全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 8期, 2010年 8月 853
收稿 2010-05-19 修定 200-05-26
资助 广东省科技厅社会发展面上项目(20 08B0 8070 1030 )。
* 通讯作者(E-mail: vip.pancm@gzhtcm.edu.cn; Tel: 020-
3 9 3 5 8 2 4 9 )。
毛冬青的组织培养与快速繁殖
赖珍珍, 潘超美 *, 梁钻姬, 夏静, 郑芳昊
广州中医药大学中药学院, 广州 510006
Tissue Culture and Rapid Propation of Ilex pubescens Hook. et Arn.
LAI Zhen-Zhen, PAN Chao-Mei*, LIANG Zuan-Ji, XIA Jing, ZHENG Fang-Hao
School of Chinese Materia Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510006, China
1 植物名称 毛冬青(Ilex pubescens Hook. et Arn.)。
2 材料类别 成熟果实。
3 培养条件 基本培养基为 1/2MS。(1)种子无菌发
芽培养基: 1/2MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同)+IBA
0.2; (2)丛芽增殖培养基: 1/2MS＋6-BA 1.0+IBA 0.2;
(3)生根培养基: 1/2MS+6-BA 1.0+NAA 0.5。上述培
养基中均加入 20 g·L-1蔗糖和 5 g·L-1琼脂, pH 5.8。
培养温度为(25±2) ℃, 光照时间为 8~10 h·d-1, 光照
强度为 40~50 μmol·m-2·s-1。
4 生长与分化情况
4.1 种子处理和萌发 取毛冬青成熟果实, 将数个果
实包于一块纱布中, 轻轻揉搓以去除果皮, 获得种
子。再将种子在清水中清洗干净, 并于自来水下流
动冲洗 20~30 min。然后在超净工作台上, 放入
75%的酒精浸泡 15~20 s, 用无菌水冲洗 2~3次, 再
用 0.1%升汞溶液(预先加入 1~2滴吐温 -80)处理
8~10 min, 然后用无菌水冲洗 5~7次, 最后用无菌
滤纸吸干多余的水分, 接入培养基(1)中于8 h·d-1光
照时间下培养。种子接种 40 d后开始萌发(图 1),
50 d左右是萌发的高峰期, 可在无菌的条件下陆续
萌发至 150 d。萌发后的 20 d内即可形成真叶(图
2), 形成幼苗。
4.2 丛芽的诱导与增殖 取已萌发长至 1~1.5 cm高
的无菌幼苗, 切除子叶和下胚轴的生长点, 转植于
培养基(2)上, 与种子发芽相同的条件下培养。约
30 d幼苗长出 2~3个节间(图 3)后, 即进行继代扩
繁。转瓶时, 将植株剪去叶片, 裁成约 0.5 cm长
的小段, 每段含一个节, 植入新的培养基(2)中, 按
上述条件继续培养。15 d左右腋芽开始分化, 40
d左右即可以形成丛生芽(图 4), 平均 50 d继代一
次, 增殖系数为 4.5左右。
4.3 生根培养 将长至 2.0 cm左右、含 3个以上
图 1 毛冬青的种子萌发
图 2 毛冬青的种子形成真叶
的节的芽接种于培养基(3)中, 30 d左右, 可长出不
定根, 平均每株生根 2~3条(图 5), 平均长度为 3.0
cm, 生根率为 85%左右。
植物生理学通讯 第 46卷 第 8期, 2010年 8月854
5 意义与进展 毛冬青属冬青科冬青属植物, 别名
毛批树、细叶冬青、山熊胆。毛冬青为常绿灌
木, 主要分布于我国华东、华南及台湾等地区。
毛冬青是我国常用中药, 具有活血通络、消肿止
痛、清热解毒之功效, 临床上广泛应用于治疗冠心
病、心绞痛、脉管炎、慢性肾炎和高血压等, 有
较好疗效, 具有广阔的应用前景。目前, 毛冬青的
图 3 毛冬青的幼苗
图 4 毛冬青的丛芽扩繁
图 5 毛冬青的生根
商品药材主要来源于自然, 长期大量地采挖必将导
致毛冬青资源逐渐枯竭, 毛冬青药材野生转家栽势
在必行。但毛冬青在野外自我更新能力较弱, 其种
子具有一定的顽拗性, 室内萌发试验只有20%~30%
萌发, 生长周期长, 远远不能满足人工种植的产业
化的需求, 种苗的短缺成为毛冬青中药材产业化生
产的一个瓶颈。通过毛冬青种子成熟胚的离体快
繁技术, 可在短周期内快速获得大量种苗, 成苗快
且整齐, 这不仅对毛冬青资源的保护及可持续利用
具有重要的意义, 同时对今后毛冬青中药材种植的
规范化、产业化生产奠定了基础。冬青属一些植
物的组培工作已有报道(蔡时可等 2006; 李登中
2004; 周喜军等 2008; 朱志国 2007), 但有关毛冬青
离体快繁的研究至今未见有报道。
参考文献
蔡时可, 汤亚飞, 黄云海(2006). 岗梅的组织培养和快速繁殖. 植
物生理学通讯, 42 (6): 1137
李登中(2004). 金叶日本冬青的组织培养与快速繁殖. 植物生理
学通讯, 40 (5): 592
周喜军, 罗玉兰, 张冬梅, 苏金乐(2008). 构骨的组织培养与快速
繁殖. 植物生理学通讯, 44 (5): 949
朱志国(2007). 金叶日本冬青愈伤组织诱导及分化的研究. 安徽
农业科学, 35 (9): 2569~2570