全 文 ：诺丽(Morinda citrifolia Linn.)为茜草科(Rubiaceae)
热带常绿多年生阔叶灌木或小乔木[1]。诺丽果是一
种天然水果，营养丰富，几乎包含了所有对人体生
长所需的营养成分，除了可以直接食用或加工后食
用外，还具有预防和治疗疾病的功效[2]，诺丽的根、
茎、叶、树皮、花、果实、种子都可以入药[3–4]。诺丽多
生长于赤道带国家，以南太平洋群岛国为主，在夏
威夷、印度、印尼、泰国、马来西亚及中南美洲等也
有分布[5–6]。在我国，诺丽可以生长在海南岛、西沙
群岛和台湾岛等，近几年，海南、云南等省已开始规
模种植。
随着分子生物学的发展，分子标记技术已被广
泛应用于作物遗传研究。ISSR (Inter-simple sequence
repeats)标记是采用 17~22 bp 的重复锚定引物扩增
重复序列之间的片段，具有操作简单、重复性好、
多态性丰富等特点[7]。且一套 ISSR 引物可在多种
收稿日期： 2014–03–10　　　　接受日期： 2014–04–28
基金项目： 国家林业局 948 项目(2011-4-45)资助
作者简介： 吴田(1980 ~ )，女，博士，副教授，研究方向为植物分子生物学。E-mail: 461257271@qq.com
* 通讯作者 Corresponding author. E-mail: 2351417655@qq.com
热带亚热带植物学报　2014， 22(6)： 617 ~ 623
Journal of Tropical and Subtropical Botany
基于ISSR技术研究诺丽种质资源的亲缘关系
吴田a, 蓝增全b*
(西南林业大学， a. 园林学院； b. 环境科学与工程学院，昆明 650224)
摘要： 为探讨我国诺丽(Morinda citrifolia)种质资源的亲缘关系，采用 ISSR 技术对诺丽种质资源的遗传关系进行分析。结果表
明， 10 条 ISSR 引物对 13 份诺丽种质资源共扩增出 183 条带，其中多态性条带有 159 条，占 86.9%。13 份诺丽种质的遗传相
似系数为 0.464 ~0.784。聚类分析将 13 份诺丽种质资源聚为两类，其中诺丽小黑种单独聚为一类，与其他 12 份诺丽种质资源
的亲缘关系较远。虽然按照外部形态特征不能将所有诺丽种质完全区分，但具有相同特征的多数种质还是聚在同一类或亚类
中。
关键词： 诺丽； ISSR； 形态特征； 遗传多样性
doi: 10.11926/j.issn.1005–3395.2014.06.010
Genetic Relationship of Morinda citrifolia Germplasms by ISSR
WU Tiana, LAN Zeng-quanb*
(a. Landscape Architecture College; b. Environment Science and Engineering College, Southwest Forestry University, Kunming 650224, China)
Abstract: In order to understand the genetic relationship of Morinda citrifolia (noni), the DNA fingerprints
of 13 noni germplasm resources of were studied by ISSR markers. The results showed that ten ISSR primers
could amplify 183 bands, of which 159 bands were polymorphic, accounting for 86.9%. The genetic similarity
coefficients of 13 noni germplasm resources ranged from 0.464 to 0.784. Cluster analysis showed that 13 noni
germplasm resources could be divided into two clads, in which Small fruit as a single group had distant relation
with other germplasm resources. Although all noni germplasm resources could not completely separated according
external morphological characteristics, the most with the same characteristics could be clustered into the same
group or sub-group.
Key words: Morinda citrifolia; ISSR; Morphological characteristics; Genetic diversity
618 第22卷热带亚热带植物学报
作物中通用，利用率高，在遗传关系研究方面的应
用前景更广阔[8]。ISSR 技术已应用于水稻(Oryza
sativa)[9–10]、甜瓜(Cucumis melo)[11]、地黄(Rehmannia
glutinosa)[12]、黄 麻(Corchorus capsularis)[13]、杜 鹃
红 山 茶(Camellia changii)[14]、野 牡 丹(Melastoma
candidum)[15]等植物的种质资源鉴定和亲缘关系分
析。为进一步开发利用诺丽的种质资源，本文采用
ISSR 技术分析诺丽种质资源的亲缘关系，为后续
开展诺丽种质资源的遗传多样性研究，构建遗传连
锁图谱等研究奠定基础。
1 材料和方法
1.1 材料
供试诺丽(Morinda citrifolia Linn.)种质材料共
13 份(表 1)，按照采集地或来源地的首字母大写或
者种质的特征命名。INA-1 的原产地为印度尼西
亚，US-1、US-A、US-B、US-C、US-D 的原产地
为美国夏威夷，已经引种栽培在云南省西双版纳州
热带作物研究所内。YJ 采自云南省元江县屏边，
可能的原产地为海南省。其余 6 份种质材料采自
海南省儋州，其中 Small fruit 在海南当地人称为诺
丽小黑种，并认为是海南岛原产植物。热带作物研
究所位于勐腊县勐仑镇，勐腊县地处云南省最南
端，地处北回归线以南，属北热带湿润季风气候，夏
无酷热，冬无严寒，旱雨两季分明，年平均温度为
21℃，年降雨量 1700 mm 以上；儋州处于东亚大陆
季风气候的南缘，属热带湿润季风气候，夏无酷暑，
冬无严寒，阳光充足，雨量充沛，常年平均气温为
23.5℃；屏边属元江县炎热地区，常年不结冰，年平
均气温 20℃~21℃，年平均降雨 700~1200 mm。分
别于 2010 年 3 月采集 13 份种质材料的新鲜嫩叶
片，放入冰盒中带回实验室，于 –80℃冰箱内保存备
用。
1.2 主要试剂
β-巯基乙醇、琼脂糖、矿物油、CTAB、75% 乙
醇等购于昆明鼎国生物有限公司。Taq DNA 聚合
酶、Buffer (含 MgCl2)、dNTP 等购于上海 TaKaRa
生物有限公司。ISSR 引物由上海生物工程有限公
司合成。
1.3 基因组DNA的提取与检测
诺丽叶片基因组 DNA 提取采用改良的 CTAB
法[16]。提取后的 DNA 用 1.0% 琼脂糖凝胶电泳检
测，并用超微量分光光度计检测，计算 OD260/OD280、
OD260/OD230 及浓度。
1.4 ISSR引物的筛选及PCR扩增
从加拿大哥伦比亚大学设计的 100 个 ISSR 通
用引物中随机选出 22 个引物(表 2)。PCR 反应体系、
PCR 反应程序、PCR 产物的电泳分离及成像均参
表 1 诺丽供试材料
Table 1 Materials of Morinda citrifolia tested
材料 Material 采集地 Location 来源 Origin 生长状态 Growth state 叶形 Leaf shape 果实大小 Fruit size
HN-R 海南 Hainan 未知 Unkown 茂密 Lush 卵形 Ovate 中等 Medium
HN-M 海南 Hainan 未知 Unkown 稀疏 Sparse 卵形 Ovate 中等 Medium
HN-H 海南 Hainan 未知 Unkown 茂密 Lush 椭圆形 Oblong 中等 Medium
HN-ZZ 海南 Hainan 未知 Unkown 茂密 Lush 卵形 Ovate 中等 Medium
HN-1 海南 Hainan 可能是海南 Probably in Hainan 稀疏 Sparse 椭圆形 Oblong 小 Small
Small fruit 海南 Hainan 可能是海南 Probably in Hainan 稀疏 Sparse 椭圆形 Oblong 小 Small
YJ 云南 Yunnan 可能是海南 Probably in Hainan 稀疏 Sparse 披针形 Lanceolate 中等 Medium
INA-1 云南 Yunnan 印度尼西亚 Indonesia 茂密 Lush 披针形 Lanceolate 大 Large
US-1 云南 Yunnan 美国 US 茂密 Lush 卵形 Ovate 大 Large
US-A 云南 Yunnan 美国 US 茂密 Lush 卵形 Ovate 大 Large
US-B 云南 Yunnan 美国 US 茂密 Lush 卵形 Ovate 大 Large
US-C 云南 Yunnan 美国 US 茂密 Lush 卵形 Ovate 大 Large
US-D 云南 Yunnan 美国 US 茂密 Lush 卵形 Ovate 大 Large
第6期 619
照吴田等[17]的方法。
1.5 数据统计分析
根据电泳条带的有无统计数据，在相同迁移
位置，有带记为 1，无带记为 0。计算诺丽种质的
多 态 性 : 多 态 性 (%) = (总 带 数 – 共 有 带 数)/总 带
数 ×100%。
1.6 聚类分析
采用 NTsys 2.1e 软件对诺丽种质进行非加权
组平均法(Unweighted Pair Group Method Analysis，
UPGMA)聚类分析，计算遗传相似系数，构建树状图。
2 结果和分析
2.1 诺丽基因组DNA的提取
提取的诺丽种质叶片基因组 DNA 经电泳检
测，可见 DNA 主带清晰明亮，条带整齐，无拖带现
象。经超微量分光光度计检测，诺丽基因组 DNA 的
OD260/OD280 为 1.71~1.89，OD260/OD230 为 1.96~2.14，
表 明 所 提 取 的 总 DNA 纯 度 好，可 以 满 足 后 续
ISSR-PCR 的要求。
2.2 ISSR引物的筛选
以诺丽 HN-M 基因组 DNA 为模板，对 22 条
ISSR 引物进行筛选，结果筛选出 10 条能扩增出条
带清晰、重复性好、多态性高的引物，分别为 818、
825、827、846、847、848、855、856、857、858 (图 1)。
2.3 诺丽种质的ISSR多态性分析
利用筛选出的 10 个引物，分别对 13 份诺丽种
质的 DNA 进行 ISSR-PCR 扩增。从图 2，3 可见，
扩增出的条带均清晰，易于读带，扩增的条带大部
分集中在 250~2000 bp，共扩增出 183 条 DNA 条
带，其中多态性条带 159 条，平均多态性百分率为
86.9%(表 3)。
2.4 诺丽种质间的遗传相似系数分析
对 13 份诺丽种质所产生的 159 条多态性条
带进行统计分析，获得了他们的遗传相似系数矩阵
(表 4)。各种质间的遗传相似系数为 0.464~0.784，
平均为 0.648。采自海南的 6 份诺丽种质的遗传相
似系数为 0.562~0.752，除小黑种外，其余种质间的
均大于 0.6。来源于美国的 5 份诺丽种质的遗传相
似系数为 0.575~0.784，变化范围较采自海南的种
质要大。除 US-C 与 US-B 的遗传相似系数最小外，
其余种质间的遗传相似系数均大于 0.6，且有 6 种
对的大于 0.7，遗传距离小表明亲缘关系较近。
2.5 诺丽种质间的聚类分析
采用 UPGMA 法构建了 13 份诺丽种质的遗传
关系聚类图(图 4)。结果表明，13 份种质明显地
聚为两类，第Ⅰ类包含 12 份种质，包括两个亚类，
第Ⅰ亚类有 10 份诺丽种质，分成两个组，组Ⅰ包括
采自海南的 HN-R 和 HN-M，他们的叶均为卵形、
果实中等大小，不同之处仅在于 HN-R 的植株生长
茂密，HN-M 生长稀疏；组Ⅱ有 8 份诺丽种质，又
表 2 引物序列
Table 2 Primer sequence
引物 Primer 序列 Sequence (5′~3′) 引物 Primer 序列 Sequence (5′~3′)
814 CTCTCTCTCTCTCTCTA 846 CACACACACACACACART
815 CTCTCTCTCTCTCTCTG 847 CACACACACACACACARC
825 ACACACACACACACACT 848 CACACACACACACACARG
827 ACACACACACACACACG 850 GTGTGTGTGTGTGTGTYC
834 AGAGAGAGAGAGAGAGYT 854 TCTCTCTCTCTCTCTCRG
835 AGAGAGAGAGAGAGAGYC 855 ACACACACACACACACYT
836 AGAGAGAGAGAGAGAGYA 856 ACACACACACACACACYA
840 GAGAGAGAGAGAGAGAYT 857 ACACACACACACACACYG
841 GAGAGAGAGAGAGAGAYC 858 TGTGTGTGTGTGTGTGRT
844 CTCTCTCTCTCTCTCTRC 895 AGAGTTGGTAGCTCTTGATC
845 CTC TCTCTCTCTCTCTRG 900 ACTTCCCCACAGGTTAACACA
吴田等：基于ISSR技术研究诺丽种质资源的亲缘关系
620 第22卷热带亚热带植物学报
图 1 诺丽 HN-M 基因组 DNA 的 PCR 扩增。1~22 分别代表引物 900、827、846、840、836、834、858、856、855、825、814、850、848、
847、845、844、841、835、857、854、895、815。
Fig. 1 PCR amplification of Morinda citrifolia ‘HN-M’. 1–22 are primers 900, 827, 846, 840, 836, 834, 858, 856, 855, 825, 814, 850, 848, 847, 845,
844, 841, 835, 857, 854, 895 and 815, respectively.
图 2 引物 847 对诺丽基因组 DNA 的扩增。M: 标准分子量； 1~13 分别代表诺丽 US-D、US-C、US-B、US-A、INA-1、US-1、HN-1、Small
fruit、HN-ZZ、YJ、HN-H、HN-M、HN-R。
Fig. 2 Amplification of Morinda citrifolia by primer 847. M: Standard marker DL 2000; 1–13 are Morinda citrifolia US-D, US-C, US-B, US-A, INA-
1, US-1, HN-1, Small fruit, HN-ZZ, YJ, HN-H, HN-M and HN-R, respectively.
图 3 引物 848 对诺丽基因组 DNA 的扩增。M: 标准分子量； 1~13 分别代表诺丽 US-D、US-C、US-B、US-A、INA-1、US-1、HN-1、Small
fruit、HN-ZZ、YJ、HN-H、HN-M、HN-R。
Fig. 3 Amplification of Morinda citrifolia by primer 848. M: Standard marker DL 2000; 1–13 are Morinda citrifolia US-D, US-C, US-B, US-A, INA-
1, US-1, HN-1, Small fruit, HN-ZZ, YJ, HN-H, HN-M and HN-R, respectively.
第6期 621
表 3 诺丽 ISSR 标记的多态性分析
Table 3 Polymorphic analysis of Morinda citrifolia by ISSR
引物 Primer 扩增条带数 Number of amplified bands 多态性条带数 Number of polymorphic bands %
818 15 12 80.0
825 15 12 80.0
827 20 15 75.0
846 11 9 81.8
847 26 22 84.6
848 28 27 96.4
855 21 19 90.5
856 15 13 86.7
857 20 18 90.0
858 12 12 100.0
合计 Total 183 159 86.9
表 4 13 个诺丽种质的遗传相似系数矩阵
Table 4 Genetic similarity matrix of 13 germplasms of Morinda citrifolia
HN-R HN-M HN-H YJ HN-ZZ Small fruit HN-1 US-1 INA-1 US-A US-B US-C US-D
HN-R 1.000
HN-M 0.752 1.000
HN-H 0.634 0.634 1.000
YJ 0.588 0.627 0.562 1.000
HN-ZZ 0.627 0.654 0.680 0.582 1.000
Small fruit 0.562 0.588 0.575 0.464 0.621 1.000
HN-1 0.686 0.699 0.686 0.706 0.680 0.575 1.000
US-1 0.627 0.654 0.732 0.582 0.673 0.490 0.719 1.000
INA-1 0.654 0.641 0.653 0.582 0.556 0.503 0.732 0.712 1.000
US-A 0.686 0.686 0.699 0.641 0.706 0.575 0.765 0.784 0.719 1.000
US-B 0.582 0.621 0.647 0.549 0.680 0.549 0.660 0.719 0.549 0.712 1.000
US-C 0.654 0.667 0.654 0.725 0.621 0.516 0.732 0.647 0.660 0.745 0.575 1.000
US-D 0.634 0.686 0.660 0.614 0.758 0.614 0.686 0.732 0.654 0.739 0.686 0.641 1.000
图 4 诺丽种质的遗传关系聚类图
Fig. 4 Dendrogram of genetic relationships of Morinda citrifolia
吴田等：基于ISSR技术研究诺丽种质资源的亲缘关系
622 第22卷热带亚热带植物学报
分为两个小组，多数种质具有植株生长茂密、叶椭
圆形至卵形、果实较大等特征。第Ⅱ亚类包含采自
云南的 YJ 和来源于美国的 US-C 两个种质，前者
植株生长稀疏、叶披针形、果实中等，后者植株生长
茂密、叶卵形、果实大，它们在这三个特征上都有差
异。第Ⅱ类仅有采自海南的 Small fruit，单独聚为
一类，其植株生长稀疏、叶椭圆形、果实小。
3 讨论
一般情况下，种质之间的地理距离远，生活在
不同的栖息地，彼此不能相遇，阻碍了生物的自由
迁移、交配、基因漂流，会造成基因流动的减少[18]；
且受到太阳辐射、温度、水分、土壤、风、火等的影
响，可以预料地理隔离会减少遗传相似性[19–20]。采
自海南的 HN-R、HN-M 聚在同 1 组，均具有叶卵形、
果实中等的特征；而来源于美国的 US-1、US-A、
US-B、US-D 这 4 份种质间的遗传相似系数较小，
具有植株生长茂密、叶卵形、果实大的特征，但这 4
份种质处于不同的分支上。这说明种质的生境不
一样，也会存在一定的地理隔离。
但是对诺丽种质而言，地理隔离并不一定会产
生遗传变异。来源于美国的 5 份诺丽种质虽然具
有相同的外部形态特征，但 US-C 与其余 4 份美国
种质的亲缘关系相对较远，存在一定的变异。US-C
反而和外部形态特征不同的 YJ 种质亲缘关系最
近，他们聚为一个亚类。采自海南的 6 份诺丽种质
在外部形态上不尽相同，小黑种的变异较大，单独
聚为一类，而其余 5 份海南种质的变异程度较小。
物种的遗传变异愈丰富，它们对环境的适应性
也愈大。遗传多样性的降低会降低物种对于生态
和进化的适应能力，而栽培植物较易流失遗传多样
性[21]。本研究中诺丽具有较高的遗传多样性，以本
研究 ISSR 标记的聚类结果为依据，今后进行育种
时宜选择亲缘关系较远的种质作为亲本进行杂交，
增加遗传变异，如果实小的诺丽种质小黑种与其余
种质亲缘关系都比较远，对需要获得果实小的目的
基因来说，小黑种是比较合适的选择。
参考文献
[1]　 Xing Y W, Fu M X, Li C W, et al. The seeds structure and
germination test of Morinda citrifolia Linn. [J]. Nat Sci J Hainan
Univ, 2007, 25(2): 156–162.
邢诒旺, 符懋修, 李承武, 等. 海巴戟的种子结构及发芽试验
[J]. 海南大学学报: 自然科学版, 2007, 25(2): 156–162.
[2]　 Wang M Y, West B J, Jensen C J, et al. Morinda citrifolia (Noni):
A literature review and recent advances in noni research [J]. Acta
Pharmcol Sin, 2002, 23(12): 1127–1141.
[3]　 McClatchey W. From Polynesian healers to health food stores:
Changing perspectives of Morinda citrifolia (Rubiaceae) [J]. Integr
Cancer Ther, 2002, 1(2): 110–120.
[4]　 Wang M Y, Su C. Cancer preventive effect of Morinda citrifolia
(Noni) [J]. Ann N Y Acad Sci, 2001(952): 161–168.
[5]　 Dixon A R, McMillen H, Etkin N L. Ferment this: The transformation
of Noni, a traditional Polynesian medicine (Morinda citrifolia,
Rubiaceae) [J]. Econ Bot, 1999, 53(1): 51–68.
[6]　 Hirazumi A, Furusawa E. An immunomodulatory polysaccharide-
rich substance from the fruit juice of Morinda citrifolia (noni)
with antitumour activity [J]. Phytother Res, 1999, 13(5): 380–387.
[7]　 Prevost A, Wilkinson M J. A new system of comparing PCR
primers applied to ISSR fingerprinting of potato cultivars [J].
Theor Appl Genet, 1999, 98(1): 107–112.
[8]　 Zietkiewicz E, Rafalski A, Labuda D. Genome finger-printing
by simple sequence repeat (SSR)-anchored polymerase chain-
reaction amplification [J]. Genomics, 1994, 20(2): 176–183.
[9]　 Blair M W, Panaud O, McCouch S R. Inter-simple sequence
repeat (ISSR) amplification for analysis of microsatellite motif
frequency and finger printing in rice (Oryza sativa L.) [J]. Theor
Appl Genet, 1999, 98(5): 780–792.
[10]　 Nagaraju J, Kathirvel M, Kumar R R, et al. Genetic analysis of
traditional and evolved Basmati and non-Basmati rice varieties
by using fluorescence-based ISSR-PCR and SSR markers [J].
Proc Natl Acad Sci USA, 2002, 99(9): 5836–5841.
[11]　 Liu W B, Song M, Liu F Z, et al. Assessment of genetic diversity
of melon (Cucumis melo) germplasm based on RAPD and ISSR
[J]. J Agri Biotechn, 2002, 10(3): 231–236.
刘万勃, 宋明, 刘富中, 等. RAPD 和ISSR 标记对甜瓜种质遗
传多样性的研究 [J]. 农业生物技术学报, 2002, 10(3): 231–
236.
[12]　 Zhou Y Q, Jing J Z, Li Z Y, et al. Assessment of genetic diversity
of Rehmannia glutinosa germplasm detected by RAPDs and
ISSRs [J]. Hereditas, 2004, 26(6): 922–928.
周延清, 景建洲, 李振勇, 等. 利用RAPD和ISSR分子标记分析
地黄种质遗传多样性 [J]. 遗传, 2004, 26(6): 922–928.
[13]　 Qi J M, Zhou D X, Wu W R, et al. A comparison between RAPD
and ISSR technology in detection of genetic diversity of jute [J].
Sci Agri Sin, 2004, 37(12): 2006–2011.
祁建民, 周东新, 吴为人, 等. RAPD和ISSR标记检测黄麻属遗
传多样性的比较研究 [J]. 中国农业科学, 2004, 37(12): 2006–
2011.
[14]　 Luo X Y, Zhuang X Y, Yang Y S. Genetic diversity of Camellia
第6期 623
changii Ye (Theaceae) using ISSR markers [J]. J Trop Subtrop
Bot, 2007, 15(2): 93–100.
罗晓莹, 庄雪影, 杨跃生. 杜鹃红山茶遗传多样性的ISSR分析
[J]. 热带亚热带植物学报, 2007, 15(2): 93–100.
[15]　 Zheng T, Chen Z D, Lin X X, et al. ISSR analysis of Melastoma
germplasm in Fujian Province [J]. J Trop Subtrop Bot, 2013,
21(5): 406–413.
郑涛, 陈振东, 林秀香, 等. 福建省野牡丹属种质资源的ISSR分
析 [J]. 热带亚热带植物学报, 2013, 21(5): 406–413.
[16]　 Wu T, Lan Z Q, Li Q H. Isolation of genomic DNA in Morinda
citrifolia Linn. and establishment of its ISSR-PCR reaction
system [J]. J Anhui Agri Sci, 2010, 38(17): 8859–8860.
吴田, 蓝增全, 李青红. 诺丽(Morinda citrifolia Linn.)叶片DNA
的提取及ISSR-PCR 反应体系的建立 [J]. 安徽农业科学, 2010,
38(17): 8859–8860.
[17]　 Wu T, Shen X J, Li F Y, et al. ISSR analysis between Shuang-
jiang ancient tea trees and Yunnan big-leaf tea trees [J]. Nat Sci J
CS Univ For Techn, 2012, 32(3): 136–140.
吴田, 沈晓进, 李法营, 等. 双江古茶树与云南大叶种茶群体
品种间的ISSR分析 [J]. 中南林业科技大学学报: 自然科学版,
2012, 32(3): 136–140.
[18]　 Paulo J E. Isozyme analysis revealed that the Portuguese mandarin
‘Carvalhais’ originated as a single clone [J]. Sci Hort, 1999,
82(1/2): 145–152.
[19]　 Wang Z R. Allozyme analysis in studies of plant genetic
diversity and systematics [J]. Biodiv Sci, 1994, 2(1): 38–43.
王中仁. 植物遗传多样性和系统学研究中的等位酶分析 [J].
生物多样性, 1994, 2(1): 38–43.
[20]　 He J S, Li Z Z, Huang H W. Allozymic genetic diversity in
Manglietia patungensis, an endangered species, and its conservation
strategies [J]. Biodiv Sci, 2005, 13(1): 27–35.
何敬胜, 李作洲, 黄宏文. 濒危物种巴东木莲的等位酶遗传多
样性及其保护策略 [J]. 生物多样性, 2005, 13(1): 27–35.
[21]　 Wang L. ISSR analysis of genetic diversity of the traditional
Chinese medicinal plant Ligusticum chuanxiong Hort. [D].
Chengdu: Sichuan University, 2007: 12–15.
王岚. 用ISSR分子标记研究川产道地药用植物川芎的遗传多
样性 [D]. 成都: 四川大学, 2007: 12–15.
吴田等：基于ISSR技术研究诺丽种质资源的亲缘关系