全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊怨冤院员远怨源 耀 员苑园园
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园苑鄄员远摇 接受日期院圆园员缘鄄园源鄄圆苑
基金项目院浙江省野三农六方冶科技协作计划项目渊 杂晕圆园员猿园员愿冤袁公益性行业渊农业冤科研专项 渊圆园员园园猿园远源冤袁浙江省农业新品种选育专项
渊圆园员圆悦员圆怨园源 原 愿冤袁国家自然科学基金渊猿员圆园员远员猿冤袁浙江省农科院创新提升工程渊圆园员圆砸园缘再园员耘园猿冤
作者简介院杨肖芳袁女袁研究实习员袁主要从事草莓栽培技术研究遥 耘鄄皂葬蚤造院圆圆愿园圆员苑愿远岳 择择援 糟燥皂
通讯作者院蒋桂华袁男袁研究员袁主要从事草莓遗传育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院躁早澡圆园园源圆远苑岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园怨鄄员远怨源鄄园苑
浙江省红颜草莓镶脉病毒渊杂灾月灾冤的调查
与茎尖脱毒技术研究
杨肖芳员 摇 苗立祥员 摇 张豫超员 摇 蒋桂华员 摇 胡美华圆
渊员 浙江省农业科学院园艺研究所袁 浙江 杭州摇 猿员园园圆员曰 圆浙江省农业技术推广中心袁 浙江 杭州摇 猿员园园圆园冤
摘摇 要院为了解浙江省草莓主要产区红颜草莓镶脉病毒的感染情况袁建立适宜的草莓脱毒快繁技术体系袁
调查了浙江省主要草莓产区草莓镶脉病毒的分布情况遥 孕悦砸检测结果表明袁大部分红颜品种的植株感
染了 杂灾月灾遥 序列分析表明袁所感染的病毒与 晕悦月陨中报道的病毒相似性达 怨愿豫以上遥 以 园郾 圆 皂皂匍匐
茎茎尖为外植体袁用 酝杂培养基 垣园郾 猿 皂早窑蕴 原员 远 原 月粤 垣园郾 园缘 皂早窑蕴 原员 郧粤 垣 园郾 园员 皂早窑蕴 原员 陨月粤 垣 猿豫 蔗
糖渊责匀 值 缘郾 愿冤进行脱毒培养遥 孕悦砸 检测结果显示袁茎尖培养植株的脱毒率达到 怨猿豫 遥 采用以上方法
可以培养根系发达尧抗性强的植株遥 试验结果将为建立完善的草莓病毒脱毒技术体系提供一定的技术
指导遥
关键词院草莓曰茎尖曰脱毒曰草莓镶脉病毒渊杂灾月灾冤
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园怨援 员远怨源
摇 摇 草莓渊云则葬早葬则蚤葬 葬灶葬灶葬泽泽葬 阅怎糟澡冤是蔷薇科草莓属宿
根性多年生草本常绿植物袁果实柔软多汁袁它具有适应
性广尧生长周期短尧果实营养丰富尧经济价值高的特点袁
是深受人们喜爱的时令水果之一遥 目前袁草莓生产上
种苗繁育主要利用匍匐茎进行营养繁殖袁然后分株移
栽遥 经过多年的种植袁很容易感染上病毒袁一旦感染病
毒便会世代相传袁导致植株矮化尧匍匐茎减少尧果实品
质变劣袁产量严重下降咱员暂 遥
危害草莓种植的病毒病尧类病毒病和菌原体病害
等有 圆缘 种之多袁其中分布广泛尧为害严重的有 远 耀 苑
种遥 在我国草莓生产区袁已调查和鉴定的草莓病毒病
主要有 源 种院草莓斑驳病毒病尧草莓轻型黄边病毒病尧
草莓皱缩病毒病和草莓镶脉病毒病咱圆 原 猿暂 遥 目前袁在生
产上袁草莓带病毒株率高达 愿园郾 圆豫 袁单种病毒侵染株
率为 源员郾 远豫 袁 圆 种 以 上 病 毒 复 合 侵 染 株 率 为
猿愿郾 远豫 咱源暂 遥 目前解决草莓种苗病毒主要是通过热处理
技术咱缘暂 尧脱毒组培技术尧花药组织培养咱远 原 愿暂 尧微茎尖组
织培养咱怨暂等技术脱去病原菌袁从而获得无毒草莓再生
植株咱员园暂 袁但是这些技术脱毒效果均不是特别理想遥
红颜草莓果实个大袁鲜艳漂亮袁品质上乘袁植株生
长势强袁丰产性好袁耐贮运性好袁鲜食加工兼用袁适于大
棚促成栽培袁近年来在全国各地栽培面积不断扩大袁是
浙江省目前主栽草莓品种遥 近年来袁红颜草莓病害比
较严重袁部分植株出现了叶片变小尧花而不实的现象袁
这些是否与病毒病相关袁需要进行调查研究遥 本研究
在调查浙江省草莓主要产区草莓镶脉病毒渊泽贼则葬憎遭藻则则赠
增藻蚤灶 遭葬灶凿蚤灶早 增蚤则怎泽袁杂灾月灾冤的基础上袁通过茎尖培养方
式袁建立了红颜草莓茎尖快速繁殖体系袁为进一步的规
模化生产提供依据遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
圆园员圆 年 员员 月 原 圆园员猿 年 猿 月分别从浙江省的建
德尧临海等地采集红颜品种的嫩叶袁每地采集 员园 个样
品袁采集地点如表 员 所示遥
源怨远员
摇 怨 期 浙江省红颜草莓镶脉病毒渊杂灾月灾冤的调查与茎尖脱毒技术研究
表 员摇 草莓样品采集地点
栽葬遭造藻 员摇 杂贼则葬憎遭藻则则赠 泽葬皂责造藻 糟燥造造藻糟贼蚤燥灶 造燥糟葬贼蚤燥灶泽
材料编号
晕怎皂遭藻则
采样地点
蕴燥糟葬贼蚤燥灶
材料编号
晕怎皂遭藻则
采样地点
蕴燥糟葬贼蚤燥灶
材料编号
晕怎皂遭藻则
采样地点
蕴燥糟葬贼蚤燥灶
粤 建德杨村桥 耘 临海枧桥 陨 台州临海
月 建德下涯 云 杭州下沙 允 嘉兴海宁
悦 建德梗楼 郧 湖州埭溪 运 嘉兴海盐
阅 建德航头 匀 乐清北塘 蕴 杭州富阳
员郾 圆摇 脱毒培养
员郾 圆郾 员摇 外植体采集与消毒摇 采集带病毒的红颜草莓
母株较嫩带茎尖的匍匐茎袁剪取约 缘 糟皂 长置于烧杯
中袁用 员 耀 圆 滴洗洁精清洗后流水反复冲洗 猿园 皂蚤灶遥 首
先将匍匐茎用 苑缘豫酒精消毒 猿园 泽袁然后用 园郾 员豫 匀早悦造圆
处理 愿 皂蚤灶袁最后用无菌水冲洗 源 次袁每次 猿 皂蚤灶袁放置
于盛有灭菌滤纸的培养皿内袁用无菌滤纸吸干水分备
用遥
员郾 圆郾 圆摇 茎尖剥取摇 左手持尖头镊子袁右手持解剖刀或
解剖针袁在解剖镜下小心剥去茎尖生长点外的叶片及
苞片袁切取约 园郾 圆 皂皂 的生长点部分袁避免伤到生长
点袁防止褐化遥 迅速放到诱导培养基渊酝杂 培养基 垣
园郾 猿 皂早窑蕴 原员 远 原 月粤 垣 园郾 园缘 皂早窑蕴 原员 郧粤 垣 园郾 园员 皂早窑蕴 原员
陨月粤 垣 猿豫 蔗糖袁责匀 值 缘郾 愿冤中进行培养遥 培养温度
为 圆缘 依 员益袁每天光照 员源 澡袁光照强度 圆 园园园 造曾遥
员郾 圆郾 猿摇 继代生根培养与驯化移栽摇 待茎尖诱导出的
小苗长至 员 糟皂左右时袁愈伤组织周围长满丛生芽袁把
芽逐个切下袁每瓶放置 缘 耀 远 个芽继续增殖袁将丛生芽
分成单株袁用诱导培养基进行继代培养袁诱导出的小芽
长到 猿 糟皂左右时袁挑选生长健壮的小苗在生根培养基
渊猿 辕 源酝杂培养基 垣 猿豫 蔗糖袁责匀 值 缘郾 愿冤上进行生根培
养遥
先把试管苗从培养室移到普通温室袁选晴好的天
气移栽遥 将培养基冲洗干净袁用 员 园园园 倍甲基托布津
浸泡 缘 皂蚤灶后直接移栽室外栽培基质中袁浇透水后盖
上小拱棚膜保温保湿遥 猿 凿 后撤去遮阳网袁棚内温度
高于 猿猿益时再加盖遮阳网遥
员郾 猿摇 病毒检测
员郾 猿郾 员摇 阅晕粤 提取 摇 采用改良的 悦栽粤月 法袁将草莓叶
片在液氮中研磨成粉袁迅速转入盛有 圆豫 悦栽粤月 提取液
渊圆豫 悦栽粤月袁员园园 皂酝 栽则蚤泽鄄匀悦造袁 圆园 皂酝 耘阅栽粤袁 员郾 源 酝
晕葬悦造袁 责匀值 愿郾 园冤和 圆 豫 茁 原巯基乙醇的离心管中混
合均匀袁远缘益水浴 圆园 皂蚤灶袁期间摇 猿 次遥 水浴后加入
员 辕 猿 体积提取液的 缘 酝 运粤悦袁混匀袁冰浴 员 澡袁然后加入
等体积 圆源颐 员的氯仿 辕异戊醇袁源益 员园 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心
员园 皂蚤灶袁取上清液至新的离心管中袁再加入等体积 圆源颐 员
的氯仿 辕异戊醇袁于 源益 员园 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶袁
以不出现蛋白层为止遥 取上清水相至新的离心管中袁
加入 圆 辕 猿 体积异丙醇袁源益 员园 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶
后袁倒掉上清液袁瞬时离心袁吸掉上清后袁加入适量 栽耘
渊含 缘园 滋早窑皂蕴 原员的 砸晕葬泽藻冤溶解沉淀袁猿苑益水浴 猿园
皂蚤灶遥 加入等体积 圆源颐 员的氯仿 辕异戊醇袁于 源益 员园 园园园
则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶袁取上清袁加入 圆 倍体积的无水乙
醇和 员 辕 员园 体积的 猿 酝 晕葬粤悦袁放置于 原 苑园益袁员 澡 后于
源益 员园 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶袁倒掉上清液袁用 愿园豫
乙醇洗涤沉淀 圆 次袁然后在超净工作台渊匀云泽葬枣藻鄄员圆园园
型袁力新仪器有限公司袁上海冤上吹干沉淀袁加入灭菌
水溶解沉淀袁放置于 原 圆园益备用遥 每个样品重复提取
猿 次 阅晕粤遥
员郾 猿郾 圆摇 孕悦砸 反应体系 摇 根据已经报道的草莓 杂灾月灾
病毒序列咱员员暂 设计一对特异引物袁 杂灾月灾圆缘圆云院 缘忆 原
粤郧粤郧郧悦郧粤粤悦粤悦粤悦粤悦粤悦粤郧 原 猿忆曰 杂灾月灾圆缘圆砸院缘忆 原
栽郧栽栽悦粤郧悦栽栽悦栽郧栽悦悦粤粤悦郧 原 猿忆渊预期产物 圆缘圆 遭责冤袁
以提取的 阅晕粤为模板进行 孕悦砸 反应遥 孕悦砸 反应采用
栽葬运葬砸葬 孕则藻皂蚤曾 栽葬择 进行袁反应体系为院孕则藻皂蚤曾 栽葬择 圆缘
滋蕴袁模板 员 滋蕴渊约 缘园 灶早冤袁上尧下游引物分别 圆 滋蕴渊员园
滋酝冤袁灭菌蒸馏水 圆园 滋蕴遥 孕悦砸 反应条件为 怨源益变性
猿园 泽袁缘缘益退火 猿园 泽袁苑圆益延伸 员 皂蚤灶袁猿缘 个循环袁循环
结束后 苑圆益延伸 员园 皂蚤灶遥 孕悦砸结束后 员郾 缘豫琼脂糖凝
胶电泳检测 孕悦砸 产物遥 每样品 孕悦砸 重复 猿 次遥 阅蕴袁
圆园园园 阅晕粤 酝葬则噪藻则 购自宝生物工程渊大连冤有限公司
渊分子量由小到大为 员园园尧圆缘园尧缘园园尧苑缘园尧员 园园园尧圆 园园园
遭责冤遥
阳性对照院根据 孕悦砸 结果袁将阳性条带回收克隆
测序后与 晕悦月陨 数据库中的草莓 杂灾月灾 序列进行比
对袁将确定为草莓 杂灾月灾 的菌液再次在 猿苑益培养袁提
取质粒袁用 晕葬灶燥阅则燥责 圆园园园渊栽澡藻则皂燥云蚤泽澡藻则 公司袁美国冤
进行浓度检测袁将质粒 阅晕粤 作为阳性对照的 孕悦砸 的
阅晕粤模板遥
阴性对照院以无菌水代替 阅晕粤 模板作为 孕悦砸 的
缘怨远员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
阴性对照遥
内参设置院根据栽培草莓 粤糟贼蚤灶 基因保守序列
渊晕悦月陨编号 粤月员员远缘远缘冤设置内参引物 粤糟贼蚤灶鄄云院缘忆 原 郧悦
栽粤粤栽悦郧栽郧粤郧粤粤郧粤栽郧粤悦 原猿忆袁粤糟贼蚤灶鄄砸院缘忆 原 粤郧悦粤悦粤
粤栽粤悦悦粤郧栽粤郧栽粤悦郧 原猿忆袁目的条带 员员怨 遭责遥
员郾 猿郾 猿摇 孕悦砸产物回收尧克隆与测序摇 胶回收采用生工
生物工程渊上海冤股份有限公司 杂葬灶孕则藻责 柱式 阅晕粤 胶
回收试剂盒袁克隆载体用北京全式金生物技术有限公
司的 责耘粤杂再鄄栽缘 在藻则燥 悦造燥灶蚤灶早 运蚤贼袁栽粤 转化克隆后 孕悦砸
检测袁每个 孕悦砸产物 栽粤 克隆选 缘 个阳性克隆送上海
生工进行测序袁序列结果与 晕悦月陨 数据库和草莓基因
组信息进行比对袁以确定是否为病毒序列或草莓基因
组序列遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 浙江省草莓主要产区 杂灾月灾病毒的调查
根据 孕藻贼则扎蚤噪 等咱员员暂报道的 杂灾月灾 病毒序列设计
孕悦砸 引物袁扩增了从浙江不同地区采集到的草莓叶
片袁孕悦砸结果表明袁采集到的叶样品大部分含有 杂灾月灾
病毒袁不同植株感染病毒的程度也是不同的渊图 员冤遥
结果表明 杂灾月灾可能是一种常见的草莓病毒遥
注院孕院阳性对照曰晕院阴性对照曰 粤糟贼蚤灶院内参曰员 耀 员园院不同样品曰粤鄄蕴院采样地点遥 下同遥
晕燥贼藻院 孕院 孕燥泽蚤贼增藻 糟燥灶贼则燥造援 晕院 晕藻早葬贼蚤增藻 糟燥灶贼则燥造援 酝院 阅蕴袁圆园园园 阅晕粤 酝葬则噪藻则援 粤糟贼蚤灶院 砸藻枣藻则藻灶糟藻 早藻灶藻援 员 贼燥
员园院 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 责造葬灶贼泽援 粤 贼燥 蕴院 杂葬皂责造蚤灶早 造燥糟葬贼蚤燥灶援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早援
图 员摇 不同地区草莓样品 杂灾月灾的检测
云蚤早援 员摇 孕悦砸 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 杂灾月灾 枣则燥皂 凿蚤枣枣藻则藻灶藻贼 造燥糟葬贼蚤燥灶泽
圆郾 圆摇 杂灾月灾序列的克隆和分析
将 杂灾月灾条带用上海生工 杂葬灶孕则藻责 柱式 阅晕粤胶回
收试剂盒回收片段袁克隆载体用北京全式金生物技术有
限公司的 责耘粤杂再鄄栽缘 在藻则燥 悦造燥灶蚤灶早 运蚤贼袁栽粤 转化克隆后
孕悦砸检测袁阳性克隆进行测序遥 序列比对分析表明袁不
同地区的 杂灾月灾序列基本一致袁与 晕悦月陨 数据库中登陆
的草莓病毒序列相似性为 怨愿豫 耀员园园豫渊图 圆冤遥
圆郾 猿摇 草莓脱毒组培苗的获得
将 孕悦砸 鉴定含有 杂灾月灾 病毒的草莓植株进行移
栽袁使其抽生匍匐茎袁选取较嫩带茎尖的匍匐茎袁在解
剖镜下切取 园郾 圆 皂皂 左右的生长点袁然后进行诱导培
养渊图 猿 原 粤冤遥
待茎尖诱导出的小苗长至 员 糟皂左右时袁愈伤组织
周围长满丛生芽袁把芽逐个切下袁每瓶放置 缘 耀 远 个芽
继续增殖袁一般增殖 猿 代就可以获得大量的丛生芽遥
将丛生芽分成单株袁用诱导培养基进行继代培养袁可获
得大量繁殖苗渊图 猿 原 月冤遥
圆郾 源摇 组培苗病毒的 孕悦砸检测
用无菌剪刀切取 猿园 瓶组培苗提取 阅晕粤进行 孕悦砸
检测袁结果显示袁被检测的 猿园 个株系中袁圆愿 株均未扩
增出 杂灾月灾条带渊约 猿园园 遭责冤袁只有 圆 株和阳性对照扩
增出 杂灾月灾条带袁脱毒率达 怨猿豫 渊图 源冤遥
圆郾 缘摇 生根培养与驯化移栽
将检测为无毒的草莓苗继续进行扩繁袁当诱导出
的小芽长到 猿 糟皂左右时袁挑选生长健壮的小苗在生根
培养基上进行生根培养袁小苗易生根袁且根系发达袁平
远怨远员
摇 怨 期 浙江省红颜草莓镶脉病毒渊杂灾月灾冤的调查与茎尖脱毒技术研究
图 圆摇 草莓 杂灾月灾序列的序列比对
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽 葬造蚤早灶皂藻灶贼 燥枣 杂灾月灾
图 猿摇 摇 生长点诱导出的健壮小苗和丛生芽单株诱导出的繁殖苗
云蚤早援 猿摇 陨灶凿怎糟藻凿 泽藻藻凿造蚤灶早泽 枣则燥皂 早则燥憎蚤灶早 责燥蚤灶贼 葬灶凿 遭则藻藻凿蚤灶早 泽藻藻凿造蚤灶早泽 蚤灶凿怎糟藻凿 枣则燥皂 遭怎凿泽
均每苗可产生 猿 耀 远 根遥 先把试管苗从培养室移到普
通室袁选晴好的天气移栽遥 将培养基冲洗干净袁用
员 园园园倍甲基托布津浸泡 缘 皂蚤灶后直接移栽室外栽培基
质中袁浇透水后盖上小拱棚膜保温保湿遥 移栽的前 猿 凿
如果是晴天袁中午前后须盖遮阳网以防光照过强袁猿 凿
后撤去遮阳网袁棚内温度高于 猿猿益时再加盖遮阳网遥
移栽 员缘 凿后小苗新叶长出袁表明移栽成活渊图 缘冤遥
苑怨远员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
注院员 耀 猿园院不同株系遥
晕燥贼藻院 员 贼燥 猿园院 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 责造葬灶贼泽援
图 源摇 茎尖培养植株的镶脉病毒渊杂灾月灾冤孕悦砸检测
云蚤早援 源摇 栽澡藻 孕悦砸 凿藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 杂灾月灾 枣则燥皂 贼蚤责 糟怎造贼怎则藻
图 缘摇 组织培养苗的驯化移栽
云蚤早援 缘摇 栽蚤泽泽怎藻 糟怎造贼怎则藻 泽藻藻凿造蚤灶早泽 葬糟糟造蚤皂葬贼蚤扎葬贼蚤燥灶
猿摇 讨论
草莓是多年生以无性繁殖为主的作物袁在我国以
冬春保护地栽培为主袁其生长的环境较适宜病虫害的
越冬繁殖和生存袁如蚜虫尧灰霉病菌等遥 病毒病不仅是
农作物生产中的一个重要威胁袁也影响着草莓的生
产咱愿袁员圆 原 员源暂 遥 目前国内对草莓病毒的检测技术咱愿袁员缘 原 圆园暂
和防治技术咱圆员 原 圆愿暂的研究比较多袁对病害调查研究较
少遥 在自然状态下袁草莓镶脉病毒渊杂灾月灾冤主要通过
蚜虫以非持久性方式传染袁人工接种也可以通过嫁接
传染袁给草莓生产带来严重损失咱猿园暂 袁单独侵染草莓时
症状不明显袁与其他病毒复合侵染时可表现出叶脉间
黄化尧叶缘黄化镶边尧匍匐茎数量减少等症状袁降低了
草莓产量和质量咱员员袁圆怨袁猿员暂 袁在欧美尧日本尧澳大利亚等国
家和地区普遍发生咱圆怨 原 猿园暂 遥 本研究发现袁浙江省草莓主
要产区的红颜草莓感染 杂灾月灾 比较严重袁可能与蚜虫
的防治有很大关系遥
我国栽培草莓已经有 员园园 多年的历史袁据 云粤韵 统
计 圆园员猿 年中国草莓栽培总面积约 员远缘郾 苑猿缘 万亩袁主要
栽培品种以欧美和日本品种为主袁有红颜尧章姬尧甜查
理尧幸香尧达赛莱克特等遥 其中袁红颜是 圆园园园 年从日本
引进的优良草莓品种袁具有果实颗粒大袁色泽鲜红袁富
有光泽袁果型端正整齐袁硬度高袁耐贮运性好等特点袁目
愿怨远员
摇 怨 期 浙江省红颜草莓镶脉病毒渊杂灾月灾冤的调查与茎尖脱毒技术研究
前占浙江省栽培面积的 苑园豫以上咱猿圆暂 遥 本研究调查发
现袁浙江省主要草莓产区红颜品种 杂灾月灾 感染率比较
高袁部分病原种与已报道的 杂灾月灾 基因组序列完全一
致袁也出现了一些变种袁相似性达 怨愿豫以上遥 此外袁有
研究发现草莓在不同生长季节其病毒检测结果会不一
致袁这与取样部位尧病毒的繁殖时期及感染程度高度相
关咱猿猿暂 遥 一般草莓植株在感染病毒后袁其传播尧扩散速
度都较迅速袁很快就能遍布全株袁但是病毒在植株的各
器官和组织中分布并不均匀袁茎尖和根尖分生组织一
般都不会感染或很少感染病毒咱猿暂 遥 因此袁茎尖常用作
脱毒培养的有效外植体遥 本研究在解剖镜下袁把含有
圆 个叶原基的 园郾 圆 皂皂大小的茎尖切下袁接种在培养基
上袁成功获得了脱毒草莓苗袁脱毒率 怨猿豫 袁为进一步的
草莓脱毒种苗规模化生产提供了技术支持遥 此外袁对
采集匍匐茎的母株在 猿苑益进行 猿园凿 左右的高温处理袁
可明显提高脱毒效果咱猿源暂 遥 脱毒后的草莓植株由于去
除了植株体内所带的各种病毒袁从而使植株的生长发
育及其生理代谢都恢复了正常袁表现出强劲的生长势遥
与普通带病毒苗相比袁无病毒苗的各项生长指标袁包括
产量和质量等都有明显的提高咱猿缘暂 遥
病毒的检测效率与检测方法的灵敏性也有很大的
关系遥 目前袁草莓病毒的检测方法主要有指示植物检
测法尧耘蕴陨杂粤法尧以 孕悦砸为代表的分子生物学检测法尧
指示植物小叶嫁接等方法咱员猿袁猿猿袁猿远 原 猿苑暂 遥 其中 孕悦砸 法因
其快速尧灵敏性高尧成本低等袁正逐渐成为病毒检测的
主要方法遥 本文利用 孕悦砸法袁首次分析了浙江省红颜
草莓感染 杂灾月灾的情况袁通过调查发现袁杂灾月灾 已经成
为一种严重危害草莓的潜隐性病毒遥 此外袁在基因组
或转录组测序时袁通过对序列进行生物信息学分析也
能够把植物病毒序列区分出来袁从而检测出病毒的种
类和表达丰度遥 这种基于测序技术的病毒检测方法是
当前灵敏度最高尧最可靠的技术袁然而因其成本太高袁
还不适用于大规模的检测服务遥 随着高通量测序技术
的发展袁测序成本会越来越低袁这一技术也必将在植物
病毒检测中得到广泛应用遥
源摇 结论
通过调查浙江省红颜草莓主要产区草莓镶脉病毒
渊杂灾月灾冤的分布情况袁结果表明袁大部分植株感染了
杂灾月灾袁所感染的病毒与已经报道的病毒相似性达
怨愿豫以上遥 以匍匐茎的茎尖为外植体在解剖镜下剥取
园郾 圆 皂皂茎尖为外植体进行脱毒袁孕悦砸 检测结果显示袁
茎尖培养植株的脱毒率达到 怨猿豫 遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 胡淑明袁张学英袁李青云袁葛会波援 草莓脱毒技术研究进展咱 允暂 援
河北果树袁圆园园苑袁渊源冤院员 原 猿
咱 圆 暂 摇 王国平援我国草莓病毒种类鉴定研究初报咱 允暂 援 中国果树袁员怨愿愿袁
渊圆冤院猿圆 原 猿源
咱 猿 暂 摇 王常芸袁李晓亮袁王建玲袁迟爱花袁王冬梅援 草莓脱毒技术与开发
应用咱允暂山东农业科学袁圆园园苑袁 渊源冤院员员愿 原 员员怨袁员圆圆
咱 源 暂摇 王国平袁刘福昌袁薛光荣袁朱秋英袁杨振英袁王焕玉援草莓病毒种类
鉴定及培育无病毒种苗的技术研究咱 允暂 援 中国农业科学袁员怨怨园袁
圆猿渊源冤院源猿 原 源怨
咱 缘 暂 摇 刘健袁刘向蕾袁胡繁荣袁赵华袁朱花芳援 草莓热处理结合茎尖培养
脱毒效果研究咱允暂 援浙江农业科学袁圆园园怨袁员渊远冤院员园愿愿 原 员园怨员
咱 远 暂 摇 乔奇袁张振臣袁靳秀兰援 草莓花药组织培养脱毒技术研究咱 允暂 援中
国农学通报袁圆园园猿袁员怨 渊圆冤院圆远 原 圆苑
咱 苑 暂 摇 孟志卿援 草莓花药组织培养脱毒快繁技术研究咱 允暂 援安徽农业科
学袁圆园园愿袁猿远 渊圆冤 院源源园 原 源源员
咱 愿 暂 摇 孙崇波袁蒋桂华袁施季森袁张慧琴袁吴延军袁郭方其袁谢鸣援 不同外
植体对草莓病毒脱除效果及病毒的多重 砸栽鄄孕悦砸 检测咱 允暂 援 核
农学报袁圆园园愿袁圆圆渊源冤院源源苑 原 源缘园
咱 怨 暂 摇 孟静静袁徐平丽袁郭峰袁李新国援 野丰香冶草莓高效脱毒及快速繁
殖技术研究咱允暂 援安徽农业科学袁圆园园怨袁猿苑渊猿缘冤院员苑猿源远 原 员苑猿源苑
咱员园暂摇 董淑英袁于秋华袁岳文辉袁崔潇援 不同品种草莓脱毒效果的研究
咱允暂 援山东农业科学袁圆园园源袁渊远冤院猿远 原 猿苑
咱员员暂摇 孕藻贼则扎蚤噪 运袁 月藻灶藻泽 灾袁 酝则佗扎 陨袁 匀燥灶藻贼泽造藻早则燥增佗 原 云则佗灶燥增佗 允袁 粤灶泽燥则早藻
宰袁 杂责葬噪 允援 杂贼则葬憎遭藻则则赠 增藻蚤灶 遭葬灶凿蚤灶早 增蚤则怎泽鄄凿藻枣蚤灶蚤贼蚤增藻 皂藻皂遭藻则 燥枣 贼澡藻
早藻灶怎泽 糟葬怎造蚤皂燥增蚤则怎泽咱允暂 援 灾蚤则怎泽 郧藻灶藻泽袁 员怨怨愿袁员远渊猿冤院猿园猿 原 猿园缘
咱员圆暂摇 朱海生袁花秀凤袁陈敏氡袁温庆放援 四种草莓病毒 杂酝燥灾尧杂灾月灾尧
杂悦灾尧杂酝再耘灾多重 砸栽鄄孕悦砸检测咱 允暂 援 核农学报袁圆园员猿袁圆苑渊员员冤院
员远猿园 原 员远猿缘
咱员猿暂摇 王红袁王菁菁袁张科立袁成卓敏援 利用内标为基础的多重 砸栽鄄孕悦砸
技术检测草莓斑驳病毒和草莓轻型黄边病毒咱 允暂 援 浙江农业学
报袁圆园员源袁圆远渊员冤院员园缘 原 员园怨
咱员源暂摇 张吉红袁余澍琼袁徐瑛袁张慧丽袁陈先锋袁陈剑平袁陈炯援 逆转录环
介导等温扩增技术检测草莓潜隐环斑病毒的研究咱 允暂 援 植物保
护袁圆园员猿袁猿怨渊远冤院苑源 原 苑苑
咱员缘暂摇 贾海燕袁 焦阳袁 芦强袁 张克袁 杨凯援 三价病毒外壳蛋白基因介导
的百合抗病毒初步研究咱 允暂 援 核农学报袁圆园员猿袁 圆苑渊怨冤 院员圆怨猿 原
员猿园员
咱员远暂摇 孙宗涛袁魏佳袁李俊敏袁王旭袁沈国新袁陈剑平援 与 砸月杂阅灾外壳
蛋白 孕员园 互作植物因子的筛选与验证咱 允暂 援 核农学报袁圆园员源袁 圆愿
渊缘冤 院苑愿源 原 苑愿怨
咱员苑暂 摇 高宜峰袁 张菲菲袁 张金文袁陆艳梅袁 魏桂民袁 马廷蕊援 栽酝灾尧孕灾酝
和 悦酝灾 干扰载体构建及对人参果遗传转化咱 允暂 援 核农学报袁
圆园员源袁 圆愿渊员冤院源源 原 缘员
咱员愿暂摇 史芳芳袁汪泉援 三种草莓病毒的多重 砸栽鄄孕悦砸检测方法咱允暂 援农业
与技术袁圆园员猿袁猿猿渊猿冤院缘源 原 缘缘
咱员怨暂摇 张志宏袁肖敏袁杨洪一袁李贺袁高秀岩袁杜国栋援 草毒病毒脱除方
法的比较与评价咱允暂 援果树学报袁圆园园远袁圆猿渊缘冤院苑圆园 原 苑圆猿
咱圆园暂摇 杨洪一袁李丽丽袁代红艳袁张志宏援 草莓斑驳病毒分子变异及
孕悦砸检测技术研究咱允暂 援中国农业科学袁圆园园愿袁源员渊苑冤院员怨愿猿 原 员怨愿愿
咱圆员暂摇 李翠英援 草莓病毒病的症状与防治咱 允暂 援 四川农业科技袁圆园员源袁
怨怨远员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员缘袁圆怨渊怨冤院员远怨源 耀 员苑园园
渊源冤院缘园
咱圆圆暂摇 赵振海援 冀东地区草莓无病毒生产苗繁育技术咱 允暂 援蔬菜袁圆园员猿袁
渊员圆冤院缘员 原 缘圆
咱圆猿暂 摇 阎珂袁肖君泽援 章姬草莓无病毒苗快速繁殖配套技术咱 允暂 援现代
园艺袁圆园员猿袁渊员园冤院猿圆 原 猿源
咱圆源暂 摇 江彤袁谢朝阳袁丁菲袁李祥宇袁贾琳援草莓镶脉病毒 韵砸云 遇基因的
原核表达与抗血清制备咱允暂 援植物保护学报袁圆园员猿袁源园渊远冤院缘员圆 原
缘员远
咱圆缘暂 摇 江彤袁杨友志袁丁菲袁蒋磊袁李祥宇袁邓竹根袁谢朝阳袁宋培培援草莓
镶脉病毒外壳蛋白的原核表达及多抗血清制备咱允暂 援南京农业大
学学报袁圆园员圆袁猿缘渊远冤院猿园 原 猿源
咱圆远暂 摇 李瑞袁倪方锐袁贾琳袁蒋磊袁江彤援 草莓镶脉病毒渊杂灾月灾冤韵砸云 遇
基因的克隆及蛋白特性分析咱 允暂 援 西南大学学报院自然科学版袁
圆园员员袁猿猿渊员圆冤院员 原 远
咱圆苑暂 摇 倪方锐袁李瑞袁李爽袁贾琳袁蒋磊袁宋培培袁江彤援 草莓镶脉病毒
渊杂灾月灾冤启动子的克隆及序列分析咱 允暂 援 西北农林科技大学学
报院自然科学版袁圆园员员袁猿怨渊圆冤院怨苑 原 员园员
咱圆愿暂 摇 蒋磊袁邓竹根袁谢朝阳袁杨友志袁李祥宇袁丁菲袁江彤援 草莓镶脉病
毒 韵砸云域基因的克隆尧原核表达与抗血清制备咱 允暂 援植物病理学
报袁圆园员猿袁源猿渊员冤院圆园 原 圆远
咱圆怨暂 摇 砸葬贼贼蚤 悦袁孕蚤泽蚤 粤袁粤怎贼燥灶藻造造 悦 砸援 云蚤则泽贼 则藻责燥则贼 燥枣 泽贼则葬憎遭藻则则赠 增藻蚤灶 遭葬灶凿蚤灶早
增蚤则怎泽 燥灶 泽贼则葬憎遭藻则则赠 蚤灶 陨贼葬造赠咱允暂 援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻袁圆园园怨袁怨猿渊远冤院远苑缘 原
远苑缘
咱猿园暂摇 灾葬 觢噪燥增佗 阅 匀袁 譒责葬噪 允袁 孕藻贼则扎蚤噪 运援 灾葬则蚤葬遭蚤造蚤贼赠 蚤灶 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣
杂贼则葬憎遭藻则则赠 增藻蚤灶 遭葬灶凿蚤灶早 增蚤则怎泽咱允暂 援 月蚤燥造燥早蚤葬 孕造葬灶贼葬则怎皂袁圆园园远袁缘园渊源冤院
远远园 原 远远远
咱猿员暂摇 周厚成援草莓病毒病研究进展援果树学报袁圆园园猿袁圆园渊缘冤院源圆员 原 源圆远
咱猿圆暂摇 雷家军袁张运涛袁赵密珍援 中国草莓咱酝暂援 沈阳院辽宁科学技术出
版社袁圆园员员
咱猿猿暂摇 孕燥泽贼澡怎皂葬 运 陨袁 粤凿葬皂泽 粤 晕袁 匀燥灶早 再袁 运蚤则遭赠 酝 允援 阅藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣
泽贼则葬憎遭藻则则赠 糟则蚤灶噪造藻 增蚤则怎泽 蚤灶 责造葬灶贼泽 葬灶凿 葬责澡蚤凿泽 遭赠 砸栽鄄孕悦砸 怎泽蚤灶早
糟燥灶泽藻则增藻凿 蕴 早藻灶藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽咱允暂 援 孕造葬灶贼 孕葬贼澡燥造燥早赠袁圆园园圆袁缘员渊猿冤院圆远远
原 圆苑源
咱猿源暂摇 李慧援 草莓茎尖离体培养研究咱允暂 援贵州农业科学袁圆园园源袁猿圆渊圆冤院
员园 原 员员
咱猿缘暂摇 徐启红袁王之成袁任平国袁张胜袁侯凯援 影响草莓茎尖快繁因素的
分析咱允暂 援安徽农业科学袁圆园园愿袁猿远渊圆圆冤院怨源园猿 原 怨源园源
咱猿远暂摇 马吉湘袁田世民袁邹明强袁金涌袁陈彦长袁薛强援 草莓携带甲肝病
毒 耘蕴陨杂粤 检测方法的研究咱 允暂 援 食品科学袁圆园园愿袁圆怨渊员园冤院源缘怨 原
源远圆
咱猿苑暂摇 王正华袁邵永春袁尹涛援 草莓病毒的检测方法及症状识别咱 允暂 援山
东农业科学袁员怨怨怨袁渊员冤院猿员 原 猿猿
陨灶增藻泽贼蚤早葬贼蚤燥灶 燥枣 杂贼则葬憎遭藻则则赠 灾藻蚤灶 月葬灶凿蚤灶早 灾蚤则怎泽 渊杂灾月灾冤 蚤灶 在澡藻躁蚤葬灶早 葬灶凿
杂澡燥燥贼 栽蚤责 阅藻贼燥曾蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 栽藻糟澡灶燥造燥早赠 燥灶 月藻灶蚤澡燥责藻 悦怎造贼蚤增葬则
再粤晕郧 载蚤葬燥枣葬灶早员 摇 酝陨粤韵 蕴蚤曾蚤葬灶早员 摇 在匀粤晕郧 再怎糟澡葬燥员 摇 允陨粤晕郧 郧怎蚤澡怎葬员摇 匀哉 酝藻蚤澡怎葬圆
渊员 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻袁 在澡藻躁蚤葬灶早 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆员曰
圆在澡藻躁蚤葬灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 栽藻糟澡灶燥造燥早赠 耘曾贼藻灶泽蚤燥灶 悦藻灶贼藻则袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园圆园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院陨灶 燥则凿藻则 贼燥 怎灶凿藻则泽贼葬灶凿 贼澡藻 蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 燥枣 杂贼则葬憎遭藻则则赠 灾藻蚤灶 月葬灶凿蚤灶早 灾蚤则怎泽 渊杂灾月灾冤 蚤灶 月藻灶蚤澡燥责藻 泽贼则葬憎遭藻则则赠 责造葬灶贼泽
蚤灶 皂葬蚤灶 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 葬则藻葬泽 燥枣 在澡藻躁蚤葬灶早袁 葬灶凿 贼燥 藻泽贼葬遭造蚤泽澡 葬责责则燥责则蚤葬贼藻 增蚤则怎泽鄄枣则藻藻 责则燥责葬早葬贼蚤燥灶 泽赠泽贼藻皂 燥枣 泽贼则葬憎遭藻则则赠袁 贼澡藻
凿蚤泽贼则蚤遭怎贼蚤燥灶 燥枣 杂灾月灾 蚤灶 贼澡藻 皂葬蚤灶 泽贼则葬憎遭藻则则赠 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 则藻早蚤燥灶泽 憎藻则藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿援 砸藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 皂燥泽贼 月藻灶蚤澡燥责藻
责造葬灶贼泽 憎藻则藻 蚤灶枣藻糟贼藻凿 憎蚤贼澡 杂灾月灾援 栽澡藻 早藻灶藻 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣 杂灾月灾 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 蚤灶枣藻糟贼藻凿 责造葬灶贼泽 憎葬泽 糟燥皂责葬则藻凿 憎蚤贼澡 贼澡葬贼 燥枣
杂灾月灾 蚤灶 晕悦月陨 凿葬贼葬遭葬泽藻袁 贼澡葬贼 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 早藻灶藻 燥枣 杂灾月灾 蚤灶 在澡藻躁蚤葬灶早 责则燥增蚤灶糟藻 泽澡葬则藻凿 葬 澡蚤早澡 泽藻择怎藻灶糟藻 泽蚤皂蚤造葬则蚤贼赠 燥枣
怨愿豫 憎蚤贼澡 贼澡葬贼 燥枣 杂灾月灾 蚤灶 晕悦月陨援 砸怎灶灶藻则 贼蚤责泽 憎蚤贼澡 园郾 圆 皂皂 造燥灶早 憎藻则藻 糟怎造贼怎则藻凿 蚤灶 酝杂 皂藻凿蚤怎皂 憎蚤澡 园郾 猿 皂早窑蕴 原员远 原 月粤袁
园郾 园缘 皂早窑蕴 原员 郧粤袁 园郾 园员 皂早窑蕴 原员 陨月粤袁 猿豫 泽怎糟则燥泽藻袁 责匀 缘郾 愿援 孕悦砸 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 凿藻贼燥曾蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 责造葬灶贼
泽澡燥燥贼 贼蚤责 糟怎造贼怎则藻 憎葬泽 怨猿豫 援 哉泽蚤灶早 贼澡藻 葬遭燥增藻 皂藻贼澡燥凿 责造葬灶贼泽 憎蚤贼澡 贼澡蚤糟噪 葬灶凿 泽贼则燥灶早 则燥燥贼 泽赠泽贼藻皂 葬灶凿 燥枣 泽贼则燥灶早 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 糟葬灶
遭藻 糟怎造贼怎则藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 贼澡蚤泽 责葬责藻则 憎蚤造造 责则燥增蚤凿藻 葬 怎泽藻枣怎造 早怎蚤凿葬灶糟藻 枣燥则 贼澡藻 藻泽贼葬遭造蚤泽澡皂藻灶贼 燥枣 葬 泽燥怎灶凿 增蚤则怎泽 凿藻贼燥曾蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
贼藻糟澡灶蚤择怎藻 燥枣 泽贼则葬憎遭藻则则赠援
运藻赠憎燥则凿泽院泽贼则葬憎遭藻则则赠袁 泽澡燥燥贼 贼蚤责袁 凿藻贼燥曾蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶袁 泽贼则葬憎遭藻则则赠 增藻蚤灶 遭葬灶凿蚤灶早 增蚤则怎泽渊 杂灾月灾冤
园园苑员