全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员源袁圆愿渊员员冤院圆园缘愿 耀 圆园远源
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园猿鄄园苑摇 接受日期院圆园员源鄄园愿鄄员圆
作者简介院吴红洋袁女袁主要从事功能性食品的研究遥 憎澡赠苑缘员圆圆源园圆员岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院张志清袁男袁教授袁主要从事粮油副产物开发利用的研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 扎择扎澡葬灶早苑圆员岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员源冤员员鄄圆园缘愿鄄园苑
花椒籽蛋白降血压肽的分离纯化
吴红洋摇 姜太玲摇 杨承志摇 张志清
渊四川农业大学食品学院袁四川 雅安摇 远圆缘园员源冤
摘摇 要院为了获得高活性尧高纯度的花椒籽蛋白降血压肽袁本试验采用 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析对酶解液
进行分离纯化袁并用 栽则蚤糟蚤灶藻鄄杂阅杂鄄孕粤郧耘测定其分子量遥 结果表明袁最佳分离条件为院以超纯水为洗脱溶
液袁洗脱流速为 园郾 远 皂蕴窑皂蚤灶 原员袁上样量为 圆郾 园 皂蕴袁样品浓度为 猿园 皂早窑皂蕴 原员遥 在此条件下可收集得到 源
个组分袁其中洗脱峰域有较高的 粤悦耘 抑制效果袁陨悦缘园为 园郾 园圆员 皂早窑皂蕴 原员袁该组分的分子量在 猿 园园园 阅葬 以
下遥 本研究为新型降血压药物或者保健食品的研发提供了一定的科学依据遥
关键词院花椒籽蛋白曰降血压肽曰分离纯化曰凝胶层析曰分子量
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员源郾 员员援 圆园缘愿
摇 摇 花椒渊在葬灶贼澡燥曾赠造怎皂 遭怎灶早藻葬灶怎皂 酝葬曾蚤皂冤是我国传
统的野八大调味品冶之一袁分布于全国多个省份袁北方
以陕西尧甘肃尧河南尧河北尧山东等省为主袁南方以四川
花椒最为出名咱员暂 遥 它主要包括花椒果皮和花椒籽两
部分袁其中花椒籽是调味料花椒果皮生产的主要副产
物袁实际产量基本与花椒果皮持平咱圆暂 袁但是长期以来
都没有被有效利用而造成很大的资源浪费遥 花椒籽中
富含蛋白质袁其脱脂后的花椒籽种仁中蛋白质含量高
达 远园郾 猿源豫 咱猿暂 袁是一种新型的蛋白质资源遥 因此袁开发
利用占花椒籽相当比例的蛋白质显得尤为重要咱源暂 遥
目前袁对花椒籽的利用主要是从花椒籽中提取花椒籽
油咱缘 原 苑暂和优化蛋白质的提取工艺咱愿暂 袁而关于花椒籽蛋
白制备降血压肽的研究鲜见报道遥
降血压肽又称血管紧张素转换酶抑制肽
渊葬灶早蚤燥贼藻灶泽蚤灶 糟燥灶增藻则贼蚤灶早 藻灶扎赠皂藻 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则 责藻责贼蚤凿藻泽袁简称
粤悦耘陨孕泽冤袁是从食物蛋白质中分离出的一类具有显著
降低血压功效的多肽短链物质咱怨暂 遥 它通过抑制肾素
原血管紧张素系统渊 则藻灶蚤灶鄄葬灶早蚤燥贼藻灶泽蚤灶 泽赠泽贼藻皂袁砸粤杂冤中
血管紧张素域的生成和减少激肽释放酶 原激肽系统
渊噪葬造造蚤噪则藻蚤灶要噪蚤灶蚤灶 泽赠泽贼藻皂袁运运杂冤中缓激肽的破坏袁从而
达到降血压的作用咱员园暂 遥 天然蛋白质因其安全高袁无毒
副作用袁利用其制备降压肽已经成为降血压研究领域
的研究热点遥 目前已经从多种动植物原料及下脚料中
水解分离出降血压肽袁也有学者从奶制品尧肉制品尧海
产品咱员员 原 员源暂等动物蛋白和谷类尧豆类尧海藻等咱员缘 原 圆园暂植物
蛋白的酶解产物或发酵制品中分离得到了各种不同结
构的 粤悦耘抑制肽遥
本研究以花椒籽蛋白为原料袁利用木瓜蛋白酶进
行水解制备花椒籽蛋白降血压肽遥 采用 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄
圆缘 凝胶层析对酶解液进行分离纯化袁从而提高酶解产
物的纯度和 粤悦耘抑制效果袁为新型降血压药物或者保
健食品的研发提供新途径遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
花椒籽蛋白由四川农业大学食品学院分析测试中
心实验室自制遥
木瓜蛋白酶 渊酶活力为 圆郾 园 伊 员园缘 哉窑早 原员 冤尧
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘渊进口分装冤均购于北京华迈科生物技
术有限责任公司曰血管紧张素转化酶渊粤悦耘冤由四川农
业大学食品学院分析测试中心实验室自制渊酶活力为
怨郾 缘愿 伊 员园 原猿 哉窑皂早 原员 冤曰马尿酰 原 组氨酰 原 亮氨酸
渊匀匀蕴冤购自美国 杂蚤早皂葬 公司曰马尿酸标准品购自中国
药品生物制品检定所曰杂阅杂鄄孕粤郧耘 蛋白质超低分子量
多肽购自上海源叶生物科技有限公司曰晕葬韵匀尧匀悦造尧
晕葬悦造尧硼酸尧乙酸乙酯尧栽则蚤糟蚤灶藻尧栽则蚤泽尧栽耘酝耘阅尧考马斯亮
蓝 砸圆缘园尧丙三醇尧十二烷基硫酸钠尧茁鄄巯基乙醇尧过硫
愿缘园圆
摇 员员 期 花椒籽蛋白降血压肽的分离纯化
酸铵等均为分析纯曰丙烯酰胺尧甲叉双丙烯酰胺等为电
泳纯遥
员郾 圆摇 仪器设备
哉灾鄄猿员园园 紫外可见分光光度计渊上海美谱达仪器
有限公司冤曰月砸源蚤 冷冻离心机渊美国 栽澡藻则皂燥 公司冤曰
匀匀鄄圆 数显恒温水浴锅 渊江苏荣华仪器制造有限公
司冤曰悦孕圆圆缘阅型电子天平渊德国 杂葬则贼燥则蚤怎泽 公司冤曰月孕鄄圆园
责匀计渊德国 杂葬则贼燥则蚤怎泽 公司冤曰杂糟蚤藻灶贼扎鄄晕 型真空冷冻干
燥机 渊宁波新芝生物科技股份有限公司冤曰 酝悦宰韵
缘园园园阅葬超滤离心管渊美国 酝蚤造造蚤责燥则藻 公司冤曰月杂鄄员园园粤自
动部分收集器尧阅匀蕴鄄月 电脑定时恒流泵尧层析柱 员郾 远
糟皂 伊 远园 糟皂渊上海沪西仪器分析有限公司冤曰美国 月蚤燥鄄
砸葬凿凝胶成像系统渊北京五业嘉科技有限公司冤尧美国
月蚤燥鄄砸葬凿电泳系统 渊北京博雅创新科技发展有限公
司冤遥
员郾 猿摇 试验方法
员郾 猿郾 员摇 花椒籽蛋白酶解制备降血压肽的工艺流程及
粤悦耘抑制率的测定
员郾 猿郾 员郾 员摇 工艺流程 摇 花椒籽蛋白寅预处理 渊怨园 耀
员园园益袁员园 皂蚤灶冤寅不同条件下酶解寅灭酶渊怨园 耀 员园园益袁
员园 皂蚤灶冤寅冷却寅离心渊缘 园园园 则窑皂蚤灶 原员袁员园 皂蚤灶冤寅收集
上清液渊测定 粤悦耘抑制活性冤寅冻干遥
员郾 猿郾 员郾 圆摇 粤悦耘抑制率的测定摇 粤悦耘 抑制率的检测方
法在高丹丹咱圆员暂体外检测方法的基础上进行改进遥 在
圆 皂蕴的离心管中混合 源园 滋蕴 样品液和 愿园 滋蕴 园郾 园园缘
皂燥造窑蕴 原员的 匀匀蕴 溶液渊匀匀蕴 溶液用含有 园郾 猿 皂燥造窑蕴 原员
晕葬悦造的 园郾 员 皂燥造窑蕴 原员尧责匀 值 愿郾 猿 的硼酸盐缓冲液配
制冤袁然后加入 圆园 滋蕴 园郾 园源愿 哉窑皂蕴 原员 粤悦耘 启动反应袁
猿苑益恒温保持 远园 皂蚤灶袁加入 园郾 圆 皂蕴 造 皂燥造窑蕴 原员的匀悦造终
止反应遥 再加入 员郾 缘 皂蕴冷冻后的乙酸乙酯袁用力振荡
混合袁源 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶 后袁吸取 员郾 园 皂蕴 的乙
酸乙酯层渊上层冤移入试管中袁在 愿园 耀 怨园益的烘箱中烘
干袁再加入 源 皂蕴 员 皂燥造窑蕴 原员 晕葬悦造 溶液溶解马尿酸袁溶
液在 圆圆愿 灶皂测定吸光值渊韵阅冤曰对照组除不加入抑制
剂尧空白组除在反应前先加入 园郾 圆 皂蕴 造 皂燥造窑蕴 原员的盐
酸以终止反应外袁其余操作与反应管完全相同遥
粤悦耘 抑制率 越 韵阅粤 原 韵阅月韵阅粤 原 韵阅悦 伊员园园豫
其中袁韵阅粤要不存在抑制剂时体系在 圆圆愿 灶皂 波长
下的吸光值曰韵阅月要存在抑制剂与 粤悦耘 时体系在 圆圆愿灶皂波长下的吸光值曰韵阅悦要不存在抑制剂与 粤悦耘 时
体系在 圆圆愿 灶皂波长下的吸光值遥
员郾 猿郾 员郾 猿摇 半数抑制浓度渊陨悦缘园冤的测定摇 将样品冷冻干
燥后配制成不同浓度的溶液袁按照 粤悦耘 抑制活性的检
测方法测定 粤悦耘 抑制率遥 以样品浓度为横坐标袁粤悦耘
抑制率为纵坐标绘制样品浓度和 粤悦耘抑制率之间关系
的曲线袁然后进行一元二次回归分析得到回归方程袁通
过回归方程即可求出 粤悦耘 抑制率为 缘园豫时的样品浓
度袁即得 陨悦缘园遥 陨悦缘园值越小说明抑制剂活性越大遥员郾 猿郾 圆摇 降血压肽的超滤分离 摇 取上述酶解液经过
园郾 圆圆 滋皂滤膜过滤袁然后通过截留分子量为 缘 园园园 阅葬
的超滤离心管进行离心 渊源 园园园 则窑皂蚤灶 原员袁 员园 皂蚤灶袁
圆园益冤袁分别收集超滤液和截留液的组分袁将其真空冷
冻干燥后分别测定 陨悦缘园遥员郾 猿郾 猿摇 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析摇 将超滤离心后 粤悦耘
抑制活性较高的组分配成一定浓度的溶液袁经过
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析分离袁用超纯水进行洗脱袁研
究洗脱流速渊园郾 源尧园郾 远尧园郾 愿尧员郾 园 皂蕴窑皂蚤灶 原员 冤尧上样量
渊员郾 园尧 员郾 缘尧 圆郾 园尧 圆郾 缘 皂蕴冤 和样品浓度 渊 员园尧 圆园尧 猿园尧
源园 皂早窑皂蕴 原员冤对降血压肽分离效果的影响遥 将收集到
的各组分在 圆员缘 灶皂波长下进行检测袁收集各洗脱峰袁
经冷冻干燥后测定 陨悦缘园遥员郾 猿郾 源摇 栽则蚤糟蚤灶藻鄄杂阅杂鄄孕粤郧耘 测定降血压肽的分子量 摇
将酶解液尧超滤液和 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 洗脱分离收集到的
粤悦耘抑制活性最高的组分采用 栽则蚤糟蚤灶藻鄄杂阅杂鄄孕粤郧耘 测
定其分子量遥 分别配制分离胶尧夹层胶和浓缩胶袁并依
次灌胶袁待凝胶脱色后观察电泳图谱遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 花椒籽蛋白降血压肽的超滤分离
花椒籽蛋白经木瓜蛋白酶酶解后袁酶解产物通过
截留分子量为 缘 园园园 阅葬的超滤离心管袁得到了 圆 个组
分袁各组分 粤悦耘 抑制活性的 陨悦缘园结果见表 员遥 由表 员
可知袁超滤液的 陨悦缘园低于截留液和酶解产物的 陨悦缘园袁说
明经过超滤分离袁花椒籽蛋白酶解产物中具有活性的
降血压肽达到了初步纯化的目的袁并且随着分子量的
摇 摇 摇 摇
表 员摇 不同超滤组分的 粤悦耘抑制活性
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 粤悦耘 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 燥枣 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 枣则葬糟贼蚤燥灶
泽藻责葬则葬贼藻凿 遭赠 怎造贼则葬鄄枣蚤造贼则葬贼蚤燥灶
组分
悦燥皂责燥灶藻灶贼
粤悦耘抑制率
粤悦耘 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 葬糟贼蚤增蚤贼赠 辕 豫 陨悦缘园 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
花椒籽蛋白 猿员郾 猿源 缘郾 源苑员
酶解产物 远愿郾 圆缘 园郾 圆园园
截留液 远缘郾 远怨 园郾 圆源员
超滤液 苑愿郾 苑缘 园郾 园猿圆
怨缘园圆
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
减小袁花椒籽蛋白降血压肽的 粤悦耘 抑制活性不断增
大遥 因此将超滤液的组分收集冷冻干燥后用于凝胶层
析的进一步纯化遥
圆郾 圆摇 花椒籽蛋白降血压肽 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析
分离纯化
圆郾 圆郾 员摇 洗脱流速对降血压肽分离的影响摇 以超纯水
为洗脱溶液袁样品浓度为 员园 皂早窑皂蕴 原员袁上样量为 员郾 园
皂蕴袁考察洗脱流速对降血压肽分离效果的影响袁各洗
脱峰如图 员 所示遥
注院粤院流速 园郾 源皂造窑皂蚤灶 原 员 曰 月院流速 园郾 远皂造窑皂蚤灶 原员 曰 悦院流速 园郾 愿皂造窑皂蚤灶 原 员 曰 阅院流速 员郾 园皂造窑皂蚤灶 原 员 遥
晕燥贼藻院 粤院 云造燥憎 则葬贼藻 园郾 源皂造窑皂蚤灶 原 员 曰 月院 云造燥憎 则葬贼藻 园郾 远皂造窑皂蚤灶 原 员 曰 悦院 云造燥憎 则葬贼藻 园郾 愿皂造窑皂蚤灶 原员 曰 阅院 云造燥憎 则葬贼藻 员郾 园皂造窑皂蚤灶 原 员
图 员摇 洗脱流速对分离效果的影响
云蚤早援 员摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 枣造燥憎 则葬贼藻 燥灶 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶爷泽 则藻泽怎造贼
保持适当的洗脱流速是凝胶层析获得良好分离效
果的重要条件遥 由图 员 可知袁当洗脱流速从 园郾 源 皂蕴窑
皂蚤灶 原员增加到 园郾 愿 皂蕴窑皂蚤灶 原员时袁均能得到 圆 个洗脱峰袁
而当洗脱流速加快到 员郾 园 皂蕴窑皂蚤灶 原员时只能得到 员 个
洗脱峰袁说明洗脱流速太大袁降血压肽不能得到较好的
分离遥 这是因为凝胶层析的分离作用主要取决于分子
扩散进入凝胶的机会袁流速过快有些分子来不及在分
子筛中分配而流出袁速度过慢时已经分离的组分会因
扩散而混合袁导致峰形变宽袁分辨率降低袁并且会大大
延长实验时间遥 因此袁选择洗脱流速为 园郾 远 皂蕴窑皂蚤灶 原员
时分离效果最好遥
圆郾 圆郾 圆摇 上样量对分离效果的影响摇 以超纯水为洗脱
溶液袁 样 品 浓 度 为 员园 皂早 窑 皂蕴 原员袁 洗 脱 流 速
园郾 远 皂蕴窑皂蚤灶 原员袁考察上样量对降血压肽分离效果的影
响袁各洗脱峰如图 圆 所示遥
上样量对分离效果也有很大的影响袁一般不能超
过床体积的 缘豫 遥 上样量过多袁会造成洗脱峰的重叠袁
影响分离效果曰上样太少袁提纯后各组分量少尧浓度低袁
实验效率低遥 由图 圆 可知袁当上样量为 员郾 园 皂蕴 和 员郾 缘
皂蕴时袁均能得到 圆 个分离效果较好的峰袁当上样量增
加到 圆郾 园 皂蕴和 圆郾 缘 皂蕴时袁能洗脱得到 猿 个峰袁并且当
上样量大于 圆郾 园 皂蕴时没有更多的分离峰袁分离效果也
没有相应地变好遥 这是因为凝胶颗粒的吸附容量已经
达到最大值遥 因此袁选择上样量为 圆郾 园 皂蕴进行洗脱遥
圆郾 圆郾 猿摇 样品浓度对分离效果的影响摇 以超纯水为洗
脱溶液袁上样量 圆郾 园 皂蕴袁洗脱流速 园郾 远 皂蕴窑皂蚤灶 原员袁考察
样品浓度对降血压肽分离效果的影响袁各洗脱峰如图
猿 所示遥
样品浓度对分离效果有很大的影响袁适当增加样
品浓度可以保持较高的分离效果遥 当样品浓度为 员园
皂早窑皂蕴 原员和 圆园 皂早窑皂蕴 原员时袁均能得到 猿 个明显的洗脱
园远园圆
摇 员员 期 花椒籽蛋白降血压肽的分离纯化
注院粤院上样量 员郾 园皂蕴曰 月院 上样量 员郾 缘皂蕴曰 悦院 上样量 圆郾 园皂蕴曰 阅院 上样量 圆郾 缘皂蕴遥
晕燥贼藻院 粤院 陨灶蚤贼蚤葬造 增燥造怎皂藻 员郾 园皂造曰 月院 陨灶蚤贼蚤葬造 增燥造怎皂藻 员郾 缘皂造皂造曰 悦院 陨灶蚤贼蚤葬造 增燥造怎皂藻 圆郾 园皂造曰 阅院 陨灶蚤贼蚤葬造 增燥造怎皂藻 圆郾 缘皂蕴援
图 圆摇 上样量对分离效果的影响
云蚤早援 圆摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 蚤灶蚤贼蚤葬造 增燥造怎皂藻 燥灶 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶爷泽 则藻泽怎造贼
峰袁当样品浓度增加到 猿园 皂早窑皂蕴 原员和 源园 皂早窑皂蕴 原员时袁
能洗脱出 源 个组分袁但样品浓度为 源园 皂早窑皂蕴 原员时分离
效果不佳袁出峰开始重叠遥 这是因为样品浓度过大会
导致黏度增大袁而使层析分辨率下降袁一般要求样品黏
度小于 园郾 园员 孕葬窑泽遥因此袁选择样品浓度为 猿园 皂早窑皂蕴 原员
进行洗脱遥
圆郾 猿摇 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘凝胶层析分离纯化后 陨悦缘园的测定
以超纯水为洗脱溶液袁选择洗脱流速为 园郾 远
皂蕴窑皂蚤灶 原员袁上样量为 圆郾 园 皂蕴袁样品浓度为 猿园 皂早窑皂蕴 原员
对样品进行洗脱袁每管收集 圆郾 园 皂蕴遥 将各峰的收集液
合并袁冷冻干燥后分别测定各个组分 粤悦耘 抑制活性的
陨悦缘园袁结果见表 圆遥摇 摇 由图 猿 原 悦 和表 圆 可知袁样品经过 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘
凝胶分离后所得组分玉尧域尧芋尧郁均具有 粤悦耘 抑制活
性袁 其 陨悦缘园 分 别 为 园郾 园源缘尧 园郾 园圆员尧 园郾 园圆愿尧 园郾 园源员
皂早窑皂蕴 原员袁其中组分玉最先洗脱下来袁可能是由于该组
分含有平均分子量较大的多肽遥 与之相反袁组分域尧
芋尧郁的 粤悦耘抑制活性均高于组分玉袁可能是由于这
些组分出峰时间比组分玉晚袁组分中含有较多分子量
表 圆摇 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析分离组分的
粤悦耘抑制活性
栽葬遭造藻 圆摇 粤悦耘鄄蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 陨悦缘园燥枣 杂藻责澡葬凿藻曾
郧鄄圆缘 泽藻责葬则葬贼藻凿 责藻葬噪泽
组分
悦燥皂责燥灶藻灶贼
粤悦耘抑制率
粤悦耘 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 葬糟贼蚤增蚤贼赠 辕 豫 陨悦缘园 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
玉 苑圆郾 怨源 园郾 园源缘
域 愿缘郾 园园 园郾 园圆员
芋 愿园郾 园园 园郾 园圆愿
郁 苑远郾 愿圆 园郾 园源员
较小的短肽的缘故袁这些可能是 粤悦耘 抑制活性比较高
的组分遥 组分域的 粤悦耘 抑制活性最高袁含量也较高袁
表明该组分中可能含有具有较高 粤悦耘 抑制活性的短
肽袁该组分与超滤液相比袁 粤悦耘 抑制活性提高了
猿源郾 猿愿豫 袁说明 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析达到了进一步
纯化的作用遥 组分郁为分子量更低的肽组分袁粤悦耘 抑
制活性与组分玉相当袁但该组分含量较低遥
员远园圆
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
注院粤院样品浓度 员园皂早窑皂蕴 原员 曰 月院样品浓度 圆园皂早窑皂蕴 原员 曰
悦院样品浓度 猿园皂早窑皂蕴 原员 曰 阅院样品浓度 源园皂早窑皂蕴 原员 遥
晕燥贼藻院 粤院 杂葬皂责造藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 员园皂早窑皂蕴 原员 曰 月院 杂葬皂责造藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 圆园皂早窑皂蕴 原员 曰
悦院 杂葬皂责造藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 猿园皂早窑皂蕴 原员 曰 阅院 杂葬皂责造藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 源园皂早窑皂蕴 原员 援
图 猿摇 样品浓度对分离效果的影响
云蚤早援 猿摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 泽葬皂责造藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥灶 贼澡藻 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶爷泽 则藻泽怎造贼
圆郾 源摇 杂阅杂鄄孕粤郧耘测定降血压肽的分子量范围
将降血压肽经过初步纯化后进行电泳袁电泳结束
后的图谱结果见图 源 所示遥
由图 源 可知袁花椒籽蛋白降血压肽酶解液粗品电
泳泳带呈连续的条带袁说明该酶解液分子量分布范围
较广袁而经过超滤初步纯化后袁分子量降低袁条带集中
在 缘 园园园 阅葬 以下袁其中经过 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 层析后
粤悦耘抑制活性最高组分的分子量主要集中在猿 园园园 阅葬
以下袁说明降血压肽起抑制效果的活性组分主要在
猿 园园园 阅葬以下遥
猿摇 讨论
凝胶层析是目前分离纯化肽类最常用的方法之
一遥 该法设备简单尧操作方便尧重复性好尧样品回收率
高遥 人们根据降血压肽的分子量范围袁选用不同型号
注院员院超滤液曰 圆院层析液曰 猿尧源院酶解液曰 缘院标准品遥
晕燥贼藻院员院孕藻则皂藻葬贼泽曰 圆院杂葬皂责造藻 燥枣 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠曰
猿尧源院匀赠凿则燥造赠泽葬贼藻曰 缘院酝葬则噪藻则援
图 源摇 杂阅杂鄄孕粤郧耘电泳图谱
云蚤早援 源摇 耘造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 杂责藻糟贼则怎皂 燥枣 杂阅杂鄄孕粤郧耘
的葡聚糖凝胶 杂藻责澡葬凿藻曾系列进行分离纯化遥 目前袁绝
圆远园圆
摇 员员 期 花椒籽蛋白降血压肽的分离纯化
大多数学者采用葡聚糖凝胶 郧鄄员缘 和 郧鄄圆缘 来对产品进
行纯化遥 辛志宏等咱圆圆暂 尧王茵咱圆猿暂采用 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄员缘 分
别对小麦胚芽蛋白水解物和紫菜酶解液进行分离纯
化袁得到了纯度较高的降血压肽遥 冯雅蓉等咱圆源暂 用
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 对羊骨胶原降血压肽粗品进行初步纯
化袁得到了峰 员 和峰 圆 两种纯度较高的多肽产品袁其
粤悦耘抑制率均达到 怨圆豫以上遥 刘军咱圆缘暂采用 杂藻责澡葬凿藻曾
郧鄄圆缘 对棉籽蛋白酶解物进行初步分离纯化袁得到 源 个
肽组分袁其中组分 睾 的 粤悦耘 抑制活性最高遥 本文以
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 对花椒籽蛋白酶解物进行分离纯化袁同
样得到了纯度和 粤悦耘抑制活性更高的组分袁说明采用
杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 达到了初步纯化的效果遥 但是袁本文未
将初步纯化的样品进行进一步的纯化袁如离子交换尧反
相高效液相等袁也没有对降血压肽活性组分的组成结
构尧分布进行分析检测以及评价对原发性高血压大鼠
的降压效果袁因此还需做深入的研究遥
源摇 结论
采用 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析分离花椒籽蛋白降
血压肽袁通过研究洗脱流速尧上样量和样品浓度对分离
效果的影响袁得出最佳分离条件为以超纯水为洗脱溶
液袁洗脱流速为 园郾 远 皂蕴窑皂蚤灶 原员袁上样量为 圆郾 园 皂蕴袁样品
浓度为 猿园 皂早窑皂蕴 原员袁每管收集 圆郾 园 皂蕴遥 在此条件下
可较好地分离得到 源 个组分遥 收集 源 个组分袁测定其
粤悦耘抑制活性的 陨悦缘园袁其中洗脱峰域的 粤悦耘 抑制活性
最高袁 陨悦缘园 为 园郾 园圆员 皂早窑皂蕴 原员袁并测定其分子量在猿 园园园 阅葬以下袁说明经过 杂藻责澡葬凿藻曾 郧鄄圆缘 凝胶层析达到
了初步纯化的效果袁为进一步分离纯化制得降血压肽
单体奠定了基础遥
参考文献院
咱 员 暂摇 薛小辉袁 蒲彪援 花椒风味成分研究与产品开发现状咱允暂 援 核农学
报袁 圆园员猿袁 圆苑渊员员冤院 员苑圆源 原 员苑圆愿
咱 圆 暂摇 寇明钰援 花椒籽蛋白质分离提取及功能性质的研究咱阅暂援 重庆院
西南大学袁 圆园园远
咱 猿 暂摇 杨令叶袁 田呈瑞袁 权麻玉援 大红袍花椒籽种仁蛋白的分类研究
咱允暂 援 中国油脂袁 圆园园愿袁 猿猿渊怨冤院 员远 原 员愿
咱 源 暂摇 张志清袁 宋燕袁 刘翔援 响应面法优化提取花椒籽蛋白质工艺研
究咱允暂 援 核农学报袁 圆园员猿袁 圆苑渊苑冤院 怨愿愿 原 怨怨缘
咱 缘 暂 摇 欧阳玉祝袁 石爱华袁 陈小东袁 余艳华袁 谢显华援 花椒油的超声提
取及其成分分析咱 允暂 援 食品与发酵工业袁 圆园园苑袁 猿猿渊猿冤院 员猿猿 原
员猿缘
咱 远 暂摇 李霞袁 刘尚军袁 李园园援 花椒籽油的微波萃取工艺研究咱 允暂 援 南
阳理工学院学报袁 圆园员园袁 圆渊源冤院 苑苑 原 愿园
咱 苑 暂 摇 刘春叶袁 张剑袁 苗延青袁 王丽援 花椒籽油的提取及 郧悦鄄酝杂 分析
咱允暂 援 安徽农业科学袁 圆园员圆袁 源园渊远冤院 猿缘怨源 原 猿缘怨远袁 猿缘怨怨
咱 愿 暂摇 宋燕援 花椒籽膳食纤维尧蛋白质的分离提取及抗氧化肽的制备
研究咱阅暂援 雅安院 四川农业大学袁 圆园员圆
咱 怨 暂摇 黄朝明袁 孔繁东袁 祖国仁袁 孙浩袁 季瑛袁 纪宁援 降血压肽分离的
研究现状与展望咱 允暂 援 食品研究与开发袁 圆园园远袁 圆苑 渊源冤院 员远员 原
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