全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊猿冤院园源远员 耀 园源远缘允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园猿鄄园源远员鄄园缘
大叶铁线莲四倍体的诱导及初步鉴定
董摇 娟员 摇 杨摇 娜员 摇 吴玉香圆 摇 赵晓明圆
渊员援 山西农业大学研究生院袁山西 太谷摇 园猿园愿园员曰 圆援 山西农业大学农学院袁山西 太谷摇 园猿园愿园员冤
摘摇 要院以毛茛科铁线莲属植物大叶铁线莲为试验材料袁采用初生分生组织处理法用 园援 圆豫秋水仙碱溶
胶诱导大叶铁线莲顶芽以期获得多倍体遥 本研究探讨了秋水仙碱诱导大叶铁线莲的最佳处理时间袁并
对所得的诱变株进行形态学和细胞遗传学鉴定遥 结果表明院园援 圆豫秋水仙碱诱导多倍体最佳时间为
源愿澡袁诱导率可高达 愿园豫 遥 形态学方面袁所得变异株与对照株叶片相比袁叶片加长尧加宽尧增厚袁叶形指数
变小遥 变异株的叶片下表皮气孔明显大于对照袁而气孔密度明显小于对照曰保卫细胞中的叶绿体数目明
显高于其二倍体对照曰杂孕粤阅值表明叶绿素含量也有明显增加遥 根尖有丝分裂细胞学鉴定结果表明院对
照株的染色体数目均为 员远渊圆灶 越圆曾冤袁而变异株的染色体数为 猿圆渊圆灶 越源曾冤袁由此表明本研究通过秋水仙
碱诱导大叶铁线莲成功获得四倍体遥
关键词院大叶铁线莲曰 初生分生组织处理法曰 秋水仙碱曰 细胞学鉴定
栽耘栽砸粤孕蕴韵陨阅 陨晕阅哉悦栽陨韵晕 粤晕阅 悦再栽韵蕴韵郧再 陨阅耘晕栽陨云陨悦粤栽陨韵晕 韵云 悦造藻皂葬贼蚤泽 澡藻则葬糟造藻蚤枣燥造蚤葬
阅韵晕郧 允怎葬灶员 摇 再粤晕郧 晕葬员 摇 宰哉 再怎鄄曾蚤葬灶早圆 摇 在匀粤韵 载蚤葬燥鄄皂蚤灶早 圆
渊员援 悦燥造造藻早藻 燥枣 郧则葬凿怎葬贼藻袁 杂澡葬灶曾蚤 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 栽葬蚤早怎袁 杂澡葬灶曾蚤摇 园猿园愿园员曰
圆援 悦燥造造藻早藻 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻袁 杂澡葬灶曾蚤 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 栽葬蚤早怎袁 杂澡葬灶曾蚤摇 园猿园愿园员冤
粤遭泽贼则葬糟贼院悦造藻皂葬贼蚤泽 澡藻则葬糟造藻蚤枣燥造蚤葬 蚤泽 葬灶 蚤皂责燥则贼葬灶贼 皂藻凿蚤糟蚤灶葬造 责造葬灶贼 蚤灶 悦澡蚤灶葬援 月赠 葬责蚤糟葬造 皂藻则蚤泽贼藻皂 皂藻贼澡燥凿袁 园援 圆豫 糟燥造糟澡蚤糟蚤灶藻
泽藻皂蚤鄄泽燥造早藻造 憎葬泽 怎泽藻凿 贼燥 蚤灶凿怎糟藻 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 悦造藻皂葬贼蚤泽 澡藻则葬糟造藻蚤枣燥造蚤葬援 陨灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠 憎藻 泽藻贼 怎责 圆源澡袁 源愿澡 葬灶凿 苑圆澡 贼燥 泽藻造藻糟贼 贼澡藻
遭藻泽贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼 贼蚤皂藻袁 葬灶凿 皂燥则责澡燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 糟赠贼燥造燥早蚤糟葬造 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶泽 憎藻则藻 糟燥灶凿怎糟贼藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 源愿澡 燥枣
贼澡藻 贼则藻葬贼皂藻灶贼 责藻则蚤燥凿 早葬增藻 贼澡藻 澡蚤早澡藻泽贼 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 怎责 贼燥 愿园豫 援 蕴藻葬枣 燥枣 增葬则蚤葬贼蚤燥灶泽 憎葬泽 造燥灶早藻则袁 憎蚤凿藻则袁 贼澡蚤糟噪藻则袁 葬灶凿
泽澡燥憎藻凿 泽皂葬造造藻则 造藻葬枣 蚤灶凿藻曾 贼澡葬灶 贼澡葬贼 燥枣 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造援 栽澡藻 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 燥枣 泽贼燥皂葬贼葬 泽蚤扎藻 葬灶凿 泽贼燥皂葬贼葬 凿藻灶泽蚤贼赠 蚤灶 贼澡藻 葬遭葬曾蚤葬造
藻责蚤凿藻则皂蚤泽 燥枣 造藻葬枣 遭藻贼憎藻藻灶 增葬则蚤葬贼蚤燥灶泽 葬灶凿 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 憎藻则藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼援 悦澡造燥则燥责造葬泽贼 灶怎皂遭藻则 蚤灶 早怎葬则凿 糟藻造造泽 葬灶凿 糟澡造燥则燥责澡赠造造
糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 增葬则蚤葬贼蚤燥灶泽 憎藻则藻 葬造造 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 葬泽 糟燥皂责葬则藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造 遭赠 皂蚤糟则燥泽糟燥责藻 燥遭泽藻则增葬贼蚤燥灶 燥枣 葬遭葬曾蚤葬造
藻责蚤凿藻则皂蚤泽 燥枣 造藻葬枣 葬灶凿 杂孕粤阅 增葬造怎藻援 悦澡则燥皂燥泽燥皂藻 灶怎皂遭藻则 燥枣 皂燥泽贼 增葬则蚤葬贼蚤燥灶泽 憎葬泽 猿圆 渊圆灶 越 源曾冤袁 憎澡蚤造藻 贼澡葬贼 燥枣 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造
憎葬泽 员远 渊圆灶 越圆曾冤 遭赠 贼澡藻 糟赠贼燥造燥早蚤糟葬造 燥遭泽藻则增葬贼蚤燥灶 燥枣 则燥燥贼 贼蚤责 糟藻造造泽援 粤泽 葬 则藻泽怎造贼袁 贼藻贼则葬责造燥蚤凿 燥枣 悦造藻皂葬贼蚤泽 澡藻则葬糟造藻蚤枣燥造蚤葬 憎葬泽
泽怎糟糟藻泽泽枣怎造造赠 燥遭贼葬蚤灶藻凿援
运藻赠 憎燥则凿泽院悦造藻皂葬贼蚤泽 澡藻则葬糟造藻蚤枣燥造蚤葬曰 葬责蚤糟葬造 皂藻则蚤泽贼藻皂 皂藻贼澡燥凿曰 糟燥造糟澡蚤糟蚤灶藻曰 糟赠贼燥造燥早蚤糟葬造 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
收稿日期院圆园员员鄄园苑鄄员园摇 接受日期院圆园员员鄄员圆鄄员远
基金项目院山西省自然科学基金渊圆园园怨园员员园源园 原 圆冤袁山西高校科技研究开发项目渊圆园园愿员园员园冤
作者简介院董摇 娟渊员怨愿猿鄄冤袁女袁河北石家庄人袁硕士研究生袁研究方向为作物遗传育种药用植物染色体工程遥 耘鄄皂葬蚤造院 凿燥灶早躁怎葬灶园苑圆圆岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院吴玉香渊员怨远苑鄄冤袁女袁山西神池人袁博士袁教授袁主要从事作物遗传育种研究遥 栽藻造院园猿缘源鄄远圆愿怨员园圆曰耘鄄皂葬蚤造院赠怎曾蚤葬灶早憎怎圆园园怨岳 澡燥贼皂葬蚤造援 糟燥皂
摇 摇 大叶铁线莲渊悦造藻皂葬贼蚤泽 澡藻则葬糟造藻蚤枣燥造蚤葬冤又名木通花尧草
本女蒌尧草牡丹咱员暂 袁属于毛茛科铁线莲属直立草本或
亚灌木咱圆暂 袁俗名气死大夫袁全草及根可入药袁治疗关节
疼痛咱猿暂 遥 大叶铁线莲为铁线莲属中少有的直立型灌
员远源
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
木袁茎尧叶尧花尧果均被不同程度的白色绒毛袁三出复叶
对生袁总叶柄粗壮遥 聚伞花序袁两性花袁蓝色袁花有花萼
无花瓣袁瘦果倒卵形袁红棕色袁宿存花柱羽毛状遥 其原
始分布地区涵盖全国的 员源 个省袁最南端为云南省袁最
北端为吉林省咱源暂 遥 前人对大叶铁线莲的育种研究较
少袁主要集中在大叶铁线莲的药用价值方面袁但在西方
一些国家的公园及庭园中大叶铁线莲是一种观赏价值
极高的植物袁可以作为垂直绿化和覆盖绿化的优良植
物材料咱缘暂 遥
多倍体植物在生理上较二倍体有更强的适应性尧
在遗传上有较大的可塑性袁半个世纪以来袁药用植物育
种学家们已经对多种药用植物进行了多倍体的诱导研
究遥 但有关大叶铁线莲的多倍体育种还未见报道遥 本
试验利用秋水仙碱通过改良的初生分生组织处理法诱
导大叶铁线莲袁以期获得多倍体袁旨在利用多倍体效应
增强其药材的药用价值袁并且加快我国野生铁线莲属
植物资源的合理开发和利用袁探索并优化诱导方法袁为
药用植物多倍体育种提供参考遥
员摇 材料与方法
员援 员摇 试验材料
本试验所用大叶铁线莲种子来源于山西农业大学
药用生物研究所遥
员援 圆摇 试验准备
在温室做长 源皂尧宽 员援 缘皂尧深 园援 圆皂 的阳畦遥 将筛
好的腐熟牛粪与生土以 员颐 猿的比例混匀装入 员园糟皂 的
营养钵中袁横竖整齐排列袁放入畦内并浇水袁备用遥 将
饱满的大叶铁线莲种子用 远园益温水浸种 猿澡 后袁播种
于营养钵中遥
员援 猿摇 多倍体诱导
种子萌发并生长至 圆 片子叶展开期袁采用改良初
生分生组织处理法进行诱导遥 用 园援 圆豫秋水仙碱溶液
和 员豫的琼脂混合加热成凝胶态涂抹幼苗顶芽袁再罩
上 缘园皂造塑料杯防止秋水仙碱蒸发并保持湿润袁设 猿 个
处理时间渊圆源尧源愿 和 苑圆澡冤袁每个处理诱导 员缘 株袁及时
揭去秋水仙碱与琼脂干胶遥 对照 员缘 株遥 在幼苗恢复
生长 员 至 圆 周后袁清水与营养液轮流喷施渊第 员 天清
水袁第 圆 天营养液袁以此类推冤以促进生长渊营养液成
分院尿素 园援 猿早袁磷酸二氢钾 园援 缘早 溶于 员蕴 蒸馏水中冤袁
轮番喷施 圆 周遥 待幼苗株高 员园糟皂 左右后定植到大
田遥
员援 源摇 多倍体鉴定
诱导后第 怨园 天袁观察叶片颜色变化和皱缩情况袁
随机选择 员园 株诱导成功植株和 员园 株对照株袁选取每
株主茎的第 员圆 片叶袁用卷尺测量叶片的叶长和叶宽曰
游标卡尺测量叶片厚度袁计算其叶形指数并进行统计
分析遥
用尖镊子轻轻撕下以上所测叶片的下表皮袁显微
镜下渊员园 伊 源园冤用显微测微尺测量气孔的长和宽袁随机
选择 员园 个视野袁统计视野中的气孔数目和保卫细胞中
的叶绿体数目袁照相并进行统计分析遥
在大叶铁线莲盛花期袁随机选取对照株和变异株
各 员园 株袁用 杂孕粤阅手持叶绿素仪测量相同叶片 缘 个不
同部位的叶绿素含量袁并进行统计分析遥
大叶铁线莲根尖制片采用李懋学咱远暂的方法袁将变
异株和对照株大叶铁线莲种子用温水浸种 猿澡袁置于
圆缘益恒温培养箱中培养发芽袁当根尖长到 员 耀 圆糟皂 时袁
用饱和的对二氯苯溶液预处理 圆澡袁后转入卡诺固定液
中固定 圆源澡袁将固定好的根尖清洗干净后放入 员皂燥造 辕 蕴
盐酸中袁远园益水浴锅中解离 员园皂蚤灶袁取出后用蒸馏水冲
洗干净袁再用卡宝品红染色 员园皂蚤灶压片袁选择染色体分
散良好的玻片照相遥 变异株和对照株各统计 缘园 个细
胞袁对细胞中的染色体数目计数并分析遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 不同处理时间对大叶铁线莲的诱导效果
在当代苗期袁鉴别四倍体大叶铁线莲的形态学依
据主要有以下几点院渊员冤生长受阻曰渊圆冤叶色浓绿曰渊猿冤
植株畸形曰渊源冤叶片皱缩遥 依据此标准袁酝园 代幼苗诱
导效果如表 员 所示遥
表 员摇 秋水仙碱不同处理时间对大叶铁线莲的诱导效果
栽葬遭造藻 员摇 陨灶凿怎糟贼蚤燥灶 藻枣枣藻糟贼 燥枣 糟燥造糟澡蚤糟蚤灶藻 燥灶 悦造藻皂葬贼蚤泽 澡藻则葬糟造藻蚤枣燥造蚤葬 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼 贼蚤皂藻
处理时间
贼则藻葬贼皂藻灶贼 贼蚤皂藻 渊澡冤
处理株数
晕燥援 燥枣 贼则藻葬贼藻凿 责造葬灶贼
变异株数
晕燥援 燥枣 增葬则蚤葬贼蚤燥灶贼
死亡株树
晕燥援 燥枣 凿藻葬贼澡
成活率
泽怎则增蚤增葬造 则葬贼藻渊豫 冤
变异率
增葬则蚤葬贼蚤燥灶 则葬贼藻渊豫 冤
圆源澡 员缘 愿 圆 愿远援 苑 缘猿援 猿
源愿澡 员缘 员圆 猿 愿园援 园 愿园援 园
苑圆澡 员缘 远 缘 远远援 苑 源园援 园
园澡 员缘 园 园 员园园 园
圆远源
摇 猿 期 大叶铁线莲四倍体的诱导及初步鉴定
摇 摇 表 员 结果表明袁处理 源愿澡的诱导效果最好袁诱导率
高达 愿园豫 遥 字圆 测验表明 猿 种处理对诱导率和死亡率
的影响没有显著性差异遥
圆援 圆摇 大叶铁线莲变异株叶形变化
对照株和变异株叶形的比较如表 圆 所示遥
与对照株叶片相比袁变异株叶色加深袁叶形指数发
生了变化渊图 员冤遥 统计分析表明院变异株和对照株的
叶宽尧叶长尧叶厚尧叶面积和叶形指数均存在极显著差
异渊表 圆冤遥
表 圆摇 对照株和变异株叶形的比较
栽葬遭造藻 圆摇 蕴藻葬枣 泽澡葬责藻 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 糟燥灶贼则燥造 葬灶凿 增葬则蚤葬贼蚤燥灶
材料
皂葬贼藻则蚤葬造
叶宽
造藻葬枣 憎蚤凿贼澡渊糟皂冤
叶长
造藻葬枣 造藻灶早贼澡渊糟皂冤
叶厚
造藻葬枣 贼澡蚤糟噪灶藻泽泽渊糟皂冤
叶面积
造藻葬枣 葬则藻葬渊糟皂圆冤
叶形指数
造藻葬枣 蚤灶凿藻曾
对照株 糟燥灶贼则燥造 缘援 缘圆葬粤 员猿援 圆猿月 园援 园猿远月 苑猿援 园圆怨远遭粤 圆援 猿怨月
变异株 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 苑援 缘苑葬月 员源援 怨远粤 园援 园源猿粤 怨员援 苑园苑圆葬月 员援 怨愿粤
摇 摇 注院小写字母和大写字母分别表示差异显著渊园援 园缘 水平下冤和极显著渊园援 园员 水平下冤遥 下表同遥
晕燥贼藻院 杂皂葬造造 造藻贼贼藻则泽 葬灶凿 糟葬责蚤贼葬造 造藻贼贼藻则泽 泽贼葬灶凿 枣燥则 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶糟藻 葬贼 园援 园缘 葬灶凿 园援 园员 造藻增藻造袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早 贼葬遭造藻泽援
圆援 猿摇 大叶铁线莲对照株和变异株气孔大小和密度的
比较
变异株叶片气孔较对照明显增大袁变异株气孔横
径和纵径分别较对照株增加 猿怨援 远源豫和 圆园援 园缘豫 曰变异
株的气孔密度较对照株减少 圆苑援 苑愿豫 渊表 猿冤遥
表 猿摇 对照株和变异株气孔的比较
栽葬遭造藻 猿摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 泽贼燥皂葬贼葬 遭藻贼憎藻藻灶 糟燥灶贼则燥造 葬灶凿 增葬则蚤葬贼蚤燥灶
材料
皂葬贼藻则蚤葬造
气孔横径
泽贼燥皂葬贼葬 憎蚤凿贼澡渊滋皂冤
气孔纵径
泽贼燥皂葬贼葬 造藻灶早贼澡渊滋皂冤
气孔密度渊个 辕视野冤
泽贼燥皂葬贼葬 凿藻灶泽蚤贼赠
对照 糟燥灶贼则燥造 圆猿援 源远粤 猿愿援 苑愿粤遭 猿远援 愿愿月
变异株 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 猿圆援 苑远月 源远援 缘远葬月 圆愿援 愿远粤
图 员摇 变异株和对照株的叶片比较
云蚤早援 员摇 蕴藻葬枣 糟燥皂责葬则蚤泽燥灶 遭藻贼憎藻藻灶
增葬则蚤葬贼蚤燥灶 渊造藻枣贼冤 葬灶凿 糟燥灶贼则燥造 渊则蚤早澡贼冤
圆援 源摇 大叶铁线莲叶绿体数目及叶绿素含量比较
经秋水仙碱诱导后袁叶片表皮气孔的变化是植物
多倍化的一个很重要的细胞学现象遥 变异株气孔器的
变化主要表现为气孔增大和气孔频度减少袁以及保卫
细胞中叶绿体数目的增加遥 变异株及其对照的叶片下
表皮保卫细胞中叶绿体数目的测量结果及 杂孕粤阅 值比
较如表 源 所示遥
由表 源 可以看出院变异株叶片气孔保卫细胞内平
均叶绿体数目较对照株增加了 圆猿援 远远豫 曰变异株的
杂孕粤阅值较对照增加了 员园援 员源豫 遥
表 源摇 对照株和变异株保卫细胞中叶
绿体数和 杂孕粤阅值的比较
栽葬遭造藻 源摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 糟澡造燥则燥责造葬泽贼泽 蚤灶 早怎葬则凿 糟藻造造泽
葬灶凿 杂孕粤阅 增葬造怎藻 遭藻贼憎藻藻灶 糟燥灶贼则燥造 葬灶凿 增葬则蚤葬贼蚤燥灶
材料
皂葬贼藻则蚤葬造
叶绿体渊个冤
晕燥援 燥枣 糟澡造燥则燥责造葬泽贼泽
杂孕粤阅值
杂孕粤阅 增葬造怎藻
对照 糟燥灶贼则燥造 员愿援 愿怨粤葬 缘远援 苑愿月葬
变异株 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 圆猿援 猿远月遭 远圆援 缘源粤遭
圆援 缘摇 大叶铁线莲的细胞学鉴定
对变异株和对照株根尖染色体制片进行分析袁分
别统计观察 缘园 个可准确计数染色体的根尖有丝分裂
中期细胞袁细胞学鉴定结果如图 圆 所示遥 结果表明袁对
照株的染色体数均为 员远渊圆灶 越 圆曾冤袁大多数变异株的染
色体数目为 猿圆渊圆灶 越 源曾冤袁在部分变异株的根尖压片
中袁有四倍体细胞袁也有二倍体细胞的存在袁这是多倍
体的嵌合现象遥
猿远源
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
图 圆摇 对照株渊圆灶 越 圆曾 越 员远袁左冤和变异株渊圆灶 越 源曾 越 猿圆袁右冤根尖染色体渊源园园 伊 冤
云蚤早援 圆摇 悦澡则燥皂燥泽燥皂藻泽 燥枣 糟燥灶贼则燥造 渊圆灶 越圆曾 越员远袁 造藻枣贼冤 葬灶凿 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 渊圆灶 越源曾 越 猿圆袁 则蚤早澡贼冤 蚤灶 则燥燥贼 贼蚤责泽 渊源园园 伊 冤
猿摇 讨论
猿援 员摇 诱导方法的选择
本试验采用的方法为改良初生分生组织处理法袁
利用 园援 圆豫的秋水仙碱与 员豫的琼脂混合成凝胶态袁采
用涂抹法处理幼苗顶芽袁处理时间分别为 圆源尧源愿 和
苑圆澡遥 该方法具有操作简单袁处理时期集中袁秋水仙碱
浓度与处理时间可以精确控制袁药剂用量少等特点遥
对材料而言袁幼苗生长点分裂旺盛袁处理部位易于掌
握袁药剂不会毒害根尖和子叶袁因此根部吸收养分与子
叶光合作用不受影响袁本课题组利用此法已成功对多
种药用植物进行诱导并获得多倍体咱苑袁愿暂 遥 本研究在对
大叶铁线莲诱导过程中袁虽然处理的部位是幼苗的上
胚轴和中胚轴袁但由于植株内维管束的存在袁秋水仙素
不会单独停留在被处理部位袁而会随着维管束对物质
的运输作用由被处理部位向其他部位转移袁如果这一
部位有次生分生组织或原生分生组织袁则会造成细胞
的加倍袁这就是多倍体诱导的野远端效应冶遥 另外袁由
于细胞间的胞间连丝尧胞引尧渗透压等作用的存在袁能
使秋水仙素在相邻的细胞间发生转移袁而形成多倍体
诱导的野近端效应冶和秋水仙素直接作用于所处理部
位而造成细胞加倍的野原点效应冶袁这 猿 种效应统称为
多倍体的野三效应冶袁也正是我们试验能够成功的原因
所在遥
猿援 圆摇 多倍体的鉴定方法
鉴别多倍体的直接依据是染色体数目的加倍和减
数分裂联会配对时四价体的出现袁但由于这 圆 个条件
在诱导当代渊酝园冤无法满足袁故本课题组通过多年的多
倍体诱导经验采用形态学特征来作为多倍体的鉴别条
件渊植株畸形袁生长受阻袁叶片皱缩袁叶色浓绿咱苑暂 冤袁鉴
定效果显著遥 染色体数目鉴定法是确定倍性最基本和
最精确的方法袁目前常采用压片法和去壁低渗法进行
染色体标本制作遥 陈瑞阳等咱怨暂首创利用去壁低渗法
进行染色体标本制备袁已经对多种植物进行了鉴定遥
间接鉴定法常采用器官巨大型等形态特征尧流式细胞
分析法尧气孔的大小和保卫细胞中叶绿体数目的测定
等遥 阅憎蚤增藻凿蚤咱员园暂等研究发现二倍体蓝莓加倍成为四倍
体后袁株高增加袁侧枝数量增多袁叶片变厚遥 晕燥贼泽怎噪葬咱员员暂
等也发现四倍体葡萄的果实体积增大遥 匀蚤则泽糟澡咱员圆暂等利
用流式细胞仪快速尧准确地对猕猴桃属中几个品种的
杂交后代进行了倍性鉴定遥
本研究也发现多倍体大叶铁线莲的气孔远大于二
倍体大叶铁线莲的气孔袁而且保卫细胞中叶绿体的数
目明显增加袁气孔频度减小袁这与其他植物的多倍体研
究成果相符遥 何立珍等咱员猿暂在黄花菜同源四倍体与二
倍体的分析中发现袁同源四倍体的叶片气孔保卫细胞
平均长度和宽度比二倍体分别增加 猿猿援 远豫和 猿缘援 猿豫 曰
王晓红等咱员源暂在秋水仙碱诱导非洲菊多倍体研究中发
现四倍体的气孔保卫细胞远远大于二倍体曰王真等咱员缘暂
在半支莲多倍体鉴定研究中得出变异株气孔长度和宽
度明显大于对照株袁而气孔数少于对照株曰在果树上常
月梅等咱员远暂也得到相同结论院气孔大小尧保卫细胞大小
和叶绿体数与倍性成显著正相关袁相关系数达 园援 愿园 以
上袁而气孔密度与倍性成负相关遥 谭素英咱员苑暂的研究发
现不同倍性西瓜的叶片气孔保卫细胞中叶绿体数目存
在遗传差异袁它们与体细胞的染色体数成正相关袁由此
可知计数叶片气孔保卫细胞中的叶绿体数目也是植物
倍性鉴别的依据遥 染色体倍性与保卫细胞中叶绿体数
目存在正相关袁叶绿体数目可大致反映染色体倍性遥
猿援 猿摇 秋水仙碱处理浓度和时间的选择
秋水仙碱的浓度和处理时间是影响染色体加倍最
重要的条件袁也是试验中可以控制的条件遥 用秋水仙
碱水溶液处理外植体时袁关于浓度和处理时间的最适
宜组合会因植物种类的不同而有很大差别遥 根据目前
获得的成功报道袁秋水仙素的有效浓度很广袁园郾 园园远豫
耀 园援 缘豫 之间均有成功报道咱员愿暂 袁最常用的浓度是
园郾 圆豫 曰处理时间理论上应为一个细胞分裂周期的时间
源远源
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员圆袁圆远渊猿冤院园源远员 耀 园源远缘
与药液透入细胞的时间之和袁远澡 耀 苑凿 之间都有成功的
报道咱员怨暂 遥 尹翠翠等咱圆园暂用不同浓度秋水仙素对杂交兰
云员 代无菌苗根状茎进行处理袁成功获得了四倍体植
株袁结果表明以 园援 员豫的秋水仙素处理 源愿澡 诱导效果
最佳袁变异率为 猿远豫 遥 王帅等咱圆员暂用不同浓度的秋水
仙碱浸泡地黄种子袁结果发现用 园援 员豫浸泡 远澡袁诱导率
可达 怨愿豫以上遥 刘好霞等咱圆圆暂在诱导白魔芋多倍体的
研究中发现袁不同浓度秋水仙碱处理白魔芋种子诱导
率有一定差异袁以 园援 圆豫浓度处理 源愿澡 的变异率最高袁
达 远员援 怨豫 曰当秋水仙碱浓度达 园援 源豫时 袁浸泡 苑圆澡 的
变异率最高袁为 苑缘豫 遥 因为随着处理浓度的增加袁秋
水仙碱对细胞的伤害增大袁细胞死亡率会增加袁故选择
合适的浓度和处理时间对诱导多倍体至关重要遥 本试
验选择最常用的浓度 园援 圆豫 袁处理时间设为 圆源尧源愿 和
苑圆澡袁结果表明诱导大叶铁线莲多倍体最佳时间为
源愿澡袁诱导率可高达 愿园豫 遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 江苏新医学院援中药大辞典渊第一版冤咱酝暂援上海院上海人民出版
社袁员怨苑苑
咱 圆 暂 摇 浙江植物志编辑委员会援 浙江植物志渊第二卷冤 咱酝暂援 浙江科学
技术出版社袁员怨怨圆
咱 猿 暂 摇 中国科学院中国植物志编辑委员会援中国植物志渊第二十八卷冤
咱酝暂援北京院中国科学出版社袁员怨愿愿院怨缘
咱 源 暂 摇 马 迪袁岳 桦援 大叶铁线莲对低温胁迫的相应咱 允暂 援 北方园艺袁
圆园员园袁渊远冤院员员圆 原 员员源
咱 缘 暂摇 章银河袁江 燕援我国铁线莲属植物研究现状及其园林应用咱 允暂 援
北方园艺袁圆园园苑袁渊猿冤院员圆圆 原 员圆源
咱 远 暂摇 李懋学袁张赞平援作物染色体及其研究技术咱酝暂援北京院中国农业
出版社袁员怨怨愿院员怨园 原 圆园猿
咱 苑 暂摇 杨福红袁赵晓明袁吴玉香袁何永波袁李鹏飞援 秋水仙碱诱导栝楼四
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