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斑皮柠檬桉的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 4期,2009年 4月 399
收稿 2009-02-04 修定  2009-02-23
资助 广东省科技计划基金项目(20 02C2 0134 )。
* 通讯作者(E-mail: shwhuang@scau.edu.cn; Tel: 020-
8 5 2 8 0 2 5 9 )。
斑皮柠檬桉的组织培养与快速繁殖
刘纯鑫, 张 , 刘天颐, 黄少伟 *
华南农业大学林学院, 广州 510642
Tissue Culture and Rapid Propagation of Corymbia citriodora ssp. variegata
(F. Muell.) K. D. Hill & L. A. S. Johnson
LIU Chun-Xin, ZHANG Ying-Ying, LIU Tian-Yi, HUANG Shao-Wei*
College of Forestry, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China
1 植物名称 斑皮柠檬桉[Corymbia citriodora ssp.
variegata (F. Muell.) K. D. Hill & L. A. S. Johnson]。
2 材料类别 带腋芽的茎段。
3 培养条件 基本培养基为 DCR和MS。(1)诱导
培养基: 2DCR+6-BA 1.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA
0.05; (2)继代增殖培养基: 2DCR+6-BA 0.5+NAA
0.05; (3)生根培养基: 1/2MS+NAA 0.8+IBA 0.5。以
上培养基中均加入 2%蔗糖和 0.5%琼脂, pH 5.8。
培养温度(25±2) ℃, 连续光照 12 h·d-1, 光照强度为
30~40 µmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得与启动培养 选取一年生的木
质化的萌芽条, 剪成 3~5 cm长的茎段, 剪去嫩梢和
叶片, 保留叶柄基部。用自来水流水冲洗 5 min,
移到超净工作台用0.1%新洁尔灭溶液摇荡消毒20
min, 无菌水冲洗 3次, 再用 0.1%的升汞溶液消毒
3 min (滴加 2~3滴吐温 -20), 然后用无菌水冲洗
5~6次, 无菌滤纸吸干水分。随后将枝条切成带
1~2个潜伏腋芽的小茎段, 接种在诱导培养基(1)
上。接种 14 d腋芽开始萌发, 续而长成丛芽, 到
30 d丛芽高 1.0~1.5 cm。
4.2 增殖培养 将新生丛生芽带少许母枝切下, 转接
到继代增殖培养基(2)中, 15 d左右有丛生芽生成,
30 d时, 增殖系数达 5.3。反复切分丛生芽, 在培
养基(2)中进行增殖培养, 可以获得大量的丛生芽(图
1)。
4.3 生根培养 选取丛生芽中的壮苗, 沿基部剪断成
2.0 cm左右的茎段, 接入生根培养基(3)中进行培
养。其中, 前 10 d黑暗培养, 小苗基部切口处开
始膨大并有白色根突出; 恢复正常光照培养, 根陆
续长出, 20 d时长出 4~6条根, 根长 1.5~2.0 cm, 生
根率达 90%以上(图 2)。
4.4 炼苗与移栽 将培养瓶放到培养室外, 前4 d逐
步拧松瓶盖, 4 d后打开瓶盖炼苗。炼苗 7 d后用
镊子将生根苗从培养瓶中取出, 用自来水完全洗掉
根部琼脂, 避免损伤根系, 移栽入已灭过菌的营养
土(腐殖土:珍珠岩:黄心土=2:2:1), 移栽后10 d内保
持营养土的湿润, 并用塑料薄膜保湿, 空气湿度85%
以上, 此后慢慢降低空气湿度, 隔天喷水 1次, 移栽
成活率 85%以上(图 3)。
5 意义与进展 斑皮柠檬桉属于桃金娘科伞房属的
图 1 斑皮柠檬桉的增殖培养
图 2 斑皮柠檬桉的生根培养
植物生理学通讯 第 45卷 第 4期,2009年 4月400
“普利塔”(Politaria)组(Hill和Johnson 1995; 祁述雄
2002)。主要分布在澳大利亚东部, 从昆士兰北部
到维多利亚东南沿海。其特点是树干高大挺拔, 枝
繁叶茂, 树皮光滑, 白色至浅灰色, 每年脱落, 广泛
用于行道树或庭院绿化。斑皮柠檬桉的木材有非
常广泛的用途, 包括作为锯材和圆木使用, 可作枕
木、车辆、桥梁、建筑、地板等用材, 还用于造纸,
蒸馏桉油; 未干燥时作为一般的建筑用材, 细木加
工和栅栏; 也用于制造家具, 镶木地板和车削产品,
大径材为优良造船材。同时, 斑皮柠檬桉作为栽培
树种在土地恢复和管理中扮演很重要的角色。斑
皮柠檬桉国内的研究较少, 2000年, 华南农业大学
从澳大利亚昆士兰林业研究所引进 47个家系进行
引种试验(何华等 2007)。目前, 国内斑皮柠檬桉种
质资源较贫乏, 采用组织培养可快速获得大量种苗,
成苗快且整齐, 有助于解决苗木短缺的问题, 本文
的结果对其推广应用可能有一定的参考价值。斑
皮柠檬桉的组织培养与快速繁殖尚未见报道。
参考文献
何华, 孔凡启, 黄少伟, 刘天颐, 黄军雄(2007). 伞房属 4个树种在
广东德庆的引种试验. 福建林学院学报, 27 (3): 226~230
祁述雄主编(2002). 中国桉树. 第 2 版. 北京: 中国林业出版社,
37~38
Hill KD, Johnson LAS (1995). Systematic studies in the eucalypts.
7. A revision of the bloodwoods, genus Corymbia (Myrtaceae).
Telopea, 6: 185~504
图 3 斑皮柠檬桉的移栽