全 文 :© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
文章编号 :100028551 (2002) 0220119203
60 Coγ射线对高免卵黄液中沙门氏
杆菌的辐射效应
马海利1 韩克光1 郑明学1 李国柱1 柴桂珍2 刘冠章2
(11 山西农业大学动物科技学院 山西 太谷 030801 ;21 山西省兽药监察所 山西 太原 030001)
摘 要 :用60 Coγ射线对高免卵黄液中的沙门氏杆菌进行辐照研究 ,结果表明 :60 Coγ射
线可显著杀灭高免卵黄液中的沙门氏杆菌 ,3kGy 辐照可完全杀灭该菌 ,其 D10 值为
0136~0146kGy。
关键词 :60 Coγ射线 ;高免卵黄液 ;沙门氏杆菌 ;D10值
收稿日期 :2001203205
基金项目 :山西省科委攻关项目 (971015)
作者简介 :马海利 (1964~) ,男 ,山西人 ,山西农业大学副教授 ,硕士 ,从事动物传染病教学、科研工作
高免卵黄液由于生产工艺简单 ,成本低 ,且对多种动物传染病 ,尤其是家禽病毒性传染病 ,
如传染性法氏囊病 ( IBD) 、鸡新城疫 (ND) 、小鹅瘟、鸭瘟、减蛋综合症 ( EDS
- 76 ) 等有明显的防治
效果[1 ] 。由于制备高免卵黄液所用的蛋大部分为非 SPF 蛋 ,易带有蛋传性病原菌如沙门氏杆
菌、大肠杆菌等 ,在防治某种传染病时 ,易造成蛋传性疾病的传播 ,使高免卵黄液的应用受到限
制[2 ] 。为了获得无蛋传性病原菌的高免卵黄液 ,我们选用具有穿透力强、无残毒、灭菌均匀彻
底、效果可靠等优点的60 Coγ射线对含有沙门氏杆菌的高免卵黄液进行辐照 ,研究不同辐照剂
量对沙门氏杆菌的杀灭情况 ,为生产无病原菌高免卵黄液提供理论依据。
1 材料与方法
111 材料
11111 菌株 沙门氏杆菌 C79 - 13 ,由中国兽药监察所提供。
11112 培养基 营养肉汤、营养琼脂、麦康凯琼脂 ,均购自中国兽药监察所。
11113 高免卵黄液 参照文献[3 ]自制。
11114 钴源 山西农业大学生物物理室60 Coγ源 ,钴源活度为 4147 ×1014 Bq。辐照场经 Fricke
剂量计或 Farner 计量标定剂量率 ,辐照场的温度为 20~25 ℃,不均匀度为 1113 %。
112 方法
将沙门氏杆菌 C79 - 13增殖后 ,接种于制备好的高免卵黄液中 ,充分摇匀 ,分装于无菌青霉素
小瓶内 ,每瓶 5ml ,每 3 瓶 1 组 ,辐照剂量分别为 011、012、015、110、115、210、215、310kGy ,同时设
对照 (接种不辐照卵黄液) 。3 次重复试验。辐照后用平板倾注稀释分离法测定沙门氏杆菌存
活数。每个剂量选 3 个适宜稀释度 ,每个稀释度重复 3 次 ,37 ℃培养 24~36h ,观察计数 ,取平
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均数 ,并计算杀灭率。
2 结果与分析
211 相同剂量率不同辐照剂量对沙门氏杆菌的影响
在剂量率为 619GyΠmin 时 ,辐照对起始浓度分别为 1154 ×107 个Πml 和 2113 ×107 个Πml 沙
门氏杆菌卵黄液的细菌杀灭率基本相似 ,011kGy 辐照可以杀死 72 %左右的沙门氏杆菌 ,
012kGy 辐照可杀灭 87 %左右 ,110kGy 辐照可以杀死 99 %左右 ,310kGy 辐照可以完全杀灭高免
卵黄液中的沙门氏杆菌 (表 1) 。
表 1 相同剂量率辐照对沙门氏杆菌杀灭效果
Table 1 The results of killing Salmonella by irradiation
剂量
dose (kGy)
存活菌数
survivor (No.Πml) 杀灭率death rate ( %) 存活菌数survivor (No.Πml) 杀灭率death rate ( %)
0( GK) 1154 ×107 0 2113 ×107 0
011 412 ×106 72173 518 ×106 72177
012 119 ×106 87166 2157 ×106 87193
015 718 ×105 94104 9109 ×105 95173
110 613 ×104 99159 8109 ×104 99162
115 410 ×103 99197 5196 ×103 99197
210 613 ×102 991996 813 ×102 991996
215 819 ×10 9919994 914 ×10 9919996
310 0 100 0 100
注 :剂量率为 619kGyΠmin
Note :At dose rate of 619GyΠmin
212 不同剂量率不同辐照剂量对沙门氏杆菌的影响
在相同辐照剂量下 ,剂量率越高 ,杀灭率越大 ,如在 011kGy 辐照时 ,1318GyΠmin 剂量率可
杀灭 78 %左右的沙门氏杆菌 ,215kGy 辐照可以完全杀灭高免卵黄液中的沙门氏杆菌 ,619GyΠ
min 剂量率可杀灭 70 %左右的沙门氏杆菌 ,而用 310kGy 剂量 619GyΠmin 剂量率辐照才可完全
杀灭 (表 2) 。这是因为在辐照剂量相同时 ,剂量率越高 ,单位时间内细菌的核酸大分子被破坏
的几率就高 ,且在较短时间内不利于细菌本身修复 ,故高剂量率辐照比低剂量率辐照杀菌效果
好。
213 沙门氏杆菌的 D10值
根据表 2 细菌的存活数与辐照剂量之间的关系进行线性回归 ,可求出不同剂量率时 ,两者
之间的线性关系、相关系数及由线性关系式推算出的D10值[4 ] (表 3) 。由表 3 可知 ,沙门氏杆菌
在高免卵黄液中的 D10值与文献[5 ]报道的 D10值 0129kGy 有一定差异 ,这可能与沙门氏杆菌的
初始浓度和沙门氏杆菌所处的介质不同有关。
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表 2 不同剂量率辐照对沙门氏杆菌的杀灭效果
Table 2 The results of killing Salmonella by irradiation at different dose rate
剂量
dose (kGy)
619GyΠmin 1318GyΠmin
存活菌数
survivor (No.Πml) 杀灭率death rate ( %) 存活菌数survivor (No.Πml) 杀灭率death rate ( %)
0( GK) 2166 ×107 0 2166 ×107 0
011 718 ×106 70168 517 ×106 78157
012 311 ×106 88135 217 ×106 89184
015 917 ×105 96135 412 ×105 98142
110 8163 ×104 99168 211 ×104 99192
115 513 ×103 99198 113 ×103 991995
210 8188 ×102 991997 418 ×10 9919998
215 712 ×10 9919997 0 100
310 0 100 0 100
表 3 沙门氏杆菌的 D10值测定结果
Table 3 The results of measured Salmonella D10 value
剂量率
dose rate ( GyΠmin) 相关系数reletive coefficient (r) 回归方程lg y = a + bx D10值D10 value (kGy)
619 - 019966 lgy = 711120 - 211326 x 0146
1318 - 019971 lgy = 711134 - 217248 x 0136
参考文献 :
[1 ] 罗函禄. 卵黄抗体的研究进展. 江苏农业科学 ,1997 ,5 :62~62.
[2 ] 张家峥 ,童战江 ,于福成 ,等. 使用高免蛋黄抗体液的利弊. 中国畜禽传染病 ,1994 , (2) :51~52.
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[4 ] 马广存 ,戚成云 ,魏启建 ,等. 确定辐照灭菌 D10值的三种方法. 核农学通报 ,1992 ,13 (5) :216~218.
[5 ] 钱思敏. 我国医疗用品辐射消毒、灭菌的现状及法规标准的制定. 医疗用品工业化辐射灭菌质量保证和国际标准应用
培训班讲义汇编 ,北京市辐射中心 ,1995 ,11.
EFFECT OF 60 Coγ2ray IRRADIATION ON
Salmonella IN HIGH IMMUNITY EGG YOL K
MA Hai2li1 HAN Ke2guang1 ZHENG Ming2xue1 LI Gou2zhu1
CHAI Gui2zhen2 LIU Guan2zhang2
(11 College of Animal Science and Technology , Shanxi Agricultural University . Taigu Shanxi prov. 030801 ;
21Shanxi Control Institute of Veterinary Drug , Taiyuan Shanxi prov. 030001)
ABSTRACT :Salmonella were inoculated into the yolk and irradiated with different dose of 60 Co
γ2ray. The results show that 3kGy irradiation dose can kill all Salmonella in the yolk and D10 val2
ue of Salmonella in the yolk is 0136~0146kGy.
Key words :60 Coγ2ray ; high immunity egg yolk ; Salmonella ; D10 value
121Acta Agriculturae Nucleatae Sinica
2002 ,16 (2) :119~121