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梨组织培养过程中外植体褐变与多酚氧化酶及酚类物质的关系



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第1期,2006年2月 63
梨组织培养过程中外植体褐变与多酚氧化酶及酚类物质的关系
及华1,* 张海新2 葛会波3
1 河北省农林科学院遗传生理研究所,石家庄 050051;2 河北政法职业学院园林系,石家庄 050061;3 河北农业大学
园艺学院,河北保定 071000
收稿 2005-06-02 修定  2005-10-24
资助 河北省科技攻关项目(97245506D)。
*E-mail: yjsjihua@163.com, Tel: 0311-87652136
本文研究了不同时期秋子梨(Pyrus ussuriensis
Maxim.)和西洋梨(Pyrus communis L.)种间杂交后
代实生苗——梨S系矮化砧S4的芽及茎尖外植体中
多酚氧化酶(polyphenol oxidase, PPO)、总酚含量
及组织培养褐变率的变化及其间的关系。
2~9 月,从河北省林业科学院梨种质资源圃
内梨S4 矮化砧定株采样,芽样去除鳞片至露出叶
原基,茎尖取未分离叶片的先端一节,每月中旬
取 100 个样品用于分析测试和组织培养。
酚类物质提取与测定采用朱广廉等(1990)的方
法;PPO 活性测定参考Montgonery 和 Sgarbieri
(1975)及辛广等(1997)的方法。调查褐变率时,采
用MS培养基,附加0.5 mg·L-1 6-BA 和 0.02 mg·L-1
IBA。外植体消毒后接种到培养基上,培养 3 周
后统计褐变率,以外植体完全变成褐色枯死为标
准。得到如下结果(图1):
1. 梨S4矮化砧的外植体中PPO活性呈单峰曲
线,活力高峰出现在 4 月,分别比 2 月和 3 月高
出6.4 和 4.0 倍,说明在生长季里梨树的 PPO 活
性显著高于休眠时。
2. 在整个生长季节中,梨S4矮化砧的外植体
中酚类物质含量均保持较高的水平,进入生长季
时总酚含量迅速上升,5 月到达高峰,以后开始
下降,7 月以后又回升,说明不同生长时期的梨
S4 矮化砧外植体中酚类物质含量明显不同。
3. 梨S4矮化砧外植体组织培养褐变率的变化
也呈单峰曲线,褐变高峰期出现在 5 月,与总酚
含量高峰同期出现。
4. 梨 S4 矮化砧外植体 PPO 活性、总酚含量
及组织培养褐变率三者之间有一定的相关性,酚
类物质含量与组培褐变率之间呈现极显著正相关
(r=0.8815),PPO 活性与组培褐变率之间呈现显
著正相关(r=0.7209)。这说明梨外植体褐变是由
于 P P O 和酚类物质引起的,其变化规律取决于
PPO 活性和总酚含量的变化规律,其中酚类物质
含量起决定性作用。
参考文献
辛广, 张维华, 张兰杰, 张平, 马岩松, 王和福(1997). 南果梨多酚
氧化酶的研究. 沈阳农业大学学报, 28 (4): 274~277
朱广廉, 钟诲文, 张爱琴(1990). 植物生理学实验. 北京大学出版
社, 229~232
Montgonery MW, Sgarbieri VC (1975). Isoenzymes of banana
polyphenoloxidase. Phtochemistry, 14 (4): 1245~1249
图 1 梨 S4 矮化砧外植体中总酚含量、PPO活性
和组织培养褐变率的变化