
1/2MS培养基中。先置于光照条件下进行无菌萌发,
当种子萌发15–30天并长出3–4片叶(图1A)时, 分别
取其叶片和叶柄作为外植体进行培养。
2 培养基成分与培养条件
实验所用基本培养基为含3%蔗糖和0.7%琼脂粉的MS
培养基(pH5.8)。培养基配制后经121°C高压灭菌20分
钟后待用。外植体接种后, 在(25±2)°C、光照强度
30–40 μmol·m–2·s–1、每天16小时光照条件下培养。
2.1 不定芽的诱导
在MS培养基中添加不同浓度6-BA(6-苄基嘌呤), 并
观察6-BA对外植体不定芽诱导的影响。所用6-BA的
浓度分别为0、0.5、1.0、2.0和4.0 mg·L−1。各培养
基均接种约35个外植体, 每瓶接种5个外植体。接种
后观察不定芽的生长情况, 并筛选出不定芽诱导的适
宜培养基。将不定芽分割后进行继代培养。
2.2 生根培养
分别采用含0、0.5、1.0和2.0 mg·L−1IBA(吲哚丁酸)
的MS培养基作为诱导不定芽生根的培养基。选取生
长健壮且长势一致、高3–5 cm的不定芽接入生根培养
基进行生根诱导。各培养基均接种约51个不定芽, 每
瓶接种3个。接种后观察不定芽的生长和生根状况。
·技术方法·
许东婷等: 华北蓝盆花的组织培养与植株再生 477


图1 华北蓝盆花的组织培养与植株再生
(A) 无菌实生苗; (B) 叶片外植体产生的不定芽; (C) 再生苗。

Figure 1 Tissue culture and plant regeneration of Scabiosa tschiliensis
(A) Aseptic seedlings; (B) Adventitious shoots from leaf explants; (C) Regenerate seedlings.


表1 不同浓度6-BA对华北蓝盆花不定芽诱导的影响
Table 1 Effects of different concentrations of 6-BA on the shoot induction of Scabiosa tschiliensis
Number of explant with
adventitious shoots
Inductivity of adventitious
shoots (%)
Frequency of adventitious
shoots
6-BA concentrations
(mg·L–1)
Leaf explants Petiole explants Leaf explants Petiole explants Leaf explants Petiole explants
0 0 6 0 17.1 0 6.0
0.5 11 13 31.4 37.1 8.9 9.2
1.0 25 23 71.4 65.7 12.4 11.7
2.0 28 27 80.0 77.1 15.5 15.2
4.0 33 19 94.3 54.3 13.0 10.5


2.3 炼苗与移栽
生根培养45天的再生苗在培养室内打开瓶盖炼苗1
周。将具6–8片叶、根系发达、株高6–7 cm的再生苗
从培养瓶中取出, 洗去根部的培养基后, 移栽到由泥
炭土、珍珠岩、沙(4:3:2, v/v/v)组成的混合基质中, 并
置于相对湿度80%–90%、温度20–25°C的环境中遮
阴培养。30天后统计成活率。
3 结果与讨论
3.1 不定芽的诱导
表1显示6-BA对华北蓝盆花外植体不定芽诱导的影
响。结果表明, 叶片培养8天开始增厚、变大, 继续培
养到15天, 叶片外植体表面伤口处出现颗粒状凸起,
30天后颗粒状凸起逐渐伸长为丛生不定芽(图1B); 叶
柄培养5天后, 在叶柄外植体两端出现不定芽, 20天
后逐渐伸长为丛生不定芽。这表明叶片外植体和叶柄
外植体均以直接成芽的方式进行再生。35天后的统计
结果表明, 在添加4.0 mg·L−16-BA的培养基中叶片外
植体诱导效果较好, 不定芽诱导率达94.3%; 在添加
2.0 mg·L−16-BA的培养基中叶柄外植体诱导效果较
好, 不定芽诱导率为77.1%。相比叶柄外植体, 华北
蓝盆花叶片外植体诱导不定芽的效果更好。在添加不
同浓度6-BA的培养基中, 以MS+4.0 mg·L−16-BA最
适合叶片外植体的不定芽诱导。
3.2 生根培养
当不定芽转接至生根培养基中, 培养7天后开始生根
(图1C)。表2为IBA对不定芽生根影响的统计结果。从
表2可知, 在添加不同浓度IBA的培养基中, 以MS+2.0
mg·L−1IBA最适合华北蓝盆花不定芽的生根诱导, 培
养40天后其不定芽的生根率为74.5%, 平均每个外植
体所产生的根数目为3.18条。

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表2 不同浓度IBA对华北蓝盆花不定芽生根的影响
Table 2 Effects of different concentrations of IBA on the
rooting of adventitious shoots of Scabiosa tschiliensis
IBA concen-
trations
(mg·L–1)
Number of
rooting
shoots
Percentage of
rooting shoots
(%)
Frequency
of rooting
0 28 55.0 2.82
0.5 30 58.8 3.70
1.0 36 70.6 3.05
2.0 38 74.5 3.18


3.3 炼苗与移栽
生根苗经炼苗后移栽至基质中, 15天后, 幼苗开始长
出新叶, 其移栽成活率可达70%以上。
本研究所建立的药用植物华北蓝盆花的组织培
养与植株再生体系, 为今后利用植物细胞工程技术快
速繁殖种苗奠定了实验基础。
参考文献
国家中医药管理局《中华本草》编委会 (2004). 中华本草·蒙
药卷. 上海: 上海科学技术出版社. pp. 385–385.
王俊丽, 肖璇, 公维镇, 王珏, 陆远, 谷金科, 刘吉开 (2009).
药用植物蓝盆花的研究与应用. 中央民族大学学报(自然科
学版) 18(3), 9–12.
武海燕, 李俊 (2007). 蒙药蓝盆花的研究现状和研究方向. 内
蒙古石油化工 (1), 5–6.

Tissue Culture and Plant Regeneration of Scabiosa tschiliensis
Dongting Xu, Junli Wang*, Mingfei Liu, Kaili Bi, Yunfei Song
College of Life and Environmental Science, Minzu University of China, Beijing 100081, China
Abstract We established an asexual propagation system of Scabiosa tschiliensis using leaf explants and petiole ex-
plants. The optimal medium for inducing adventitious shoots from leaf explants was MS+4.0 mg·L–16-BA; the highest
rooting rate for adventitious shoots was obtained with MS+2.0 mg·L–1IBA. The survival rate for seedlings was > 70%.
Key words plant regeneration, Scabiosa tschiliensis, tissue culture
Xu DT, Wang JL, Liu MF, Bi KL, Song YF (2011). Tissue culture and plant regeneration of Scabiosa tschiliensis. Chin
Bull Bot 46, 476–478.
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* Author for correspondence. E-mail: wangjunli2008@yahoo.com.cn
(责任编辑: 白羽红)