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Separation and Purification of Seaweed Polysaccharides by Radial Flow Chromatography and Comparative Analysis of Antioxidant Activities in vitro

径向流色谱分离纯化海藻多糖及其抗氧化活性比较分析



全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊缘冤院园远猿缘 耀 园远源园允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园愿鄄园猿摇 接受日期院圆园员圆鄄员员鄄圆愿
基金项目院浙江省重大科技项目渊圆园员员悦员圆园源园冤
作者简介院邵平渊员怨愿园鄄冤袁男袁浙江龙游人袁博士袁副教授袁硕导袁主要从事食品资源工程化利用研究遥 栽藻造院园缘苑员鄄愿愿猿圆园员猿苑曰耘鄄皂葬蚤造院 责蚤灶早泽澡葬燥猿圆缘岳
扎躁怎贼援 藻凿怎援 糟灶
通讯作者院孙培龙渊员怨远源鄄冤男袁浙江龙游人袁博士袁教授袁博导袁主要从事食品化学利用研究遥 栽藻造院园缘苑员鄄愿愿猿圆园员猿苑曰耘鄄皂葬蚤造院 泽怎灶责造员怨远源岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园缘鄄园远猿缘鄄园远
径向流色谱分离纯化海藻多糖及其抗氧化活性比较分析
邵摇 平摇 陈摇 蒙摇 裴亚萍摇 孙培龙
渊浙江工业大学生物与环境工程学院袁浙江 杭州摇 猿员园园员源冤
摘摇 要院以裂片石莼尧亨氏马尾藻和海萝 猿 种海藻为原料袁采用超声波辅助提取尧分步醇沉得到 苑 种组分
粗多糖袁利用径向流色谱分离纯化粗多糖袁测定超氧阴离子尧羟基自由基和 粤月栽杂 猿 种自由基体系下其
抗氧化能力遥 结果表明院通过径向流处理袁多糖回收率和蛋白脱除率分别可达 怨苑郾 苑怨豫和 愿苑郾 猿圆豫 曰苑 种
海藻多糖组分均具有抗氧化活性袁均随多糖浓度的增加而增加袁马尾藻 远园豫醇沉组分渊杂匀孕远园冤抗氧化
活性最高袁在其 苑园滋早窑皂蕴 原员浓度时袁对超氧阴离子自由基和羟基自由基清除率分别为 苑源郾 猿源豫 和
苑员郾 愿源豫 曰同种海藻的中等分子量多糖组分的抗氧化活性较强遥
关键词院海藻多糖曰超声波辅助提取曰径向流色谱曰抗氧化活性
摇 摇 近年来袁随着我国海洋药物研究的加速发展和现
代分离技术的有效应用袁海藻的生物活性与药用价值
逐渐被研究与发现袁对其生物活性物质的研究日趋深
入袁其中以海藻多糖的活性最为突出袁具有广泛的应用
前景咱员暂 遥 多糖约占海藻干重的 圆园豫 耀 苑园豫 袁是海藻细
胞间和细胞内所含的各种高分子碳水化合物的总
称咱圆暂 遥 从海藻中提取的多糖多为天然硫酸酯化多糖袁
对海藻多糖进行的广泛研究表明其具有多种生物活
性袁包括抗凝血尧降血脂尧抗肿瘤尧抗病毒以及免疫调节
咱猿 原 缘暂 袁且毒副作用小袁是理想的药物来源袁因此袁越来越
受到研究人员的重视咱远暂 遥
径向流色谱法渊砸葬凿蚤葬造 云造燥憎 悦澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 砸云悦冤
是近十年发展起来的一种新型色谱分离技术袁采用径
向流动技术袁 流动相携带样品沿径向迁移 袁不同于传
统轴向色谱柱的流体在柱内从一端流向另一端遥 在径
向柱内 袁流动相和样品可以从色谱柱的周围流向柱心
袁也可以从柱心流向周围袁此独特的径向流动设计袁可
提高流速袁降低柱压袁便于线性放大袁在血液制品尧基因
工程产品尧生物药品和农产品等的分离纯化中已得到
广泛应用咱苑暂 遥 魏海龙等咱愿暂采用径向流色谱对茯苓菌
丝体多糖进行分离纯化袁多糖回收率达到 愿猿郾 圆远豫 袁比
传统轴向色谱分离及化学方法效率更高袁时间更短遥
林炳谊等咱怨暂将径向流色谱应用于灵芝多糖脱除蛋白
质的研究袁结果表明径向流色谱蛋白质脱除率及多糖
回收率比传统化学方法分别高出 猿愿郾 圆豫和 猿园郾 缘豫 遥
郭立安等咱员园暂比较了径向离子交换色谱与经典离子交
换色谱在纯化工艺放大过程中的分离效果袁证实了径
向色谱比经典色谱更合适合于促卵泡激素的纯化袁活
性回收率为 缘远豫 遥 由此可见袁径向流色谱在生物活性
物质的分离纯化方面效果显著遥
目前对海藻的研究还停留在营养成分分析和多糖
提取优化上袁对其多糖的分离纯化和抗氧化的研究还
较少遥 为了阐明海藻多糖的作用机制袁并对其进行进
一步的开发和利用袁本试验选取分别属绿藻门尧褐藻门
和红藻门的 猿 种海藻院裂片石莼渊哉造增葬 枣葬泽糟蚤葬贼葬冤尧亨氏
马尾藻 渊 杂葬则早葬泽泽怎皂 澡藻灶泽造燥怎蚤葬灶怎皂冤和海萝 渊 郧造燥蚤燥责藻造贼蚤泽
枣怎则糟葬贼葬冤袁经超声波辅助提取尧分步醇沉后袁得到不同分
子量组分的多糖遥 采用径向流色谱技术对海藻粗多糖
进行快速分离后袁对多糖的体外抗氧化活性进行了研
究袁并比较分析不同藻类尧不同分子量范围多糖之间的
抗氧化活性的差异袁以对其作用机理进行进一步探索遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 设备与仪器
云杂 原 员圆园园 型直插式超声波细胞破碎器渊上海生析
缘猿远
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
超声仪器有限公司冤曰悦砸圆员郧陨陨 型高速冷冻离心机渊日
本日立公司冤曰粤蕴孕匀粤 圆 原 源蕴阅 孕蕴哉杂 型真空冷冻干燥
机渊德国 酝葬则蚤灶 悦澡则蚤泽贼 公司冤曰砸耘 原 圆园园园粤 型旋转蒸发
器渊上海亚荣生化仪器厂冤曰苑缘圆 型紫外可见分光光度
计渊上海光学仪器有限公司冤曰径向流色谱柱渊 杂哉孕耘
砸云蕴园 原圆缘园 悦韵蕴哉酝晕袁 美国 杂藻责则葬早藻灶 公司冤遥
员郾 圆摇 材料与试剂
裂片石莼尧亨氏马尾藻尧海萝院采自浙江温州平阳
县南麓列岛袁经过自来水反复冲洗除去杂质和盐分袁阴
干袁于 远园益烘干保存备用遥
试剂院怨缘豫乙醇渊工业级冤曰苯酚尧浓硫酸尧葡萄糖尧
栽则蚤泽渊三羟甲基氨基甲烷冤尧浓盐酸尧焦性没食子酸尧磷
酸尧考马斯亮蓝 郧 原 圆缘园尧牛血清血蛋白尧氯化钠尧无水
乙醇尧粤月栽杂 二胺盐尧过硫酸钾尧水杨酸尧硫酸亚铁尧匀圆
韵圆均为分析纯曰离子交换剂院弱碱性阴离子交换剂渊粤员园猿杂冤购于德清漂莱特渊中国冤有限公司遥
图 员摇 径向流色谱结构图
云蚤早郾 员摇 栽澡藻 泽糟澡藻皂藻 燥枣 砸云悦
员 代表恒流泵袁圆 代表径向色谱柱袁猿 代表自动部分收集器袁代表样品流动的方向
员 皂藻葬灶泽 糟燥灶泽贼葬灶贼 枣造燥憎 责怎皂责袁 圆 皂藻葬灶泽 则葬凿蚤葬造 枣造燥憎 糟澡则燥皂葬贼燥早则葬责澡赠 糟燥造怎皂灶袁 猿 皂藻葬灶泽 葬怎贼燥 责葬则贼泽 糟燥造造藻糟贼燥则袁皂藻葬灶泽 贼澡藻 枣造燥憎 凿蚤则藻糟贼蚤燥灶 燥枣 泽葬皂责造藻
员郾 猿摇 试验方法
员郾 猿郾 员摇 海藻多糖的水提醇沉摇 取适量裂片石莼尧亨氏
马尾藻和海萝袁用清水进行漂洗袁自然阴干袁置于烘箱
内低温烘干袁用粉碎机粉碎袁过 员园园 目筛遥 分别称取 猿
种海藻样品 猿园早袁以料液比 员 颐 远园 加入 员愿园园皂蕴尧责匀 值
苑郾 园 的蒸馏水袁以超声功率 源愿园 憎尧占空比 员颐 员进行超声
波辅助提取 猿园皂蚤灶遥 超声完成后冷却静置 员澡袁然后以
转速 员园园园园 则窑皂蚤灶 原员尧温度 源益离心 员园皂蚤灶袁得上清液和
沉淀遥 取离心后所得上清液袁旋转蒸发浓缩至体积约
为原体积的 员 辕 员园袁加入 怨缘豫的乙醇溶液使样品最终乙
醇浓度为 猿园豫 袁放置过夜袁员园园园 则窑皂蚤灶 原员袁源益 离心
员园皂蚤灶袁所得沉淀即为该乙醇浓度下所得海藻粗多糖遥
上清液逐步加 怨缘豫的乙醇溶液袁使其最终乙醇浓度达
到 远园豫 袁离心分离袁上清液继续加入 怨缘豫的乙醇至最
终乙醇浓度为 愿园豫 袁溶液冷冻干燥袁即得到 猿园豫 尧
远园豫 尧愿园豫醇沉浓度下的粗多糖样品遥
员郾 猿郾 圆摇 径向流色谱技术分离纯化海藻多糖摇 样品配
制院称取冻干后的粗多糖样品用适量的蒸馏水溶解袁配
成 员园 皂早窑皂蕴 原员的溶液袁员园园园园 则窑皂蚤灶 原员袁源益离心 员缘皂蚤灶
后袁取上清液过 园郾 源缘滋皂 微孔滤膜袁保存备用遥 上样院
手动上样 缘园皂蕴袁上样流速为 缘皂蕴窑皂蚤灶 原员遥 洗脱院用蒸
馏水以 源园皂蕴窑皂蚤灶 原员的流速对样品进行洗脱遥 收集院采
用自动部分收集器进行收集袁直至流出液不再发生苯
酚 原硫酸法显色反应袁证明多糖已全部接收完毕袁所得
流出液浓缩后袁冷冻干燥备用遥 填料再生院用 圆皂燥造窑
蕴 原员的 晕葬悦造 水溶液对径向柱进行再生袁流速为 源园皂蕴窑
皂蚤灶 原员袁洗脱约 猿 个柱体积后换用蒸馏水洗脱袁直至无
晕葬悦造检出遥 径向流色谱结构图如图 员 所示遥
员郾 猿郾 猿摇 海藻多糖抗氧化性测定方法摇 海藻多糖对超
氧阴离子渊韵圆 原 冤 咱员猿暂 尧羟基自由基渊窑韵匀冤咱员源暂和 粤月栽杂自
由基的清除作用咱员缘暂 遥
员郾 源摇 测定和计算方法
员郾 源郾 员摇 总糖含量的测定摇 苯酚 原硫酸法咱员员暂 袁所得糖
浓度与吸光度的回归方程为 赠 越 员员郾 怨源缘曾 垣 园郾 园缘员缘遥
每组实验重复 猿 次袁结果取平均值遥
员郾 源郾 圆摇 蛋白质含量的测定摇 考马斯亮蓝法渊月则葬凿枣燥则凿
法冤 咱员圆暂 袁所得蛋白质浓度与吸光度的回归方程为 赠 越
缘郾 愿苑怨愿曾 垣 园郾 园员园愿遥 每组实验重复 猿 次袁结果取平均
值遥
员郾 源郾 猿摇 多糖得率的计算摇 多糖得率 越 皂员皂圆 伊 员园园豫 摇
式中 皂员 和皂圆 分别表示海藻粗多糖的质量和海藻原料
的质量遥 每组实验重复 猿 次袁结果取平均值遥
员郾 源郾 源摇 蛋白质脱除率 摇 蛋白质脱除率 越 曾园 原 曾员曾园 伊
员园园豫 式中 曾园和 曾员分别表示粗多糖液和过径向柱后多
远猿远
摇 缘 期 径向流色谱分离纯化海藻多糖及其抗氧化活性比较分析
糖液中蛋白质含量遥 每组实验重复 猿 次袁结果取平均
值遥
员郾 源郾 缘摇 多糖回收率摇 多糖回收率 越 赠员赠园 伊 员园园豫 摇 式
中 赠园 和 赠员 分别表示粗多糖液和过径向柱后多糖液中
多糖含量遥 每组实验重复 猿 次袁结果取平均值遥
员郾 源郾 远摇 自由基清除率摇 清除率豫 越 粤园 原 渊粤蚤 原 粤躁冤粤园 伊员园园豫 摇 式中 粤园尧粤蚤尧粤躁分别代表对照尧样品及样品对照
的吸光度遥 每组实验重复 猿 次袁结果取平均值遥
表 圆摇 不同多糖组分的蛋白质脱除率和多糖回收率
栽葬遭造藻 圆摇 栽澡藻 凿藻责则燥贼藻蚤灶蚤扎葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 葬灶凿 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 则藻糟燥增藻则赠 则葬贼藻 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽
哉云孕猿园 哉云孕远园 哉云孕愿园 杂匀孕猿园 杂匀孕远园 杂匀孕愿园 郧云孕愿园
蛋白质脱除率
阅藻责则燥贼藻蚤灶蚤扎葬贼蚤燥灶 则葬贼藻渊豫 冤 愿苑郾 猿圆 圆苑郾 愿源 缘缘郾 缘远 缘缘郾 园愿 怨圆郾 愿远 怨圆郾 怨远 远源郾 愿怨
多糖回收率
孕燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 则藻糟燥增藻则赠 则葬贼藻渊豫 冤 苑愿郾 怨猿 怨远郾 苑源 怨缘郾 缘远 怨圆郾 园远 怨苑郾 苑怨 怨远郾 猿怨 愿猿郾 员愿
圆摇 结果与讨论
圆郾 员摇 海藻多糖的提取及分步醇沉
采用超声波辅助提取尧乙醇分步醇沉所得粗多糖
的得率见表 员遥 分别记 猿园豫 尧远园豫 尧愿园豫乙醇醇沉所得
裂片石莼多糖为 哉云孕猿园尧哉云孕远园尧哉云孕愿园曰亨氏马尾藻多
糖为 杂匀孕猿园尧 杂匀孕远园尧 杂匀孕愿园曰 海萝多糖为 郧云孕猿园尧
郧云孕远园尧郧云孕愿园遥 由表 员 可知袁 郧云孕 总得率最大袁为
员猿郾 苑愿豫 袁哉云孕总得率次之为 愿郾 缘缘豫 袁而 杂匀孕总得率最
少为 源郾 圆远豫 遥 采用不同的乙醇浓度醇沉可得到分子
量大小不同的多糖组分袁分子量大小与乙醇浓度负相
关咱员远暂 遥 石莼多糖组分中袁哉云孕远园 跃 哉云孕猿园 跃 哉云孕愿园袁说
表 员摇 不同醇沉浓度下的海藻粗多糖得率
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 赠蚤藻造凿 燥枣 泽藻葬 葬造早葬藻 糟则怎凿藻 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻
遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 藻贼澡葬灶燥造 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶
粗多糖得率
栽澡藻 赠蚤藻造凿 燥枣 糟则怎凿藻
责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻渊豫 冤
哉云孕 杂匀孕 郧云孕
猿园豫醇沉 员郾 员圆 员郾 圆苑 要
远园豫醇沉 远郾 远园 员郾 圆缘 要
愿园豫醇沉 园郾 愿猿 员郾 苑源 员猿郾 苑愿
总得率 愿郾 缘缘 源郾 圆远 员猿郾 苑愿
摇 摇 注院野要冶为微量的含义袁可忽略不计
晕燥贼藻院野要冶皂藻葬灶泽 贼澡藻 赠蚤藻造凿 蚤泽 皂蚤糟则燥袁 糟葬灶 遭藻 灶藻早造藻糟贼藻凿
明中等分子量多糖占主导曰马尾藻多糖组分中袁猿 种不
同分子量多糖组分分布比较均匀曰海萝中袁猿园豫 尧远园豫
乙醇浓度下所得的多糖组分很少袁可忽略不计袁愿园豫醇
沉获得多糖组分占绝对优势袁说明海萝中分子量相对
较小的多糖占主导遥
圆郾 圆摇 径向流色谱技术分离纯化海藻多糖
采用径向流色谱技术对海藻多糖进行分离纯化袁
所需纯化时间短袁流速高袁可做到快速高效分离遥 由表
圆 可以看出袁蛋白质脱除率和多糖回收率均达到很高
的水平袁大部分多糖样品的蛋白质脱除率可达到 缘园豫
以上袁其中 杂匀孕愿园 最高袁可达到 怨圆郾 怨远豫 遥 多糖回收率
基本可达到 怨园豫 袁其中 杂匀孕远园 最高袁达到 怨苑郾 苑怨豫 遥
图 圆 和图 猿 所示为应用径向流色谱技术分离纯化海藻
多糖前后蛋白质和多糖含量的变化袁可直观看到每个
多糖样品在经径向流色谱后蛋白质都有一定的脱除袁
剩余的蛋白质可能是与糖结合在一起的糖蛋白袁多糖
在径向流色谱前后的损失也很小袁这两点都为纯化海
藻多糖的抗氧化奠定了基础遥
圆郾 猿摇 海藻多糖的抗氧化性研究
圆郾 猿郾 员摇 对超氧阴离子自由基渊韵圆 原 冤的清除作用 摇 图源 为不同多糖组分在不同浓度下对超氧阴离子自由基
渊韵圆 原 冤的清除作用遥 总体来说袁不同多糖组分都显示
图 圆摇 径向流前后蛋白质含量变化
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 糟澡葬灶早藻 燥枣 责则燥贼藻蚤灶 糟燥灶贼藻灶贼 遭藻枣燥则藻 葬灶凿 葬枣贼藻则 砸云悦
苑猿远
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
图 猿摇 径向流前后多糖含量变化
云蚤早援 猿 栽澡藻 糟澡葬灶早藻 燥枣 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 糟燥灶贼藻灶贼
遭藻枣燥则藻 葬灶凿 葬枣贼藻则 砸云悦
出一定的清除能力袁多糖浓度在 猿园 耀 苑园滋早窑皂蕴 原员范围
内袁对超氧阴离子自由基的清除率有较好的量效关系袁
且随着浓度的增加清除率也逐渐增大袁当浓度为 苑园滋早
窑皂蕴 原员时达到最大值遥 苑 种不同组分的多糖中袁杂匀孕远园
组分的清除率最高袁 苑园滋早窑皂蕴 原员 时达到 苑源郾 猿源豫 袁
杂匀孕猿园 组分的清除率最低为 源圆郾 缘园豫 遥 对三种不同种
类海藻来说袁对超氧阴离子自由基的清除力强弱顺序
是马尾藻 跃裂片石莼 跃海萝遥 同一种海藻中袁裂片石
莼对超氧阴离子自由基的清除力强弱顺序 哉云孕远园 跃
哉云孕愿园 跃 哉云孕猿园曰马尾藻为 杂匀孕远园 跃 杂匀孕愿园 跃 杂匀孕猿园袁可
见中等分子量多糖对超氧阴离子自由基的清除作用最
好袁小分子量多糖次之袁而大分子量多糖相对较差遥
圆郾 猿郾 圆摇 对羟基自由基渊窑韵匀冤的清除作用摇 图 缘 为不
同多糖组分在不同浓度下对羟基自由基渊窑韵匀冤的清
除作用遥 苑 种不同多糖组分对羟基自由基均有一定的
清除作用袁且效果较明显遥 多糖浓度在 员园 耀 源园滋早窑
皂蕴 原员范围内袁对羟基自由基的清除率有较好的量效关
系袁且随着浓度的增加清除率也逐渐增大袁但浓度达到
源园滋早窑皂蕴 原员时袁增加幅度变缓袁浓度为 苑园滋早窑皂蕴 原员时达
到最大遥 苑 种不同组分的多糖中袁杂匀孕远园 组分的清除
率最高袁苑园滋早窑皂蕴 原员时达到最大为 苑员郾 愿源豫 袁杂匀孕愿园 次
之为 远缘郾 愿园豫 袁哉云孕猿园 组分的清除率最低为 缘愿郾 园猿豫 遥
对 猿 种不同种类海藻来说袁对羟基自由基的清除力强
弱顺序是马尾藻 跃海萝 跃裂片石莼遥 同一种海藻中袁
裂片石莼对羟基自由基的清除力强弱顺序 哉云孕远园 跃
哉云孕愿园 跃 哉云孕猿园曰马尾藻是 杂匀孕远园 跃 杂匀孕愿园抑杂匀孕猿园袁可
见中等分子量多糖对羟基自由基的清除作用最好袁小
分子量多糖次之袁而大分子量多糖相对较差遥 与超氧
图 源摇 不同多糖组分对超氧阴离子
自由基的清除作用
云蚤早援 源摇 杂糟葬灶增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻
糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 燥灶 韵圆 原 则葬凿蚤糟葬造
图 缘摇 不同多糖组分对羟基自由基的清除作用
云蚤早援 缘摇 杂糟葬灶增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼
责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 燥灶窑韵匀 则葬凿蚤糟葬造
摇 摇
自由基体系相比袁各多糖组分清除羟基自由基的效果
相对较好袁杂匀孕远园 在清除超氧阴离子自由基和羟基自
由基时袁都表现出相对较好的清除效果遥
圆郾 猿郾 猿摇 对 粤月栽杂 自由基的清除作用 摇 图 远 为不同多
糖组分在不同浓度下对 粤月栽杂 自由基的清除作用遥 从
图 远 中可以明显看出 哉云孕猿园 清除 粤月栽杂自由基的作用
显著高于其他多糖组分袁且在所选的多糖浓度范围内袁
清除率与多糖浓度呈量效关系袁其最大清除率为
苑怨郾 员源豫 遥 哉云孕愿园 和 杂匀孕愿园 在最大浓度时的清除率分
别为 圆缘郾 缘源豫和 圆圆郾 园远豫 袁其他多糖组分的清除效果并
不明显袁清除率都在 员园豫以下遥
愿猿远
摇 缘 期 径向流色谱分离纯化海藻多糖及其抗氧化活性比较分析
图 远摇 不同多糖组分对 粤月栽杂自由基的清除作用
云蚤早援 远摇 杂糟葬灶增藻灶早蚤灶早 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼
责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻 糟燥皂责燥灶藻灶贼泽 燥灶 粤月栽杂 则葬凿蚤糟葬造
猿摇 讨论
前期的试验结果显示袁采用不同浓度的乙醇沉淀
可获得分子量不同的多糖组分袁且分子量的大小与乙
醇浓度呈负相关袁本试验采用浓度分别为 猿园豫 尧远园豫 尧
愿园豫的乙醇把多糖分成分子量大小不同的组分袁液相
图谱表明渊由于液相图谱较多袁在本文中没有一一列
出冤猿园豫醇沉得到的多糖分子量最大袁远园豫醇沉多糖
次之袁愿园豫醇沉多糖最小袁这与郑必胜等咱员远暂在广州虫
草多糖的醇沉及凝胶渗透色谱法表征其分子量分布的
研究结果一致遥
本文采用径向流色谱对 苑 种组分海藻多糖进行分
离纯化袁多糖回收率最高可达 怨苑郾 苑怨豫 袁比魏海龙等咱愿暂
在茯苓菌丝体多糖径向流色谱分离参数优化的研究中
茯苓菌丝体的多糖回收率高出 员苑郾 缘豫 遥 由此可见袁径
向流色谱在海藻多糖的分离纯化方面效果显著袁有着
广阔的应用前景遥
研究发现 杂匀孕远园 组分对超氧阴离子自由基和羟
基自由基清除率作用较强袁由表 圆 可以看出 杂匀孕远园 组
分的多糖回收率和蛋白脱除率都很高袁这说明海藻多
糖的抗氧化活性不仅与分子量有关袁还可能与多糖的
纯度有关袁还需要进一步的研究遥
源摇 结论
利用超声波辅助提取乙醇分步醇沉可将海藻多糖
分为 苑 个不同的多糖组分袁多糖得率因海藻的不同而
不同袁哉云孕远园 组分得率最高袁亨氏马尾藻各组分得率相
差不大袁海萝 郧匀孕猿园尧郧匀孕远园 组分得率很低可忽略不
计袁而 郧匀孕愿园 组分最高遥
采用径向流色谱技术对粗多糖进行分离纯化袁结
果表明径向流色谱是一种有效的分离纯化技术袁蛋白
质脱除率和多糖回收率均可达到很高的水平袁杂匀孕愿园
的蛋白脱除率最高可达到 怨圆郾 怨远豫 曰杂匀孕远园 的多糖回
收率最高可达到 怨苑郾 苑怨豫 遥
苑 种海藻多糖组分对超氧阴离子自由基尧羟基自
由基和 粤月栽杂自由基均有一定的清除作用袁并且清除
率随着多糖浓度的增加而增加袁只是增加的幅度不同遥
在超氧阴离子自由基尧羟基自由基体系中袁杂匀孕远园 多糖
组分的清除率都是最大的袁且 猿 种海藻多糖清除率大
小顺序都是 远园 组分 跃 愿园 组分 跃 猿园 组分遥 哉云孕猿园 对
粤月栽杂自由基的清除作用明显高于其他多糖组分遥
参考文献院
咱 员 暂摇 孟春袁 郭养浩袁 石贤爱援 海藻多糖生物活性及分子修饰咱 允暂 援 中
国生物工程杂志袁 圆园园源袁 圆源渊猿冤院 猿缘 原 猿怨
咱 圆 暂摇 砸燥遭藻则贼 粤 运袁 蕴葬则则赠 蕴援 月葬则贼燥灶援 酝蚤糟则燥葬造早葬藻 葬泽 枣燥燥凿 葬灶凿 泽怎责责造藻皂藻灶贼
咱允暂 援 悦则蚤贼蚤糟葬造 砸藻增蚤藻憎泽 蚤灶 云燥燥凿 杂糟蚤藻灶糟藻 葬灶凿 晕怎贼则蚤贼蚤燥灶袁 员怨怨员袁 猿园
渊远冤院 缘缘缘 原 缘苑猿
咱 猿 暂摇 匝蚤 匀 酝袁 在澡葬燥 栽 栽 袁 在澡葬灶早 匝 月援 粤灶贼蚤燥曾蚤凿葬灶贼 葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼
皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 泽怎造枣葬贼藻凿 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻泽 枣则燥皂 哉造增葬 责藻则贼怎泽葬 运躁藻造造皂
渊悦澡造燥则燥责澡赠贼葬冤咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 粤责责造蚤藻凿 孕澡赠糟燥造燥早赠袁 圆园园缘袁 员苑院 缘圆苑
原 缘猿源
咱 源 暂摇 耘则皂葬噪燥增葬 杂袁 杂燥噪燥造燥增葬 砸袁 运蚤皂 杂 酝援 云怎糟燥蚤凿葬灶泽 枣则燥皂 遭则燥憎灶 泽藻葬憎藻藻凿泽
杂葬则早葬泽泽怎皂 澡燥则灶藻则赠袁 耘糟造燥灶蚤葬 糟葬增葬袁 悦燥泽贼葬则蚤葬 糟燥泽贼葬贼葬院 泽贼则怎糟贼怎则葬造
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 葬灶凿 葬灶贼蚤糟葬灶糟藻则 葬糟贼蚤增蚤贼赠咱允暂 援 粤责责造蚤藻凿 月蚤燥糟澡藻皂蚤泽贼则赠 葬灶凿
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