全 文 ：2014年 9月 山东中医药大学学报 第 38卷第 5期
大叶铁线莲（Clematis heracleifolia DC.）为山东
民间地区常用草药，民间多用于治疗各种皮肤炎症，
如红疹、蚊虫叮咬引起的皮肤瘙痒，推测其可能有杀
菌抗炎作用 ［1-2］。 另外，研究表明铁线莲属植物对肿
瘤有良好的抑制作用 ［3-4］。 大叶铁线莲在民间俗称
“气死大夫”，可见其潜在的药用价值，但国内外对其
罕有研究报道。 本实验用大鼠足趾肿胀法和小鼠耳
肿胀法初步考察大叶铁线莲粗提物的抗炎作用，以
期为进一步开发和利用大叶铁线莲药用价值提供实
验依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 SPF级 SD大鼠，体质量 180～200 g，
雄性；SPF级昆明种小鼠，体质量 25～28 g，雄性。 均
由山东中医药大学动物中心提供。 生产许可证号
SCXK（鲁）20110003。
1.2 药品与试剂 大叶铁线莲，干燥的全草及根，
采自山东省济南市云梯山，经北京中医药大学中药
学院生药系刘春生教授鉴定为大叶铁线莲（Clematis
heracleifolia DC.）；阳性药，云南白药气雾剂（批号
ZJ12017），由云南白药集团股份有限公司生产；阿司
匹林泡腾片（批号 1301054），由阿斯利康制药有限
公司生产；二甲苯（批号 120306）。
1.3 仪器 足跖容积测量仪（湖北正华生物仪器设
备有限公司，YLS-7B）；电子分析天平（SHIMADZU
CORPORATION JAPAN，AUY120）；万能磨粉机（郑
州市荣阳华盛仪器厂 ，FW100）；减压旋转蒸发
仪（RE52CS，上海亚荣生化仪器厂）。
2 实验方法
2.1 药材前处理 大叶铁线莲采回后洗净除去泥
沙、残叶等杂质，在阴凉处晾干，用万能磨粉机粉碎
成粗粉。
［收稿日期］ 2013-12-16
［基金项目］ 国家级大学生创新创业训练计划项目（编号：200310
441025）
［通信作者］ 薛玲，女，教授，主要从事调肝方药药理研究。 Tel：
13969165620，E-mail：xxueling@163.com。
大叶铁线莲提取物抗炎作用实验研究
邢天天，李春磊，王义坤，郭秋霜
（山东中医药大学 2010 年级本科生，山东 济南 250355）
指导 薛 玲
［摘要］ 目的：探讨大叶铁线莲粗提物的抗炎作用。 方法：分别采用蛋清诱导大鼠足跖肿胀法、二甲苯致小鼠耳肿胀法研究
大叶铁线莲提取物的抗炎作用。 结果：大叶铁线莲提取物对大鼠足跖肿胀具有明显的抑制作用（醇提物 P< 0.01，水提物 P< 0.05），
显著减轻二甲苯致小鼠耳肿胀程度（P< 0.05）。 结论：大叶铁线莲水提物、醇提物具有明显的抗炎作用。
［关键词］ 大叶铁线莲；水提物；醇提物；抗炎
［中图分类号］ R285.5 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007-659X（2014）05-0480-03
Experimental Study of Anti-inflammatory Effect of Extraction of Clematis heracleifolia
XIN Tiantian，LI Chunlei，WANG Yinkun，GUO Qiushuang
（Undergraduate Student of Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan 250355，China）
Abstract Objective：To explore the anti-inflammatory effect of extraction of Clematis heracleifolia. Methods：
To study the effect of anti-inflammatory of water exteraction and alcoholic extraction of Clematis heracleifolia
through inflammatory rat models with swollen foot induced by egg white and mouse models with swollen
ears induced by xylol respectively. Results：Clematis heracleifolia crude extraction has an obvious inhibitory
effect on rat paw swelling（alcoholic extraction P< 0.01，water extraction and P< 0.05） and can retrain ear
tumefaction of mice（P< 0.05）. Conclusion：The water extraction and alcoholic extraction of Clematis hera-
cleifolia have significant anti-inflammatory effects.
Key words Clematis heracleifolia；water extraction of Clematis heracleifolia；alcoholic extraction of Clematis
heracleifolia；anti-inflammatory
第 38 卷 第 5 期 山东中医药大学学报 Vol．38，No．5
2014 年 9 月 JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TCM Sep.2014
480
DOI:10.16294/j.cnki.1007-659x.2014.05.024
2014年 9月 第 38卷第 5期
表 2 各组二甲苯诱导小鼠耳肿胀度比较（x±s，n=8）
剂量（m/g·kg-1） 耳肿胀度（m/mg）
空白对照组 等体积 22.9±2.5#
水提物高剂量组 18 19.1±6.4#
水提物中剂量组 9 15.9±6.0*
水提物低剂量组 4.5 19.9±6.3#
阳性对照组 9 10.5±2.9**＃
与空白对照组比较 *P< 0.05， **P< 0.01；与中剂量组比较
#P< 0.05
表 1 各组蛋清诱导的大鼠足跖肿胀度比较（x±s，n=8）
剂量
（m/g·kg-1）
致炎后不同时间足跖肿胀度（V/mL）
0 h 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h
空白对照组 9.0 0.882±0.121 0.829±0.097 0.712±0.088 0.581±0.081 0.551±0.084 0.475±0.082 0.455±0.057
水提物高剂量组 18.0 0.797±0.096 0.511±0.108**＃ 0.421±0.062**＃ 0.372±0.117**＃ 0.252±0.063**＃ 0.183±0.039**＃ 0.185±0.052**＃
水提物中剂量组 9.0 0.848±0.135 0.701±0.112* 0.561±0.135* 0.451±0.142* 0.369±0.139* 0.298±0.108** 0.217±0.120**
水提物低剂量组 4.5 0.816±0.150 0.651±0.124* 0.573±0.125* 0.435±0.114* 0.344±0.113** 0.279±0.100** 0.232±0.069**
醇提物高剂量组 18.0 0.910±0.089 0.588±0.069**＃ 0.387±0.103**＃ 0.279±0.101**＃ 0.187±0.083**＃ 0.136±0.067**＃ 0.084±0.048**＃
醇提物中剂量组 9.0 0.755±0.105* 0.674±0.102* 0.552±0.072* 0.437±0.087* 0.298±0.053** 0.241±0.056** 0.198±0.090**
醇提物低剂量组 4.5 0.828±0.121 0.715±0.117* 0.553±0.111* 0.464±0.101* 0.406±0.116** 0.328±0.093* 0.273±0.074**
阳性对照组 9.0 0.905±0.125 0.680±0.076* 0.522±0.099** 0.437±0.084* 0.315±0.126** 0.265±0.113** 0.189±0.078**
与空白对照组比较 **P< 0.01，*P< 0.05；与水提物、醇提物低剂量组比较 ＃P< 0.05
2.2 大叶铁线莲水提物、醇提物制备 原药材取粗
粉 200 g，用水或 70%醇提取 2 次，第 1 次加 10 倍
量水或醇提取 1.5 h，第 2 次加 8 倍量水或醇提取
1.0 h，两次均用四层纱布过滤，再经标准滤纸过滤后，
收集澄清滤液，两次滤液合并。 水浴浓缩制得浓度为
2 g·mL-1的药液（每 1 mL 药液相当于原生药 2 g），
密封储存于 4℃冰箱内备用。
2.3 对大鼠足跖肿胀的影响［5］ 取健康大鼠 64 只，
随机分为 8 组，分别为大叶铁线莲水提物高、中、低
剂量组，醇提物高、中、低剂量组，阳性对照组（给予
云南白药气雾剂），空白对照组，每组 8 只。 实验前
用足跖容积测量仪测定大鼠致肿前的右后足跖作为
正常足跖体积。 随后每鼠右后足跖皮下注射 10%新
鲜蛋清 0.2 mL，待注射蛋清 10 min 后，测量足跖体
积作为致肿后体积，各组大鼠右后足跖局部涂抹给
药。 给药剂量见表 1，每隔 1 h 涂抹 1 次药液，连续
给药 6 次。 空白对照组给予等体积蒸馏水。 并于致
肿后 1 h、2 h、3 h、4 h、5 h、6 h 测定大鼠右后足跖体
积，测量体积前用生理盐水充分清洗掉残存药液，并
用吸水纸吸干残留水分，计算每个时间段的大鼠足
跖肿胀度。 肿胀度=致炎后足跖体积-正常足跖体
积。 采用 SPSS 17.0软件处理数据，所有有效数据用
x±s表示，用 F检验法进行比较组间差异，取 α=0.05
或 α=0.01为检验水准。 见表 1。
2.4 对小鼠耳郭肿胀的影响［5］ 取健康小鼠 40 只，
雄性，18～22 g，随机分为 5 组，分别为大叶铁线莲
水提物高、中、低剂量组，阳性对照组，空白对照组，
每组 8 只。 于小鼠双耳郭涂抹给药，均正反两面涂
抹。 给药剂量见表 2。 阳性对照给予阿司匹林，空白
对照组涂抹蒸馏水。连续给药 8 d，最后一天末次给
药 1 h 后，用生理盐水充分清洗掉耳部残存药液，并
用吸水纸吸干残留水分。 右耳正反两面涂抹 0.02 mL
二甲苯，左耳做自身空白对照，致炎 1 h 使右耳充分
致肿后，颈椎脱臼处死小鼠，剪下双耳，对齐，在耳郭
外缘相同部位用 9 mm 打孔器取下圆形耳片，打耳
片所流出组织液用称量纸吸掉，称量纸连同耳片一
同迅速用分析天平称量，双耳重量之差为肿胀度，肿
胀度 =右耳质量-左耳质量。 采用 SPSS 17.0 软件
处理数据，所有有效数据用 x±s 来表示，用 F 检验
法进行比较组间差异，取 α=0.05 或 α=0.01 为检验
水准。 见表 2。
3 讨论
大叶铁线莲为山东民间地区常用草药，与威灵
仙同属于毛茛科铁线莲属［2］。 在民间常用于治疗各
种皮肤炎症，具有一定的杀菌抗炎作用。 铁线莲属植
物含有大量总皂苷成分，在提取过程中大叶铁线莲
提取液有明显的发泡性，推测大叶铁线莲含有大量
皂苷。 据有关报道，同属植物威灵仙抗炎主要成分
为其总皂苷，章蕴毅等 ［6］、徐先祥等 ［7］研究表明威灵
仙总皂苷对大鼠蛋清诱导的足跖肿胀、二甲苯引起
的耳肿胀具有明显的抑制作用。 因此认为大叶铁线
莲抗炎有效成分可能亦为其总皂苷。
从表 1 可看出，给药后，与空白对照组比较，大
叶铁线莲水提物，醇提物高、中、低剂量组在致肿后
1～6 h均可显著降低足肿胀值，有明显的消肿效果，
并以醇提物高浓度组消肿效果最佳（P< 0.01）。 水提
物、醇提物高剂量组消肿效果与低剂量组比较有显
著性差异（P< 0.05）。
（下转第 491页）
邢天天等：大叶铁线莲提取物抗炎作用实验研究
481
2014年 9月 第 38卷第 5期
表 2结果表明，与空白对照组比较，大叶铁线莲
水提物中剂量组以及阳性对照组能显著降低小鼠耳
肿胀度（P< 0.05，P< 0.01），有明显的消肿效果。 水提
物中剂量组与高、低剂量组比较有显著性差异（P<
0.05），高、低剂量两组间比较无显著性差异（P> 0.05），
说明药物的最佳剂量在高剂量和低剂量之间。
本实验研究表明，大叶铁线莲不论是醇提物还
是水提物都具有明显的抗炎作用，在大鼠蛋清足跖
肿胀和小鼠二甲苯耳肿胀中抗炎作用均随剂量的增
加而增强，在足跖肿胀实验中，水提物比较醇提物的
消肿效果较佳。 与空白组比较，实验组在前 3 h消肿
速度明显加快。
诸多研究表明，铁线莲属植物药用价值巨大，具
有抗肿瘤、抑菌、抗炎镇痛、利尿、抗氧化等药理作
用 ［8］。 推测大叶铁线莲也有类似作用，本实验初步探
究其抗炎作用，潜在的药用价值还有待进一步发掘。
［参考文献］
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学，2012，40（27）：13324-13327.
表 2 补气生血方药 4 种含药血清 HPLC 指纹图谱特征峰的相对保留时间、相对峰面积
峰号
EE 液
RRt/RA
WE 液
RRt/RA
SBE 液
RRt/RA
AE 液
RRt/RA
1 0.2833/1.6039 0.3128/4.3557 ※ ※
2 0.3106/2.0295 0.3197/5.4510 0.3198/1.4085 0.3217/0.6823
3 0.7267/0.5576 0.7235/0.2017 0.6988/0.2256 0.7466/1.5474
4 0.9759/0.3431 0.9702/0.1740 0.9824/0.3183 0.9744/2.8147
5（s） 1/1 1/1 1/1 1/1
6 1.1174/0.8049 1.0778/0.3529 1.1074/0.7861 1.1081/2.9718
7 1.2010/0.7265 1.2006/0.7907 1.1929/0.3258 1.2957/2.6763
8 1.4988/0.3276 1.4886/1.0518 1.4898/0.2404 1.4972/1.3561
9 1.6338/0.2100 1.6343/0.1671 1.6184/0.3112 1.6121/0.6345
10 1.9001/0.0714 1.8967/1.6236 1.9178/0.1105 ※
11 2.0540/0.0841 1.9504/0.6367 ※ 2.1056/0.4039
12 2.1902/0.0612 2.2104/0.1954 2.0991/0.1903 2.2061/0.2434
注：※表示未出峰
表 3 补气生血方药 4 种含药血清指纹图谱共有峰重叠率比较
样品 EE 液 WE 液 SBE 液 AE 液
重叠率 1 1 0.9091 0.9091
相似度 1 0.927 0.777 0.665
［参考文献］
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（上接第 481页）
朱继军等：提取技术对补气生血方药含药血清指纹图谱的影响
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