全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员缘园圆 耀 员缘园愿
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园苑鄄园圆摇 接受日期院圆园员源鄄员园鄄园愿
基金项目院中央高校基本科研业务费基金项目渊再在圆园员圆员园冤袁国家工业和信息化部 圆园员猿 年度中药材生产建设项目渊圆园员猿 原 员愿冤袁国家基本药物所
需中药材种子种苗繁育基地建设项目渊圆园员源 原茅苍术冤
作者简介院王红娟袁女袁主要从事药用植生物技术育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院圆园员圆员园源圆园员岳 灶躁葬怎援 藻凿怎援 糟灶
通讯作者院向增旭袁副教授袁主要从事药用植生物技术育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院扎曾曾蚤葬灶早岳 灶躁葬怎援 藻凿怎援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园愿鄄员缘园圆鄄园苑
二倍体与同源四倍体茅苍术基因组 阅晕粤甲基化
水平与模式的 酝杂粤孕分析
王红娟员 摇 巢建国圆 摇 李雅婷员 摇 李颖硕员 摇 向增旭员
渊员南京农业大学园艺学院袁 江苏 南京摇 圆员园园怨缘曰 圆 南京中医药大学药学院袁 江苏 南京摇 圆员园园圆猿冤
摘摇 要院为探究二倍体和同源四倍体茅苍术表观遗传差异袁以不同倍性的茅苍术为试验材料袁应用 酝杂粤孕
技术研究其基因组 阅晕粤甲基化水平及模式变化遥 本试验选用 圆园 对选扩引物袁在茅苍术二倍体和同源
四倍体中检测到的基因位点数分别为 缘圆园 和 缘圆苑袁其相应的扩增总甲基化率为 缘远郾 怨圆豫和 缘缘郾 园猿豫 袁四倍
体基因组 阅晕粤半甲基化率高于二倍体袁而全甲基化率低于二倍体曰四倍体与二倍体相比袁阅晕粤 甲基化
模式发生调整的基因位点占总检测位点的 缘圆郾 缘猿豫 遥 本研究为深入揭示四倍体茅苍术的表观遗传调控
机制奠定了基础遥
关键词院茅苍术曰同源四倍体曰表观遗传曰基因组曰甲基化敏感扩增多态性渊酝杂粤孕冤
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园愿援 员缘园圆
摇 摇 多倍体育种是药用植物新品种选育和品质改良的
重要手段袁在中药材生产中发挥着重要作用遥 同源多
倍体往往表现为活性成分含量高尧药用部位广尧抗逆性
强等利于药材生产的优势性状袁这些区别于亲本二倍
体的形态或生理特征的形成机制可能与表观遗传调控
密切相关咱员 原 猿暂 遥 表观遗传调控主要包括 阅晕粤 甲基化
修饰尧组蛋白乙酰化尧小 砸晕粤 调控等袁其中 阅晕粤 甲基
化修饰是表观遗传调控的重要方式之一袁植物发生超
甲基化或者去甲基化都会导致其生长发育的不正常和
形态异常咱源 原 苑暂 遥 开展表观遗传研究不但能够阐述植物
同源多倍化的内在机理袁而且有利于揭示同源多倍体
区别于亲本二倍体的优势农艺性状的形成原因咱员暂 遥
近几年研究发现袁黄瓜咱愿暂 尧拟南芥咱怨暂 尧小麦咱员园暂 尧水稻咱员员暂
等农作物人工加倍后 阅晕粤 甲基化水平及模式均发生
了变化遥 然而这些工作主要集中在农作物袁有关药用
植物的研究相对较少遥 鉴于此袁本研究基于表观遗传
学袁从 阅晕粤 甲基化修饰的角度出发袁以药用植物茅苍
术二倍体及其同源四倍体为试验材料袁采用 酝杂粤孕
渊皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣蚤藻凿 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂冤技术探
究其甲基化水平与模式的变化遥
茅苍术咱粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊 栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 暂为菊
科多年生宿根性草本植物咱员圆暂 遥 目前袁关于茅苍术的研
究主要集中在化学成分咱员猿 原 员源暂 尧内生菌咱员缘 原 员远暂 尧药理
学咱员苑 原 员愿暂等方面袁而有关茅苍术二倍体及其同源四倍体
之间的表观遗传研究鲜见报道遥 本文通过探究茅苍术
二倍体与同源四倍体 阅晕粤 的甲基化水平与模式变化
差异袁以期为进一步揭示同源四倍体茅苍术的表观遗
传机理奠定基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
试验材料为生长势一致的茅苍术二倍体及其同源
四倍体组培苗遥 二倍体无菌系建于 圆园员圆 年 员园 月袁四
倍体无菌苗于 圆园员猿 年 员园 月由二倍体茅苍术幼芽渊园郾 缘
耀 员郾 园糟皂冤经秋水仙素加倍后获得遥 圆园员源 年 猿 月选择
生长健壮的茅苍术二倍体及四倍体试管苗进行继代培
养袁员 个月后各采取生长势一致的 缘 株幼苗相同部位
的叶片 园郾 缘早袁提取 阅晕粤遥
圆园缘员
摇 愿 期 二倍体与同源四倍体茅苍术基因组 阅晕粤甲基化水平与模式的 酝杂粤孕分析
员郾 圆摇 茅苍术四倍体的鉴定
提取 阅晕粤之前先对茅苍术二倍体及其四倍体材料
的根尖染色体数目进行鉴定袁以确保试验材料的准确
性遥 染色体制备采用根尖压片法袁每棵幼苗取 缘 个根
尖袁每个根尖选 员园个染色体数目清晰的细胞进行观察袁
确定染色体数与预期倍性相符便可进行 阅晕粤提取遥
员郾 猿摇 总 阅晕粤提取
采用改良的 悦栽粤月法咱员怨 原 圆园暂 袁进行 阅晕粤提取袁提取
产物取 圆 耀 猿滋蕴袁用 员郾 园豫琼脂糖凝胶电泳检测袁其余
置于 原圆园益冰箱袁保存备用遥
员郾 源摇 酶切尧连接反应
具体参照 载蚤燥灶早等咱圆员暂和 悦藻则增藻则葬等咱圆圆暂的方法并略
做改动袁用同裂酶 匀责葬域和 酝泽责玉分别与识别六碱基
的核酸内切酶 耘糟燥砸玉渊晕耘月冤 组合袁对 圆 个不同倍性
的茅苍术 阅晕粤 进行双酶切袁连上接头袁应用 粤云蕴孕 扩
增程序咱圆猿暂进行 圆 轮扩增袁接头尧引物序列见表 员遥
表 员摇 接头尧预扩增和选择性扩增引物序列
栽葬遭造藻 员摇 粤凿葬责贼藻则泽袁 责则藻鄄 葬灶凿 泽藻造藻糟贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责则蚤皂藻则泽 怎泽藻凿 枣燥则 酝杂粤孕 葬泽泽葬赠
接头与引物
粤凿葬责贼藻则泽 葬灶凿 责则蚤皂藻则泽
序列渊缘忆 原 猿忆冤
杂藻择怎藻灶糟藻渊缘忆 原 猿忆冤
引物
孕则蚤皂藻则泽
序列 杂藻择怎藻灶糟藻 渊缘忆 原 猿忆冤
杂藻择怎藻灶糟藻 渊缘忆 原 猿忆冤
耘糟燥砸 陨 接头 员 悦栽悦郧栽粤郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦 耘源愿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦悦粤悦
耘糟燥砸 陨 接头 圆 粤粤栽栽郧郧栽粤悦郧悦粤郧栽悦栽粤悦 耘源怨 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦悦粤郧
匀酝接头 员 郧粤悦郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧 耘缘园 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦悦粤栽
匀酝接头 圆 悦郧悦栽悦粤郧郧粤悦栽悦粤栽 耘苑缘 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽粤
耘园园 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦 耘苑远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽悦
酝杂孕园园 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧悦郧郧 耘苑苑 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽郧
耘猿远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤悦悦 耘苑愿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽栽
耘猿愿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤悦栽 耘愿源 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦栽悦悦
耘源园 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤郧悦 耘愿缘 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦栽悦郧
耘源员 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤郧郧 耘愿远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦栽悦栽
耘源圆 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤郧栽 酝泽责猿怨 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧悦郧郧粤郧粤
耘源猿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤栽粤 酝泽责源园 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧悦郧郧粤郧悦
耘源源 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤栽悦 酝泽责源员 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧悦郧郧粤郧郧
耘源远 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤栽栽 酝泽责源圆 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧悦郧郧粤郧栽
耘源苑 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦悦粤粤 酝泽责愿园 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧悦郧郧栽粤悦
员郾 缘摇 预扩增与选择性扩增
预扩增和选择性扩增操作过程均参照何艳霞
等咱圆源暂的方法遥 预扩增反应体系为 圆园滋蕴袁包括 园郾 缘滋蕴
员园滋皂燥造 窑 蕴 原员 酝园园 原 责则蚤皂藻则袁 圆滋蕴 员园 伊 月怎枣枣藻则袁
园郾 源滋蕴员园皂皂燥造窑蕴 原员 凿晕栽孕泽袁 园郾 圆滋蕴 缘哉窑滋蕴 原员 栽葬择 酶袁
园郾 缘滋蕴 员园滋皂燥造窑蕴 原员 耘园园 原 责则蚤皂藻则袁其余体积用水补齐遥
预扩增反应条件为院孕悦砸程序为 圆远 个循环袁怨源益 变性
猿园泽袁缘远益退火 员皂蚤灶袁苑圆益延伸 员皂蚤灶袁 苑圆益延伸 员园皂蚤灶遥
反应结束后袁将预扩增产物稀释 圆园 倍用于选择性
扩增遥 扩增程序参照杨岚等咱圆缘暂的方法进行袁反应条件
为院第 员 个循环袁怨源益变性 猿园泽袁远缘益 耀 缘远益变性 猿园泽袁
苑圆益延伸 员皂蚤灶曰圆 耀 员猿 个循环袁每个循环降 园郾 苑益进行
降式 孕悦砸扩增曰员源 耀 圆猿 个循环袁怨源益变性 猿园泽袁缘远益退
火 猿园泽袁苑圆益延伸 员皂蚤灶袁苑圆益延伸 员园皂蚤灶遥
员郾 远摇 变性电泳
将选择性扩增 孕悦砸产物加上上样缓冲液袁于 怨源益
变性 员园皂蚤灶后袁采用 远 豫变性聚丙烯酰胺凝胶进行垂
直电泳袁银染后观察并分析遥
员郾 苑摇 条带统计及数据分析
酝杂粤孕技术中同裂酶 匀责葬域和 酝泽责玉分别与 耘糟燥砸
玉组合袁进行双酶切遥 因此每个样品同时拥有 圆 条泳
道袁其中第 员 条泳带采用 耘糟燥砸玉辕 匀责葬域进行酶切袁记
为 匀袁第 圆 条泳带采用 耘糟燥砸玉辕酝泽责玉进行酶切袁记为
酝遥 同一位点袁有条带记 员袁无带记为 园遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 二倍体和四倍体茅苍术染色体数目
根尖染色体鉴定结果显示茅苍术二倍体染色体数
圆灶 越 圆曾 越 圆源渊图 员袁左冤袁同源四倍体染色体数为 圆灶 越 源曾
越 源愿渊图 员袁右冤袁观察多个细胞的染色体形态袁发现四
倍体茅苍术染色体结构未发生明显变化袁表明试验材
猿园缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
图 员摇 茅苍术二倍体渊左冤和四倍体染色体渊右冤
云蚤早援 员摇 栽澡藻 糟澡则燥皂燥泽燥皂藻 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿渊 造藻枣贼冤 葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿渊则蚤早澡贼冤 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援
料纯合稳定袁适用于甲基化研究遥
圆郾 圆摇 二倍体和同源四倍体茅苍术基因组 阅晕粤 甲基
化水平差异
表 圆摇 二倍体和同源四倍体茅苍术 阅晕粤甲基化水平
栽葬遭造藻 圆摇 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 造藻增藻造泽 蚤灶 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援
茅苍术
粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬
渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援
总位点
栽燥贼葬造 泽蚤贼藻泽
非甲基化位点
晕燥灶藻鄄皂藻贼澡赠造葬贼藻凿 泽蚤贼藻泽
甲基化的位点 酝藻贼澡赠造葬贼藻凿 悦悦郧郧 泽蚤贼藻泽
全甲基化位点
云怎造造赠 皂藻贼澡赠造葬贼藻凿 泽蚤贼藻泽
半甲基化位点
匀藻皂蚤鄄皂藻贼澡赠造葬贼藻凿 泽蚤贼藻泽
总计
栽燥贼葬造
二倍体
阅蚤责造燥蚤凿 缘圆园 圆圆源渊源猿郾 园愿豫 冤 圆园猿渊猿怨郾 园源豫 冤 怨猿渊员苑郾 愿愿豫 冤 圆怨远渊缘远郾 怨圆豫 冤
四倍体
粤怎贼燥贼藻贼则葬造责造燥蚤凿 缘圆苑 圆猿苑渊源源郾 怨苑豫 冤 员怨源渊猿远郾 愿员豫 冤 怨远渊员愿郾 圆圆豫 冤 圆怨园渊缘缘郾 园猿豫 冤
摇 摇 经 酝杂粤孕扩增出的条带数及甲基化水平见表 圆遥
变性聚丙烯凝胶电泳结果显示袁圆园 个引物组合共检测
到 员 园源苑 个基因位点袁 其中二倍体茅苍术基因组内检
测到 缘圆园 个袁四倍体中检测到 缘圆苑 个袁这些检测到的基
因位点约有一半发生了甲基化袁二者总甲基化率分别
为 缘远郾 怨圆豫和 缘缘郾 园猿豫 遥 由表 圆 可知袁在茅苍术二倍体
中有 圆怨远 个基因位点发生了甲基化袁 其中 圆园猿 个为全
甲基化位点袁 全甲基化率为 猿怨郾 园源豫 袁半甲基化率仅为
员苑郾 愿愿豫 曰 而茅苍术四倍体中有 圆怨园 个基因位点发生
甲基化全甲基化率和半甲基化率分别为 猿远郾 愿员豫和
员愿郾 圆圆豫 遥
圆郾 猿摇 二倍体和同源四倍体茅苍术基因组 阅晕粤 甲基
化模式差异
关于不同倍性茅苍术基因组 阅晕粤 甲基化类型的
划分参考王春国等咱员暂和边禹咱圆远暂的方法袁二倍体尧四倍
体茅苍术 酝杂粤孕扩增条带带型共有 员缘 种袁所有的扩增
模式可分为 粤尧月尧悦尧阅 源 大类袁员缘 个亚类渊图 圆尧表 猿冤遥
类型 粤 包含 猿 个亚类袁四倍体与二倍体相比袁阅晕粤 甲
基化模式未发生改变袁这样的 阅晕粤 甲基化模式变化类
型占所检测类型的 愿源郾 苑圆豫 遥 类型 月 包含 缘 个亚类袁
四倍体与二倍体相比袁缘郾 远源豫的位点 阅晕粤甲基化程度
升高袁即发生了过甲基化遥 类型 悦 也包含 缘 个亚类袁
四倍体与二倍体相比袁愿郾 猿远豫的基因位点 阅晕粤 甲基化
水平下降袁即发生了去甲基化遥 阅为次甲基化类型袁即
四倍体甲基化水平较二倍体有所降低袁但仍存在甲基
化状态袁这样的位点仅占总检测位点的 员郾 圆苑豫 遥
猿摇 讨论
不同研究者采用 酝杂粤孕技术探究不同材料加倍前
后的 阅晕粤甲基化水平及模式变化袁得到的结论也不完
全相同遥 杨岚等咱圆缘暂研究甜叶菊二倍体及其同源四倍
体之间的 阅晕粤甲基化差异后袁发现四倍体半甲基化水
平低于二倍体袁而全甲基化水平则高于二倍体遥 南方
泡桐及豫杂一号泡桐染色体加倍后全甲基化率及半甲
源园缘员
摇 愿 期 二倍体与同源四倍体茅苍术基因组 阅晕粤甲基化水平与模式的 酝杂粤孕分析
摇 摇 摇 摇 表 猿摇 同源四倍体与二倍体茅苍术相比 阅晕粤甲基化模式的变化
栽葬遭造藻 猿摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 贼澡藻 糟澡葬灶早藻泽 燥枣 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶责葬贼贼藻则灶泽 遭藻贼憎藻藻灶 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 葬灶凿 凿蚤责造燥蚤凿 燥枣
粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援
扩增模式
粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶
带型 孕葬贼贼藻则灶
匀源 酝源 匀圆 酝圆
不同带型位点数
蕴燥糟蚤 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责葬贼贼藻则灶
差异位点数
阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造燥糟蚤
所占比例
砸葬贼藻 辕 豫
粤 源远远 愿源郾 苑圆
粤员 员 员 员 员 圆源园
粤圆 员 园 员 园 苑苑
粤猿 园 员 园 员 员源怨
月 猿员 缘郾 远源
月员 员 园 员 员 猿
月圆 园 员 员 员 缘
月猿 园 园 员 员 远
月源 园 园 员 园 源
月缘 园 园 园 员 员猿
悦 源远 愿郾 猿远
悦员 员 员 员 园 员园
悦圆 员 员 园 员 远
悦猿 员 员 园 园 源
悦源 员 园 园 园 员员
悦缘 园 员 园 园 员缘
阅 苑 员郾 圆苑
阅员 园 员 员 园 圆
阅圆 员 园 园 员 缘
总差异位点数 缘缘园
基化率均高于二倍体咱圆苑 原 圆愿暂 遥 本试验中袁二倍体和四倍
体茅苍术的半甲基化水平分别为 员苑郾 愿愿豫和 员愿郾 圆圆豫 袁
全甲基化水平分别为 猿怨郾 园源豫 和 猿远郾 愿员豫 袁可见四倍
体半甲基化水平高于二倍体袁全甲基化水平则低于二
倍体袁这一结果与王春国等咱员暂在西瓜的研究中得到的
甲基化水平相似遥 由此可知袁不同倍性的植物基因组
阅晕粤甲基化水平与染色体数目关系不大袁并未表现为
染色体数越多袁阅晕粤 甲基化水平就越高袁而是各自维
持在一个比较稳定的水平遥
四倍体为适应新的调控系统使其表达调控达到最
佳状态袁其 阅晕粤 甲基化模式会发生相应的调整咱圆源暂 遥
多倍体植物基因甲基化模式的改变会影响植物的形
态尧育性尧产量及生理状况等咱圆怨暂 遥 芸薹属咱猿园 原 猿员暂 尧拟南
芥咱怨暂等植物人工加倍后表观遗传调控模式和基因表
达模式均发生了调整袁这些变化可能是多倍体植物产
生优良性状的分子基础咱猿圆暂 遥 本研究中茅苍术四倍体
与二倍体相比袁 阅晕粤甲基化模式发生调整的基因位点
占总检测位点的 缘圆郾 缘猿豫 袁这些发生调整的位点以去
甲基化为主袁由此可知袁一些在二倍体茅苍术内发生
阅晕粤 过甲基化的位点在四倍体内发生去甲基化或没
有发生甲基化袁这可能是四倍体茅苍术维持其自身基
因组稳定性所必须的遥
源摇 结论
本研究通过 酝杂粤孕 技术检测袁发现茅苍术二倍体
在人工加倍形成四倍体后袁染色体数目加倍袁细胞内环
境改变袁细胞核与细胞质基因之间的调控关系也随之
发生变化遥 四倍体茅苍术 阅晕粤 半甲基化水平高于二
倍体袁全甲基化水平则低于二倍袁且其甲基化模式发生
了大规模调整袁这些发生调整的基因位点以相应位点
阅晕粤甲基化程度降低为主袁这或许是同源四倍体茅苍
术性状形成区别于亲本二倍体的原因之一遥 本研究所
得到的茅苍术四倍体外观形态及生理特性变异的内在
机理仅是 阅晕粤甲基化水平与模式变化的结果袁而关于
组蛋白乙酰化尧小 砸晕粤 调控尧染色质改型等与表观遗
缘园缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
注院匀圆 和 匀源 分别表示二倍体和四倍体茅苍术 耘糟燥砸 陨 辕 匀责葬 陨陨酶切的扩增结果遥 酝圆 和 酝源 表示二倍体和四倍体茅苍术 耘糟燥砸 陨 辕 酝泽责 陨
酶切的扩增结果遥 箭头和字母指代不同的 阅晕粤甲基变化类型渊与表 猿 中的相对应冤遥 耘源怨 酝泽责源员 原 耘苑愿 酝泽责源圆 表示引物组合遥
晕燥贼藻院匀圆 葬灶凿 匀源 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 藻皂责造蚤藻凿 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶泽 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 憎葬泽 凿蚤早藻泽贼藻凿 遭赠 耘糟燥砸 陨 辕 匀责葬 陨陨援
酝圆 葬灶凿 酝源 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 藻皂责造蚤藻凿 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶泽 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 憎葬泽 凿蚤早藻泽贼藻凿 遭赠 耘糟燥砸 陨 辕酝泽责 陨援 粤则则燥憎泽
葬灶凿 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟澡葬灶早藻泽 燥枣 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶泽 蚤灶 贼葬遭造藻 猿援 耘源怨 酝泽责源员 原 耘苑愿 酝泽责源圆 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡藻 糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶泽 燥枣 责则蚤皂藻则援
图 圆摇 二倍体及四倍体茅苍术的部分 阅晕粤甲基化模式
云蚤早援 圆摇 孕葬则贼 燥枣 贼澡藻 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶泽 燥枣 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援
传调控相关的分子遗传机制与四倍体茅苍术优势性状
形成的相关性还需作进一步研究遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 王春国袁 古瑜袁 陈成彬袁 陈成彬袁 焦定量袁 薛振毅袁 宋文芹援 不
同倍性西瓜基因组 阅晕粤 甲基化水平与模式的 酝杂粤孕 分析咱 允暂 援
分子细胞生物学报袁 圆园园怨袁 源圆渊圆冤院 员员愿 原 员圆远
咱 圆 暂 摇 酝葬贼澡蚤藻怎 韵袁 月藻灶凿藻则 允援 砸晕粤鄄凿蚤则藻糟贼藻凿 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造
燥枣 悦藻造造 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园源袁 员员苑渊圆员冤院 源愿愿员 原 源愿愿愿
咱 猿 暂 摇 陨噪藻凿葬 再袁 运蚤灶燥泽澡蚤贼葬 栽援 阅晕粤 凿藻皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶院 葬 造藻泽泽燥灶 枣则燥皂 贼澡藻 早葬则凿藻灶
咱允暂 援 悦澡则燥皂燥泽燥皂葬袁 圆园园怨袁 员员愿渊员冤院 猿苑 原 源员
咱 源 暂 摇 在澡藻灶早 载 宰袁 孕燥灶贼藻泽 韵袁 在澡怎 允袁 酝蚤噪蚤 阅袁 在澡葬灶早 云袁 蕴蚤 宰 载袁 陨蚤凿葬 运袁
运葬责燥燥则 粤袁 悦则葬蚤早 杂袁 孕蚤噪葬葬则凿袁 在澡怎 允 运援 砸韵杂猿 蚤泽 葬灶 砸晕粤鄄遭蚤灶凿蚤灶早
责则燥贼藻蚤灶 则藻择怎蚤则藻凿 枣燥则 阅晕粤 凿藻皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽咱 允暂 援 晕葬贼怎则藻袁
圆园园愿袁 源缘缘渊苑圆员苑冤院 员圆缘怨 原 员圆远圆
咱 缘 暂 摇 在蚤造遭藻则皂葬灶 阅援 栽澡藻 藻增燥造增蚤灶早 枣怎灶糟贼蚤燥灶泽 燥枣 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 咱 允 暂 援
悦怎则则藻灶贼 燥责蚤灶蚤燥灶 蚤灶 责造葬灶贼 遭蚤燥造燥早赠袁 圆园园愿袁 员员渊缘冤院 缘缘源 原 缘缘怨
咱 远 暂摇 云蚤灶灶藻早葬灶 耘 允袁 孕藻葬糟燥糟噪 宰 允袁 阅藻灶灶蚤泽 耘 杂援 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶袁 葬 噪藻赠
则藻早怎造葬贼燥则 燥枣 责造葬灶贼 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿 燥贼澡藻则 责则燥糟藻泽泽藻泽 咱 允暂 援 悦怎则则藻灶贼
燥责蚤灶蚤燥灶 蚤灶 早藻灶藻贼蚤糟泽 驭 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 圆园园园袁 员园渊圆冤院 圆员苑 原 圆圆猿
咱 苑 暂摇 云蚤灶灶藻早葬灶 耘 允袁 孕藻葬糟燥糟噪 宰 允袁 阅藻灶灶蚤泽 耘 杂援 砸藻凿怎糟藻凿 阅晕粤
皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 则藻泽怎造贼泽 蚤灶 葬遭灶燥则皂葬造 责造葬灶贼
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼咱允暂 援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 晕葬贼蚤燥灶葬造 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁
员怨怨远袁 怨猿渊员远冤院 愿源源怨 原 愿源缘源
咱 愿 暂摇 悦澡藻灶 蕴袁 悦澡藻灶 允 云援 悦澡葬灶早藻泽 燥枣 糟赠贼燥泽蚤灶藻 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶凿怎糟藻凿 遭赠 憎蚤凿藻
澡赠遭则蚤凿蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 葬造造燥责燥造赠责造燥蚤凿赠 蚤灶 糟怎糟怎皂蚤泽贼咱允暂 援 郧藻灶燥皂藻袁 圆园园愿袁 缘员
渊员园冤院 苑愿怨 原 苑怨怨
咱 怨 暂摇 酝葬凿造怎灶早 粤袁 酝葬泽怎藻造造蚤 砸 宰袁 宰葬贼泽燥灶 月袁 砸藻赠灶燥造凿泽 杂 匀袁 阅葬增蚤泽燥灶 允袁
悦燥皂葬蚤 蕴援 砸藻皂燥凿藻造蚤灶早 燥枣 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 葬灶凿 责澡藻灶燥贼赠责蚤糟 葬灶凿
贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶葬造 糟澡葬灶早藻泽 蚤灶 泽赠灶贼澡藻贼蚤糟 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 葬造造燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿泽贼咱 允暂 援
孕造葬灶贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园圆袁 员圆怨 渊圆冤院 苑猿猿 原 苑源远
咱员园暂摇 匀葬灶 云 孕袁 云藻凿葬噪 郧袁 韵怎藻造造藻贼 栽袁 蕴蚤怎 月援 砸葬责蚤凿 早藻灶燥皂蚤糟 糟澡葬灶早藻泽 蚤灶
蚤灶贼藻则泽责藻糟蚤枣蚤糟 葬灶凿 蚤灶贼藻则早藻灶藻则蚤糟 澡赠遭则蚤凿泽 葬灶凿 葬造造燥责燥造赠责造燥蚤凿泽 燥枣 贼则蚤贼蚤糟藻葬藻
咱允暂 援 郧藻灶燥皂藻袁 圆园园猿袁 源远渊源冤院 苑员远 原 苑圆猿
咱员员暂摇 在澡葬灶早 匀 再袁 孕藻灶早 匀袁 蕴蚤 再袁 载怎 孕 在袁 宰葬灶早 载 阅袁 宰怎 载 允援 孕葬贼贼藻则灶泽
远园缘员
摇 愿 期 二倍体与同源四倍体茅苍术基因组 阅晕粤甲基化水平与模式的 酝杂粤孕分析
燥枣 阅晕粤 糟赠贼燥泽蚤灶藻 皂藻贼澡鄄赠造葬贼蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 澡葬责造燥蚤凿泽 葬灶凿 蚤贼泽 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早
凿蚤责造燥蚤凿泽 蚤灶 则蚤糟藻 咱 允暂 援 悦澡蚤灶藻泽藻 杂糟蚤藻灶糟藻 月怎造造藻贼蚤灶袁 圆园园远袁 缘员 渊员源 冤院
员苑圆员 原 员苑圆愿
咱员圆暂摇 国家药典委员会编援 中华人民共和国药典院圆园员园 年一部 咱酝暂援
北京院 中国医药科技出版社袁 圆园员园院 员缘园
咱员猿暂摇 砸藻灶 悦 郧袁 阅葬蚤 悦 悦援 允葬泽皂燥灶蚤糟 葬糟蚤凿 蚤泽 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 贼澡藻 泽蚤早灶葬造蚤灶早
责葬贼澡憎葬赠 枣燥则 枣怎灶早葬造 藻灶凿燥责澡赠贼藻鄄蚤灶凿怎糟藻凿 增燥造葬贼蚤造藻 燥蚤造 葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤燥灶 燥枣
粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 责造葬灶贼造藻贼泽援 咱 允暂 援 月酝悦 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员圆袁 员圆
渊源冤院源苑 原 缘源
咱员源暂摇 匀蚤则葬燥噪葬 晕袁 栽燥皂蚤贼葬 再援 月燥贼葬灶蚤糟葬造 葬灶凿 糟澡藻皂蚤糟葬造 藻增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣
粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 责造葬灶贼泽 责则燥责葬早葬贼藻凿 蚤灶 增蚤贼则燥 葬灶凿 遭赠 凿蚤增蚤泽蚤燥灶 燥枣 贼澡藻
则澡蚤扎燥皂藻咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造 砸藻责燥则贼泽袁 员怨怨园袁 怨渊远冤院 猿猿圆 原 猿猿源
咱员缘暂摇 李蕾袁 刘付燕袁 任承钢袁 戴传超援 员 株选择性降解茅苍术挥发油
内生真菌的筛选与鉴定咱 允暂 援 中国中药杂志袁 圆园员圆袁 猿苑 渊员怨冤院
圆愿缘缘 原 圆愿远圆
咱员远暂摇 再葬灶早 栽袁 阅怎 宰袁 在澡燥怎 允袁 宰葬灶早 载 载袁 阅葬蚤 悦 悦援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 贼澡藻
泽赠皂遭蚤燥泽蚤泽 遭藻贼憎藻藻灶 枣怎灶早葬造 藻灶凿燥责澡赠贼藻泽 葬灶凿 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 燥灶
则澡蚤扎燥泽责澡藻则藻 葬灶凿 责澡赠造造燥泽责澡藻则藻 皂蚤糟则燥遭蚤葬造 糟燥皂皂怎灶蚤贼蚤藻泽咱允暂 援 杂赠皂遭蚤燥泽蚤泽袁
圆园员猿袁 远员渊员冤院圆猿 原 猿远
咱员苑暂摇 宰葬灶早 再袁 阅葬蚤 悦 悦袁 悦葬燥 允 蕴袁 载怎 阅 杂援 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣
枣怎灶早葬造 藻灶凿燥责澡赠贼藻 郧蚤造皂葬灶蚤藻造造葬 泽责援 葬灶凿 蚤贼泽 藻造蚤糟蚤贼燥则 燥灶 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽
造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 责造葬灶贼造藻贼泽咱允暂 援 宰燥则造凿 允燥怎则灶葬造 燥枣 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠
葬灶凿 月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园员圆袁 圆愿渊圆冤院 缘苑缘 原 缘愿源援
咱员愿暂摇 在澡葬燥 酝袁 宰葬灶早 匝袁 韵怎赠葬灶早 在袁 匀葬灶 月袁 宰葬灶早 宰袁 宰藻蚤 再袁 宰怎 再袁
再葬灶早 月援 杂藻造藻糟贼蚤增藻 枣则葬糟贼蚤燥灶 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 葬灶凿
蚤贼泽 早则燥憎贼澡 蚤灶澡蚤遭蚤贼燥则赠 藻枣枣藻糟贼 燥灶 澡怎皂葬灶 早葬泽贼则蚤糟 糟葬灶糟藻则 糟藻造造泽 咱 允 暂 援
悦赠贼燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园员源袁 远远渊圆冤院圆园员 原 圆园愿
咱员怨暂摇 程运江袁伊华林袁庞晓明袁郭文武袁邓秀新援 几种木本果树 阅晕粤
的有效提取咱允暂 援 华中农业大学学报袁 圆园园员袁 圆园渊缘冤院 源愿员 原 源愿猿
咱圆园暂摇 酝怎则则葬赠 酝 郧袁 栽澡燥皂责泽燥灶 宰 云援 砸葬责蚤凿 蚤泽燥造葬贼蚤燥灶 燥枣 澡蚤早澡 皂燥造藻糟怎造葬则
憎藻蚤早澡贼 责造葬灶贼 阅晕粤咱 允暂援 晕怎糟造藻蚤糟 粤糟蚤凿泽 砸藻泽藻葬则糟澡袁 员怨愿园袁 愿 渊员怨冤院
源猿圆员 原 源猿圆远
咱圆员暂摇 载蚤燥灶早 蕴 在袁 载怎 悦 郧袁 杂葬早澡葬蚤 酝 粤袁 在澡葬灶早 匝援 孕葬贼贼藻则灶泽 燥枣 糟赠贼燥泽蚤灶藻
皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶 葬灶 藻造蚤贼藻 则蚤糟藻 澡赠遭则蚤凿 葬灶凿 蚤贼泽 责葬则藻灶贼葬造 造蚤灶藻泽袁 凿藻贼藻糟贼藻凿 遭赠
葬 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶鄄泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂 贼藻糟澡灶蚤择怎藻 咱 允暂 援
酝燥造藻糟怎造葬则 葬灶凿 郧藻灶藻则葬造 郧藻灶藻贼蚤糟泽 酝郧郧袁 员怨怨怨袁 圆远员渊猿冤院 源猿怨 原 源源远
咱圆圆暂摇 悦藻则增藻则葬 酝 栽袁 砸怎蚤扎 郧 蕴袁 酝葬则贼蚤灶藻扎 在 允援 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶
蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 遭葬泽藻凿 燥灶 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶鄄泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 粤云蕴孕 皂葬则噪藻则泽
咱允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 郧藻灶燥皂蚤糟泽袁 圆园园圆袁 圆远愿渊源冤院 缘源猿 原 缘缘圆
咱圆猿暂摇 洪柳袁 邓秀新援 应用 酝杂粤孕 技术对脐橙品种进行 阅晕粤甲基化分
析咱允暂 援中国农业科学袁圆园园缘袁 猿愿渊员员冤院 圆猿园员 原 圆猿园苑
咱圆源暂摇 何艳霞袁 王子成袁 曹红平袁 张成婉援 光暗条件下大蒜 阅晕粤 甲基
化差异的初步研究咱 允暂 援 植物生理学通讯袁 圆园园苑袁 源猿渊员冤院 愿缘 原
愿愿
咱圆缘暂摇 杨岚袁 李红袁 向增旭援 二倍体和四倍体甜叶菊的 阅晕粤 甲基化差
异分析咱允暂 援 核农学报袁 圆园员猿袁 圆苑渊愿冤院 员员圆缘 原 员员猿园
咱圆远暂摇 边禹援 不同倍性多倍体枇杷基因组变异及其 阅晕粤 甲基化分析
咱阅暂援 重庆院 西南大学袁 圆园员园
咱圆苑暂摇 张晓申袁范国强袁邓敏捷袁董焱鹏援赵振利援 南方泡桐二倍体及其
同源四倍体 粤云蕴孕 和 酝杂粤孕 的差异咱 允暂 援 东北林业大学学报袁
圆园员源袁源圆渊圆冤院 源愿 原 缘员
咱圆愿暂摇 张晓申袁范国强袁赵振利袁曹喜兵袁赵改丽袁邓敏捷袁董焱鹏援 豫杂
一号泡桐二倍体及其同源四倍体的 粤云蕴孕和 酝杂粤孕分析咱 允暂 援林
业科学袁圆园员猿袁源怨渊员园冤院 员远愿 原 员苑员
咱圆怨暂摇 陶抵辉援 植物多倍体的研究与应用咱 允暂 援 生物技术通报袁 圆园员园袁
渊苑冤院 圆猿 原 圆苑
咱猿园暂摇 载怎 再 匀袁 在澡燥灶早 蕴袁 宰怎 载 酝袁 云葬灶早 载 孕袁 宰葬灶早 允 月援 砸葬责蚤凿
葬造贼藻则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 早藻灶藻藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬灶凿 糟赠贼燥泽蚤灶藻 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶 灶藻憎造赠
泽赠灶贼澡藻泽蚤扎藻凿 月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽 葬造造燥责燥造赠责造燥蚤凿泽 咱 允暂 援 孕造葬灶贼葬袁 圆园园怨袁 圆圆怨
渊猿冤院源苑员 原 源愿猿
咱猿员暂摇 载怎 再袁 在澡葬燥 匝袁 酝藻蚤 杂袁 宰葬灶早 允援 郧藻灶燥皂蚤糟 葬灶凿
贼则葬灶泽糟则蚤责贼燥皂蚤糟葬造贼藻则葬贼蚤燥灶泽 枣燥造造燥憎蚤灶早 澡赠遭则蚤凿蚤泽葬贼蚤燥灶 葬灶凿 早藻灶燥皂藻 凿燥怎遭造蚤灶早
蚤灶 贼则蚤早藻灶燥皂蚤糟 葬造造燥澡藻曾葬责造燥蚤凿 月则葬泽泽蚤糟葬 糟葬则蚤灶葬贼葬 伊 月则葬泽泽蚤糟葬则葬责葬 咱 允暂 援
孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 圆园员圆袁 员源渊缘冤院 苑猿源 原 苑源源
咱猿圆暂摇 郧葬藻贼葬 砸 栽袁 孕蚤则藻泽 允 悦袁 陨灶蚤早怎藻扎 蕴 云袁 蕴藻燥灶 耘袁 韵泽遭燥则灶 栽 悦援 郧藻灶燥皂蚤糟
糟澡葬灶早藻泽 蚤灶 则藻泽赠灶贼澡藻泽蚤扎藻凿 月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 藻枣枣藻糟贼 燥灶 早藻灶藻
藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬灶凿 责澡藻灶燥贼赠责藻 咱允暂 援 孕造葬灶贼 悦藻造造袁 圆园园苑袁员怨渊员员冤院 猿源园猿 原
猿源员苑
苑园缘员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员缘园圆 耀 员缘园愿
粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 蕴藻增藻造 葬灶凿 孕葬贼贼藻则灶 燥枣 郧藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤 葬灶凿 酝藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶
阅蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 粤怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤
阅悦援 遭赠 酝杂粤孕
宰粤晕郧 匀燥灶早躁怎葬灶员 摇 悦匀粤韵 允蚤葬灶早怎燥圆 摇 蕴陨 再葬贼蚤灶早员 摇 蕴陨 再蚤灶早泽澡怎燥员 摇 载陨粤晕郧 在藻灶早曾怎员
渊员 悦燥造造藻早藻 燥枣 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻袁 晕葬灶躁蚤灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 晕葬灶躁蚤灶早袁 允蚤葬灶早泽怎摇 圆员园园怨缘曰
圆 悦燥造造藻早藻 燥枣 孕澡葬则皂葬糟赠袁 晕葬灶躁蚤灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 悦澡蚤灶藻泽藻 酝藻凿蚤糟蚤灶藻袁 晕葬灶躁蚤灶早袁 允蚤葬灶早泽怎摇 圆员园园圆猿冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽燥 藻曾责造燥则藻 贼澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 蚤灶 藻责蚤早藻灶藻贼蚤糟 遭藻贼憎藻藻灶 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤
阅悦援 袁 阅蚤枣枣藻则藻灶贼 责造燥蚤凿赠 燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 憎藻则藻 怎泽藻凿 蚤灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠 葬灶凿 酝杂粤孕渊酝藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶鄄杂藻灶泽蚤贼蚤增藻
粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 孕燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂冤葬灶葬造赠泽蚤泽 憎葬泽 糟燥灶凿怎糟贼藻凿 贼燥 藻曾责造燥则藻 贼澡藻 造藻增藻造 葬灶凿 责葬贼贼藻则灶 燥枣 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 蚤灶 贼澡藻皂援 缘圆园
葬灶凿 缘圆苑 造燥糟蚤 憎藻则藻 凿藻贼藻糟贼藻凿 蚤灶 凿蚤责造燥蚤凿 葬灶凿 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 遭赠 圆园 责葬蚤则泽 燥枣 泽藻造藻糟贼蚤增藻 责则蚤皂藻则泽袁 葬灶凿 贼澡藻 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早 贼燥贼葬造
皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 憎藻则藻 缘远郾 怨圆豫 葬灶凿 缘缘郾 园猿豫 援 悦燥皂责葬则藻凿 憎蚤贼澡 凿蚤责造燥蚤凿袁 贼澡藻 早藻灶燥皂蚤糟 阅晕粤 贼燥贼葬造 皂藻贼澡赠造葬贼藻凿 则葬贼藻 葬灶凿 枣怎造造
皂藻贼澡赠造葬贼藻凿 则葬贼藻 燥枣 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿 憎藻则藻 凿藻糟则藻葬泽藻凿袁 遭怎贼 澡藻皂蚤皂藻贼澡赠造葬贼藻凿 则葬贼藻 憎葬泽 蚤灶糟则藻葬泽藻凿袁 葬灶凿 贼澡藻 阅晕粤 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶
责葬贼贼藻则灶泽 糟澡葬灶藻凿 遭赠 缘圆郾 缘猿豫 援 栽澡蚤泽 则藻泽藻葬则糟澡 造葬蚤凿 葬 枣燥怎灶凿葬贼蚤燥灶 枣燥则 贼澡藻 枣怎则贼澡藻则 泽贼怎凿赠 燥灶 藻责蚤早藻灶藻贼蚤糟 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 燥枣 贼藻贼则葬责造燥蚤凿
燥枣 粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 援
运藻赠憎燥则凿泽院粤贼则葬糟贼赠造燥凿藻泽 造葬灶糟藻葬 渊栽澡怎灶遭援 冤 阅悦援 袁 葬怎贼燥贼藻贼则葬责造燥蚤凿袁 藻责蚤早藻灶藻贼蚤糟袁 早藻灶燥皂藻袁 皂藻贼澡赠造葬贼蚤燥灶鄄泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂渊酝杂粤孕冤
愿园缘员