全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 10期, 2010年 10月 1073
收稿 2010-08-16 修定 　2010-08-25
资助 广西卫生厅自筹经费科研课题(Z20 09 34 5)。
* 通讯作者(E-mail: zzj1811@yahoo.com.cn; Tel: 0771-
5 6 0 3 8 2 4 )。
菱叶唇柱苣苔的组织培养和快速繁殖
李翠, 吕惠珍, 凌征柱, 姚绍嫦, 黄雪彦, 张占江 *
广西壮族自治区药用植物园, 南宁 530023
Tissue Culture and Rapid Propagation of Chirita subrhomboidea W. T. Wang
LI Cui, LÜ Hui-Zhen, LING Zheng-Zhu, YAO Shao-Chang, HUANG Xue-Yan, ZHANG Zhan-Jiang*
Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plant, Nanning 530023, China
1 植物名称 菱叶唇柱苣苔(Chirita subrhomboidea
W. T. Wang)。
2 材料类别 幼叶。
3 培养条件 (1)诱导不定芽分化培养基: MS+6-BA
1.0 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1; (2)生根培养基:
1/2MS+0.5%活性炭。上述培养基均加入 3.0%蔗
糖和 0.6%琼脂, pH 5.8。培养温度为(26±2) ℃;
在愈伤组织形成、芽分化和生根过程中的光照时
间为 12 h·d-1; 光照强度为 18 μmol·m2·s-1左右。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取菱叶唇柱苣苔幼嫩叶片, 用
自来水冲洗后放入烧杯, 加几滴洗洁精, 加水浸泡
15 min, 在此期间用毛笔刷洗叶表面, 除去表面污
垢和气泡, 最后用流水冲洗 15 min。在超净台上,
先用 75%酒精表面灭菌 45 s, 无菌水冲洗一次, 再
用 0.1% HgCl2溶液浸泡 8 min, 之后用无菌水冲
洗5次。
4.2 不定芽的诱导和增殖 用解剖刀将叶片切成
0.5 cm×1 cm含主脉的小块, 接种到诱导芽分化培
养基(1)内。15 d后, 外植体切口处开始膨胀肿胀,
并开始出现较为致密的愈伤组织(图1), 呈翠绿色。
约 30 d后, 部分切口处出现不定芽。将外植体切
口处的不定芽切下, 转移至新配制的培养基(1)上,
不定芽丛继续分化增殖(图 2)。
4.3 生根培养 选择分化出的不定芽高约 1 cm、生
长健壮的苗接种到培养基(2)上。1周后可见叶片
明显增大, 且有根发生; 20 d内又可长出 2~3对叶
片, 3~4条根, 且较粗壮。6周后生根率达 90%以
上(图 3 )。
4.4 炼苗及移栽 将生根试管苗小心地从培养瓶中
取出, 用水洗净根部残留的培养基, 栽入经高压灭
菌的基质中(珍珠岩:蛭石 =1:1)。盖上透光率 50%
图 1 菱叶唇柱苣苔愈伤组织
图 2 菱叶唇柱苣苔叶分化
图 3 菱叶唇柱苣苔根分化
植物生理学通讯 第 46卷 第 10期, 2010年 10月1074
的黑色遮荫网以保持较低光强, 2 d浇水 1次, 保持
土质湿润。20 d后开始有新根长出, 揭开遮荫网,
单株移栽入盆。盆底垫小鹅卵石, 上覆盆土(河沙:
草炭土 =1:3)。试管苗移栽不宜太深, 移栽的成活
率可达 95% (图 4)。
5 意义与进展 菱叶唇柱苣苔为苦苣苔科唇柱苣苔
属植物。目前查明仅广西两个自然分布点, 野外现
存植株数量稀少, 加上其生境遭到严重破坏, 已面
临濒危, 急需进行保护。同时此种植物叶菱状卵
形, 花色白至深粉红, 花梗高挺, 花期长, 观赏价值
高, 具有一定的室内观赏盆花开发前景。该种的组
织快繁成功, 解决了迁地保育的关键繁殖技术, 唇
柱苣苔属植物中刺齿唇柱苣苔和尖萼唇柱苣苔的组
织培养已有报道(汤正辉等2004; 梁桂友等2007), 但
菱叶唇柱苣苔的组培快繁尚未见报道。
参考文献
梁桂友, 温放, 李湛东(2007). 尖萼唇柱苣苔的组织培养和快速繁
殖. 植物生理学通讯, 43 (2): 321
汤正辉, 陈维伦, 石雷, 苗琛, 邢全(2004). 刺齿唇柱苣苔的离体快
速繁殖. 植物生理学通讯, 40 (2): 211图 4 菱叶唇柱苣苔幼苗移栽