全 文 ：文章编号 :100028551 (2009) 0120154205
玉米叶细胞磷吸收动力学性质
徐中平1 ,2 　姜振芳1 　郑　伟1 　李坤朋2
(11 日照职业技术学院 ,山东 日照　276826 ; 21 山东大学生命科学学院 ,山东 济南　250100)
摘 　要 :利用32 P 示踪技术测定了玉米成熟叶的细胞质膜囊泡对磷酸根离子的吸收。结果表明 ,磷饥饿胁
迫下 ,玉米成熟叶对磷的吸收能力 ( Vmax)显著增强 ( P < 0101) ;在成熟叶片上进行的32 P2 KH2 PO4 溶液施
加试验显示 ,叶细胞从质外体中吸收磷与叶片的磷输出相关 ;在磷饥饿胁迫下 ,成熟叶片通过木质部输
入的磷明显减少 ,而通过韧皮部输出的磷相对增加。基于上述结果 ,本研究认为 ,在缺磷状况下玉米成
熟叶的细胞显著增强磷吸收能力 ,可能有利于从叶片质外体包括木质部中吸收磷 ,并对增加叶的磷输出
具有意义。
关键词 :玉米 ;叶 ;磷饥饿 ;磷吸收 ;32 P
KINETICS OF PHOSPHATE UPTAKE BY CELLS OF MAIZE MATURE LEAF
XU Zhong2ping1 ,2 　J IANG Zhen2fang1 　ZHEN Wei1 　LI Kun2peng2
(11 Rizhao Polytechnic , Rizhao , Shandong 　276826 ; 21 School of Life Science , Shandong University , Jinan , Shandong 　250100)
Abstract :Phosphate uptake by plasma membrane vesicles was studied with 32 P labeled phosphate and the results indicated that
phosphate uptake capacity ( Vmax) of cells of maize ( Zea mays L. ) mature leaf was enlarged ( P < 0101) under phosphorus
starvation. Local application of 32 P labeled phosphate solutions on mature leaf revealed that a close relationship existed between
phosphate uptake by leaf cells from the apoplasts and phosphorus export of the leaf . Furthermore , the investigation on
variations of phosphorus contents in the xylem saps and phloem exudates of mature leaf during phosphorus starvation showed
that phosphorus which was imported to mature leaf through xylem flows decreased markedly , while the phosphorus export of the
leaf through phloem was enhanced relatively. It is proposed that enhancement of phosphate uptake capacity of cells of maize
mature leaf under phosphorus deficiency might benefit the absorption of phosphate from leaf apoplasts including xylem and P
output of mature leaf .
Key words : maize ; leaf ; phosphorus starvation ; phosphate uptake ; 32 P
收稿日期 :2008205203 　接受日期 :2008207211
基金项目 :国家自然科学基金 (30070487)
作者简介 :徐中平 (19682) ,男 ,山东苍山人 ,博士 ,讲师 ,细胞生物学研究方向。Tel :063328172968 ; E2mail :xzp126com @1261com　　土壤有效磷不足是限制植物生长的关键因素之一。在低磷条件下 ,植株动员成熟叶等器官中的磷到幼嫩组织进行再利用 ,以适应低磷环境[1 ] 。叶片磷的净输出涉及木质部和韧皮部的磷输入、输出对比 ,以及叶细胞的磷吸收状况等因素[2 ] 。然而在低磷胁迫下 ,成熟叶的细胞磷吸收动力学性质及其在叶片磷转运中的生理学意义 ,目前仍了解甚少。本试验利用质膜囊泡内化32 P 标记磷酸根离子 (phosphate , Pi) 的测定方法 研究了磷饥饿胁迫下玉米成熟叶的细胞磷吸收动力学性质 ,并与叶片的磷输入、输出相联系 ,试图揭示其生理学意义。1 　材料与方法111 　材料玉米自交系齐 319 幼株 (3d 龄) 种植于培养瓶
451　 核 农 学 报　2009 ,23 (1) :154～158Journal of Nuclear Agricultural Sciences
(1L)中 ,每瓶 3 株 ,随机摆放于温室 ,每天光照 16h (约
150μEΠm2·s) ,25 ℃～30 ℃;暗期为 8h ,15 ℃～18 ℃,相
对湿度控制在 65 %～70 %。基础营养液 (pH 610) 大量
元素营养盐浓度 (mmolΠL) 为 : Ca (NO3 ) 2 ·4H2O 210 ,
NH4NO3 1125 ,KCl 011 , K2 SO4 0175 ,MgSO4 0165 ;微量元
素营养盐浓度 (μmolΠL) 为 H3BO3 1010 , (NH4 ) 6Mo7O24
01025 ,MnSO4 110 ,CuSO4·5H2O 0105 ,ZnSO4·7H2O 110 ,
Fe2EDTA 10010 。植株在高磷营养液 (基础营养液中补
加 1000μmolΠL KH2 PO4 ) 培养 23d 后分为两组 ,一组植
株继续在高磷条件下培养 (以下简写为“ + P 植株”) ,
另一组植株则进行磷饥饿处理 (即营养液中的 KH2 PO4
用 500μmolΠL K2 SO4 替代) 至 40d 龄 (以下简写为“ - P
植株”) 。
112 　方法
11211 　磷饥饿处理期间的磷含量检测 　于磷饥饿处
理开始后的第 0、3、6、10 和 14 天 ,一部分 - P 植株的地
上部分在茎基部上 015 cm 处切下 ,另一部分 - P 植株
从第 4 (从基部数)叶片距叶鞘 1 cm 处切下 ,采用脱脂
棉小球吸收法收集茎和叶片的木质部伤流液 ,并测定
其 Pi 含量 ( n = 7 ,每个测定来自于 1 株植株) 。切下的
叶片 ,一部分经烘干、H2 SO42H2O2 法消解后检测叶片
的磷含量 ( n = 7 ,每个测定来自于 1 片叶片) ,另一部
分 ,其形态学下端浸于 5ml EDTA 溶液 (5mmolΠL ,pH
515) 中 ,于暗处 (饱和相对湿度) 收集叶片的韧皮部渗
出液[4 ] ,收集液经消解后测定磷含量 ( n = 7 ,每个测定
来自于 1 片叶片) 。磷含量测定采用磷钼蓝法[5 ] 。+ P
植株也于同期做相同检测。
图 1 　叶片局部放射性标记示意图
Fig. 1 　Schematic representation of local application
of 32 P on the leaf blade
11212 　叶片局部外施 Pi 的转运测定 　取 - P 植株
(36d 龄)第 4 叶片 ,如图 1 所示 ,在 a 区 (1 ×6mm) 内将
叶片横向划断 ,则 b 区 (位于主叶脉同侧两个 a 区之
间)内的径向叶脉韧皮部的远程运输通道就被切断 ,该
区质外体中的 Pi 只有通过自由扩散或者被细胞吸收
后通过共质体的短程体运输侧向移出该区 ,被完整的
径向叶脉韧皮部装载后才可能输出叶片。在 b 区 (4 ×
20mm) 涂抹含或不含跨质膜 Pi 转运抑制剂 N2乙酰马
来亚胺 (N2ethylmaleimide ,NEM ,30mmolΠL) 的32 P2KH2 PO4
溶液 [ 015 mmolΠL ,pH = 510 ,含 32 P 20 kBqΠμl , Hepes
25mmolΠL ,Triton X2100 011 ‰(VΠV) ]10μl 后 ,收集叶片
的韧皮部渗出液[4 ] ,并测定其放射活度。待收集操作
结束后 ,将 b 区及其少许周边区叶性组织去除 ,测定剩
余叶片的放射性活度。通过比较 NEM 存在与不存时
的放射性活度测定值 ,分析 NEM 对叶片磷吸收和转运
的影响 ,探讨叶片磷吸收对磷转运的作用。
11213 　叶质膜囊泡的制备　取 - P、+ P 植株 (36d 龄)
第 4 叶片 ,去除端部、边缘部及中脉后备用。采用亲水
两相法制备 ,用系列激活剂和抑制剂存在时的 H+ 2
ATPase 活性变化表征制备物的纯度和封闭膜囊的膜
定向[6 ] 。采用钼锑抗比色法测定 ATP 水解后释放的
Pi 量 ;采用考马斯亮蓝法测定制备物的蛋白含量。
11214 　跨质膜 Pi 转运活性测定 　测定程序参照
Genchi 等[7 ] 并作改动 ,测定过程中保持体系渗透压稳
定[8 ] ,主要操作如下 :所制备的质膜悬液过 Sephadex G2
75 柱 (1 ×15 cm ,4 ℃) ,收集外水体积处的洗脱物 ,即得
脱除外在 Pi 的质膜囊泡悬液。于 23 ℃下 ,在含系列
32 P2KH2 PO4 浓 度 ( 011、012、014、016、018、110 和
112mmolΠL , 32 P 9125 kBqΠμmol Pi ) 的转运测定液
(pH610 ,Mes2Tris 5mmolΠL ,山梨醇 0125 molΠL)中加入脱
除外在 Pi 的质膜囊泡悬液 (测定总体积为 200μl ,约含
50μg 膜蛋白)启动转运 ,2 min 后加入 NEM(30mmolΠL)
终止转运。立即取 180μl 转运测定液上阴离子交换柱
(Dowex AG12X8 ,氯型 ,016 ×515 cm) ,用 1125ml NaCl
洗脱液 (NaCl 50mmolΠL ,Mes2Tris 5mmolΠL ,山梨醇 0120
molΠL ,pH = 610)洗脱 (011mlΠmin) ,前 014ml 洗脱液丢
弃 ,收集剩余洗脱液于闪烁瓶 ,加入 5ml 液体闪烁剂
[PPO 014 % ( WΠV) , POPOP 011 ‰( WΠV) 、Triton X100
30 %(VΠV)甲苯溶液 ] [9 ] ,充分混合后计数 (1min) 。对
照组则先加入质膜悬液和 NEM 110 min 后 ,再加入32 P2
KH2 PO4 溶液启动转运 ;未被内化的 Pi 脱除和放射性
活度测定操作均同测定组。扣除对照测定值后 ,测试
组的放射性活度为转运活性测定值。
2 min 内的转运速率 (BqΠminΠmg protein) 作为转运
初速度对外在 Pi 浓度作图 ,并根据米氏方程 v = Vmax
·[ Pi ]Π{ Km + [ Pi ]}作回归分析 (Sigmaplot 910) ,求取 Pi
转运动力学参数。
551　1 期 玉米叶细胞磷吸收动力学性质
2 　结果与讨论
211 　磷饥饿胁迫下玉米成熟叶的磷含量变化
将高磷营养液中培养 23d 的植株进行磷饥饿处理
0 - 14d ( - P 植株) ,随处理时间的延长 ,植株的第 4 叶
片磷含量明显减少 ,说明在磷饥饿胁迫下叶片为磷输
出器官 ;而继续在高磷条件下生长的 + P 植株第 4 叶
片的磷含量基本保持稳定。
212 　磷饥饿处理期间叶片韧皮部渗出液和木质部伤
流液的磷含量变化
在磷饥饿处理期间 ,检测了成熟叶片韧皮部渗出
液和木质部伤流液的磷含量 (图 2) 。如图 22A 所示 ,
成熟叶片韧皮部渗出液的磷含量 ,在 - P 植株中随处
理时间的延长逐渐下降 ,而在 + P 植株中仅略微降低。
图 2 　磷饥饿处理期间叶片韧皮部渗出液磷含量 (A) 、茎、叶
片木质部伤流液的 Pi 浓度 (B) 、2P处理组的叶片渗出液磷含
量占 + P对照组的百分比 (C) 、叶片伤流液的 Pi 浓度占茎伤
流液的百分比 (D)
Fig. 2 　P content of leaf phloem exudates ( A) , Pi
concentrations of stem and leaf xylem saps ( B ) ,
percentage of P content of leaf exudates in2P treatment to
that in + P control ( C ) and percentage of Pi
concentration of leaf xylem saps to that of stem xylem saps
(D) 。(means ±SD , n = 7)
叶片韧皮部渗出液磷含量的下降 ,并不意味着叶
片净磷输出的减少 ,叶片磷含量的增减依赖于叶片磷
输出和输入的对比。如图 22B 所示 ,成熟叶片的木质
部伤流液 Pi 浓度在 - P 植株中也随处理时间的延长
逐渐下降 ,提示由木质部向成熟叶片输入的磷减少。
然而 ,比较叶片韧皮部渗出液与木质部伤流液的磷含
量下降的幅度 ,前者远小于后者 (图 22C) ,表明在磷饥
饿状况下 ,成熟叶片通过韧皮部的磷输出相对加强。
本研究在磷饥饿处理期间也同时检测了茎基部伤
流液的 Pi 浓度。如图 22B 所示 ,茎基部木质部伤流液
的 Pi 浓度在 + P 对照植株中基本保持稳定 ,但在 - P
植株中则随处理时间的延长逐渐下降。比较茎、叶片
伤流液 Pi 浓度 ,发现无论在 + P 还是 - P 植株中 ,后者
明显低于前者 (图 22B) ,这表明木质部汁液中的 Pi 在
向叶片运输的过程中被转移。如图 22D 所示 ,叶片伤
流液的 Pi 浓度占茎伤流液的百分比 ,在 + P 植株中基
本保持稳定 ,而在 - P 植株中 ,随处理时间的延长而逐
渐加大下降的幅度 ,这表明在缺磷状况下木质部汁液
中的 Pi 在向叶片运输的过程中相对较多地被转移。
213 　磷饥饿状态下成熟叶的细胞磷吸收动力学性质
以玉米植株 (36d 龄) 第 4 叶片为材料 ,采用亲水
两相法制备质膜囊泡。如表 1 所示 ,质膜制备物的
ATPase 活性对 NaVO4 (质膜 ATPase 特异抑制剂) 敏感 ,
而对 NaN3 和硝酸盐 (分别为线粒体膜、液泡膜 ATPase
特异抑制剂) 不敏感 ,并且在酸性环境中被 K+ 激活 ,
说明试验制备的质膜具有较高的纯度。Triton X2100
对封闭质膜囊泡具有孔洞效应[4 ] 。在加入 Triton X2100
时 ,制备物的 ATPase 活性大大增加 ,表明本试验制备
的质膜囊泡大部分为正向膜囊。
表 1 　玉米叶质膜制备物的 ATP酶活性
Table 1 　ATPase activity of the plasma membrane
preparations from maize mature leave
测试
assay
pH
制备物的 ATP 酶活性
ATPase activity of the
preparations
(μmolΠmin·mg
protein)
%
+ K+ + Triton X100 615 2153 ±0105 10010
- K+ + Triton X100 615 0115 ±0108 519
+ K+ - Triton X100 615 0124 ±0101 915
+ K+ + Triton X100 810 0105 ±0101 119
+ VO3 -4 + K+ + Triton X100 615 0105 ±0101 210
+ NaN3 + K+ + Triton X100 615 2138 ±0112 9411
+ NO -3 + K+ + Triton X100 615 2131 ±0109 9113
注 :反应体系 (pH 615)中加入 K+ 和 Triton X100 时的 ATPase 活性定义为
10010 %。+ 和 - 分别表示反应体系中存在和不存在该试剂 ;means ±SD
( n = 3) 。
Note : Percentage of ATPase activities in reaction system (pH 615) when adding
K+ and Triton X100 is 100 %. + and - mean the agent is present and absent
in the reaction system , respectively. Means ±SD ( n = 3) .
651 核　农　学　报 23 卷
通过32 P 标记的 Pi 内化法来测定质膜囊泡的磷吸
收速率。在转运测定液中加入巯基修饰试剂 NEM ,则
膜囊蛋白多肽链上的巯基基团可被特异修饰。如果被
修饰的巯基基团在蛋白质功能中起重要作用 ,则该蛋
白的活性可能会受到较大影响。在本试验中 ,质膜囊
泡提前用 NEM 处理 ,其磷吸收受到明显抑制 (抑制率
为 8618 ±413 % ,mean ±SD , n = 3) 。因此 ,本测定采
用 NEM 作为转运终止剂。
如图 3 所示 ,分别用 - P、+ P 植株的第 4 叶片组
织制备的质膜囊泡 ( - P、+ P 囊泡) 测定磷吸收 ,测得
的米氏常数 ( Km ) 分别为 0145 ±0103 和 0147 ±
0104mmolΠL (mean ±SD , n = 3) ,差异不显著 ( P >
0105) ,但 - P 囊泡磷的最大磷吸收速度 ( Vmax ) 比 + P
囊泡的显著增大 (9819 ±413 , 6913 ±711 BqΠmin·mg
protein , mean ±SD , n = 3 , P < 0101) 。上述测定结果
表明 ,玉米成熟叶的细胞在足磷和缺磷状况下均表现
为低亲和磷吸收特性 ,但在磷饥饿胁迫下其磷吸收能
力 ( Vmax)显著增强。
图 3 　玉米叶质膜囊泡在不同 Pi 浓度下的磷吸
收速率 (插入小图为磷吸收速率对外磷浓度的
双倒数曲线图)
Fig. 3 　Pi uptake rates of leaf plasma membrane vesicles
at different external Pi concentrations( Insert small
figure is Lineweaver2Burk plot of Pi uptake rate
versus external Pi concentration) (means ±SD , n = 3)
玉米成熟叶的磷含量在磷饥饿胁迫下显著减少 ,
而其叶细胞的磷吸收能力却显著增强 ,二者看似矛盾 ,
但可以解释。资料表明 ,叶脉木质部中的 Pi 可被维管
束鞘 - 叶肉细胞共质体优先吸收[2 ] 。在磷饥饿状况
下 ,叶细胞磷吸收能力的增强可能有利于从木质部中
吸收 Pi ,进一步促进木质部液流中 Pi 的转移和分流 ,
并且这一推测与磷饥饿处理期间木质部汁液中的 Pi
在向叶片运输的过程中相对较多地被转移的观测结果
(图 22D) 相一致。也有资料表明 ,叶片主要通过叶脉
韧皮部的远程运输进行磷的输出 ,该过程首要的环节
是叶片中的 Pi 被薄壁筛管/ 伴胞复合体装载[10 ] 。有研
究显示 ,玉米叶片维管束中的筛管/ 伴胞复合体与维管
束鞘 - 叶肉细胞共质体之间存在一定丰度的胞间连丝
连接[11 ] ,这意味着筛管/ 伴胞复合体的 Pi 装载也存在
共质体途径 ,而共质体装载途径可将叶肉细胞共质体
从质外体中吸收 Pi 和叶的磷输出连接起来。因此本
研究推测 ,成熟叶的细胞在缺磷状况下增强磷吸收能
力可能在叶片的磷输出转运中发挥作用。
表 2 　NEM对叶片磷吸收和磷输出的影响
Table 2 　Effect of NEM on P uptake and export of leave
测试
assay
总放射性活度
total radioactivity
(Bq)
叶片韧皮部渗出液
的放射性活度
radioactivity of leaf
phloem exudates(Bq)
对照 control 1664 ±168 75 ±6
NEM处理 NEM treatment 914 ±29233 46 ±533
注 :总放射性活度为叶片和叶片韧皮部渗出液的放射活度之和。
Note : Total radioactivity represents the sum of radioactivity of lamina and leaf
phloem exudates (Mean ±SD , n = 5) , 33 : P < 0101
214 　NEM 对叶片磷输出的影响
为探讨成熟叶片磷吸收的归宿及对磷转运的作
用 ,在成熟叶片上施加32 P 标记的 Pi 溶液 (图 1) 进行示
踪。如表 2 所示 ,在叶片渗出液中检测出较强的放射
信号 ,说明施加的 Pi 被叶片吸收并将其中的一部分输
出。NEM 存在时 ,检测出的总放射活度显著小于无
NEM时的测定值 ( P < 0101) ,表明 NEM 抑制叶细胞
从质外体中吸收32 P 标记的 Pi ,这与用叶质膜囊泡进行
的磷吸收测试结果相一致。
由于外 Pi 涂抹区 (b 区) 两端的 a 区叶片被切断 ,
Pi 纵向移动的路径也就被切断 ,外加在 b 区的 Pi 输出
只能是在质外体中的自由扩散或者是被 b 区的细胞吸
收并通过共质体短途运输侧向移动到相邻区域、被纵
向叶脉中的筛管Π伴胞复合体装载后远程输出叶片。
当 NEM 与32 P 标记的 Pi 溶液一起施加到叶片上时 ,叶
片韧皮部渗出液的放射活度显著降低 (表 2) ( P <
0101) ,这表明 NEM 存在时 ,叶片输出外施磷的量也显
著减少。
以上结果表明 ,叶细胞从质外体中吸收磷和叶片
的磷输出密切相关。
3 　结语
玉米成熟叶的细胞在低磷胁迫下增强磷吸收能
751　1 期 玉米叶细胞磷吸收动力学性质
力 ,可能有利于从低 Pi 浓度的质外体及木质部中吸收
较多的 Pi ,并对增加叶片的磷输出具有重要的意义。
参考文献 :
[ 1 ] 　Hanmond J P ,Broadley M R ,White P J1Genetic responses to phosphorus
deficiency[J ]1Ann Bot ,2004 ,94 :323～332
[ 2 ] 　Karley A J ,Leigh R A ,Sanders D1Where do all the ions go ? The cellular
basis of differential ion accumulation in leaf cells [J ] 1Trends in Plant
Sci ,2000 ,5 :465～470
[ 3 ] 　Xu Z P ,Li K P ,Liu Z G,Zhang K W , Zhang J R1Correlations between
kinetic parameters of phosphate uptake and internal phosphorus
concentrations in maize ( Zea mays L. ) plants : making it possible to
estimate the status of phosphate uptake according to shoot phosphorus
concentrations[J ]1Commun Soil Sci Plant ,2007 ,38 :2519～2533
[ 4 ] 　Li C J , Pang X , Zhang F S1Comparison on responses of different
phosphorus2efficient wheat varieties to phosphorus2deficiency stress [J ] .
Acta Bot Sin ,2003 ,45 :936～943
[ 5 ] 　刘庆龙 ,任学良 ,王玉华 ,舒庆尧 1 水稻高无机磷突变籽粒检测
方法的简化[J ]1 核农学报 ,2006 ,20 (3) :229～232
[ 6 ] 　Qiu Q S ,Barkla B J ,Vera2Estrella R ,Zhu J K,Schumaker K S1Na + ΠH +
exchange activity in the plasma membrane of Arabidopsis [ J ] 1Plant
Physiol ,2003 ,132 :1041～1052
[ 7 ] 　Genchi G, Spagnoletta A , Santis A D , Stefanizzi L , Palmieri
F1Purification and characterization of the reconstitutively active citrate
carrier from maize mitochondria[J ]1Plant Physiol ,1999 ,120 :841～847
[ 8 ] 　Zocchi C , Rabotti G1Calcium transport in membrane vesicles isolated
from maize coleoptiles[J ]1Plant Physiol ,1993 ,101 :135～139
[ 9 ] 　韩爱良 ,叶庆富 1 放射性同位素示踪试验需要注意的若干问题
[J ]1 核农学报 ,2007 ,21 (6) :646～651
[10 ] 　Marschner H ,Kirby E A ,Engels C1Importance of cycling and recycling of
mineral nutrients within plants for growth and development[J ]1Bot Acta ,
1997 ,110 :265～273
[11 ] 　Sowińskia P ,Rudzińska2Langwaldb A ,Dalbiaka A ,Sowiska A1Assimilate
export from leaves of chilling2treated seedlings of maize1The path to vein
[J ]1Plant Physiol Biochem ,2001 ,39 :881～889
(上接第 153 页)
[ 8 ] 　陈　洁 ,林栖凤. 植物耐盐生理及耐盐机理研究进展[J ] . 海南大
学学报 (自然科学版) ,2003 ,21 (2) :177～182
[ 9 ] 　Inze D , Montaga M V. Oxidative stress in plants[J ] . Current Opinion in
Biotechnology , 1995 , 6 :153～158
[10 ] 　Gregorio G B , Senadhira D , Mendoza R D , et al . Progress in breeding
for salinity tolerance and associated abiotic stresses in rice [J ] . Field
Crops Research , 2002 , 76 : 91～101
[11 ] 　Foolad M R. Recent advances in genetics of salt tolerance in tomato[J ] .
Plant Cell Tissue Organ Culture , 2004 ,76 : 101～119
[12 ] 　Gong J M , Zheng X W , Du B X , et al . Comparative study of QTLs for
agronomic traits of rice between salt stress and nonstress environment[J ] .
Science in China (Series C) , 2000 , 44 (1) :73～82
[13 ] 　Prasad S R , Bagali P G, Hittalmani S , et al . Molecular mapping of
quantitative trait loci associated with seedling tolerance to salt stress in
rice[J ] . Current Sciences , 2000 , 78 :162～164
[14 ] 　Koyama M K, Levesley A , koebnert R M D , et al . Quantitative trait loci
for component physiological traits determining salt tolerance in rice [J ] .
Plant Physiology , 2001 , 125 : 406～422
[15 ] 　Lin H X , Zhu M Z , Yano M , et al . QTLs for Na + and K+ uptake of the
shoots and roots controlling rice salt tolerance [ J ] . Theoretical and
Applied Genetics , 2004 , 108 : 253～260
[16 ] 　Takehisa H , Shimodate T , Fukuta Y, et al . Identification of quantitative
trait loci for plant growth of rice in paddy field flooded with salt water
[J ] . Field Crops Research , 2004 , 89 :85～95
[17 ] 　吉田昌一. 水稻生理实验指南[M] . 北京 :科学出版社 ,1975
[18 ] 　中国科学院上海植物生理研究所编. 现代植物生理学实验指南
[M] . 北京 :科学出版社 ,1999
[19 ] 　Brandford M M. A rapid and sensitive method for the quantization of
microgram quantities of protein utilizing the principle of protein～ dye
binding[J ] . Anal Biochemistry , 1976 , 72 : 248～254
[20 ] 　沈　波 ,庄杰云 ,张克勤 ,戴伟民 ,鲁烨 ,傅丽卿 ,丁佳铭 ,郑康乐.
水稻叶绿素含量的 QTL 及其与环境互作分析 [J ] . 中国农业科
学 ,2005 ,38 (10) :1937～1943
[21 ] 　Wang D L , Zhu J , Li Z K, et al . Mapping QTLs with epistatic effects
and QTL environment interactions by mixed linear model approaches[J ] .
Theoretical and Applied Genetics , 1999 , 99 :1255～1264
[22 ] 　McCouch S R , Cho Y G, Yano M , et al . Report on QTL nomenclature
[J ] . Rice Genetica Newsletter , 1997 , 14 :11～13
[23 ] 　龚继明 ,何 　平 ,钱 　前 ,沈利爽 ,朱立煌 ,陈受宜. 水稻耐盐性
QTL 的定位[J ] . 科学通报 ,1998 ,43 (17) :1847～1850
[24 ] 　Ren Z H , Gao J P , Li L G, et al . A rice quantitative trait locus for salt
tolerance encodes a sodium transporter[J ] . Nature Genetics , 2005 , 37 :
1141～1146
[25 ] 　刘友良 ,汪良驹. 植物对盐胁迫的反应和耐盐性. 余叔文 ,汤章
城主编 ,植物生理与分子生物学[J ] . 北京 :科学出版社 ,2001 ,739
～751
[26 ] 　毛桂莲 ,许　兴 ,徐兆桢. 植物耐盐生理生化研究进展[J ] . 中国
生态农业学报 ,2004 , 12 (1) :43～46
[27 ] 　王建飞 ,陈宏友 ,杨庆利 ,姚明哲 ,周国安 ,张红生. 盐胁迫浓度和
温度对水稻耐盐性的影响[J ] . 中国水稻科学 ,2004 ,18 (5) :449～
454
[28 ] 　顾兴友 ,郑少玲 ,严小龙 ,杨 　崇 ,卢永根. 盐浓度对水稻苗期耐
盐指标变异度的影响[J ] . 华南农业大学学报 ,1998 ,19 (1) :30～34
[29 ] 　顾兴友 ,梅曼彤 ,严小龙 ,郑少玲 ,卢永根. 水稻耐盐性数量性状
位点的初步检测[J ] . 中国水稻科学 ,2000 ,14 (2) :65～70
[30 ] 　Kawasaki S , Borchert C , Deyholos M ,et al . Gene Expression Profiles
during the Initial Phase of Salt Stress in Rice[J ] . The Plant Cell . 2001 ,
13 : 889～905
[31 ] 　Shiozaki N , Yamada M , Yoshiba Y. Analysis of salt2stress2inducible
ESTs isolated by PCR2subtraction in salt2tolerant rice [J ] . Theoretical
and Applied Genetics ,2005 ,110 : 1177～1186
[32 ] 　Sahi C , Agarwal M , Reddy M K, et al . Isolation and expression analysis
of salt stress2associated ESTs from contrasting rice cultivars using a PCR2
based subtraction method[J ] . Theoretical and Applied Genetics ,2003 ,
106 : 620～628
851 Journal of Nuclear Agricultural Sciences
2009 ,23 (1) :154～158