全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 2期，2007年 4月 315
美洲冬青的组织培养与快速繁殖
李永欣 1,2,*，王晓明 1,2，陈明皋 1,2，易霭琴 1,2，聂启英 3　
1湖南省林业科学院，长沙 410004；2湖南省林木无性系育种重点实验室，长沙 410004；3长沙环境保护职业技术学
院，长沙 410004
Tissue Culture and Rapid Propagation of Ilex verticillata (Linn.) A. Gray
LI Yong-Xin1,2,*, WANG Xiao-Ming1,2, CHEN Ming-Gao1,2, YI Ai-Qin1,2, NIE Qi-Ying3
1Hunan Academy of Forestry, Changsha 410004, China; 2Hunan Key Laboratory of Trees Clones Breeding Technology, Changsha
410004, China; 3Changsha Environment Protect College, Changsha 410004, China
收稿 2006-12-30 修定　 2007-03-13
资助　 国家林业局“9 4 8”项目( 2 0 0 3 -4 -2 6 )。
* E-mai l：yh54 03 @sohu.com；Tel：0 73 1-53 13 03 6
1 植物名称 美洲冬青[Ilex verticillata (Linn.) A.
Gray]，由美国缅因大学张冬林博士提供。
2 材料类别 带腋芽的嫩茎段。
3 培养条件 启动培养基：(1) MS+6-BA 0.5 mg·L-1
(单位下同)+IBA 0 .1。增殖与壮苗培养基：(2)
MS+6-BA 1.0+NAA 0.5；(3) MS+KT 1.0+NAA 0.5；
(4) MS+ZT 1.0+NAA 0.5；(5) MS+氯吡笨脲(CPPU)
1.0+NAA 0.5；(6) MS+2-iP 1.0+NAA 0.5；(7)
MS+TDZ 1.0+NAA 0.5；(8) MS+6-BA 0.8+NAA 0.5。
生根培养基：(9) 1/2MS+IBA 2.0；(10) 1/2MS+
NAA 2.0。以上培养基均附加 0.8%琼脂和 3%蔗
糖，pH 5.8。培养温度为(24±2) ℃，光照度为
30~40 µmol·m-2·s-1，光照时间 12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 启动培养 取带腋芽或顶芽的春梢嫩茎段，
剪去叶片；先用中性洗衣粉洗涤，再流水冲洗 1
h，滤纸吸干表面；超净工作台上先用 75%酒精
浸润 10~20 s，无菌水冲洗 3次，0.1%升汞(加
入 2~3滴吐温 -80)消毒 5~7 min，无菌水冲洗 5次，
用无菌滤纸吸干表面水分。将外植体切成 1.5~2.0
cm长的带芽茎段，接种到启动培养基(1)上。13 d
左右，嫩茎段的腋芽开始萌发；30 d，萌芽长
成 1.5~2.0 cm高。
4.2 增殖与壮苗培养 将萌发的嫩梢剪切成1.5~2.0
cm长的茎段，转接到增殖培养基(2)~(7)上进行继
续培养，6~9 d后开始分化为丛芽。培养基(5)的
增殖效果较好，增殖系数高达 10 . 8，但丛芽量
少，培养 35 d的苗高仅 1.8 cm。培养基(2)~(4)
和(7)上的芽苗生长较快，且粗壮，培养 25 d的
苗高 3.4 cm，但增殖系数较低，仅为 2.7。培养
基(6)上的芽苗几乎不增殖。这说明 CPPU最利于
美洲冬青试管苗增殖。将培养基(5)的丛芽转接在
壮苗培养基(8)上，培养 25 d的苗高为 3.5 cm，
试管苗粗壮，有利于移栽成活。
4.3 生根培养 将 2~3 cm高的丛芽切成单株后转
接在生根培养基(9)和(10)上。培养 8 d左右开始
生根，15 d左右已有很多须根。其中，培养基
(9 )上的主根较粗，平均根数 6 条以上，须根较
多，生根率为 99.9%；而培养基(10)的主根长，
平均根数 3条，须根少，生根率 80.2%。可见，
IBA有利于诱导生根。
4.4 试管苗的移栽 生根培养 20 d后，不用炼
苗，直接将试管苗从培养基中取出，洗净培养
基，在 0.1%的百菌清(75%可湿性粉剂，上海升
联化工有限公司生产)溶液中浸泡 3 min后，栽入
盛有泥炭土和珍珠岩(1:3)基质的穴盘中。再以同
样浓度的百菌清溶液淋透盘中基质，置于自动
间歇喷雾的塑料大棚中。4 5 d 左右的成活率达
98.9%。
5 意义与进展 美洲冬青是引自美国东部的一种冬
青科冬青属的落叶灌木。此树果实小巧玲珑，圆
形，鲜红色，初秋成熟，宿存枝头的时间很长，
直至翌年 3~4月，是一种珍贵的观赏树种，而且
喜光，耐涝，适应性广，可耐-30 ℃的低温。为
了加快其在园林绿化的应用，我们进行了组织培
养的研究，现已建立了快繁技术体系，并已达到
苗木组培繁殖规模化。与美洲冬青同属的金叶日
本冬青(Ilex crenata)、大叶冬青(Ilex latifolia
Thunb.)的组织培养和快速繁殖已有过报道，但美
洲冬青的组织培养和快速繁殖尚未见报道。