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Research on the Factors Influencing Regeneration of Plantlets From Resistant Calli of Transgenic Maize

转基因玉米抗性愈伤再生植株的影响因素研究


再生植株的培养是玉米转基因重要环节之一.本文比较了基本培养基、愈伤组织大小、继代次数、激素添加物对转基因抗性愈伤组织分化和再生植株的影响.结果表明:以N6为基本培养基有利于抗性愈伤组织分化;抗性愈伤组织大小在2.5~3.5mm之间、继代2~3次的分化率最高;再生培养基中添加ABT 0.5 mg·L-1和S3307 0.25 mg·L-1能促进生根壮苗.本研究为转基因玉米再生体系建立提供了依据.


全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊源冤院园远猿苑 耀 园远源圆允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园猿鄄园源摇 接受日期院圆园员源鄄员圆鄄圆员
基金项目院国家转基因生物新品种培育科技重大专项项目 渊圆园园怨在载园愿园园猿园员圆月袁圆园员猿在载园愿园园猿鄄园园源冤袁四川省教育厅高校科研创新团队项目
渊员源栽阅园园圆缘冤袁四川省科技厅基础研究项目渊圆园员缘允再园圆源圆冤袁四川省教育厅重点项目渊员猿在粤园园园苑袁员源在粤园圆缘园冤袁内江师范学院自然科学重
点项目渊员猿在粤园员冤袁内江师范学院博士科研基金渊员猿月园猿冤
作者简介院张志勇袁男袁副研究员袁研究方向为植物分子生物学遥 耘鄄皂葬蚤造院 扎澡葬灶早扎赠燥灶早圆员怨岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院付凤玲袁女袁教授袁研究方向为玉米遗传育种与生物技术研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 枣枣造岳 泽蚤糟葬怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园源鄄园远猿苑鄄园远
转基因玉米抗性愈伤再生植株的影响因素研究
张志勇员袁圆 摇 李晚忱圆 摇 付凤玲圆
渊员 内江师范学院生命科学学院 辕四川省高等学校特色农业资源研究与利用重点实验室袁
四川 内江摇 远源员员园园曰圆 四川农业大学玉米研究所袁 四川 成都摇 远员员员猿园冤
摘摇 要院再生植株的培养是玉米转基因重要环节之一遥 本文比较了基本培养基尧愈伤组织大小尧继代次
数尧激素添加物对转基因抗性愈伤组织分化和再生植株的影响遥 结果表明院以 晕远 为基本培养基有利于
抗性愈伤组织分化曰抗性愈伤组织大小在 圆郾 缘 耀 猿郾 缘皂皂之间尧继代 圆 耀 猿 次的分化率最高曰再生培养基中
添加 粤月栽 园郾 缘 皂早窑蕴 原员和 杂猿猿园苑 园郾 圆缘 皂早窑蕴 原员能促进生根壮苗遥 本研究为转基因玉米再生体系建立提供
了依据遥
关键词院玉米曰转基因曰农杆菌曰培养基曰再生植株
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园源援 园远猿苑
摇 摇 胚性愈伤组织是目前玉米遗传转化中最常用的受
体系统咱员暂 遥 胚性愈伤组织转化后再生植株是遗传转
化的关键环节之一遥 玉米胚性愈伤组织诱导及再生植
株受到基因型的限制袁多年来只限于少数几个自交系
及其衍生系袁而且这些自交系在生产上的直接利用价
值不高袁影响了转化材料在育种中的应用进程咱圆暂 遥 因
此袁研究生产上常用的一些优良自交系再生植株影响
因素袁对于转化材料在育种中的应用更具现实意义遥
近年来袁以幼胚咱猿 原 远暂 尧幼嫩叶段咱远暂 尧成熟胚咱苑暂 尧胚
叶咱愿暂 尧茎尖咱怨暂等组织为材料诱导愈伤组织并获得再生
植株已有相关报道袁通过比较基因型尧基本培养基尧激
素添加物等对玉米愈伤诱导和再生植株的影响袁认为
基因型是重要的影响因素咱猿袁 缘 原 远暂 袁激素添加物的种类
和浓度也对愈伤诱导及分化成苗有重要影响咱猿袁 愿 原 员园暂 遥
但这些研究是以未经农杆菌侵染的愈伤组织进行分化
和再生植株袁由于基因型限制袁导致不同品种的再生体
系不具备广适性遥 尤其当玉米胚性愈伤组织经过农杆
菌侵染后共培养尧加上抗生素筛选袁新长出的抗性愈伤
组织分化和植株再生相对未转基因的胚性愈伤组织直
接分化更加困难遥 白云凤等咱员员暂研究发现袁即使直接以
幼胚为受体袁经农杆菌侵染后长出的抗性愈伤其分化
再生植株能力下降遥 愈伤分化和生根壮苗不理想袁将
直接影响再生植株成活率袁给转基因玉米的下游工作
造成困难遥 因此袁对转基因的玉米再生体系进行研究袁
建立高效的转基因再生植株体系非常必要遥 本研究着
重探讨对经过农杆菌侵染后的抗性愈伤组织分化和生
根壮苗的影响因素袁与前人未转基因再生体系研究结
果互为补充袁 建立一个稳定性好的转基因玉米抗性愈
伤组织再生植株体系遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
玉米胚性愈伤组织由四川农业大学玉米研究所培
育的优良玉米自交系 员愿 原 缘怨怨 红尧员愿 原 缘怨怨 白的未成
熟胚诱导而来袁经过农杆菌 耘匀粤员园缘 侵染和潮霉素梯
度筛选渊选择培养基中分别含 缘尧愿尧员园皂早窑蕴 原员潮霉素冤
后重新长出抗性愈伤组织遥 将抗性愈伤组织继代培养
圆 耀 源 次袁进而分化和再生植株遥 杂蚤早皂葬 干粉培养基购
自 杂蚤早皂葬公司渊美国冤遥
苑猿远
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
员郾 圆摇 培养基
基本培养基 陨院晕远 垣 蕴 原脯氨酸 园郾 远怨 早窑蕴 原员 垣肌醇
园郾 员圆 早窑蕴 原员 垣酸水解酪蛋白 园郾 员 早窑蕴 原员遥
基本培养基 陨陨院杂蚤早皂葬干粉培养基遥
分化培养基 陨院基本培养基 陨 垣 远 原 月粤 园郾 缘 皂早窑蕴 原员
垣蔗糖 猿园 早窑蕴 原员 垣琼脂 苑 早窑蕴 原员袁责匀值 缘郾 愿遥
分化培养基 陨陨院基本培养基 陨 垣 运栽 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 垣
蔗糖 猿园 早窑蕴 原员 垣琼脂 苑 早窑蕴 原员袁责匀 值 缘郾 愿遥
分化培养基 陨陨陨院基本培养基 陨陨 垣 远 原 月粤 园郾 缘
皂早窑蕴 原员 垣 蔗糖 猿园 早窑蕴 原员 垣 琼脂 苑 早窑蕴 原员袁责匀 值 缘郾 愿遥
分化培养基 陨灾院基本培养基 陨陨 垣 运栽 园郾 缘 皂早窑蕴 原员
垣 蔗糖 猿园 早窑蕴 原员 垣 琼脂 苑 早窑蕴 原员袁责匀值 缘郾 愿遥
再生培养基 陨院酝杂 垣肌醇 园郾 园缘 早窑蕴 原员 垣酸水解酪
蛋白 园郾 园猿 早窑蕴 原员 垣蔗糖 圆园 早窑蕴 原员 垣琼脂 苑 早窑蕴 原员袁责匀
值 缘郾 愿遥
再生培养基 陨陨院酝杂 垣肌醇 园郾 园缘 早窑蕴 原员 垣酸水解酪
蛋白 园郾 园猿 早窑蕴 原员 垣 粤月栽 园郾 缘皂早窑蕴 原员 垣 杂猿猿园苑 园郾 圆缘
皂早窑蕴 原员 垣蔗糖 圆园 早窑蕴 原员 垣琼脂 苑 早窑蕴 原员袁责匀 值 缘郾 愿遥
再生培养基 陨陨陨院 杂蚤早皂葬 干粉培养基 垣 蔗糖 圆园
早窑蕴 原员 垣琼脂 苑 早窑蕴 原员袁责匀 值 缘郾 愿遥
再生培养基 陨灾院 杂蚤早皂葬 干粉培养基 垣 粤月栽 园郾 缘
皂早窑蕴 原员 垣 杂猿猿园苑 园郾 圆缘 皂早窑蕴 原员 垣蔗糖 圆园 早窑蕴 原员 垣琼脂
苑 早窑蕴 原员袁责匀值 缘郾 愿遥
员郾 猿摇 抗性愈伤组织分化成苗
首先将经过农杆菌共培养和潮霉素梯度筛选后的
抗性愈伤组织转移到继代培养基渊晕远 垣 蕴 原 脯氨酸
园郾 远怨 早窑蕴 原员 垣 肌醇 园郾 员圆 早窑蕴 原员 垣 酸水解酪蛋白 园郾 员
早窑蕴 原员 垣 圆袁源 原 阅 员郾 园 皂早窑蕴 原员 冤上袁圆缘益暗培养袁继代 圆
耀 源 次袁每次 员缘 耀 圆园 凿袁扩繁抗性愈伤组织遥
分化培养基以改良 晕远 和 杂蚤早皂葬 干粉为基本培养
基袁每种基本培养基的激素添加物分别为 园郾 缘 皂早窑蕴 原员
远 原 月粤和 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 运栽遥 每种培养基分别接种 员愿鄄
缘怨怨 红尧员愿鄄缘怨怨 白胚性愈伤组织 员园园 块袁重复 猿 次袁圆缘
耀 圆愿益下 圆 园园园 蕴曾 光照 员圆 澡窑凿 原员遥 愈伤组织逐渐变
绿袁并分化出叶片和少量根袁成为再生小苗遥 当再生小
苗长至 员郾 缘 耀 圆 糟皂 时袁移栽至再生培养基中袁对再生植
株生根壮苗遥
员郾 源摇 再生植株生根壮苗
再生培养基分别以 酝杂 和 杂蚤早皂葬 干粉为基本培养
基袁将分化出的玉米幼苗转移至再生培养基 陨尧陨陨尧陨陨陨和
陨灾培养袁圆缘 耀 圆愿益下 圆 园园园 蕴曾光照 员远 澡窑凿 原员遥 每次培
养 圆园 凿 后将再生植株移至新的再生培养基中袁圆缘 耀
圆愿益下 圆 园园园 蕴曾光照 员远 澡窑凿 原员遥 待再生植株高度达到
缘 糟皂左右袁长出几条新生根尧具有 圆 耀 猿 片新叶时将培
养瓶开盖袁加少量无菌水覆盖培养基表面袁防止霉菌污
染袁炼苗 圆 耀 猿 凿遥 之后将再生植株从培养瓶转移到营
养钵中培养袁圆缘 耀 圆愿益下 猿 园园园 蕴曾 光照 员远 澡窑凿 原员袁以
员 辕 圆 酝杂液体培养基进行浇灌袁员园 凿后提高光照强度至
缘 园园园 蕴曾袁使再生植株充分生长遥 成活的再生植株移
栽至大田遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 培养基对愈伤组织分化的影响
胚性愈伤组织分别转移到分化培养基 陨尧陨陨尧陨陨陨 和
陨灾上袁光照培养 员 周内胚性愈伤组织表面开始变绿袁
圆园 凿 左右分化出绿色小苗袁统计 源园 凿 的总分化苗数遥
结果显示袁分化培养基 陨 和 陨陨 培养的抗性愈伤组织分
化率分别达到 苑缘豫和 远怨郾 缘豫 曰而分化培养基 陨陨陨 和 陨灾
的分化率仅为 缘园豫和 源远郾 缘豫 渊表 员冤遥 利用杂孕杂杂 员愿郾 园
进行方差显著性检验结果表明袁分化培养基 陨 和 陨陨 抗
性愈伤组织分化率与分化培养基 陨陨陨和 陨灾的分化率差
异显著遥 对于同一种基本培养基袁添加 园郾 缘 皂早窑蕴 原员
远鄄月粤和 园郾 缘 皂早窑蕴 原员运栽 对愈伤分化没有显著性差异遥
表明以 晕远 为基本培养基比 杂蚤早皂葬 通用型培养基的愈
伤组织分化效率更高遥
表 员摇 培养基对抗性愈伤组织分化率的影响
栽葬遭造藻 员摇 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 糟怎造贼怎则藻 遭葬泽藻 燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 糟葬造造蚤
分化培养基
悦怎造贼怎则藻 皂藻凿蚤怎皂
员愿 原 缘怨怨 红分化幼苗数
晕燥援 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
责造葬灶贼造藻贼泽 燥枣 耶员愿 原 缘怨怨爷 砸藻凿
员愿 原 缘怨怨 白分化幼苗数
晕燥援 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
责造葬灶贼造藻贼泽 燥枣 耶员愿 原 缘怨怨爷 宰澡蚤贼藻
平均分化率
阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 辕 豫
玉 苑猿 苑苑 苑缘郾 园 葬粤
域 远苑 苑圆 远怨郾 缘 葬粤
芋 缘园 缘园 缘园郾 园 遭月
郁 源缘 源愿 源远郾 缘 遭月
摇 摇 注院表中注释后带有不同小写 辕大写字母表示在 园郾 园缘 辕 园郾 园员 水平差异显著遥 下同遥
晕燥贼藻院 栽澡藻 凿葬贼葬 枣燥造造燥憎藻凿 遭赠 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 泽皂葬造造 葬灶凿 糟葬责蚤贼葬造 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 葬灶凿 园郾 园员 造藻增藻造泽袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早援
愿猿远
摇 源 期 转基因玉米抗性愈伤再生植株的影响因素研究
圆郾 圆摇 抗性愈伤组织大小对分化的影响
本试验比较了 猿 种不同大小的抗性愈伤组织对分
化率的影响渊图 员冤遥 图 员 分别是 员愿 原 缘怨怨 红尧员愿 原 缘怨怨
白抗性愈伤组织大小为 员郾 园 耀 圆郾 园 皂皂尧圆郾 缘 耀 猿郾 缘 皂皂
以及 跃源郾 园 皂皂时的幼苗分化率遥
图 员摇 抗性愈伤组织大小对分化率的影响
云蚤早援 员摇 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 贼澡藻 泽蚤扎藻 燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
则葬贼藻 燥枣 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 糟葬造造蚤
表 圆摇 继代次数对抗性愈伤组织分化率的影响
栽葬遭造藻 圆摇 栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 贼澡藻 泽怎遭糟怎造贼怎则藻 贼蚤皂藻泽 燥灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 燥枣 则藻泽蚤泽贼葬灶贼 糟葬造造蚤
继代次数
杂怎遭糟怎造贼怎则藻 贼蚤皂藻泽
员愿 原 缘怨怨 红分化幼苗数
晕燥援 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
责造葬灶贼造藻贼泽 燥枣 耶员愿 原 缘怨怨爷 砸藻凿
员愿 原 缘怨怨 白分化幼苗数
晕燥援 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶
责造葬灶贼造藻贼泽 燥枣 耶员愿 原 缘怨怨爷 宰澡蚤贼藻
平均分化率
阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 辕 豫
圆 愿猿 怨圆 愿苑郾 缘 葬
猿 愿源 愿缘 愿源郾 缘 葬
员 圆怨 猿缘 猿圆郾 园 遭
源 圆圆 员愿 圆园郾 园 糟
摇 摇 由图 员 可知袁 在抗性愈伤组织大小相同时袁员愿 原
缘怨怨 红和 员愿 原 缘怨怨 白 圆 个自交系的幼苗分化率差异不
大遥 针对每一种自交系袁抗性愈伤组织大小不同袁其分
化率不同遥 当抗性愈伤组织大小在 圆郾 缘 耀 猿郾 缘 皂皂 之
间时袁 圆 个自交系的分化率均最高袁平均达到 苑远郾 缘豫 曰
抗性愈伤组织 跃源郾 园 皂皂 时袁其分化率虽然接近 缘园豫 袁
但分化的幼苗多为丛生苗袁畸形率较高袁影响到后期的
生根壮苗袁导致成活率不高遥
圆郾 猿摇 继代次数对抗性愈伤组织分化的影响
继代次数是影响转基因抗性愈伤组织分化率的一
个重要因素遥 继代次数不同袁转基因抗性愈伤组织分
化率不同遥 总体上随着继代次数的增加袁分化率呈现
出由低到高再降低的趋势遥 继代 员 次袁分化率为
猿圆豫 曰在继代 圆 耀 猿 次时分化率最高袁超过 愿园豫的抗性
愈伤组织能分化出幼苗袁显著高于仅继代 员 次的分化
率曰继代达到 源 次时袁虽然抗性愈伤组织数量有所增
加袁但是分化率急剧下降袁仅为 圆园豫 渊表 圆冤遥
圆郾 源摇 激素添加物对再生植株生根壮苗的影响
分化的幼苗转移至再生培养基 陨尧陨陨尧陨陨陨和 陨灾中培
养约 员缘 凿后开始生根遥 随着培养时间增加袁茎长茎粗
等变化明显袁叶色逐渐加深遥 转接一次再培养 圆园 凿袁之
后移栽至营养土中袁员缘 耀 圆园 凿 后观察到再生培养基 陨
和 陨陨陨培养出的幼苗生长比较迅速袁但幼苗的茎细长袁
易折断袁根系不发达渊图 圆 原 粤尧悦冤曰而再生培养基 陨陨和
陨灾培养出的幼苗其茎变得粗壮尧叶片数量更多尧颜色
较深袁根系发达渊图 圆 原 月尧阅冤遥 再生培养基 陨陨 培养的
植株成活率达 怨园豫 袁再生培养基 陨灾 培养的植株成活
率也超过 缘园豫 遥 而再生培养基 陨 和 陨陨陨 培养的植株其
成活率仅为 猿猿郾 猿豫和 远郾 苑豫 袁表明 园郾 缘皂早窑蕴 原员 粤月栽 和
园郾 圆缘 皂早窑蕴 原员的烯效唑 杂猿猿园苑 对转化的抗性愈伤组织
再生植株早期生根壮苗具有明显的促进作用渊表 猿冤遥
猿摇 讨论
猿郾 员摇 转基因抗性愈伤组织分化的影响因素
本试验以农杆菌侵染后经过抗生素筛选获得的玉
米自交系 员愿 原 缘怨怨 抗性愈伤组织为材料袁主要观察了
基本培养基尧抗性愈伤组织大小尧继代次数对转基因玉
米抗性愈伤组织分化的影响遥 以 晕远 为基本培养基的
分化率最高达到 苑缘豫 袁显著优于 杂蚤早皂葬 干粉通用型植
物组织培养基袁这与前人研究中认为选择适宜的培养
基是决定愈伤诱导和再生植株的关键外部因素相吻
合咱员袁 员园暂 遥 对于抗性愈伤组织大小而言袁大小在 圆郾 缘 耀
猿郾 缘皂皂之间的愈伤组织分化率最高袁相比过大的愈伤
组织渊 跃 源皂皂冤袁后期畸形苗比例少袁幼苗成活率更高袁
所以可以在分化培养时选用愈伤大小作为衡量标准袁
以提高分化成苗率遥 在转基因抗性愈伤组织继代培养
过程中袁继代 圆 耀 猿 次进行分化效果最好袁平均分化率
超过 愿园豫 遥 继代过少袁抗性愈伤恢复培养不足袁愈伤
过小袁影响分化率遥 当抗性愈伤继代达到 源 次袁分化成
怨猿远
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
摇 摇 摇 摇
注院粤院 培养基中未添加 粤月栽和烯效唑 杂猿猿园苑 的再生植株曰月院培养基中添加 园郾 缘皂早窑蕴 原员 粤月栽和 园郾 圆缘皂早窑蕴 原员烯效唑 杂猿猿园苑 的再生植株曰悦院未
摇 摇 添加 粤月栽和烯效唑 杂猿猿园苑 的再生植株炼苗情况曰阅院添加 园郾 缘皂早窑蕴 原员 粤月栽和 园郾 圆缘皂早窑蕴 原员烯效唑 杂猿猿园苑 的再生植株炼苗情况遥
晕燥贼藻院粤院 砸藻早藻灶藻则葬贼藻凿 责造葬灶贼泽 燥灶 贼澡藻 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂 憎蚤贼澡燥怎贼 粤月栽 则燥燥贼鄄责则燥皂燥贼蚤灶早 责燥憎凿藻则 葬灶凿 怎灶蚤糟燥灶葬扎燥造藻 渊杂猿猿园苑冤援 月院 砸藻早藻灶藻则葬贼藻凿 责造葬灶贼泽 燥灶 贼澡藻
则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂 憎蚤贼澡 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 粤月栽 则燥燥贼鄄责则燥皂燥贼蚤灶早 责燥憎凿藻则 园郾 圆缘 皂早窑蕴 原员 葬灶凿 怎灶蚤糟燥灶葬扎燥造藻 杂猿猿园苑援 悦院 匀葬则凿藻灶蚤灶早 燥枣 责造葬灶贼造藻贼泽 憎蚤贼澡燥怎贼 粤月栽 则燥燥贼鄄
责则燥皂燥贼蚤灶早 责燥憎凿藻则 葬灶凿 怎灶蚤糟燥灶葬扎燥造藻 渊杂猿猿园苑冤 援 阅院 匀葬则凿藻灶蚤灶早 燥枣 责造葬灶贼造藻贼泽 憎蚤贼澡 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 粤月栽 则燥燥贼鄄责则燥皂燥贼蚤灶早 责燥憎凿藻则 园郾 圆缘 皂早窑蕴 原员 葬灶凿 怎灶蚤糟燥灶葬扎燥造藻
摇 摇 摇 摇 杂猿猿园苑援
图 圆摇 粤月栽和烯效唑 杂猿猿园苑 对再生植株生根壮苗的作用
云蚤早援 圆摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 怎灶蚤糟燥灶葬扎燥造藻 杂猿猿园苑 葬灶凿 粤月栽 则燥燥贼鄄责则燥皂燥贼蚤灶早 责燥憎凿藻则 贼燥 贼澡藻 早则燥憎贼澡 燥枣 则藻早藻灶藻则葬贼藻凿 责造葬灶贼泽援
表 猿摇 烯效唑 杂猿猿园苑 和 粤月栽生根粉对转基因再生植株的影响
栽葬遭造藻 猿摇 孕则燥皂燥贼蚤燥灶 藻枣枣藻糟贼 燥枣 怎灶蚤糟燥灶葬扎燥造藻 杂猿猿园苑 葬灶凿 粤月栽 则燥燥贼鄄责则燥皂燥贼蚤灶早 责燥憎凿藻则 葬凿凿蚤贼蚤燥灶 贼燥 责造葬灶贼 则藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶
再生培养基
砸藻早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤怎皂
粤月栽含量
粤月栽 糟燥灶贼藻灶贼 辕 渊皂早窑蕴 原员 冤
杂猿猿园苑含量
杂猿猿园苑 糟燥灶贼藻灶贼 辕 渊皂早窑蕴 原员冤
移栽幼苗数
晕燥援 燥枣 贼则葬灶泽责造葬灶贼葬贼蚤燥灶 责造葬灶贼造藻贼泽
成活植株数
晕燥援 燥枣 葬造蚤增藻 责造葬灶贼造藻贼泽
成活率
杂怎则增蚤增蚤灶早 则葬贼藻 辕 豫
域 园郾 缘 园郾 圆缘 员缘 员圆 怨园郾 园
郁 园郾 缘 园郾 圆缘 员缘 愿 缘猿郾 猿
玉 园郾 园 园郾 园园 员缘 缘 猿猿郾 猿
芋 园郾 园 园郾 园园 员缘 员 远郾 苑
苗受到严重影响袁这可能与培养时间过长有关遥 在前
人的研究中袁白云凤等咱员员暂使用农杆菌直接转化玉米幼
胚时同样发现袁生长状态较差的愈伤组织很难得到转
化苗袁经抗生素筛选获得的愈伤组织因延长了继代时
间也导致愈伤分化成苗能力下降遥 张桂玲等咱缘暂将未
经转化的 员愿 原 缘怨怨 愈伤组织直接进行分化袁当继代超
过 缘 次幼苗分化率开始降低遥 因此袁抗性愈伤分化成
苗的总继代次数不宜过多遥 此外袁培养基中添加适当
浓度的 远鄄月粤尧粤早晕韵猿 等对愈伤组织的分化成苗也具有
促进作用咱员圆 原 员愿暂 遥
猿郾 圆摇 再生植株生根壮苗的影响因素
在研究生根壮苗的影响因素时发现袁不论以 晕远
或 杂蚤早皂葬干粉通用型培养基袁再生培养基中添加适量
的 粤月栽 生根粉渊园郾 缘 皂早窑蕴 原员 冤和烯效唑 杂猿猿园苑 渊园郾 圆缘
皂早窑蕴 原员冤生根壮苗效果明显优于未添加的培养基袁表
明再生培养基中植物生长调节剂如 粤月栽 生根粉和烯
效唑 杂猿猿园苑 添加与否是决定植株生根壮苗以及移栽成
活的关键因素袁在玉米再生体系中起着非常重要的作
用袁这与前人的研究结果相一致咱员怨暂 遥 其原因在于植物
生长调节剂 粤月栽 和 杂猿猿园苑 能促进植物叶绿体及根系
等的发育袁提高植物的抗逆性咱圆园 原 圆圆暂 遥 粤月栽 的作用机
理在于能促进玉米根系的生长袁增加同化面积袁因此使
玉米具有较强的吸收尧同化能力咱圆猿暂 遥 烯效唑 杂猿猿园苑 能
抑制赤霉素的合成袁减弱植物顶端生长优势袁尤其对控
制作物生长速度尧壮苗尧促根促孽尧使下胚轴渊茎冤加
粗袁根系增多且发达袁能使作物根系结构发生变化袁扩
大根系对水分和营养的吸收面积曰使叶片增多加厚袁在
增加光合效率等方面都有明显效果咱圆源 原 圆苑暂 遥 粤月栽 垣
杂猿猿园苑 处理提高不定根中碳水化合物的含量袁故根系
发育旺盛袁从而提高了再生植株成活率咱圆愿暂 遥
源摇 结论
基本培养基尧愈伤组织大小尧继代次数尧激素添加
物对转基因抗性愈伤组织分化和再生植株的生长有显
著影响遥 以 晕远 为基本培养基尧抗性愈伤组织大小在
圆郾 缘 耀 猿郾 缘皂皂 之间尧继代 圆 耀 猿 次的分化率最高曰再生
培养基中添加 园郾 缘 皂早窑蕴 原员 粤月栽和 园郾 圆缘 皂早窑蕴 原员 杂猿猿园苑
园源远
摇 源 期 转基因玉米抗性愈伤再生植株的影响因素研究
有利于再生植株生根壮苗遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 窦茜袁 余桂蓉袁 杜文平袁 余尧颖袁 赵直袁 彭正松袁 徐利远援 玉米
幼胚转基因受体系统的建立咱允暂 援 西南农业学报袁 圆园员园袁 圆猿渊圆冤院
猿圆远 原 猿圆怨
咱 圆 暂 摇 在澡葬燥 在 再袁 郧怎 宰 晕袁 悦葬蚤 栽 杂袁 栽葬早造蚤葬灶蚤 蕴袁 匀燥灶凿则藻凿 阅袁 月燥灶凿 阅袁
杂糟澡则燥藻凿藻则 杂袁 砸怎凿藻则贼 酝袁 孕蚤藻则糟藻 阅援 匀蚤早澡 贼澡则燥怎早澡鄄责怎贼 早藻灶藻贼蚤糟
贼则葬灶泽枣燥则皂 葬贼蚤燥灶 皂藻凿蚤葬贼藻凿 遭赠 粤早则燥遭葬糟贼藻则蚤怎皂 贼怎皂藻枣葬糟蚤藻灶泽 蚤灶 皂葬蚤扎藻咱允暂 援
酝燥造藻糟怎造葬则 月则藻藻凿蚤灶早袁 圆园园圆袁 愿渊源冤院 猿圆猿 原 猿猿猿
咱 猿 暂摇 王景雪袁孙毅袁胡晶晶袁崔贵梅援 玉米自交系高频率再生因素研
究咱允暂 援 作物学报袁 圆园园源袁 猿园渊源冤院 猿怨愿 原 源园圆
咱 源 暂摇 徐立华袁 张举仁袁 周柱华袁 许方佐袁 阴卫军袁 邢燕菊援 玉米愈伤
组织再生体系的研究咱允暂 援 玉米科学袁 圆园园远袁 员源渊远冤院 怨远 原 怨怨
咱 缘 暂摇 张桂玲袁 张素芝袁 荣廷昭援 影响玉米幼胚愈伤组织再生率的因
素分析咱允暂 援核农学报袁 圆园园怨袁 圆猿渊猿冤院 猿愿缘 原 猿怨园
咱 远 暂 摇 陈靖袁董浩袁马海珍袁孙全喜袁刘江袁亓宝秀袁李新征袁董树亭援 玉
米幼胚和源于幼苗的幼嫩叶段愈伤诱导及其植株再生的比较
咱允暂 援 中国农业科学袁 圆园员员袁 源源渊员苑冤院 猿远苑远 原 猿远愿圆
咱 苑 暂 摇 贾小霞袁 王汉宁袁 孔维萍袁 梁慧光袁 张金文援 玉米幼胚和成熟胚
愈伤组织诱导过程中内源激素的比较咱允暂 援 核农学报袁 圆园园怨袁 圆猿
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咱 愿 暂 摇 王景雪袁 孙毅袁 胡冬焱袁 高武军袁 胡晶晶援 玉米胚叶再生植株研
究咱允暂 援 作物学报袁 圆园园圆袁 圆愿渊员冤院 员猿远 原 员猿怨
咱 怨 暂摇 王昌涛袁 杨爱国袁 高树仁袁 赵琦袁 赵玉锦袁 张世煌援 玉米不同外
植体愈伤组织的诱导及植株再生的研究咱 允暂 援 沈阳农业大学学
报袁 圆园园缘袁 猿远渊缘冤院 缘员缘 原 缘员愿
咱员园暂摇 陈淑萍袁 王雪征袁 崔银辉袁 茜晓哲袁 宋聪敏袁 庞建周袁 陈秀敏援
不同培养基对小麦 伊玉米杂种胚离体培养成苗的影响咱 允暂 援 核
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咱员员暂摇 白云凤袁 王国英袁 苟明月袁 赵晋锋袁 董志刚援 农杆菌介导玉米转
基因的影响因素研究咱 允暂 援 中国生态农业学报袁 圆园园远袁 员源渊猿冤院
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咱员圆暂摇 高武军袁 孙富丛袁 魏开发袁 卢龙斗袁 王景雪援 玉米胚性愈伤组织
诱导与分化的影响因素咱允暂 援 华北农学报袁 圆园园缘袁 圆园渊员冤院圆苑 原 猿园
咱员猿暂摇 张立军袁 赵成昊袁 葛超援 玉米再生体系建立及其影响因素的研
究咱允暂 援 玉米科学袁 圆园园愿袁员远渊圆冤院 苑苑 原 苑怨袁 愿苑
咱员源暂摇 张慧英袁 张耀华袁农友业袁 薛艳霞援 玉米幼胚培养及植株再生的
研究咱允暂 援 玉米科学袁 圆园园愿袁 员远渊远冤院 苑怨 原 愿圆
咱员缘暂摇 杜何为袁 许先凤袁 黄敏袁 赵启桂袁 张祖新援 硝酸银对玉米幼胚组
织培养的影响咱允暂 援 河北农业科学袁 圆园园愿袁 员圆渊愿冤院 远圆 原 远猿
咱员远暂摇 魏开发援 农杆菌介导的高效玉米遗传转化体系的建立咱 允暂 援 遗
传袁 圆园园怨袁 猿员渊员员冤院 员员缘愿 原 员员苑园
咱员苑暂摇 林霞袁 王志安袁 陈玲袁 李新鹏袁 吴家和袁 夏春兰袁 胡保民袁 陈全
家袁 王沛政援 不同玉米自交系幼胚愈伤组织诱导和分化的研究
咱允暂 援 新疆农业科学袁 圆园员圆袁 源怨渊怨冤院员缘愿苑 原 员缘怨猿
咱员愿暂摇 董浩袁 夏光利袁 毕军袁 朱国梁袁 史桂芳援 玉米幼嫩叶片愈伤诱导
及分化过程优化的研究咱 允暂 援 核农学报袁圆园员猿袁 圆苑渊怨冤院员圆缘猿 原
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咱员怨暂摇 付凤玲袁 李晚忱袁 荣廷昭援 晕远 培养基添加钙和烯效唑对玉米幼
胚培养的作用咱允暂 援 作物学报袁 圆园园缘袁 猿员渊缘冤院 远猿源 原 远猿怨
咱圆园暂摇 张义林袁 高宝岩援 水分胁迫下 粤月栽 生根粉对玉米耐旱性的影响
咱允暂 援 华北农学报袁 员怨怨源袁 怨渊圆冤院 圆园 原 圆源
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咱圆猿暂摇 李潮海袁 高素玲援 粤月栽生根粉对玉米抗旱性的影向咱允暂 援 干旱地
区农业研究袁 员怨怨源袁员圆渊员冤院 员园远 原 员员园
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咱圆缘暂摇 王玉洁袁 郁继华袁 雍山玉袁 张洁宝援 烯效唑 渊杂猿猿园苑冤 浸种对盐
胁迫下黄瓜幼苗生理的影响咱允暂 援 山西农业大学学报院自然科学
版袁 圆园园苑袁 圆苑渊圆冤院 员猿怨 原 员源圆
咱圆远暂摇 姜英袁 彭彦袁 李志辉袁 吴志华袁 任世奇援 多效唑袁 烯效唑和矮壮
素对金钱树的矮化效应 咱 允暂 援 园艺学报袁 圆园员园袁 猿苑渊缘冤袁 愿圆猿 原
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定根的影响咱允暂 援 核农学报袁 圆园园猿袁员苑渊圆冤院 员猿猿 原 员猿苑
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