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ANALYSIS OF GENETIC DIVERSITY AND RELATIONSHIP OF Cymbidium kanran LINES USING SSR MARKERS

寒兰株系间遗传多样性和亲缘关系的SSR分子标记分析



全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员员袁圆缘渊远冤院员员猿缘 耀 员员源员允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员员鄄园远鄄圆员摇 接受日期院圆园员员鄄园怨鄄园缘
基金项目院浙江省科技面上科研农业项目渊圆园园愿悦猿圆园员远冤
作者简介院徐晓薇渊员怨苑怨鄄冤袁女袁浙江温州人袁硕士袁助理研究员袁研究方向为种子资源的开发及驯化遥 耘鄄皂葬蚤造院 曾怎曾憎圆员岳 员圆远郾 糟燥皂
通讯作者院江摇 南渊员怨愿员鄄冤袁女袁浙江嘉兴人袁博士袁助理研究员袁研究方向为分子系统学遥 耘鄄皂葬蚤造院蚤葬灶早灶葬灶岳 皂葬蚤造援 噪蚤遭援 葬糟援 糟灶
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员员冤园远鄄员员猿缘鄄园苑
寒兰株系间遗传多样性和亲缘关系
的 杂杂砸分子标记分析
徐晓薇员 摇 江摇 南员 摇 杨俊波圆 摇 杨燕萍员 摇 王丽芳员
渊员郾 浙江省亚热带作物研究所袁 浙江 温州摇 猿圆缘园园缘曰
圆郾 中国科学院昆明植物研究所西南种质资源库袁 云南 昆明摇 远缘园圆园源冤
摘摇 要院本研究筛选了从春兰和莲瓣兰中开发的 苑 个 杂杂砸位点的引物袁用于 猿苑 个寒兰株系的遗传多样性
和亲缘关系研究遥 研究结果表明袁苑 个 杂杂砸位点的引物在寒兰中均具有非常好的通用性袁而且每个位点
在不同的株系中具有特有等位基因袁特别是位点 悦杂杂砸园缘尧悦杂杂砸员员 和 员怨缘遥 株系具有的特有等位基因可
以用于株系鉴别遥 苑 个位点在寒兰株系间具有较高的遗传多样性袁这可能与长期的人工选育有关遥 基
于 晕藻蚤氏遗传距离的聚类和分支分析表明袁杂杂砸标记可以用于寒兰株系间亲缘关系的分析遥
关键词院寒兰曰杂杂砸标记曰遗传多样性曰株系鉴定
粤晕粤蕴再杂陨杂 韵云 郧耘晕耘栽陨悦 阅陨灾耘砸杂陨栽再 粤晕阅 砸耘蕴粤栽陨韵晕杂匀陨孕 韵云
悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 噪葬灶则葬灶 蕴陨晕耘杂 哉杂陨晕郧 杂杂砸 酝粤砸运耘砸杂
载哉 载蚤葬燥鄄憎藻蚤员 摇 允陨粤晕郧 晕葬灶员 摇 再粤晕郧 允怎灶鄄遭燥圆 摇 再粤晕郧 再葬灶鄄责蚤灶早员 摇 宰粤晕郧 蕴蚤鄄枣葬灶早员
渊员郾 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 杂怎遭贼则燥责蚤糟葬造 悦则燥责泽袁 在澡藻躁蚤葬灶早 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 宰藻灶扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿圆缘园园缘曰
圆郾 郧藻则皂责造葬泽皂 月葬灶噪 燥枣 宰蚤造凿 杂责藻糟蚤藻泽 蚤灶 杂燥怎贼澡憎藻泽贼藻则灶 悦澡蚤灶葬袁 运怎灶皂蚤灶早 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻
燥枣 月燥贼葬灶赠袁 运怎灶皂蚤灶早袁 再怎灶灶葬灶摇 远缘园圆园源冤
粤遭泽贼则葬糟贼院杂藻增藻灶 杂杂砸 皂葬噪藻则泽 凿藻增藻造燥责藻凿 枣则燥皂 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 早燥藻则蚤灶早蚤蚤 葬灶凿 悦援 贼燥则贼蚤泽藻责葬造怎皂 憎藻则藻 怎泽藻凿 贼燥 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻 早藻灶藻贼蚤糟
凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责 燥枣 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 噪葬灶则葬灶 造蚤灶藻泽援 栽澡藻 泽藻增藻灶 杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 澡葬凿 葬 责则燥皂蚤泽蚤灶早 贼则葬灶泽枣藻则葬遭蚤造蚤贼赠 葬灶凿
葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 贼燥 贼澡藻 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 噪葬灶则葬灶 造蚤灶藻泽援 耘葬糟澡 造燥糟怎泽 澡葬凿 泽责藻糟蚤枣蚤糟 葬造造藻造藻泽 蚤灶 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造蚤灶藻泽袁 藻泽责藻糟蚤葬造造赠 贼澡藻 造燥糟怎泽 燥枣
悦杂杂砸园缘尧悦杂杂砸员员 葬灶凿 员怨缘郾 栽澡藻 泽藻增藻灶 杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 则藻增藻葬造藻凿 糟燥灶泽蚤凿藻则葬遭造藻 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 枣则燥皂 猿苑 悦援 噪葬灶则葬灶 造蚤灶藻泽援 陨贼
皂蚤早澡贼 遭藻 则藻泽怎造贼藻凿 枣则燥皂 贼澡藻 造燥灶早贼蚤皂藻 葬则贼蚤枣蚤糟蚤葬造 遭则藻藻凿蚤灶早 葬灶凿 澡赠遭则蚤凿蚤扎葬贼蚤燥灶援 悦造怎泽贼藻则蚤灶早 葬灶凿 糟造葬凿蚤泽贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 怎泽蚤灶早 晕藻蚤爷 泽
早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 糟燥怎造凿 遭藻 怎泽藻枣怎造 枣燥则 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶葬造赠泽蚤泽 葬灶凿 增葬则蚤藻贼赠 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶援
运藻赠 憎燥则凿泽院悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 噪葬灶则葬灶 酝葬噪蚤灶燥曰 杂杂砸 皂葬则噪藻则曰 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠曰 造蚤灶藻泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
摇 摇 寒兰 渊 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 噪葬灶则葬灶 酝葬噪蚤灶燥冤 隶属于兰科
渊韵则糟澡蚤凿葬糟藻葬藻冤兰属渊悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 杂憎援 冤 咱员暂 袁它与春兰渊悦援
早燥藻则蚤灶早蚤蚤 渊 砸糟澡遭援 枣援 冤 砸糟澡遭援 枣援 冤尧 莲 瓣 兰 渊 悦援
贼燥则贼蚤泽藻责葬造怎皂 云怎噪怎赠葬皂葬冤尧惠兰 渊悦援 枣葬遭藻则蚤 砸燥造枣藻冤尧建兰
渊悦援 藻灶泽蚤枣燥造蚤怎皂 渊蕴援 冤 杂憎援 冤和墨兰渊悦援 泽蚤灶藻灶泽藻 渊 允葬糟噪泽援
藻曾 粤灶凿则藻憎泽冤 宰蚤造造凿援 冤被称为六大中国兰咱圆暂 遥 我国寒兰
资源较为丰富袁在我国南部各省均产袁在日本和韩国亦
有分布咱员暂 遥 寒兰具有极高的观赏价值和经济价值袁具
有唇瓣渊花冠下唇冤形态变异多样袁花色丰富袁且四季
开花和花期长等特点遥 在国内外袁对寒兰具有很高的
评价袁尤其在日本有野兰中之王冶的美誉咱猿暂 遥
中国兰的栽培已有 员园园园 多年的历史袁其中春兰和
缘猿员员
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
蕙兰的记载居多咱源暂 遥 虽然中国兰具有大量的栽培品
种袁但这些栽培品种是依靠长期野外采集或长期栽培
选育而来咱圆暂 遥 现在通过杂交育种获得的品种数量较
少袁或可靠的记载较少遥 近年来袁受中国兰热的影响袁
寒兰栽培品种数量急剧增加遥 然而袁传统上对寒兰栽
培品种的鉴定主要依赖于对花部形态性状特点的鉴
别袁这种方式必然会使寒兰栽培品种存在混淆遥 现有
研究表明袁阅晕粤分子标记可有效地对一些中国兰栽培
品种进行鉴定咱猿袁 缘 耀 员园暂 袁其中袁杂砸粤孕和 陨杂杂砸在寒兰中也
进行了应用袁并获得了较理想的分辨结果咱猿袁 远暂 遥
简单重复序列渊杂蚤皂责造藻 杂藻择怎藻灶糟藻 砸藻责藻葬贼袁杂杂砸冤袁也
称微卫星 阅晕粤渊酝蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻冤袁是以少数几个核苷酸
渊员 耀 远 个冤为重复单元的串联重复 阅晕粤序列咱员员暂 遥 杂杂砸
是一种中性和共显性的分子标记袁近年来在种间亲缘
关系分析尧遗传多样性分析尧群体遗传学分析等众多遗
传学领域中得到了广泛应用咱员员袁 员圆暂 遥 在兰属中袁研究者
以春兰为主袁开发了一些 杂杂砸 位点的引物咱员猿 耀 员缘暂 袁并利
用其对种间关系和遗传多样性进行了研究遥 本文采用
春兰咱员缘暂和莲瓣兰渊杨俊波等袁未发表数据冤中开发的
杂杂砸引物袁对 猿苑 个寒兰株系进行遗传多样性及亲缘关
系的鉴定遥 本研究的主要目的是检测春兰和莲瓣兰的
杂杂砸引物在寒兰中的通用性袁并揭示寒兰株系间的遗
传多样性和亲缘关系袁以期为以后寒兰的品种鉴定和
种质保存与开发提供基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 供试材料
本研究试材是从不同产地引种的 猿苑 个株系的寒
兰袁栽培在浙江亚热带作物研究所温室遥 所选株系涵
盖了寒兰中的青花尧青紫花尧紫花尧群色花和素心 缘 种
花色系列遥 猿苑 个株系的详细信息见表 员遥
员郾 圆摇 总 阅晕粤提取
将新鲜叶片材料渊约 员园园皂早冤剪碎后移入 圆皂造离心
管袁用液氮冷却后直接利用金属棒将其捣碎袁然后利用
栽蚤葬灶郧藻灶公司 阅晕粤 提取试剂盒渊阅晕粤泽藻糟怎则藻 孕造葬灶贼 运蚤贼袁
阅孕猿圆园冤提取总 阅晕粤遥 阅晕粤 质量利用 圆豫琼脂糖凝胶
渊加 耘月冤袁在 员 伊 栽粤耘缓冲液下进行电泳和检测遥
员郾 猿摇 杂杂砸位点扩增和条带分型
通过对春兰的 员缘 个位点咱员缘暂和莲瓣兰 员远 个位点
渊杨俊波等袁未发表数据冤共 猿员 对 杂杂砸 引物的筛选袁开
发出了在寒兰中通用性较好和有多态位性的 苑 个位点
的引物渊见表 圆冤遥 孕悦砸反应体系为 圆员滋造袁包括 员园滋造双
蒸水袁怨滋造 圆 伊 皂蚤曾 反应体系袁园郾 缘滋造 双向引物袁员滋造 模
板曰反应条件为院预扩增 员 伊 渊怨源益 猿皂蚤灶冤袁扩增 猿圆 伊
渊怨源益 源缘泽袁 缘源益 耀 缘远益 源园泽曰 苑圆益 员皂蚤灶冤和延展 员 伊
渊苑圆益 缘皂蚤灶冤遥 孕悦砸 产物利用 匝陨粤曾糟藻造 全自动电泳系
统渊匝蚤葬早藻灶 陨灶糟援 袁哉杂粤冤袁选择参数 韵酝苑园园鄄猿郾 缘泽 进行毛
细管 电 泳 分 型遥 电 泳 结 果 输 出 后 在 匝陨粤曾糟藻造
月蚤燥悦葬造糟怎造葬贼燥则进行片段长度读取和预处理袁然后将片
段长度数据输出到 耘曾糟藻造遥
员郾 源摇 数据分析
将 杂杂砸 数据在 耘曾糟藻造 中编辑为 郧藻灶粤造耘曾 远郾 源员咱员远暂
输入格式袁导入或打开该软件宏文件进行数据分析和
格式转换遥 利用该软件统计出每个位点的等位基因数
渊晕怎皂遭藻则 燥枣 葬造造藻造泽袁 晕粤 冤尧有效等位基因数 渊 耘枣枣藻糟贼蚤增藻灶怎皂遭藻则 燥枣 葬造造藻造藻泽袁 晕耘 冤尧 观 察 杂 合 度 渊 韵遭泽藻则增藻凿澡藻贼藻则燥扎赠早燥泽蚤贼赠袁 匀韵 冤尧 期 望 杂 合 度 渊 耘曾责藻糟贼藻凿澡藻贼藻则燥扎赠早燥泽蚤贼赠袁匀耘 冤 和 杂澡葬灶灶燥灶 信息指数 渊 杂澡灶灶燥灶爷 泽蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 蚤灶凿藻曾袁陨冤袁以及每个位点中具有特有等位基
因渊 孕则蚤增葬贼藻 葬造造藻造藻冤的株系数遥 同时袁将数据输入到
孕燥憎藻则酝葬则噪藻则 猿郾 圆缘咱员苑暂中袁计算 苑 个位点多态信息含量
渊孕燥造赠皂燥则责澡蚤糟 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 糟燥灶贼藻灶贼袁孕陨悦冤和株系间的 晕藻蚤
氏遗传距离渊晕藻蚤爷 泽 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻冤 咱员愿暂 遥 将 晕藻蚤 氏遗
传距离进行邻接法渊晕躁袁晕藻蚤早澡遭燥怎则蚤灶早鄄躁燥蚤灶贼蚤灶早冤和类平
均法渊哉孕郧酝粤袁怎灶憎藻蚤早澡贼藻凿 责葬蚤则 早则燥怎责 皂藻贼澡燥凿 葬则蚤贼澡皂藻贼蚤糟
葬增藻则葬早藻泽冤聚类分析袁比较株系之间的亲缘关系遥 株系
间的 晕藻蚤 氏遗传距离输入到 郧藻灶粤造耘曾 远郾 源员 进行主坐
标分析渊孕悦燥粤袁孕则蚤灶糟蚤责葬造 悦燥燥则凿蚤皂葬贼藻凿泽 粤灶葬造赠泽蚤泽冤遥 猿 个
主坐标的三维图输入到 杂孕杂杂 员猿郾 园渊杂孕杂杂 陨灶糟援 冤进行作
图遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 杂杂砸位点的扩增和遗传多样性
对寒兰的 孕悦砸扩增结果表明袁从春兰筛选出的 源
个 杂杂砸位点比从莲瓣兰筛选出的 猿 个位点的引物通
用性要好遥 春兰筛选出的 源 个位点只有位点 悦杂杂砸园怨
在 员 个株系渊悦运猿猿冤中扩增失败遥 从莲瓣兰中筛选出
的位点袁只有位点 员怨 能扩增出所有的株系袁而位点
陨陨陨耘园员 对 员 个株系渊悦运员缘冤袁陨陨陨耘园猿 对 缘 个株系渊悦运园苑尧
悦运圆员尧悦运圆猿尧悦运猿园 和 悦运猿圆冤无法进行扩增遥
数据分析结果表明渊表 圆冤袁单个位点的等位基因
数是 缘 耀 员愿 个袁平均值是 员员郾 缘苑曰有效等位基因数是
猿郾 员园 耀 员圆郾 怨圆袁平均值是 远郾 愿缘遥 位点 悦杂杂砸员员 的等位基
因数和有效等位基因数最多袁其次是位点 员怨缘曰等位基
因数最少的位点是 悦杂杂砸园源袁有效等位基因数最低的位
点是 陨陨陨耘园猿遥 观测杂合度和期望杂合度分别是 园郾 缘园 耀
远猿员员
摇 远 期 寒兰株系间遗传多样性和亲缘关系的 杂杂砸分子标记分析
表 员摇 猿苑 个株系数据信息及具体性状
栽葬遭造藻 员摇 孕澡藻灶燥贼赠责蚤糟 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 燥枣 悦援 噪葬灶则葬灶 造蚤灶藻泽
编号
晕燥援
株系
造蚤灶藻
主坐标
分析
孕悦燥粤
类平
均法
哉孕郧酝粤
邻接法
晕允
特有等
位基因
泽责藻糟蚤枣蚤糟
葬造造藻造藻
位点
造燥糟怎泽
叶形
造藻葬枣
泽澡葬责藻
花梗颜色
责藻凿怎灶糟造藻
糟燥造燥则
苞片颜色
遭则葬糟贼
糟燥造燥则
唇瓣特征
造葬遭藻造造怎皂
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽
颜色
糟燥造燥则
斑点
泽责燥贼
株系来源地
造蚤灶藻 燥则蚤早蚤灶
悦运园员 园怨鄄圆 陨陨 陨 陨葬 圆 蕴愿袁 蕴员怨缘 员 源 员 圆 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运园圆 园怨鄄猿 陨陨 陨陨 陨陨遭 源 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨悦园愿 猿 圆 源 员 圆 福建武夷山渊宰再杂冤
悦运园猿 园怨鄄缘 陨 陨陨 陨陨遭 远 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨悦园愿袁 陨陨陨耘园员袁陨陨陨耘园猿 员 圆 源 圆 员 浙江龙泉渊蕴匝冤
悦运园源 园怨鄄员 陨 陨陨 陨陨遭 缘 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨悦园愿袁 陨陨陨耘园员 员 源 源 圆 圆 浙江龙泉渊蕴匝冤
悦运园缘 园怨鄄员源 陨陨 陨 陨陨陨葬 猿 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 陨陨陨耘园员 猿 圆 源 猿 员 江西井岗山渊允郧杂冤
悦运园远 园怨鄄怨 陨 陨陨 陨陨遭 源 蕴愿袁 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 陨陨陨悦园愿 员 源 圆 圆 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运园苑 园怨鄄员猿 陨陨 陨 陨葬 猿 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源 员 圆 员 猿 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运园愿 园怨鄄圆园 陨陨 陨 陨陨葬 源 蕴愿袁 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 陨陨陨耘园员 猿 源 员 员 圆 福建武夷山渊宰再杂冤
悦运园怨 园怨鄄员愿 陨陨 陨 陨葬 猿 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源 员 源 员 猿 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运员园 园怨鄄员苑 陨陨 陨 陨陨遭 猿 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 陨陨陨耘园猿 猿 圆 员 猿 员 浙江云和渊再匀冤
悦运员员素心寒兰 陨陨 陨 陨陨葬 源 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 陨陨陨耘园员袁 陨陨陨耘园猿 圆 员 员 员 圆 浙江永嘉渊再允冤
悦运员圆 园怨鄄圆源 陨陨 陨 陨陨葬 缘 蕴愿袁 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园员 猿 圆 圆 圆 员 浙江龙泉渊蕴匝冤
悦运员猿 园怨鄄猿圆 陨 陨陨 陨陨遭 源 蕴愿袁 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 陨陨陨悦园愿 猿 源 源 圆 员 福建武夷山渊宰再杂冤
悦运员源 园怨鄄圆苑 陨 陨陨 陨陨遭 缘 蕴愿袁 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨悦园愿 员 圆 员 猿 圆 浙江龙泉渊蕴匝冤
悦运员缘 园怨鄄猿员 陨 陨陨 陨陨遭 圆 蕴员怨缘袁 陨陨陨悦园愿 员 源 源 圆 员 浙江云和渊再匀冤
悦运员远 园苑鄄猿源 陨陨 陨 陨陨陨遭 源 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园猿 圆 源 员 员 圆 福建武夷山渊宰再杂冤
悦运员苑 园怨鄄员圆 陨陨 陨 陨陨陨葬 圆 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园猿 员 源 员 圆 员 福建武夷山渊宰再杂冤
悦运员愿 园怨鄄源愿 陨陨 陨 陨陨陨葬 猿 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园猿 猿 源 员 圆 员 福建武夷山渊宰再杂冤
悦运员怨 园怨鄄远员 陨陨 陨 陨陨陨遭 源 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园员 员 圆 员 圆 员 不详渊钥冤
悦运圆园 园怨鄄源猿 陨陨 陨 陨陨陨遭 缘 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园员袁 陨陨陨耘园猿 猿 源 圆 圆 员 江西井岗山渊允郧杂冤
悦运圆员 园苑园员愿 陨陨 陨 陨陨陨遭 猿 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园猿 圆 员 猿 员 员 四川峨眉山渊耘酝杂冤
悦运圆圆 园怨鄄远园 陨陨 陨 陨陨陨葬 源 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园员 猿 圆 员 圆 圆 江西井岗山渊允郧杂冤
悦运圆猿 园怨鄄员园 陨陨 陨 陨陨葬 员 蕴员员 员 源 圆 圆 员 浙江丽水渊蕴杂冤
悦运圆源 园怨园员猿 陨陨 陨 陨陨葬 源 蕴愿袁 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源 猿 圆 员 圆 圆 不详
悦运圆缘 园怨鄄圆缘 陨陨 陨 陨遭 员 蕴圆缘源 猿 员 员 圆 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运圆远 园苑鄄圆员 陨 陨陨 陨陨遭 缘 蕴愿袁 蕴员员袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨悦园愿 员 猿 员 猿 圆 浙江龙泉渊蕴匝冤
悦运圆苑 园园源 陨 陨陨 陨陨遭 缘 蕴愿袁 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨悦园愿袁 陨陨陨耘园猿 源 员 员 圆 员 四川峨眉山渊耘酝杂冤
悦运圆愿 园苑鄄圆苑 陨陨 陨 陨遭 猿 蕴员怨缘袁 蕴圆缘源袁 陨陨陨耘园员 圆 源 源 员 员 浙江乐清渊再匝冤
悦运圆怨 园怨鄄源圆 陨陨 陨 陨陨陨遭 圆 蕴员员袁 蕴员怨缘 员 圆 员 猿 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运猿园 园怨鄄猿愿 陨陨 陨 陨遭 员 蕴圆缘源 猿 圆 圆 猿 员 福建武夷山渊宰再杂冤
悦运猿员 园怨园园愿 陨陨 陨 陨葬 员 陨陨陨悦园愿 员 圆 员 园 园 浙江永嘉渊再允冤
悦运猿圆 园怨园缘 陨陨 陨 陨陨陨遭 园 圆 圆 员 园 园 浙江永嘉渊再允冤
悦运猿猿 园怨鄄源怨 陨陨 陨 陨陨葬 园 猿 圆 员 圆 员 江西井岗山渊允郧杂冤
悦运猿源 园员员 陨陨 陨 陨陨陨葬 园 员 圆 员 员 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运猿缘 园怨园园远 陨陨 陨 陨葬 员 陨陨陨悦园愿 圆 员 圆 园 园 浙江永嘉渊再允冤
悦运猿远 园圆愿 陨陨 陨 陨葬 员 陨陨陨耘园员 员 员 员 员 员 浙江永嘉渊再允冤
悦运猿苑 园怨鄄圆愿 陨陨 陨 陨陨陨遭 园 猿 圆 员 员 员 福建武夷山渊宰再杂冤
注院叶形院员院细叶曰圆院中细叶曰猿院中阔叶曰源院阔叶遥 花梗颜色院员院绿梗曰圆院青梗曰猿院红梗曰源院紫梗遥 苞片颜色院员院绿色曰圆院橘黄色曰猿院红色曰源院紫色遥 唇瓣颜
色院园院缺失曰员院白色曰圆院淡青色曰猿院青色遥 唇瓣斑点渊有否紫红色冤院园院缺失曰员院有曰圆院无遥
晕燥贼藻院蕴藻葬枣 泽澡葬责藻院员院灶葬则则燥憎曰圆院皂藻凿蚤怎皂 灶葬则则燥憎曰猿院皂藻凿蚤怎皂 遭则燥葬凿曰源院遭则燥葬凿援 孕藻凿怎灶糟造藻 糟燥造燥则院员院早则藻藻灶曰圆院糟赠葬灶曰猿院则藻凿曰源院责怎则责造藻援 月则葬糟贼 糟燥造燥则院员院早则藻藻灶曰圆院燥则葬灶早藻曰猿院
则藻凿曰源院责怎则责造藻援 蕴葬遭藻造造怎皂 糟燥造燥则院园院皂蚤泽泽蚤灶早曰员院憎澡蚤贼藻曰圆院造蚤早澡贼 糟赠葬灶曰猿院糟赠葬灶援 蕴葬遭藻造造怎皂 憎蚤贼澡 燥则 憎蚤贼澡燥怎贼 责怎则责造藻鄄则藻凿 泽责燥贼院园院酝蚤泽泽蚤灶早曰员院泽责燥贼曰圆院灶燥 泽责燥贼援
苑猿员员
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
表 圆摇 筛选出的 苑 个 杂杂砸位点的基本信息和遗传多样性参数
栽葬遭造藻 圆摇 杂怎皂皂葬则赠 燥枣 造燥糟怎泽 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 责葬则葬皂藻贼藻则泽 枣燥则 泽藻增藻灶 杂杂砸 造燥糟蚤
位点
造燥糟怎泽
引物序列
责则蚤皂藻则 泽藻择怎藻灶糟藻
产物长度
泽蚤扎藻 渊遭责冤
样本数

等位
基因数
晕粤
有效等位
基因数
晕耘
观测
杂合度
匀韵
期望
杂合度
匀耘
杂澡葬灶燥灶
指数

多态信
息含量
孕陨悦
愿 渊悦杂杂砸园缘冤鄢 云院 葬葬葬葬 糟贼贼早 葬早早早 糟葬葬葬 糟葬砸院 葬贼糟葬 早糟早贼 早早早糟 葬糟葬贼 葬糟 员怨远鄄圆圆源 猿苑 员员 源郾 圆猿 园郾 远愿 园郾 苑远 员郾 愿远 园郾 苑源
员员 渊悦杂杂砸园怨冤鄢 云院 糟糟葬贼 糟贼糟葬 贼葬糟糟 糟葬糟糟 贼糟糟砸院 早贼葬葬 糟葬糟糟 葬糟早早 糟葬葬 葬贼 员源苑鄄员远苑 猿远 愿 缘郾 怨园 园郾 苑圆 园郾 愿猿 员郾 怨园 园郾 愿员
员怨泽覮 云院 早糟贼糟 贼早糟贼 糟葬贼贼 糟糟糟贼 糟贼砸院 早贼葬葬 糟糟葬葬 早葬葬贼 贼贼糟葬 葬糟葬贼 员苑怨鄄圆圆猿 猿苑 员愿 员员郾 园源 园郾 苑愿 园郾 怨员 圆郾 远圆 园郾 怨园
圆缘源 渊悦杂杂砸员员冤鄢 云院 葬葬糟糟 贼早早早 贼早早早 葬贼葬早 葬早砸院 葬早早早 葬贼早早 早贼贼葬 糟葬葬葬 早糟 员员怨鄄员缘猿 猿苑 员愿 员圆郾 怨圆 园郾 愿源 园郾 怨圆 圆郾 远怨 园郾 怨圆
陨陨陨悦园愿 渊悦杂杂砸园源冤鄢 云院 葬糟葬糟 早早葬贼 葬贼早贼 早葬葬早 糟葬砸院 早葬早早 早贼贼贼 早贼葬葬 葬早贼糟 糟贼葬糟 员缘缘鄄员远猿 猿苑 缘 猿郾 员源 园郾 愿源 园郾 远愿 员郾 猿员 园郾 远猿
陨陨陨耘园员覮 云院 贼葬葬贼 早早葬葬 贼早葬贼 早糟早贼 葬早砸院 糟葬早贼 葬葬贼贼 早早葬糟 糟糟贼葬 葬糟 圆园园鄄圆猿圆 猿圆 员园 苑郾 远员 园郾 缘远 园郾 愿苑 圆郾 员猿 园郾 愿缘
陨陨陨耘园猿覮 云院 葬早早早 贼早葬葬 早贼贼糟 贼糟葬贼 贼贼砸院 葬葬贼葬 早早早贼 早葬早贼 早早葬早 贼早 猿圆员鄄猿缘园 猿远 员员 猿郾 员园 园郾 缘园 园郾 远愿 员郾 缘怨 园郾 远缘
平均值 皂藻葬灶 渊杂耘冤 猿远渊园郾 远怨冤
员员郾 缘苑
渊员郾 愿源冤
远郾 愿缘
渊员郾 源苑冤
园郾 苑园
渊园郾 园缘冤
园郾 愿员
渊园郾 园源冤
圆郾 园员
渊园郾 员怨冤
园郾 苑怨
渊园郾 园源冤
注院鄢表示引物来自春兰曰覮表示引物来自莲瓣兰遥
晕燥贼藻院鄢袁 责则蚤皂藻则泽 憎藻则藻 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 悦赠皂凿蚤怎皂 早燥藻则蚤灶早蚤蚤 渊砸糟澡遭援 枣援 冤 砸糟澡遭援 枣援 渊匀怎葬灶早 藻贼 葬造援 圆园员员冤曰 覮袁 责则蚤皂藻则泽 憎藻则藻 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂 悦援 贼燥则贼蚤泽藻责葬造怎皂 云怎噪怎赠葬皂葬
渊再葬灶早 藻贼 葬造援 怎灶责怎遭造蚤泽澡藻凿冤 援
园郾 愿源渊园郾 苑园冤和 园郾 远愿 耀 园郾 怨圆渊园郾 愿员冤遥 观测杂合度最高
的位点是 悦杂杂砸园源 和 悦杂杂砸员员袁最低的位点是 陨陨陨耘园猿曰期
望杂合度最高的位点是 悦杂杂砸员员袁其次是位点 员怨缘袁最
低的位点是 悦杂杂砸园源 和 陨陨陨耘园猿遥 杂澡葬灶燥灶 信息指数和多
态信息含量分别是 员郾 猿员 耀 圆郾 远怨渊圆郾 园员冤和 园郾 远猿 耀 园郾 怨圆
渊园郾 苑怨冤袁两者的最高值都在位点 悦杂杂砸员员 处袁其次是位
点 员怨袁最低是位点 悦杂杂砸园源遥
圆郾 圆摇 株系特有的等位基因
在 猿苑 个株系中渊表 员冤袁只有 源 个株系 渊 悦运猿圆尧
悦运猿猿尧悦运猿源 和 悦运猿苑冤没有特有等位基因的位点袁其他
株系的特有等位基因数的范围是 员 耀 远 个袁且只有株系
悦运园猿 含有 远 个特有等位基因遥 单个位点拥有特有等
位基因的样本数为 怨 耀 圆远 个袁其中位点 员怨缘 具有特有
等位基因的样本数最多袁最少是位点 陨陨陨耘园猿遥
圆郾 猿摇 株系间的亲缘关系
株系间的 晕藻蚤 氏遗传距离有 缘园豫以上大于 园郾 苑袁
仅有 员郾 缘豫小于 园郾 源渊图 员冤遥 主坐标分析提取的第一
至第三坐标的累积变异百分率达到了 远员郾 猿愿豫 遥 第一
至第三坐标的贡献率分别为 圆源郾 怨源豫 尧 圆园郾 员猿豫 和
员猿郾 猿圆豫 遥 利用第一至第三坐标的聚类分析结果表明袁
猿苑 个株系明显地分成 圆 组渊图 圆冤遥 圆 组包含的株系很
不平衡袁分组 陨渊悦造怎泽贼藻则 陨冤只有 愿 个株系袁另外 圆怨 个株
系都属于分组域渊悦造怎泽贼藻则 陨陨冤遥 哉孕郧酝粤 分支树与主坐
标分析结果较为一致渊图 猿鄄粤冤遥 哉孕郧酝粤 分支树也分
成 圆 个分支袁分支 陨陨渊悦造葬凿藻 陨陨冤包含了 怨 个株系袁除了
株系 悦运园圆 外袁其他 愿 个株系和主坐标聚类中的分组
玉相同遥 实际上袁在主坐标分析中袁株系 悦运园圆 也是第
域组中较为异质的成员遥
图 员摇 晕藻蚤氏遗传距离的频率分布
云蚤早援 员摇 云则藻择怎藻灶糟赠 澡蚤泽贼燥早则葬皂 燥枣 晕藻蚤爷泽 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻
在邻接分支树中袁所有的株系形成了 猿 个主要分
支渊图 猿鄄月冤袁在主要分支上与主坐标分析和 哉孕郧酝粤
愿猿员员
摇 远 期 寒兰株系间遗传多样性和亲缘关系的 杂杂砸分子标记分析
图 圆摇 基于 晕藻蚤氏遗传距离主坐标分析得到第一至
第三坐标的寒兰株系聚类图
云蚤早援 圆摇 悦造怎泽贼藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 悦援 噪葬灶则葬灶 糟怎造贼蚤增葬则泽 怎泽蚤灶早
贼澡藻 枣蚤则泽贼 葬曾蚤泽 贼燥 贼澡藻 贼澡蚤则凿 葬曾蚤泽 燥枣 责则蚤灶糟蚤责葬造 糟燥燥则凿蚤皂葬贼藻凿泽
葬灶葬造赠泽蚤泽 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 晕藻蚤爷泽 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻
分支树结果差异较大遥 不过袁猿 种分析方法得到的结
果较为一致的是袁分支 陨陨 中的 陨陨遭 小分支几乎等同于
哉孕郧酝粤的分支 陨陨渊除了 悦运员园冤和主坐标中的分组玉
渊除了 悦运园圆 和 悦运园源冤遥 进一步对 哉孕郧酝粤 和邻接分
支树比较得出袁有 愿 个小分支在 圆 种分析中都得到了
支持渊图 猿冤遥
形态性状和株系来源地与分支树整体上不存在明
显的关联性袁但一些主要分支或小分支上的株系具有
一些共同的性状和渊或冤相同的来源地袁尤其 圆 种分析
都支持 愿 个小分支渊图 猿冤遥 如在 哉孕郧酝粤 分支树上袁
分支 陨葬的株系苞片都是绿色渊除 悦运园缘冤和唇瓣上都具
有紫红色的斑点渊除 悦运圆圆冤曰分支 陨糟 的株系都是来自
浙江永嘉曰分支 陨凿 的株系都是青色花梗和紫色苞片曰
分支 陨藻的株系都是淡青色唇瓣曰分支 陨枣的株系唇瓣上
都具有紫红色的斑点曰分支 陨陨葬 的株系唇瓣都是淡青
色且有紫红色斑点曰分支 陨陨糟 的株系都是细叶和引自
浙江温州渊乐清和永嘉冤遥 在邻接分支树上袁分支 陨 的
株系唇瓣都具有紫色红斑点渊悦运猿员 和 悦运猿缘 缺失冤和
引自浙江温州渊乐清和永嘉袁除 悦运猿园 来自福建武夷
山冤曰分支 陨陨陨葬 的株系唇瓣都具有紫色红斑点 渊除
悦运圆圆冤遥
猿摇 讨论
本研究筛选出的 苑 个 杂杂砸 位点袁有 缘 个位点的等
位基因数超过 员园 个袁以及期望杂合度和 杂澡葬灶燥灶 信息
指数等都表明株系间具有较高的遗传多样性遥 所研究
的寒兰株系间具有较高的遗传多样性可能与悠久的栽
培历史有关遥 由于研究的株系是从多个地方引种而
来袁而且株系繁殖主要利用营养体繁殖袁因此袁株系间
存在较长时间的基因流阻隔袁株系间已经发生了遗传
分化遥 株系间较大的 晕藻蚤 氏遗传距离也证明了这一
点遥 允蚤葬灶等咱远暂利用 耘砸粤孕阅 对寒兰研究也得到相似的
结果遥 同时袁在其他中国兰栽培品种之间也存在较大
的遗传分化咱苑袁 员猿暂 遥 这些结果表明袁人工选择育种是强
化了株系间的遗传分化袁但所得到的遗传多样性不能
等同于自然野生居群的遗传多样性遥
苑 个 杂杂砸位点有 远 个位点在 员园 个以上的株系中
拥有特有等位基因袁这也是人工长期选择育种所造成
的遥 株系的营养繁殖可保证特有等位基因的延续袁这
可用于株系的鉴别遥 基于现在的结果袁猿苑 个株系有
愿怨郾 员怨豫的株系可以利用单个或多个特有等位基因进
行株系鉴别遥 只联合利用位点 悦杂杂砸园缘尧悦杂杂砸员员 和
员怨缘 可以鉴别出 苑愿郾 猿愿豫的株系遥 另外袁株系的鉴别也
可以利用 杂杂砸 位点引物的通用性遥 如株系 悦运猿圆 和
悦运猿猿 缺乏特有等位基因袁同时位点 悦杂杂砸园怨 和 陨陨陨耘园猿
也无法进行扩增遥 根据现有的研究结果袁我们认为联
合或单独利用位点 悦杂杂砸园缘尧悦杂杂砸员员 和 员怨缘袁可以用于
鉴定株系的亲本来源和繁殖子代遥
基于 晕藻蚤氏遗传距离的聚类分析和分支分析的结
果表明袁亲缘关系近的株系聚在一起袁构成姐妹关系遥
由于分析方法是基于不同的模型袁邻接法与主坐标分
析方法和 哉孕郧酝粤法的结果之间差异较大遥 猿 种分析
方法都支持株系 悦运园猿尧 悦运园源尧 悦运园远尧 悦运员猿尧 悦运员源尧
悦运员缘尧悦运圆远 和 悦运圆苑 之间亲缘关系较近袁且 悦运园圆 和
渊或冤悦运员园 与它们之间也存在一定的亲缘关系遥 虽然
其他株系之间总体关系不太明确袁但有 愿 个小分支的
株系间亲缘关系在 哉孕郧酝粤和邻接分支树上可以被确
定遥 这些具有亲缘关系的株系在聚类图中聚集在一
起袁或分支树上两者处于末端分支中遥
整体上袁株系间的聚类与叶形尧花性状和来源地没
有明显关联性袁即相同的叶形尧花性状和来源地分散在
不同的分支渊组冤中遥 不过袁在 愿 个小分支和其他支持
的分支中袁发现同一分支的株系具有相同的叶形尧花性
怨猿员员
核摇 农摇 学摇 报 圆缘 卷
图 猿摇 基于 晕藻蚤氏遗传距离的寒兰株系 哉孕郧酝粤树渊粤冤和邻接树渊月冤
云蚤早援 猿摇 哉孕郧酝粤 贼则藻藻 渊粤冤 葬灶凿 晕藻蚤早澡遭燥怎则蚤灶早鄄躁燥蚤灶贼蚤灶早 贼则藻藻 渊月冤 燥枣 悦援 噪葬灶则葬灶
造蚤灶藻泽 遭葬泽藻凿 燥灶 贼澡藻 晕藻蚤爷泽 早藻灶藻贼蚤糟 凿蚤泽贼葬灶糟藻
株系名称后面的 缘 个数字和大写字母依次指代叶形尧花梗颜色尧苞片颜色尧唇瓣颜色与唇瓣上斑点类型和产地缩写渊野钥冶表示产地不
详冤袁详细信息见表 员遥 同一分支共享的性状或来自相同渊或邻近冤产地用方框进行标示遥 分枝上标注的黑色实心圈是指 哉孕郧酝粤 树和
邻接树都得到支持曰圈中的数字表示相同的分支遥
栽澡藻 枣蚤增藻 泽藻则蚤藻泽 灶怎皂遭藻则泽 葬灶凿 糟葬责蚤贼葬造 造藻贼贼藻则泽 葬枣贼藻则 贼澡藻 造蚤灶藻 灶葬皂藻 则藻责则藻泽藻灶贼 蚤贼泽 造藻葬枣 泽澡葬责藻袁 责藻凿怎糟造藻 糟燥造燥则袁 遭则葬糟贼 糟燥造燥则袁 造葬遭藻造造怎皂 糟燥造燥则 葬灶凿 憎蚤贼澡 燥则
憎蚤贼澡燥怎贼 责怎则责造藻鄄则藻凿 泽责燥贼袁 葬灶凿 葬遭遭则藻增蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 造蚤灶藻 燥则蚤早蚤灶 渊寓 钥寓 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 怎灶噪灶燥憎灶冤袁 则藻责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 凿藻贼葬蚤造 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 蚤泽 造蚤泽贼藻凿 蚤灶 栽葬遭造藻 员郾 栽澡藻
遭造葬糟噪 糟蚤则糟造藻 燥灶 贼澡藻 遭则葬灶糟澡 蚤灶凿蚤糟葬贼藻泽 贼澡葬贼 贼澡藻 糟造葬凿藻 蚤泽 憎藻造造鄄泽怎责责燥则贼藻凿 怎泽蚤灶早 哉孕郧酝粤 葬灶凿 晕藻蚤早澡遭燥怎则蚤灶早鄄躁燥蚤灶贼蚤灶早 葬灶葬造赠泽藻泽袁 葬灶凿 贼澡藻 泽葬皂藻 灶怎皂遭藻则 蚤灶
贼澡藻 糟蚤则糟造藻 燥灶 遭燥贼澡 贼则藻藻泽 则藻责则藻泽藻灶贼泽 贼澡藻 泽葬皂藻 糟造葬凿藻援
状或来源地遥 相同或邻近来源地的所有株系不能聚在
一支袁一方面暗示现在的来源地可能并不是其原生地袁
另一方面袁暗示株系在人工选择和栽培过程中具有较
大的流动性渊如异地采集尧买卖尧赠送等冤遥 由于株系
选育过程非常重视花性状袁因此叶形并没有体现出较
好的鉴别性袁而且叶形也存在变异性遥 相比而言袁观赏
园源员员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员员袁圆缘渊远冤院员员猿缘 耀 员员源员
性状苞片颜色尧唇瓣颜色或唇瓣上的斑点是一些主要
分支或小分支上株系的共同性状遥 因此袁株系的鉴别
渊和品种鉴定冤依据花部性状是可行的袁但需要综合考
虑多个性状遥
本研究是首次将 杂杂砸 标记用于寒兰的遗传多样
性和亲缘关系的研究遥 结果表明袁从春兰和莲瓣兰中
筛选出的 杂杂砸 位点引物在寒兰中具有非常好的通用
性袁这是因为寒兰与春兰和莲瓣兰之间的亲缘关系较
近咱怨袁 员园袁 员怨暂 遥 在本研究检测的 苑 个位点中袁 位点
悦杂杂砸园缘尧悦杂杂砸员员 和 员怨缘 不仅通用性好袁而且也可以用
于株系的鉴别遥 虽然现有的数据不能完全解决株系间
的亲缘关系袁但 杂杂砸标记对于株系间亲缘关系的研究
具有非常好的前景遥 在已有引物信息的前提下袁杂杂砸
分子标记不仅试验过程简单渊常规 孕悦砸产物可直接检
测冤袁而且数据准确性高袁可重复性强遥 即便是采用毛
细管电泳分型袁其成本也不高遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 蕴蚤怎 在 允袁 悦澡藻灶 载 匝袁 悦则蚤遭遭 孕 允援 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 杂憎葬则贼扎 渊韵则糟澡蚤凿葬糟藻葬藻冤 援
陨灶 云造燥则葬 燥枣 悦澡蚤灶葬 咱 酝暂 郾 月藻蚤躁蚤灶早 驭 杂贼援 蕴燥怎蚤泽院 杂糟蚤藻灶糟藻 孕则藻泽泽 驭
酝蚤泽泽燥怎则蚤 月燥贼葬灶蚤糟葬造 郧则葬则凿藻灶袁 圆园园怨院圆远园 原 圆愿园
咱 圆 暂 摇 刘仲建袁 陈心启袁 茹正忠援 中国兰属植物咱酝暂援 北京院 科学出版
社袁圆园园远院 圆猿愿 原 圆远怨
咱 猿 暂摇 蹇摇 黎袁 朱利泉援 寒兰品种类型的 杂砸粤孕分子鉴定咱 允暂 援 中国农
业科学袁 圆园员园袁 源猿渊员缘冤院 猿员愿源 原 猿员怨园
咱 源 暂 摇 陈心启援 中国兰史考辨要要要自春秋至宋朝咱允暂 援 武汉植物研究袁
员怨愿愿袁 远院 苑怨 原 愿猿
咱 缘 暂 摇 悦澡燥蚤 杂 匀袁 运蚤皂 酝 允袁 蕴藻藻 允 杂袁 砸赠怎 运 匀援 郧藻灶藻贼蚤糟 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿
责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 葬皂燥灶早 葬灶凿 憎蚤贼澡蚤灶 泽责藻糟蚤藻泽 燥枣 燥则蚤藻灶贼葬造
糟赠皂遭蚤凿蚤怎皂泽 遭葬泽藻凿 燥灶 砸粤孕阅 葬灶葬造赠泽蚤泽 咱 允暂 援 杂糟蚤藻灶贼蚤葬 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则葬藻袁
圆园园远袁 员园愿渊员冤院 苑怨 原 愿缘
咱 远 暂 摇 允蚤葬灶 蕴袁 在澡葬灶早 再 在袁 再怎 阅 云袁 在澡怎 蕴 匝援 酝燥造藻糟怎造葬则 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣
悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 噪葬灶则葬灶 糟怎造贼蚤增葬则泽 遭葬泽藻凿 燥灶 藻曾贼藻灶凿藻凿 则葬灶凿燥皂 葬皂责造蚤枣蚤藻凿
责燥造赠皂燥则责澡蚤糟 阅晕粤 渊 耘砸粤孕阅冤 皂葬则噪藻则泽 咱 允 暂 援 粤枣则蚤糟葬灶 允燥怎则灶葬造 燥枣
月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园员园袁 怨渊猿圆冤院 缘园愿源 原 缘园愿怨
咱 苑 暂 摇 宰葬灶早 匀 在袁 宰怎 在 载袁 蕴怎 允 允袁 杂澡蚤 晕 晕袁 在澡葬燥 再袁 在澡葬灶早 在 栽袁 蕴蚤怎 允
允援 酝燥造藻糟怎造葬则 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 葬皂燥灶早 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 早燥藻则蚤灶早蚤蚤
糟怎造贼蚤增葬则泽 遭葬泽藻凿 燥灶 蚤灶贼藻则鄄泽蚤皂责造藻 泽藻择怎藻灶糟藻 则藻责藻葬贼 渊 陨杂杂砸冤 皂葬则噪藻则泽
咱允暂 援 郧藻灶藻贼蚤糟葬袁 圆园园怨袁 员猿远渊猿冤院 猿怨员 原 猿怨怨
咱 愿 暂摇 朱根发袁 李冬梅袁 郭振飞援 大花蕙兰遗传多样性及亲缘关系的
粤云蕴孕分析咱允暂 援 园艺学报袁 圆园园苑袁 猿源渊圆冤院 源员苑 原 源圆源
咱 怨 暂摇 吴振兴袁 王慧中袁 施农农袁 赵 摇 艳援 兰属 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 植物 陨杂杂砸
遗传多样性分析咱允暂 援 遗传袁 圆园园愿袁 猿园渊缘冤院 远圆苑 原 远猿圆
咱员园暂摇 文摇 李袁 叶庆生袁 王小菁袁 潘瑞炽援 利用 砸粤孕阅 技术分析兰属
渊悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂冤品种间的亲缘关系咱 允暂 援 应用与环境生物学报袁
圆园园员袁 苑渊员冤院 圆怨 原 猿圆
咱员员暂摇 云则藻藻造葬灶凿 允 砸援 酝燥造藻糟怎造葬则 藻糟燥造燥早赠咱酝暂援 悦澡蚤糟澡藻泽贼藻则院 允燥澡灶 宰蚤造藻赠 驭
杂燥灶泽援 圆园园缘院
咱员圆暂摇 蕴燥憎藻 粤袁 匀葬则则蚤泽 杂袁 粤泽澡贼燥灶 孕援 耘糟燥造燥早蚤糟葬造 早藻灶藻贼蚤糟泽院 凿藻泽蚤早灶袁 葬灶葬造赠泽蚤泽袁
葬灶凿 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶咱酝暂援 酝葬造凿藻灶院 月造葬糟噪憎藻造造 孕怎遭造蚤泽澡蚤灶早袁 圆园园源
咱员猿暂摇 匀怎葬灶早 再袁 蕴蚤 云袁 悦澡藻灶 运 杂援 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 葬灶凿 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽
葬皂燥灶早 悦澡蚤灶藻泽藻 燥则糟澡蚤凿 糟怎造贼蚤增葬则泽 怎泽蚤灶早 耘杂栽鄄杂杂砸 皂葬则噪藻则泽 咱 允 暂 援
月蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 杂赠泽贼藻皂葬贼蚤糟泽 葬灶凿 耘糟燥造燥早赠袁 圆园员园袁 猿愿渊员冤院 怨猿 原 员园圆
咱员源暂摇 酝燥藻 运 栽袁 在澡葬燥 宰 郧袁 杂燥灶早 匀 杂袁 运蚤皂 再 匀袁 悦澡怎灶早 允 宰袁 悦澡燥 再 陨袁
孕葬则噪 孕 匀袁 孕葬则噪 匀鄄杂袁 悦澡葬藻 杂鄄悦袁 孕葬则噪 再鄄允援 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 杂杂砸
皂葬则噪藻则泽 贼燥 泽贼怎凿赠 凿蚤增藻则泽蚤贼赠 蚤灶 贼澡藻 早藻灶怎泽 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂咱允暂 援 月蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造
杂赠泽贼藻皂葬贼蚤糟泽 葬灶凿 耘糟燥造燥早赠袁 圆园员园袁 猿愿渊源冤院 缘愿缘 原 缘怨源
咱员缘暂摇 匀怎葬灶早 允 蕴袁 在藻灶早 悦 载袁 蕴蚤 匀 栽袁 再葬灶早 允 月援 陨泽燥造葬贼蚤燥灶 葬灶凿
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 员缘 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 皂葬则噪藻则泽 枣则燥皂 贼澡藻 泽责则蚤灶早 燥则糟澡蚤凿
渊悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂 早燥藻则蚤灶早蚤蚤冤 渊 韵则糟澡蚤凿葬糟藻葬藻冤 咱 允暂 援 粤皂藻则蚤糟葬灶 允燥怎则灶葬造 燥枣
月燥贼葬灶赠袁 圆园员员袁 怨愿渊源冤院苑远 原 苑苑
咱员远暂摇 孕藻葬噪葬造造 砸袁 杂皂燥怎泽藻 孕 耘援 郧耘晕粤蕴耘载 远院 早藻灶藻贼蚤糟 葬灶葬造赠泽蚤泽 蚤灶 耘曾糟藻造援
孕燥责怎造葬贼蚤燥灶 早藻灶藻贼蚤糟 泽燥枣贼憎葬则藻 枣燥则 贼藻葬糟澡蚤灶早 葬灶凿 则藻泽藻葬则糟澡咱允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则
耘糟燥造燥早赠 晕燥贼藻泽袁 圆园园远袁 远渊员冤院 圆愿愿 原 圆怨缘
咱员苑暂摇 蕴蚤怎 运 允袁 酝怎泽藻 杂 灾援 孕燥憎藻则酝葬则噪藻则院 葬灶 蚤灶贼藻早则葬贼藻凿 葬灶葬造赠泽蚤泽
藻灶增蚤则燥灶皂藻灶贼 枣燥则 早藻灶藻贼蚤糟 皂葬则噪藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽咱 允暂 援 月蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽袁 圆园园缘袁
圆员渊怨冤院 圆员圆愿 原 圆员圆怨
咱员愿暂摇 晕藻蚤 酝袁 栽葬躁蚤皂葬 云袁 栽葬贼藻灶燥 再援 粤糟糟怎则葬糟赠 燥枣 藻泽贼蚤皂葬贼藻凿 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟
贼则藻藻泽 枣则燥皂 皂燥造藻糟怎造葬则 凿葬贼葬 陨陨援 早藻灶藻鄄枣则藻择怎藻灶糟赠 凿葬贼葬 咱 允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣
酝燥造藻糟怎造葬则 耘增燥造怎贼蚤燥灶袁 员怨愿猿袁 员怨渊圆冤院 员缘猿 原 员苑园
咱员怨暂摇 在澡葬灶早 酝 再袁 杂怎灶 悦 再袁 匀葬燥 郧袁 再藻 载 蕴袁 蕴蚤葬灶早 悦 再袁 在澡怎 郧 匀援 粤
责则藻造蚤皂蚤灶葬则赠 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 责澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 则藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责泽 蚤灶 悦赠皂遭蚤凿蚤怎皂
渊韵则糟澡蚤凿葬糟藻葬藻冤 遭葬泽藻凿 燥灶 灶则陨栽杂 泽藻择怎藻灶糟藻咱允暂 援 粤糟贼葬 月燥贼葬灶蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁
圆园园圆袁 源源渊缘冤院 缘愿愿 原 缘怨圆
渊责任编辑摇 王媛媛冤
员源员员