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粉葛的离体培养和无糖生根



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第5期,2005年10月646
粉葛的离体培养和无糖生根
吴丽芳* 张素芳 蒋亚莲 屈云慧
云南省农业科学院花卉研究所,昆明 650205
Tissue Culture and Sucrose-free Rooting of Pueraria thomsonii Benth
WU Li-Fang*, ZHANG Su-Fang, JIANG Ya-Lian, QU Yun-Hui
Flower Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650205, China
收稿 2004-11-22 修定   2005-05-08
*E-mail: wlf6601@163.com, Tel: 0871-5891839
1 植物名称 粉葛(Pueraria thomsonii Benth),又名
甘葛藤。
2 材料类别 幼嫩的茎段、茎尖。
3 培养条件 丛芽诱导培养基:(1)MS+6-BA 0.2
mg·L-1(单位下同)+NAA 0.2;(2)MS+6-BA 0.5+
NAA 0.2;(3)MS+6-BA 1.0+NAA 0.2。继代增殖
培养基:(4)MS+6-BA 0.3+NAA 0.3;(5)MS+6-BA
0.6+NAA 0.3。无糖生根培养基:(6)MS大量元素+
NAA 0.2。粉葛的生根利用箱式无糖培养专利技术[1]
进行,基质为蛭石,在培养基中不添加糖分,以
C O 2 作为碳源,培养箱中 C O 2 浓度为 0 . 1 % ~
0.12%,空气流速为2 L·min-1,光照度为5 000 lx。
在丛芽诱导和继代阶段,培养基中的糖浓度均为
3.0%,琼脂的用量为6.0 g·L-1,pH 5.6~5.8。培
养温度24~26℃,光照时间10~12 h·d-1,光照度
1 500~2 000 lx。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 从植株上切取1 cm的茎尖和
带节的嫩茎,在加有少量洗衣粉水中充分摇洗
后,在自来水下冲洗干净,用 7 5 % 的酒精消毒
20 s。在无菌条件下,用 0.15% 的 HgCl2 溶液消
毒 15 min,然后在 1.2% NaClO 溶液中消毒 10
m i n,最后用无菌水漂洗 3 次,待用。
4.2 丛生芽诱导增殖 将无菌材料接种于诱导培养
基上,10 d 后,基部产生愈伤组织,并在上部
产生绿色的小点。在 3 种诱导培养基上,产生绿
色芽点和愈伤组织的时间和数量不同:在诱导培
养基(3)中的诱导效果最好,产生大量的绿色芽点
和少量的嫩芽;在培养基(1)中主要是芽的生长;
在培养基(2)中,既有嫩芽的生长,也有少量的芽
点产生。在继代培养基(4)中进行多代转接,增殖
率在 1.5~2 倍,苗的生长正常。
4.3 无糖生根和移栽 将苗高1~1.5 cm、具有2~3
片叶的小苗分切成单株后接种在无糖培养基中,
并在无糖培养箱中进行生根培养。8 d 后开始生
根,且小苗的叶片迅速长大、变绿。15 d 后可
直接进行移栽,生根率达到 9 8 % 以上。将苗移
入腐叶土、红土、珍珠岩(3∶2∶1)的过渡基质
中,7 d 内注意遮阴和保湿,用两层遮阳网加塑
料薄膜进行覆盖,以后逐渐揭去遮阴网和塑料
膜,过渡移栽成活率可达到 95%。1 个月后,可
下地种植。
5 意义与进展 粉葛是豆科葛属多年生藤本植物,
可鲜食和药用,葛粉有清凉解毒、防暑降温之
效,同时对预防和治疗高血压、冠心病和心绞痛
也有特殊的疗效。近年来,各地开始进行大量引
种种植,在江西等地已建立基地并进行综合加工
利用。目前,生产中主要是用扦插繁殖,我们
在其组织培养生根阶段采用的箱式无糖培养技术尚
未见报道。此技术可以降低生产成本,减少污
染,提高葛根苗的生根率、移栽成活率和种苗质
量。
参考文献
1 屈云慧, 张素芳. 彩色马蹄莲无糖生根培养的环境控制. 植
物遗传资源学报, 2004, 5(2): 166~169