免费文献传递   相关文献

翻白草的组织培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 43卷 第 3期,2007年 6月498
收稿 2006-12-21 修定  2007-05-21
资助 科技部国家科技基础条件平台项目(2004DKA30430)和
湖南省普通高校学科带头人培养费。
* 通讯作者(E-mail:hhuxianjin@163.com;Tel:0745-
2 8 5 5 9 2 9 )。
翻白草的组织培养和植株再生
牛友芽,伍贤进 *,蔡伟航,张应亮
怀化学院生物工程系,湖南怀化 418008
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Potentilla discolor Bunge
NIU You-Ya, WU Xian-Jin*, CAI Wei-Hang, ZHANG Ying-Liang
Department of Bio-engineering, Huaihua College, Huaihua, Hunan 418008, China
1 植物名称 翻白草(Potentilla discolor Bunge)。
2 材料类别 叶片。
3 培养条件 (1)愈伤组织诱导培养基:MS+6-BA
1 mg·L-1 (单位下同)+2,4-D 0.5、1、2、3、4;
(2)诱导芽分化培养基:MS+6-BA 1+NAA 0.5、
1、2、3、4;(3)诱导生根培养基:1/2MS+IBA
0. 5、1、2、3、4。培养基均加 30 g ·L- 1蔗糖、
6 g·L-1琼脂,pH 5.8。置于培养箱中培养,光照
时间 12 h·d-1,光照强度为 32.4~36 µmol·m-2·s-1,
培养温度为 25 ℃左右。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 植物材料来自湖南新宁。取
翻白草较嫩的叶,用自来水洗净,用 75%的酒精
消毒 30 s;再用 0.1%的升汞溶液消毒 10 min,浸
泡过程中要不断摇动,使升汞与嫩枝充分接触;
用蒸馏水冲洗 4~6次。取出嫩叶,用无菌滤纸吸
去材料表面的水分,并切成长宽约为 5 mm的切
块,叶面朝上,接种于愈伤组织诱导培养基。
4.2 叶片愈伤组织的诱导 9 d后,叶片边缘伤口
处出现细小白色颗粒状愈伤组织,并零星分布在
叶片上;12 d后,愈伤组织增殖加快。培养基
MS+6-BA 1+2,4-D 4的诱导分化叶片愈伤组织的
诱导速度和诱导率(100%)均为最佳。
4.3 丛生芽的诱导 叶片愈伤组织培养 12 d后,
观察到愈伤组织基部长出7~9个很小的带绿色的芽
点,20 d得到丛生芽。培养基中MS+6-BA 1+NAA
2的效果最佳,其不定芽分化率可达 90%,且生
长势较好。
4.4 生根与移栽 待丛生芽长到 2~3 cm时,取生
长健壮的芽接种于生根培养基中。以 IBA浓度为
3 mg·L-1的培养基生根效果最好,16 d后长出幼
根;23 d后幼根长到 2 cm左右。打开封口膜,
瓶内炼苗 3 d,从瓶内取出试管苗,用清水洗去
根部培养基,无菌小苗移栽入营养杯中。培养土
为腐质土,控制好温度、湿度以及光照,1个月
左右成活率可达 85% 以上。
5 意义与进展 翻白草为蔷薇科委陵草属一年生
或多年生植物,是广泛分布的一种中药,有效成
分是鞣质和黄酮类。翻白草全草可治疗肠炎、细
菌性痢疾、阿米巴痢疾、清热、吐血、便血,
外用治创伤、痈疖肿毒、增强免疫功能(全国中
草药汇编编写组 1996)。翻白草可治“三高”(高
血脂、高血糖、高血压); 马瑛和温少珍(2002)
临床研究表明,翻白草还可治疗Ⅱ型糖尿病,对
其有一定的疗效;现代药理研究也证实翻白草可
显著降低正常动物和糖尿病动物的血糖(韩永明等
2002)。因此其用量增大,但野生翻白草的数量
有限且分散,采集成本较高;繁殖系数较低,难
以大规模利用。本文有待为翻白草的快速繁殖和
大规模利用开拓一条新的途径。翻白草的组织培
养和植株再生未见报道。
参考文献
韩永明, 张业辉, 熊迎春, 袁尚荣(2002). 中药翻白草对糖尿病大
鼠血糖的影响. 湖北中医学院学报, 4 (1): 23~24
马瑛, 温少珍(2002). 翻白草治疗Ⅱ型糖尿病 50 例疗效观察. 中
草药, 33 (7): 644
全国中草药汇编编写组(1996). 全国中草药汇编(上册). 北京: 人
民卫生出版社出版, 934~935