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天仙藤的组织培养及植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 3期,2009年 3月 279
收稿 2009-01-16 修定  2009-02-04
资助 广西科技攻关项目(桂科攻 05 37 01 7-17 )。
* 通讯作者(E-mail: yzg7898xyl@126.com; Tel: 0771-
5 6 0 2 4 6 1 )。
天仙藤的组织培养及植株再生
闫志刚, 冯世鑫, 胡东南 *, 徐永莉, 黄天述
广西药用植物园, 南宁 530023
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Fibraurea recisa Pierre
YAN Zhi-Gang, FENG Shi-Xin, HU Dong-Nan*, XU Yong-Li, HUANG Tian-Shu
Guangxi Botanical Garden of Medicinal Plant, Nanning 530023, China
1 植物名称 天仙藤(Fibraurea recisa Pierre)。
2 材料类别 带腋芽茎段。
3 培养条件 (1)诱导愈伤组织的培养基: MS+6-BA
2 mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.01+Vc 100; (2)芽分化
及继代培养基: MS+6-BA 2+2,4-D 0.5; (3)诱导生根
培养基: 1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.3。上述培养基均
加 3%食用白糖和 0.7%琼脂, pH 5.8。培养温度
为(25±1) ℃, 光照强度为 40 µmol·m-2·s-1, 光照时间
为 12~14 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 4月从广西药用植物园内采
取天仙藤的幼嫩茎段, 剪去叶片和叶柄, 先在加有
洗衣粉的洗涤液中漂洗10 min, 再在自来水中冲洗
1~2 h。然后在无菌超净工作台上用70%的酒精消
毒 30 s, 再以 0.1%的升汞表面消毒 9 min, 最后用
无菌水冲洗5次, 接种在培养基(1)上进行培养。先
进行暗培养, 3 d后转入光培养。由于有褐化现象,
每隔 5 d转 1次瓶, 30 d后褐化现象基本消除。
40~50 d后, 腋芽开始萌动, 茎段基部开始膨大且有
许多淡绿色的粗粒状愈伤组织。再经10 d培养, 开
始长出幼嫩叶片(图 1)。
4.2 分化及继代培养 待苗长到 4~5 cm时, 将苗分
成单株, 转接到培养基(2)中增殖(图 2)。1个月后
丛芽芽点分化出丛生芽。每个芽苗又可分化出
8~9个芽。平均一个月增殖 1次。无根苗在继代
培养基中长势很好, 苗健壮, 叶色正常。分化率随
继代次数的增加而增加, 苗长势随着继代次数的增
加而减弱, 不适宜继代太多的次数。光照和温度对
苗分化率有一定的影响, 过长的光照时间和过低的
温度会抑制芽的分化。
图 1 天仙藤的初代培养
图 2 天仙藤的增殖培养
4.3 诱导生根及移栽 将较健壮的高 3~4 cm的苗转
入生根培养基(3)上培养。30 d时基部开始有少许
膨大, 35 d时开始分化出根的生长点, 45 d时开始
长出黄色粗壮的幼根(图 3)。45 d后统计生根率为
70%, 平均根数为 7, 平均根长为 6 cm。此外还发
现一部分生根异常苗, 根向上生长。生根苗在温室
大棚中打开封口膜炼苗2~3 d, 小心取出小苗, 洗净
植物生理学通讯 第 45卷 第 3期,2009年 3月280
培养基, 移栽到沙和蛭石各半混合成的基质中, 置
于半阴处, 注意浇水。30 d后移栽到培养钵中, 成
活率达 60%以上(图 4)。
5 意义与进展 天仙藤为防己科天仙藤属植物, 别
名藤黄连、土黄连, 收载于 2005年版的《中华人
民共和国药典》中(国家药典委员会 2005)。天仙
藤主要分布在我国的广西和云南等地, 在越南、缅
甸等国也有分布(戚育芳等 2005)。天仙藤不但具
有清热解毒、利尿的功效, 而且还有预防流感和降
血压等作用(高丽等 2005), 主治妇科炎症、外科感
染、菌痢、肠炎、呼吸道感染及眼结膜炎等症,
是黄藤素栓、黄藤素注射剂、黄藤素和黄藤素片
等中成药的主要原料(戚育芳等 2005)。随着新药
黄藤素栓等的开发, 资源需求量日益增加, 导致野
生资源遭到毁灭性破坏。由于资源短缺, 收购量逐
年下降, 部分制药企业被迫停止生产(闫志刚等
2008)。因此, 开展人工栽培已成当务之急, 而要
开展人工栽培, 就必须先解决种苗供应问题。目
前, 天仙藤大多采用种子繁殖的方法, 繁殖率相对
较高, 但由于天仙藤种子具有二次结实的特性, 采
集的时间性要求很强, 种子收集困难, 用种子繁殖
难以满足大规模生产的需要, 用组培快速繁殖的方
法可短期内获得大量性状一致的苗木, 供生产需要,
可能有一定的潜在应用前景。天仙藤的组织培养
和植株再生尚未见报道。
参考文献
国家药典委员会(2005). 中华人民共和国药典(一部). 北京: 化学
工业出版社
戚育芳, 高丽, 符德欢, 邱斌(2005). 大黄藤的研究进展. 云南中
医中药杂志, (3): 56
高丽, 符德欢, 戚育芳, 李学芳, 邱斌(2005). 云南药用植物大黄
藤的资源现状及保护意见. 药品评价, 2 (1): 7
闫志刚, 胡东南, 冯世鑫, 陈乾平, 李建芳(2008). 吲哚丁酸和萘
乙酸对黄藤插穗生根的影响. 时珍国医国药, 19 (2): 356~357
图 4 天仙藤育苗移栽图 3 天仙藤的生根培养