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Genetic Analysis and Molecular Mapping of Watermelon Anthrucnose Resistance Gene Rco-1

西瓜抗炭疽病的遗传分析和抗性基因定位研究


西瓜炭疽病(Anthracnose)是由瓜类炭疽病菌(Colletotrichumorbiculare)引起的真菌性病害。本研究以抗病自交系PI189225和感病自交系Black Diamond杂交并自交获得F1、F2、F3为材料,采用炭疽病菌生理小种1接种,对西瓜抗炭疽病生理小种1进行遗传规律分析和基因定位研究。研究结果表明,西瓜炭疽病抗性基因由显性单基因控制,抗病对感病为显性,将此基因命名为Rco-1。用分离群体分组分析法(BSA)和AFLP分子标记技术对PI189225中的抗炭疽病基因进行分子标记鉴定,并利用MAPMAKER/Exp version 3.0软件进行了标记与目的基因间的遗传距离计算,发现E4/M19、E1/M8、E29/M5与抗炭疽病基因Rco-1连锁,遗传距离分别为34.8、23.4、6.9cM。为采用分子标记辅助选育抗炭疽病西瓜新品种奠定了基础。


全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员源袁圆愿渊愿冤院员猿远缘 耀 员猿远怨允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园怨鄄园怨摇 接受日期院圆园员源鄄园猿鄄园苑
基金项目院浙江省农业科学院创新能力提升工程渊圆园员圆砸圆猿再园员耘园源冤袁国家自然科学基金项目渊猿员圆苑圆员愿愿冤袁浙江省科技计划项目渊圆园员员悦员圆园园员冤袁
浙江省重大科技专项渊圆园员圆悦员圆怨园猿 原 圆 原 员园冤
作者简介院牛晓伟袁男袁助理研究员袁主要从事西瓜抗病育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院曾蚤葬燥憎藻蚤鄄灶蚤怎岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院范敏袁男袁研究员袁主要从事西瓜抗病育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 枣葬灶皂蚤灶枣皂岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员源冤园愿鄄员猿远缘鄄园缘
西瓜抗炭疽病的遗传分析和抗性基因定位研究
牛晓伟员 摇 唐宁安圆 摇 范摇 敏员袁圆 摇 张跃建员 摇 寿伟松员 摇 赵小强员
渊员 浙江省农业科学院蔬菜研究所袁浙江 杭州摇 猿员园园圆员曰 圆浙江师范大学袁浙江 金华摇 猿圆员园园源冤
摘摇 要院西瓜炭疽病渊粤灶贼澡则葬糟灶燥泽藻冤是由瓜类炭疽病菌渊悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂燥则遭蚤糟怎造葬则藻冤引起的真菌性病害遥 本研
究以抗病自交系 孕陨员愿怨圆圆缘 和感病自交系 月造葬糟噪 阅蚤葬皂燥灶凿杂交并自交获得 云员尧云圆尧云猿 为材料袁采用炭疽病
菌生理小种 员 接种袁对西瓜抗炭疽病生理小种 员 进行遗传规律分析和基因定位研究遥 研究结果表明袁西
瓜炭疽病抗性基因由显性单基因控制袁抗病对感病为显性袁将此基因命名为 砸糟燥 原 员遥 用分离群体分组
分析法渊月杂粤冤和 粤云蕴孕 分子标记技术对 孕陨员愿怨圆圆缘 中的抗炭疽病基因进行分子标记鉴定袁并利用
酝粤孕酝粤运耘砸 辕 耘曾责 增藻则泽蚤燥灶 猿郾 园 软件进行了标记与目的基因间的遗传距离计算袁发现 耘源 辕 酝员怨尧耘员 辕 酝愿尧
耘圆怨 辕 酝缘 与抗炭疽病基因 砸糟燥 原员 连锁袁遗传距离分别为 猿源郾 愿尧圆猿郾 源尧远郾 怨糟酝遥 为采用分子标记辅助选育
抗炭疽病西瓜新品种奠定了基础遥
关键词院西瓜曰炭疽病曰抗性基因曰遗传分析曰基因定位曰分子标记
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员源郾 园愿援 员猿远缘
摇 摇 我国南方气候潮湿尧多雨袁炭疽病的危害时有发
生袁给西瓜生产带来巨大损失遥 随着近年来我国保护
地西瓜种植面积不断增加袁保护地潮湿温暖的环境为
西瓜炭疽病的发病提供了适宜的条件咱员暂 袁炭疽病已经
成为西瓜生产中最主要的病害之一遥 病原菌不但可侵
染植株的叶片尧茎蔓和果实等部位袁并且收获后在贮藏
和运输过程中引起果实大量腐烂咱圆 原 猿暂 遥 引发炭疽病的
病原菌渊悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂燥则遭蚤糟怎造葬则藻冤为葫芦科刺盘孢袁属
半知菌亚门黑盘孢目遥 目前瓜类炭疽病菌发现 苑 个生
理小种袁但生产中给西瓜造成危害的西瓜炭疽病菌主
要是生理小种 员尧圆 和 猿咱源 原 缘暂 遥
目前袁对此种病害的防治大多采用化学防治袁但化
学农药的长期使用将导致环境污染袁残毒积累曰杀死有
益微生物袁破坏植物体内微生物种群的平衡袁加速病害
发生曰病原菌抗药性增加等危害咱远暂 遥 因此袁防治炭疽
病最为有效的方法是培育抗性品种遥 我国国内西瓜抗
病育种起步于 圆园 世纪 愿园 年代中期袁建立了西瓜炭疽
病人工接种最佳技术规程咱苑 原 怨暂 袁为快速鉴定和利用抗
炭疽病材料选育新品种奠定了基础遥
目前袁西瓜炭疽病的研究主要集中在西瓜炭疽病
的分子检测袁接种前后的生理生化变化等方面咱员园 原 员员暂 遥
有关抗炭疽病基因的标记尧定位研究鲜见报道遥 随着
分子生物学技术的发展袁采用分子标记辅助选择可以
提高抗病育种的效率遥 因此袁本研究以抗病自交系
孕陨员愿怨圆圆缘咱缘暂 渊含抗炭疽病基因 砸糟燥 原 员冤和感病自交系
月造葬糟噪 阅蚤葬皂燥灶凿杂交并自交获得 云员尧云圆 和 云猿 为材料袁
采用炭疽病菌生理小种 员 接种袁对西瓜抗炭疽病基因
砸糟燥 原员 进行了遗传规律分析和基因定位研究遥 为采
用分子标记辅助选育抗炭疽病西瓜新品种奠定了基
础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
本试验所用材料为抗炭疽病西瓜自交系
孕陨员愿怨圆圆缘渊含抗炭疽病基因 砸糟燥 原 员冤和感病自交系
月造葬糟噪 阅蚤葬皂燥灶凿袁杂交 云员尧云员 自交获得 云圆 群体 圆源猿 个单
株遥 种子进行消毒催芽后袁直接播入育苗穴盘中遥 待
幼苗长出两片真叶时袁移栽到温室大棚中遥 云圆 自交得
到 云猿 株系袁取 员远 个单株用于抗病性鉴定遥
缘远猿员
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
圆园员员 原 圆园员猿 年于海宁科研基地温室大棚中完成
炭疽病接种遥
供试炭疽病菌为炭疽病生理小种 员袁由华东理工
大学王伟教授惠赠遥
员郾 圆摇 炭疽病苗期鉴定
幼苗生长到 缘 耀 远 片真叶时进行采用喷雾法进行
接种袁分生孢子浓度为 员郾 园 伊 员园远 泽责燥则藻窑皂蕴 原员遥 接种后
用小拱棚保湿袁相对湿度 怨缘豫以上袁员园凿后调查统计病
情遥
参照刘莉等咱苑暂的方法进行抗病分级袁采用加权平
均法计算病情指数遥
员郾 猿摇 抗病基因的分子标记
取 园郾 缘 耀 员郾 园早西瓜嫩叶片袁于液氮中研磨成粉末
状袁装入 圆郾 园皂蕴 的离心管中袁用 悦栽粤月 法提取 阅晕粤遥
选用 远源 伊 远源 对 粤云蕴孕 引物对亲本尧抗病池尧感病池及
云圆 群体进行扩增遥孕悦砸 反应程序院总反应体系为 圆园滋蕴 渊含 员园 伊
遭怎枣枣藻则 圆郾 园滋蕴袁圆 皂皂燥造窑蕴 原员 凿晕栽孕 员郾 缘滋蕴袁圆缘 皂皂燥造窑蕴 原员
酝早悦造圆 员郾 圆滋蕴袁员园滋皂燥造窑蕴 原员 猿忆和 缘忆引物各 员郾 园滋蕴袁猿园灶早窑
滋蕴 原员模板 阅晕粤 员郾 园滋蕴袁缘 哉窑滋蕴 原员 栽葬择 聚合酶 园郾 圆滋蕴袁
凿凿匀圆韵 员圆郾 员滋蕴冤遥 扩增反应在 孕栽悦 原 圆园园园 孕悦砸 仪中
进行遥 反应条件为院怨源益 缘皂蚤灶曰怨源益 猿园 泽袁远源益 猿园 泽袁
苑圆益远园 泽袁员猿 个循环渊每个循环退火温度降低 园郾 苑益冤曰
怨源益 猿园 泽袁缘远益 猿园 泽袁苑圆益远园 泽袁圆源 个循环袁苑圆益苑皂蚤灶遥
孕悦砸产物在 怨豫聚丙烯酰胺凝胶上电泳袁银染检测遥
取 云圆 单株中高抗渊匀砸冤员 株和随机选取抗病渊砸冤源 株尧中抗渊酝砸冤缘 株建立抗病池袁随机选取感病渊杂冤圆
株和高感渊匀砸冤愿 株建立感病池遥 根据在双亲及抗尧感
基因池间均具有多态性的 粤云蕴孕 标记袁在 云圆 分离群体
进行单株验证袁通过 酝粤孕酝粤运耘砸 辕 耘曾责 增藻则泽蚤燥灶 猿郾 园 作
图软件进行连锁分析袁用 运燥泽葬皂遭蚤 函数计算 粤云蕴孕 标
记与抗性基因间的遗传连锁距离遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 接种鉴定及遗传分析
西瓜炭疽病发病受环境影响较大袁直接通过 云圆 苗
期接种鉴定不能真实反映植株的抗病性遥 为此袁本试
验利用 云猿 株系的平均抗病指数来作为 云圆 植株的抗病
指数袁以减少环境的影响遥 抗性结果调查显示院抗病亲
本接种 圆 周后植株生长正常袁抗病指数为 猿圆郾 愿曰感病
亲本植株大部分发病袁抗病指数为 苑圆郾 苑渊图 员冤遥 云员 植
株生长正常袁无明显发病症状袁抗病指数为 圆愿郾 怨遥 对
云猿 植株的抗性调查结果进行统计袁根据病情指数对 云圆
进行抗性评价袁获得 云圆 单株抗感分布图如下渊图 圆冤遥云圆 植株间抗病性出现了明显的分离情况袁其中抗病员苑苑 株袁占总株数的 苑苑郾 愿豫 曰感病和高感植株 远远 株袁占
圆远郾 圆豫 遥 字圆 测验表明袁抗感分离比符合 猿颐 员袁达显著水
平渊 字圆 越 园郾 源源远 约 字圆园郾 园缘 越 猿郾 愿源冤 渊表 员冤遥 表明 孕陨员愿怨圆圆缘
对炭疽病生理小种 员 的抗性受显性单基因控制袁将该
基因暂时命名为 砸糟燥 原员遥
注院砸院抗病亲本袁感病亲本遥
晕燥贼藻院 砸院 孕陨员愿怨圆圆缘曰 杂院 月造葬糟噪 阅蚤葬皂燥灶凿
图 员摇 抗感亲本接种炭疽病生理小种 员 表型
云蚤早援 员摇 栽澡藻 凿蚤泽藻葬泽藻 泽赠皂责贼燥皂 燥枣 憎葬贼藻则皂藻造燥灶 责造葬灶贼泽 憎藻则藻
蚤灶燥糟怎造葬贼藻凿 憎蚤贼澡 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂燥则遭蚤糟怎造葬则藻则葬糟藻 员
图 圆摇 云圆 群体的抗病性分布
云蚤早援 圆摇 栽澡藻 凿蚤泽贼则蚤遭怎贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼
凿蚤泽藻葬泽藻 造藻增藻造泽 蚤灶 云圆 责燥责怎造葬贼蚤燥灶
圆郾 圆摇 多态性引物的筛选
以 远源 伊 远源 引物组合对亲本和所构建的抗病池和
感病池进行筛选袁从中筛选出 源猿 对有差异的引物遥 将
该引物进一步在 云圆 单株中进行验证袁最终获得 猿 对存
在明显差异的引物组合渊表 圆尧图 猿 原 缘冤遥
远远猿员
摇 愿 期 西瓜抗炭疽病的遗传分析和抗性基因定位研究
表 员摇 亲本及 云圆 单株对炭疽病生理小种 员 的反应
栽葬遭造藻 员摇 砸藻泽责燥灶泽藻 燥枣 责葬则藻灶贼泽 葬灶凿 云圆 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造泽 贼燥 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂燥则遭蚤糟怎造葬则藻 则葬糟藻 员
亲本和组合
孕葬则藻灶贼泽 葬灶凿
糟燥皂遭蚤灶葬贼蚤燥灶
世代
郧藻灶藻则葬贼蚤燥灶
株数
晕燥援 燥枣 责造葬灶贼泽
分离比
砸葬贼蚤燥 燥枣 泽藻早则藻早葬贼蚤燥灶 卡方检验 字圆 贼藻泽贼

砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻

杂怎泽糟藻责贼蚤遭蚤造蚤贼赠
实际比例
韵遭泽藻则增藻凿
理论比例
栽澡藻燥则藻贼蚤糟葬造 字圆 孕鄄增葬造怎藻
孕陨员愿怨圆圆缘 亲本 孕葬则藻灶贼 圆园 园 原 原 原 原
月造葬糟噪 阅蚤葬皂燥灶凿 亲本 孕葬则藻灶贼 园 圆园 原 原 原 原
孕陨员愿怨圆圆缘 辕 月造葬糟噪 阅蚤葬皂燥灶凿 云圆 员苑苑 远远 圆郾 苑院员 猿郾 园院员 园郾 源源远 猿郾 愿源
摇 摇 晕燥贼藻院 凿枣 越 员袁字圆园郾 园缘 越 猿郾 愿源援
表 圆摇 存在差异的引物组合
栽葬遭造藻 圆摇 杂藻择怎藻灶糟藻鄄泽责藻糟蚤枣蚤糟 责则蚤皂藻则 蚤灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠
引物名称
孕则蚤皂藻则 灶葬皂藻
正向引物序列渊缘忆 原 猿忆冤
云燥则憎葬则凿 泽藻择怎藻灶糟藻泽 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 渊缘忆 原 猿忆冤
反向引物序列渊缘忆 原 猿忆冤
砸藻增藻则泽藻 泽藻择怎藻灶糟藻泽 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 渊缘忆 原 猿忆冤
耘员 辕 酝愿 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤粤悦 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤悦粤郧
耘源 辕 酝员怨 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦粤悦悦 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤郧栽粤
耘圆怨 辕 酝缘 郧粤悦栽郧悦郧栽粤悦悦粤粤栽栽悦郧栽粤 郧粤栽郧粤郧栽悦悦栽郧粤郧栽粤粤粤栽栽
图 猿摇 引物组合 耘员 辕 酝愿 在部分 云圆 群体单株中的扩增图谱
云蚤早援 猿摇 栽澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 皂葬责 燥枣 粤云蕴孕 责则蚤皂藻则 耘员 辕 酝愿 蚤灶 云圆 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造泽
图 源摇 引物组合 耘源 辕 酝员怨 在部分 云圆 群体单株中的扩增图谱
云蚤早援 源摇 栽澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 皂葬责 燥枣 粤云蕴孕 责则蚤皂藻则 耘源 辕 酝员怨 蚤灶 云圆 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造泽
苑远猿员
核摇 农摇 学摇 报 圆愿 卷
图 缘摇 引物组合 耘圆怨 辕 酝缘 在部分 云圆 群体单株中的扩增图谱
云蚤早援 缘摇 栽澡藻 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 皂葬责 燥枣 粤云蕴孕 责则蚤皂藻则 耘圆怨 辕 酝缘 蚤灶 云圆 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造泽
圆郾 猿摇 抗病基因 砸糟燥 原员 的 粤云蕴孕标记与作图
利用获得的 猿 对 粤云蕴孕 引物组合对 云圆 群体单株
进行 孕悦砸 扩增银染检测和记录结果后袁 利用
酝葬责皂葬噪藻则猿郾 园 软件对数据进行连锁分析遥 耘圆怨 辕 酝缘 距
目的基因的遗传距离为 远郾 怨糟酝袁耘员 辕 酝愿 距目的基因的
遗传距离为 圆猿郾 源糟酝袁耘源 辕 酝员怨 距目的基因的遗传距离
为 猿源郾 愿糟酝遥 标记与基因在染色体上的位置关系为
耘源 辕 酝员怨 原 耘员 辕 酝愿 原 砸糟燥 原 员 原 耘圆怨 辕 酝缘 渊图 远冤袁其中
耘圆怨 辕 酝缘 与西瓜炭疽病抗性基因遗传距离小于 员园糟酝袁
可作为分子辅助选择的标记使用遥
图 远摇 抗炭疽病基因 砸糟燥鄄员 及其连锁的
粤云蕴孕标记连锁图
云蚤早援 远摇 郧藻灶藻贼蚤糟 造蚤灶噪葬早藻 皂葬责 燥枣 葬灶贼澡则葬糟葬灶燥泽藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻
早藻灶藻 砸糟燥鄄员 葬灶凿 贼澡藻 造蚤灶噪藻凿 粤云蕴孕 皂葬则噪藻则泽
猿摇 讨论
虽然瓜类炭疽病存在 苑 个生理小种袁但对西瓜造
成危害的主要是生理小种 员尧圆 和 猿遥 蕴葬赠贼燥灶 等咱员苑暂最早
对西瓜抗炭疽病进行了遗传分析袁通过 粤枣则蚤糟葬 愿 等咱员苑暂 尧
粤枣则蚤糟葬 怨 和 粤枣则蚤糟葬 员猿 三份抗病材料与感炭疽病的 陨燥憎葬
月藻造造藻及 陨燥憎葬 运蚤灶早杂交后袁用瓜类炭疽病菌接种幼苗袁
发现杂交 云员 表现抗病袁抗病对感病为显性袁云圆 及 云员 回
交结果表明抗性是受一对单因子控制的遥 随后袁
允藻灶噪蚤灶泽等咱源暂研究发现袁抗生理小种 员 的种质同时也抗
生理小种 猿袁但不抗生理小种 圆遥 已有的研究发现袁西
瓜对炭疽病生理小种 员 和 猿 的抗性主要是显性单基因
控制咱员圆 原 员源暂 遥 西瓜对炭疽病生理小种 圆 的抗性比较复
杂袁来自 孕陨圆怨怨猿苑怨 和 孕陨员愿怨圆圆缘 的抗性是显性单基因
控制袁而来自 砸猿园怨 的抗性并不是由 员 或 圆 个基因控
制咱员缘暂 遥 本研究选用抗性材料为 孕陨员愿怨圆圆缘 根据已有报
道对生理小种 员尧圆 和 猿 的抗性都为显性单基因控制遥
通过对其与感病材料 月造葬糟噪 阅蚤葬皂燥灶凿杂交后代 云圆 进行
分析后证实袁孕陨员愿怨圆圆缘 对生理小种 员 的抗性为显性单
基因控制遥
本研究通过连锁分析后获得了 孕陨员愿怨圆圆缘 中与炭
疽病抗性基因连锁的 猿 个标记袁其中袁耘圆怨 辕 酝缘 与 砸糟燥
原 员 的遗传距离为 远郾 怨 糟酝遥 该标记的获得可以加速抗
炭疽病西瓜新品种的育种进程遥 同时袁随着西瓜基因
组测序的完成咱员远暂 袁该标记的获得也为预测并克隆到该
基因提供了基础遥
源 结论
本研究证实抗病自交系 孕陨员愿怨圆圆缘 中抗炭疽病生
理小种 员 的抗性基因是由显性单基因控制袁抗病对感
病为显性袁将此基因命名为 砸糟燥 原 员遥 同时获得了 猿 个
粤云蕴孕标记 耘源 辕 酝员怨尧耘员 辕 酝愿尧耘圆怨 辕 酝缘 与抗炭疽病基因
砸糟燥 原员 连锁袁遗传距离分别为 猿源郾 愿尧圆猿郾 源尧远郾 怨 糟酝遥
参考文献院
咱 员 暂摇 张锋袁陈志杰袁张淑莲援 棚室西瓜炭疽病发生规律与综合防治措
愿远猿员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员源袁圆愿渊愿冤院员猿远缘 耀 员猿远怨
施咱允暂 援西北园艺袁 圆园园缘袁 猿渊圆冤院猿缘 原 猿远
咱 圆 暂 摇 刘贵臣袁隋玉芝援 西瓜炭疽病发病原因及防治咱 允暂 援 植物保护袁
圆园园猿袁渊怨冤院 圆愿
咱 猿 暂 摇 罗婷援西瓜苗期炭疽病抗性鉴定方法及其抗病机理研究咱阅暂援
杨凌院 西北农林科技大学 圆园园愿
咱 源 暂 摇 允藻灶噪蚤灶泽 杂 云袁 宰蚤灶泽贼藻葬凿 晕 晕袁 酝糟悦燥皂遭泽 悦 蕴援 孕葬贼澡燥早藻灶蚤糟 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶
燥枣 贼澡则藻藻 灶藻憎 葬灶凿 枣燥怎则 责则藻增蚤燥怎泽造赠 凿藻泽糟则蚤遭藻凿 则葬糟藻泽 燥枣
郧造燥皂藻则藻造造葬葬灶早怎造葬贼葬增葬则援 燥则遭蚤糟怎造葬则藻 咱 允 暂 援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻 砸藻责燥则贼藻则袁
员怨远源袁 源愿院远员怨 原 远圆猿
咱 缘 暂 摇 宰蚤灶泽贼藻葬凿 晕 晕袁 郧燥燥凿藻 酝 允袁 月葬则澡葬皂 宰 杂援 砸藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶 憎葬贼藻则皂藻造燥灶
贼燥 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂造葬早藻灶葬则蚤怎皂则葬糟藻 员袁 圆袁 葬灶凿 猿 咱 允暂 援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻
砸藻责燥则贼藻则袁 员怨缘怨袁 源猿院缘苑园 原 缘苑苑
咱 远 暂摇 蒋琳袁马承铸援 生物农药研究进展渊综述冤 咱 允暂 援 上海农业学报袁
圆园园园袁员远渊杂员冤院 苑猿 原 苑苑
咱 苑 暂 摇 刘莉袁王鸣援西瓜种质资源苗期对炭疽病抗性的研究咱允暂 援中国西
瓜甜瓜袁 员怨怨园袁 渊员冤院怨 原 员猿
咱 愿 暂 摇 文生仓袁王鸣援 西瓜炭疽病人工接种鉴定的新方法 原离体叶接
种和 粤阅评价法咱允暂 援 西北农业大学学报袁 员怨怨源袁 渊员冤院员苑 原 圆圆
咱 怨 暂 摇 崔召明袁陈泉生援 西瓜炭疽病苗期不同抗性鉴定方法的研究
咱允暂 援 安徽农学通报袁 圆园园怨袁 渊员缘冤院员猿缘 原 员猿远
咱员园暂摇 唐建辉袁王伟袁王源超援 西瓜炭疽病菌 悦燥造造藻贼燥贼则蚤糟澡怎皂燥则遭蚤糟怎造葬则藻 的
分子检测咱允暂 援 中国农业科学袁 圆园园远袁 猿怨渊员园冤院圆园圆愿 原 圆园猿缘
咱员员暂摇 罗婷袁张显袁魏永新援西瓜不同品种苗期人工接种炭疽病菌后的
生理生化变化咱允暂 援西北农林科技大学学报袁 圆园园怨袁 渊猿苑冤院 员猿园 原
员猿源
咱员圆暂摇 月葬则灶藻泽 宰 悦袁 耘责责泽 宰 酝援 栽憎燥 贼赠责藻泽 燥枣 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶
糟怎糟怎皂遭藻则泽咱允暂 援 孕造葬灶贼 阅蚤泽藻葬泽藻 砸藻责燥则贼藻则袁 员怨缘圆袁 猿远院源苑怨 原 源愿园
咱员猿暂摇 砸燥遭蚤灶泽燥灶 砸 宰袁 酝怎灶早藻则 匀 酝援 宰澡蚤贼葬噪藻则 栽 宰袁 月燥澡灶 郧 宰援 郧藻灶藻泽 燥枣
贼澡藻 悦怎糟怎则遭蚤贼葬糟藻葬藻咱允暂 援 匀燥则贼杂糟蚤藻灶糟藻袁 员怨苑远袁 员员渊远冤院缘远源 原 缘远愿
咱员源暂 摇 杂怎增葬灶责则葬噪燥则灶 运袁 晕燥则贼燥灶 允 阅援 陨灶澡藻则蚤贼葬灶糟藻 燥枣 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 贼燥 则葬糟藻 圆
葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 蚤灶 憎葬贼藻则皂藻造燥灶咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 贼澡藻 粤皂藻则蚤糟葬灶 杂燥糟蚤藻贼赠 枣燥则
匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁 员怨愿园袁 员园缘渊远冤院愿远圆 原 愿远缘
咱员缘暂摇 蕴燥增藻 杂 蕴袁 砸澡燥凿藻泽 月 月援 杂蚤灶早造藻 早藻灶藻 糟燥灶贼则燥造 燥枣 葬灶贼澡则葬糟灶燥泽藻 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻
蚤灶 悦蚤贼则怎造造怎泽钥 咱允暂 援 糟怎糟怎则遭蚤贼 早藻灶藻贼蚤糟泽 糟燥燥责藻则葬贼蚤增藻 则藻责燥则贼袁员怨愿愿袁员员院远源
原 远苑
咱员远暂摇 郧怎燥 杂 郧袁 在澡葬灶早 允 郧袁 杂怎灶 匀 匀袁 杂葬造泽藻 允袁 蕴怎糟葬泽 宰 允袁 在澡葬灶早 匀 再袁
在澡藻灶早 再袁 酝葬燥 蕴 再袁 砸藻灶 再袁 宰葬灶早 在 宰袁 酝蚤灶 允 酝袁 郧怎燥 载 杂袁 酝怎则葬贼
云袁 匀葬皂 月 运袁 在澡葬灶早袁 在 蕴袁 郧葬燥 杂袁 匀怎葬灶早 酝袁 载怎 再 酝袁 在澡燥灶早 杂 蕴袁
月燥皂遭葬则藻造赠 粤袁 酝怎藻造造藻则 蕴袁 在澡葬燥 匀袁 匀藻 匀 匝袁 在澡葬灶早 再袁 在澡葬灶早 在 匀袁
匀怎葬灶早 杂 宰袁 栽葬灶 栽袁 孕葬灶早 耘袁 蕴蚤灶 运袁 匀怎 匝袁 运怎葬灶早 匀 匀袁 晕蚤 孕 载袁
宰葬灶早 月袁 蕴蚤怎袁 允 郧袁 运燥怎 匝 匀袁 匀燥怎 宰 允袁 在燥怎 载 匀袁 允蚤葬灶早 允袁 郧燥灶早
郧 再袁 运造藻藻 运袁 杂糟澡燥燥枣 匀袁 匀怎葬灶早 再袁 匀怎 载 杂袁 阅燥灶早 杂 杂袁 蕴蚤葬灶早 阅 匝袁
宰葬灶早 允袁 宰怎 运袁 载蚤葬 再袁 在澡葬燥 载袁 在澡藻灶早 在 匝袁 载蚤灶早 酝袁 蕴蚤葬灶早袁 载
酝袁 匀怎葬灶早 月 匝袁 蕴增 栽袁 宰葬灶早 允 再袁 再蚤灶 再袁 再蚤 匀 孕袁 蕴蚤 砸 匝袁 宰怎 酝
在袁 蕴藻增蚤 粤袁 在澡葬灶早 载 孕袁 郧蚤燥增葬灶灶燥灶蚤 允袁 宰葬灶早 允袁 蕴蚤 再云袁 云藻蚤 在允袁 载怎
再援 栽澡藻 凿则葬枣贼 早藻灶燥皂藻 燥枣 憎葬贼藻则皂藻造燥灶 渊 悦蚤贼则怎造造怎泽 造葬灶葬贼怎泽 冤 葬灶凿
则藻泽藻择怎藻灶糟蚤灶早 燥枣 圆园 凿蚤增藻则泽藻 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶泽咱 允暂 援 晕葬贼怎则藻 早藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园员猿袁
源缘渊员冤院 缘员 原 缘愿
咱员苑暂 摇 郧怎灶藻则 晕袁 宰藻澡灶藻则 栽 悦援 郧藻灶藻 造蚤泽贼 枣燥则 憎葬贼藻则皂藻造燥灶 咱 允暂 援 悦怎糟怎则遭蚤贼
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